Les lésions cutanées sont des caractéristiques courantes et importantes dans de nombreuses maladies rhumatismales, et la biopsie avec analyse pathologique joue un rôle essentiel dans le diagnostic. Cet article fournit un aperçu détaillé de la procédure standardisée de biopsie cutanée et, en utilisant le lupus érythémateux discoïde comme exemple, souligne le rôle essentiel de la dermatopathologie dans le diagnostic des maladies rhumatismales.
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Article de méthode
Biopsie cutanée pour diagnostiquer le lupus érythémateux discoïde
Dans cet article
Résumé
Résumé
Le lupus érythémateux discoïde (DLE) est la variante la plus courante du lupus érythémateux cutané (CLE). Il affecte généralement le cuir chevelu, le visage, l’oreillette et les lèvres. Lorsque les lésions s’étendent au-delà de ces zones pour impliquer le tronc et les membres, la condition est appelée DLE disséminée (DDLE). Les lésions cutanées pathognomoniques se présentent sous la forme de plaques érythémateuses discoïdes bien délimitées avec des écailles ou des croûtes fermement adhérentes, une atrophie centrale, des cicatrices caractéristiques et des modifications pigmentaires, conduisant potentiellement à une alopécie cicatricielle irréversible. L’examen histopathologique et immunopathologique des lésions cutanées est essentiel pour diagnostiquer l’ELD. Histologiquement, le DLE est caractérisé par une hyperkératose, un obturation folliculaire, un amincissement épidermique focal, une altération vacuolaire de l’interface dermo-épidermique, un épaississement de la membrane basale épidermique et un infiltrat lymphocytaire périvasculaire et périannexiel superficiel et profond, souvent en conjonction avec de la mucine interstitielle. L’immunofluorescence directe (DIF) peut révéler des dépôts d’immunoglobulines et de complément à la jonction dermo-épidermique (JDE). L’article suivant décrit les protocoles d’évaluation des lésions DLE, les procédures de biopsie cutanée, l’analyse histopathologique et immunopathologique et les options de prise en charge, dans le but de fournir un processus diagnostique et thérapeutique complet, standardisé et reproductible pour aider les médecins cliniciens dans la pratique.
Introduction
Les lésions cutanées sont des manifestations courantes et cruciales, servant souvent d’indicateurs précoces dans de nombreuses maladies rhumatismales. Ces lésions jouent un rôle essentiel dans le diagnostic et le suivi de la maladie et sont fréquemment incluses dans les critères de classification d’affections telles que le lupus érythémateux disséminé, la dermatomyosite, la sclérodermie, la maladie de Still de l’adulte et la maladie de Behçet1. Un examen approfondi de la peau peut aider au diagnostic précoce, au traitement efficace et à la surveillance de ces affections, aidant ainsi à prévenir les complications graves.
La biopsie cutanée est l’une des procédures de diagnostic les plus couramment pratiquées dans les maladies rhumatismales avec manifestations cutanées. En tant que modalité de diagnostic simple et rentable, la biopsie cutanée permet de visualiser des caractéristiques morphologiques qui ne sont pas visibles à l’œil nu. L’histopathologie permet d’examiner en détail une petite partie de la lésion, vue perpendiculairement à la surface de la peau. Ce processus est crucial pour les cliniciens et les pathologistes dans le diagnostic des maladies du tissu conjonctif (CTD).
La technique fixée au formol et incorporée à la paraffine est largement établie et offre plusieurs avantages, tels que la capacité d’archiver des échantillons à long terme et le potentiel de traitement immunohistochimique. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (HE) est la coloration la plus couramment utilisée pour l’histopathologie en raison de sa capacité à mettre en évidence les composants cellulaires et tissulaires normaux et anormaux. Le composant hématoxyline se lie aux structures acides, telles que l’ADN et l’ARN, les colorant en bleu. Dans la peau, cela colore les noyaux cellulaires, le réticulum endoplasmique rugueux et les ribosomes2. L’éosine colore les structures éosinophiles, généralement composées de protéines intracellulaires ou extracellulaires (par exemple, le cytoplasme et la plupart des fibres du tissu conjonctif), dans différentes nuances de rouge. En conséquence, toutes les structures tissulaires pertinentes de l’échantillon sont effectivement colorées3.
L’immunofluorescence (IF) est un outil de diagnostic essentiel dans l’évaluation des patients atteints de maladies auto-immunes, vasculopathiques et vésicobulleuses cutanées suspectées, car elle permet d’identifier les anticorps liés à l’antigène dans les tissus ou les fluides corporels. Il existe deux principaux types de tests FI : les FI directs (DIF) et les FI indirects (IIF). Le test DIF, le plus couramment utilisé, utilise des anticorps marqués au fluorochrome pour détecter le dépôt d’immunoréactifs dans la peau du patient. Un panel d’anticorps ciblant les immunoglobulines (Ig) G, IgA, IgM et le complément C3 a été utilisé4.
Le lupus érythémateux discoïde (DLE) est la forme la plus répandue de lupus érythémateux cutané (CLE), affectant généralement des zones telles que le cuir chevelu, le visage, l’oreillette et les lèvres. Lorsque les lésions s’étendent au-delà de ces régions pour impliquer le tronc et les membres, la condition est appelée DLE disséminée (DDLE)5. Les lésions cutanées caractéristiques se manifestent par des plaques érythémateuses discoïdes bien délimitées, souvent accompagnées d’écailles ou de croûtes fermement adhérentes, d’une atrophie centrale, de cicatrices caractéristiques et de modifications pigmentaires, qui peuvent entraîner une alopécie cicatricielle irréversible si elles se produisent sur le cuir chevelu. Bien que de nombreux patients restent asymptomatiques, certains peuvent ressentir de légères démangeaisons 6,7. Les lésions DLE sont généralement marquées par une atrophie épidermique, un obturation folliculaire, un épaississement de la membrane basale et une infiltration lymphocytaire. La DIF met en évidence le dépôt d’immunoglobulines et de compléments le long de la jonction dermo-épidermique, présente dans la peau lésionnelle et non lésionnelle, connue sous le nom de test de la bande lupique 8,9. Le diagnostic de DLE repose principalement sur la présentation clinique, ainsi que sur des résultats histopathologiques et immunopathologiques. Lorsque des informations histopathologiques et immunopathologiques sont nécessaires, une biopsie cutanée devient indispensable.
Le choix du type et de l’emplacement de la biopsie a un impact significatif sur l’évaluation histologique. Comprendre le moment, l’emplacement et la technique appropriés de la biopsie est crucial pour obtenir des résultats pathologiques précis. Plusieurs facteurs doivent être pris en compte pour assurer un diagnostic précis, soulignant l’importance de relever les défis potentiels du processus de biopsie afin d’améliorer à la fois la qualité de la biopsie et la précision du diagnostic. Cet article fournit un aperçu détaillé de la procédure standardisée de biopsie cutanée, en utilisant la DLE comme exemple, et met en évidence les principales considérations pour assurer un diagnostic précis et efficace.
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Protocole
Ce protocole a été approuvé par le comité d’éthique de l’hôpital de dermatologie de Shanghai, et le consentement éclairé écrit des participants a été obtenu pour la publication d’images et de données cliniques. Une biopsie cutanée fait généralement référence à l’excision traditionnelle des lésions cutanées à l’aide d’une technique fusiforme avec un scalpel chirurgical. En utilisant la biopsie excisionnelle comme exemple, le protocole suivant fournit une description détaillée de l’intervention chirurgicale pour effectuer une biopsie cutanée (Figure 1).
Les participants étaient éligibles à l’inclusion s’ils présentaient des lésions cutanées distinctes nécessitant une biopsie pour un diagnostic définitif, démontrant une fonction de coagulation normale et ne montrant aucun signe d’infection aiguë ou de lésions purulentes au site de biopsie prévu. Les critères d’exclusion comprenaient une tendance connue à la formation de cicatrices chéloïdes ou hypertrophiques, l’utilisation à long terme d’immunosuppresseurs ou d’autres affections susceptibles d’entraver la cicatrisation des plaies. Les femmes enceintes ou allaitantes ont été exclues en raison des risques potentiels. Les patients incapables de coopérer en raison d’une maladie mentale ou d’autres facteurs ont également été exclus de l’étude. Tous les participants ont fourni un consentement éclairé écrit et ont volontairement accepté de subir la procédure de biopsie cutanée. Les détails des réactifs et de l’équipement utilisé sont répertoriés dans la table des matériaux.
1. Préparation du patient
- Vérifiez l’identité du patient, y compris son nom, son numéro de dossier médical et le site de la biopsie.
- Effectuez un examen approfondi des antécédents médicaux du patient, y compris toute tendance aux saignements, l’hypertension, le diabète, les maladies cardiaques et l’utilisation actuelle d’anticoagulants ou de médicaments antiplaquettaires.
- Effectuer des évaluations préopératoires, y compris des analyses sanguines de routine, des évaluations de la fonction de coagulation et le dépistage d’indicateurs de maladies infectieuses10,11.
- Expliquez clairement l’objectif, la méthode, les complications potentielles et les précautions associées à la biopsie cutanée au patient et à sa famille.
- Assurez-vous que le patient a signé le formulaire de consentement éclairé.
2. Préparation de l’équipement et des matériaux
- Préparez un kit de biopsie stérile contenant tous les instruments nécessaires, y compris un scalpel, des pinces, des ciseaux et d’autres outils requis. Assurez-vous que tous les instruments sont correctement stérilisés.
- Préparez une solution antiseptique (par exemple, de l’alcool, de l’iodophore ou de la chlorhexidine), un anesthésique local (par exemple, la lidocaïne), une seringue d’injection stérile, des aiguilles stériles, des sutures stériles, des gants stériles, de la gaze stérile et du matériel de pansement. Rangez tous les instruments et médicaments nécessaires à portée de main pour maximiser l’efficacité.
3. Préparation du site de biopsie
- Choisissez le site de la biopsie avec soin, surtout en cas de lésions multiples. Choisissez une lésion non traitée, non traumatisée, complètement développée qui présente des traits caractéristiques distincts. Assurez-vous que la biopsie est suffisamment profonde pour capturer toute l’épaisseur de la lésion, y compris l’épiderme, le derme (en particulier le derme profond) et une petite partie du tissu normal adjacent pour servir de contrôle.
- Marquez le chemin d’excision prévu avant la procédure pour assurer la précision. Rasez les poils autour du site chirurgical si nécessaire.
- Prendre des photos des lésions et du site de biopsie pour référence future dans la prise de décision médicale et la planification du traitement.
- Positionnez correctement le patient, en vous assurant que le site de biopsie est bien exposé et aligné parallèlement au sol.
4. Procédure de biopsie
- Désinfecter la zone de biopsie
- Désinfectez soigneusement la zone de biopsie avec une solution antiseptique appropriée. Couvrez un diamètre d’au moins 15 cm. Nettoyez dans un mouvement circulaire, en commençant par le site de l’incision chirurgicale et en allant vers l’extérieur. Laissez l’antiseptique sécher complètement.
REMARQUE : Utilisez un antiseptique non iodé pour les patients souffrant d’allergies connues.
- Désinfectez soigneusement la zone de biopsie avec une solution antiseptique appropriée. Couvrez un diamètre d’au moins 15 cm. Nettoyez dans un mouvement circulaire, en commençant par le site de l’incision chirurgicale et en allant vers l’extérieur. Laissez l’antiseptique sécher complètement.
- Appliquer un champ chirurgical stérile
- Après la désinfection, appliquez un champ chirurgical stérile pour isoler le champ opératoire.
- Administrer une anesthésie locale
- Utilisez une solution de lidocaïne à 1 % à 2 % pour l’anesthésie locale. Injecter par voie sous-cutanée au site de biopsie à l’aide d’une aiguille fine (selon les protocoles approuvés par l’établissement). Attendez 2-3 min pour que l’effet soit complet. Palper doucement le site pour confirmer l’absence de douleur.
REMARQUE : Pour les enfants ou les patients anxieux, envisagez un anesthésique topique en plus ou à la place de l’anesthésique injectable.
- Utilisez une solution de lidocaïne à 1 % à 2 % pour l’anesthésie locale. Injecter par voie sous-cutanée au site de biopsie à l’aide d’une aiguille fine (selon les protocoles approuvés par l’établissement). Attendez 2-3 min pour que l’effet soit complet. Palper doucement le site pour confirmer l’absence de douleur.
- Effectuer l’incision et l’excision tissulaire
- À l’aide d’un scalpel stérile, faites une incision verticale en forme de navette qui s’étend jusqu’au derme profond ou à la graisse sous-cutanée. Utilisez une pince à biopsie pour stabiliser ou soulever doucement le tissu.
- Exciser une partie représentative de la lésion, y compris une petite marge de tissu normal environnant, pour une évaluation histopathologique complète. Visez une taille de tissu de 3 à 5 mm.
- Appliquez une pression constante avec de la gaze stérile pendant 2 à 3 minutes ou jusqu’à ce que le saignement cesse complètement.
- Utilisez des sutures résorbables ou de l’électrocautérisation pour les gros vaisseaux au besoin12.
REMARQUE : Préparez à l’avance des outils hémostatiques pour les patients à haut risque.
- Suturez le site d’excision pour favoriser la cicatrisation et réduire le risque d’infection. Pour les plaies au visage ou au cou, utilisez des sutures monofilaments non résorbables 6-0. Pour les plaies du tronc ou des membres, utilisez des sutures non résorbables 5-0. Insérez l’aiguille verticalement, en maintenant une distance entre le point d’entrée et le bord de la plaie égale à la profondeur de la plaie.
- Placez un pansement stérile sur le site de biopsie et fixez-le avec du ruban adhésif.
- Conseillez au patient de garder la plaie sèche pendant 24 à 48 h. Fournir des instructions détaillées sur les soins post-opératoires, y compris des directives pour les changements de pansements et les restrictions d’activité.
REMARQUE : Planifiez des rendez-vous de suivi pour les patients à haut risque afin de surveiller la cicatrisation des plaies.
5. Manipulation des échantillons
- Divisez le tissu excisé en deux parties à l’aide d’un scalpel stérile ou de ciseaux avant de placer l’échantillon dans le support de transport approprié. Étiquetez clairement chaque contenant avec les informations d’identification du patient et le site de la biopsie. Remplissez le formulaire de demande de pathologie dans son intégralité.
- Placez la moitié du tissu dans un récipient contenant un fixateur (par exemple, une solution de formol à 10 %) et envoyez-le au laboratoire de pathologie pour la coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (HE).
- Transportez l’autre moitié soit sur de la gaze imbibée de solution saline physiologique glacée pour un traitement immédiat, soit placez-la dans le milieu de Michel pour un traitement différé. Préparez l’échantillon pour l’analyse par immunofluorescence directe (DIF)13 dès que possible.
REMARQUE : Parmi ces options, la congélation rapide est la méthode la plus couramment utilisée. Ne pas conserver les échantillons de biopsie cutanée pendant plus de 24 h dans de la gaze imbibée de sérum physiologique ou plus d’un mois dans un milieu de Michel à 4-8 °C14.
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Résultats
Histologiquement, le DLE est caractérisé par une hyperkératose, un obturation folliculaire, un aplatissement des crêtes épidermiques, un amincissement épidermique focal, une altération vacuolaire de l’interface dermo-épidermique, un épaississement de la membrane basale épidermique et un infiltrat lymphocytaire périvasculaire et périannexiel superficiel et profond, souvent en conjonction avec de la mucine interstitielle 5,15 (Figure 2...
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Discussion
La biopsie cutanée est essentielle pour confirmer les diagnostics et distinguer les différentes affections, car elle permet d’examiner les caractéristiques histologiques qui fournissent des preuves diagnostiques cruciales pour la détection précoce et le traitement de diverses affections. Un diagnostic précis permet aux médecins de formuler des plans de traitement efficaces, évitant ainsi les thérapies inappropriées qui pourraient découler d’un diagnostic erroné. En raison de son importan...
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Déclarations de divulgation
Il n’y a aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Remerciements
Nous remercions chaleureusement les personnes suivantes pour leur aide et leurs contributions au processus de production vidéo : Lili Ma, Ke Xue, Jiaping Qi et Ruilian Lin du Département de rhumatologie, Hôpital des maladies de la peau de Shanghai, Faculté de médecine de l’Université de Tongji.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Seringue d’injection 1 mL | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd | www.misawa-medical.co.jp/products.html | 1 mL |
| Fixateur de formol neutre 10 % | Beijing Solaibao Technology Co., Ltd | G2163 | 10% |
| Solution saline physiologique 10 mL | Chine Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | www.chinaotsuka.com.cn/class/1 | 10 ml |
| Primacaïne adrénaline (Primacaïne) | Entreprise française de Bi Lan | CIP : 3400956469710 | 1,7 ml : 68 mg de chlorhydrate d’articaïne avec 17 g de tartrate d’épinéphrine (sous forme d’épinéphrine) |
| Gants stériles | Yingke Medical Technology Co., Ltd | www.made-in-china.com/showroom/b7976b8c634a372c/ | |
| Lame chirurgicale | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd | www.sh-jinhuan.com | |
| Champs et gazes chirurgicaux | Genecome Medical Technology Co., Ltd | www.made-in-china.com/manufacturers/surgical-drapes.html | |
| Instruments chirurgicaux (manche de scalpel, pinces, ciseaux) | Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Usine d’instruments chirurgicaux | www.smicc.com/en/index.aspx | |
| Sutures chirurgicales à aiguille | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd | www.sh-jinhuan.com | 1/2radian, 5& fois ; 12, 19mm, 4-0 Suture, |
| Iodophore topique 1 % | Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., Ltd | www.shopshipshake.com/product-detail/haishi-hainuo-iodophor-disinfection-solution-656601234155 | 1% |
Références
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Réimpressions et autorisations
