Ce protocole décrit une procédure d’induction de lésions utérines dans un modèle murin, suivie d’analyses en aval lors d’une grossesse ultérieure.
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Article de méthode
Modèle murin de lésion utérine chirurgicale et d’issues de grossesse ultérieures
Dans cet article
Résumé
Résumé
Les lésions utérines dues aux césariennes (césariennes) et à d’autres procédures (dilatation et curetage, myomectomies, etc.) peuvent entraîner plusieurs morbidités lors de grossesses ultérieures, notamment le placenta praevia, le spectre du placenta accreta (PAS), la grossesse par césarienne et la rupture utérine. Les césariennes représentent environ 30 % des accouchements aux États-Unis, et les taux devraient augmenter. Par conséquent, il est essentiel de mieux comprendre les mécanismes par lesquels les troubles de la grossesse associés aux blessures se produisent et de disposer d’une plate-forme pour tester les interventions possibles. Pour atteindre ces objectifs, il est essentiel de disposer de modèles animaux de lésions utérines, en particulier ceux qui traitent de l’impact des lésions sur les résultats in utero ultérieurs. Ce protocole décrit une nouvelle procédure chirurgicale pour un modèle de lésion utérine induite mécaniquement chez la souris de laboratoire (Mus musculus). Les étapes prises en préparation à la chirurgie, à l’induction de la lésion utérine elle-même et aux procédures de récupération post-chirurgicale sont démontrées. Des renseignements supplémentaires sont fournis concernant la dissection en aval chez les souris non gravides et les souris gravides. Dans l’ensemble, en détaillant un ensemble de procédures pour induire des lésions utérines dans un modèle in vivo , ce protocole présente une méthode flexible pour élucider les événements moléculaires et cellulaires de la cicatrisation des plaies utérines et ses effets sur la grossesse ultérieure.
Introduction
Bien qu’aux États-Unis, 1 accouchement sur 3 soit effectué par césarienne, on sait peu de choses sur la façon dont l’utérus guérit et comment un utérus blessé entraîne des complications lors des grossesses ultérieures 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12
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Protocole
Toutes les procédures démontrées dans ce protocole ont été approuvées par l’Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) de l’Université de Californie à Davis (IACUC Protocol #23985). Les procédures décrites dans ce protocole sont généralement effectuées sur des femelles C3H âgées de 7 à 10 semaines et pesant entre 19 et 25 g, bien que ce protocole convienne aux souris femelles de toutes les souches, de tous les âges et de tous les poids, selon la question du chercheur. Surveiller les animaux avant l’intervention chirurgicale pour s’assurer que seuls des animaux en bonne santé ne présentant aucun signe de blessure ou de détress....
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Résultats
Après une intervention chirurgicale avec l’utilisation de kétamine/xylazine comme anesthésique, les animaux sont généralement partiellement mobiles en ~1 h. et complètement mobiles en ~4-6 h. La récupération de l’anesthésie à l’isoflurane se produit généralement en quelques minutes. Toutes les complications qui peuvent survenir, telles que la déhiscence de la plaie ou la douleur, sont généralement évidentes dans les 1 à 3 jours suivant la chirurgie. Effectuez des contrôles quotidiens du bien-être pour surveiller la doule.......
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Discussion
Les césariennes représentent ~33 % des accouchements aux États-Unis, et jusqu’à 55 % à 65 % des accouchements dans des pays tels que le Brésil et l’Égypte12,52, et pourtant on sait peu de choses sur la façon dont l’utérus guérit après une blessure ou sur l’impact de ces blessures sur les grossesses ultérieures. Bien que la césarienne antérieure soit un facteur de risque majeur pour les troubles de la grossesse tels que le spectre.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à déclarer.
Remerciements
Nous remercions les services d’enseignement et de recherche en soins aux animaux de l’UC Davis (TRACS) pour leur soutien continu en matière d’élevage, de procédure et de logistique. Nous remercions le Dr Yi-Je (Jay) Chen, D.V.M., Ph.D., pour ses conseils et son soutien techniques, ainsi que l’utilisation de la salle d’opération pour le tournage. Nous remercions tous les membres du laboratoire Zhang pour leur soutien à ce travail. La figure 5A a été créée avec BioRender.com (https://BioRender.com/ig9sfon).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 0,9 % NaCl pour injection, stérile | Fresenius Kabi | 63323-186-10 | |
| 25 g x 5/8 po BD PrecisionGlide&trade ; Aiguille | BD | 305122 | |
| 70 % d’éthanol | Fisher Scientific | BP82031GAL | |
| Suture résorbable 4-0 en vicryl | Éthicon | J214 | |
| Cages pour animaux | VWR | 10712-110 et 10715-323 | Les cages fournies par l’animalerie du chercheur sont acceptables |
| Poinçon d’oreille animal | Fisher Scientific | 13-812-201 | |
| Système de fermeture de l’enroulement AutoClip | Outils scientifiques fins | 12020-00 | |
| Seringue à insuline U-100 | Fisher Scientific | 14-826-79 | Marque BD |
| Écouvillons à la bétadine | Medline | MDS093901 | |
| Buprénorphine à libération prolongée, 1,3 mg/ml (Ethiqa XR) | Fidelis Pharmaceuticals | 099114 | D’autres médicaments à libération prolongée de buprénorphine ou de chlorhydrate de buprénorphine sont acceptables |
| Carprofène (RIMADYL) 50 mg/ml ; | Zoetis | RIM-00284R1 | |
| Ciseaux à iris incurvés | Instruments de précision mondiaux | Référence 501759G | |
| Stérilisateur d’outils chirurgicaux à billes de verre sèches | VWR INTERNATIONAL | 75999-324 | |
| Recharge de billes de verre sèches | VWR INTERNATIONAL | 75999-332 | |
| Souris femelles, généralement âgées de 8 à 12 semaines, p. ex. souche C3H | Rivière Charles | 025 | |
| Ciseaux fins - courbés 10,5cm | Outils scientifiques fins | 14370-23 | |
| Tondeuse à fourrure | Fisher Scientific | 50-195-4544 | |
| Presse heureuse ' n Sceau | Fisher Scientific | NC1089054 | |
| Gants, nitrile | Fisher Scientific | 19-130-1597C | |
| H2O, distillé stérile | Outils scientifiques fins | 15230170 | |
| Illuminateur pour les chirurgies | AmScope | HL150-AY | |
| Kétamine, 100 mg/mL (zétamine) | Dechra | 501072 | |
| Blouse | Uline | S-15376W-50 | |
| Microscope optique | Fisher Scientific | S13039 | |
| Rouleau à charpie | Fisher Scientific | 17-018-329 | |
| Crème dépilatoire Nair | Cible | 049-06-3304 | |
| Porte-aiguille | Outils scientifiques fins | 12500-12 | |
| Essuie-tout | Scott | 1804 | |
| Pétri | Fisher Scientific | 08-757-100 | |
| Solution saline tamponnée au phosphate (PBS) | Thermo Fisher Scientific | 10010023 | |
| Bécher en plastique | Thermo Fisher Scientific | 12010250 | |
| Chercheur de sonde avec extrémité courbée | Fisher Scientific | 08-995 | |
| Fisherbrand&commerce ; Sachets de stérilisation à fermeture instantanée 9 cm (L) x 13,3 cm (H) | Fisher Scientific | 181250 | |
| Fisherbrand&commerce ; Sachets de stérilisation à fermeture instantanée 9 cm (L) x 23 cm (H) | Fisher Scientific | 181251 | |
| Forceps, fine, #5 | Outils scientifiques fins | 11254-20 | |
| Pinces, fines, #55 ; | Outils scientifiques fins | 11295-51 | |
| Écaille | Fisher Scientific | Réf. S93805 | |
| Ciseaux chirurgicaux | Outils scientifiques fins | 14060-09 | |
| Vaporisateur | Fisher Scientific | S413505P | |
| Tampons de préparation à l’alcool stériles | Fisher Scientific | 22-363-750 | |
| Pommade vétérinaire ophtalmique stérile | Puralube | PH-PURALUBE-VET | |
| Écouvillons stériles pour l’application d’une pommade oculaire | Fisher Scientific | 18-366-472 | |
| Sachets de stérilisation | Fisher Scientific | 19-910-673 | |
| Champ chirurgical | Fisher Scientific | 50-209-1792 | |
| Bonnet chirurgical | Uline | S-10480BLU | |
| Masques chirurgicaux | Fisher Scientific | 18-048-010 | |
| Thomas Scientific Sous-matelas absorbant pour banc, Coussins de banc, 16,5 x 23 po/42 x 58 cm | Fisher Scientific | NC1588452 | |
| Chambre de réchauffement/induction avec chauffage par le sol | Fisher Scientific | 14-370-302 | |
| Recharges de clip de plaie | Outils scientifiques fins | 12022-09 | |
| 100mg/ml de xylazine | Dechra | Rompun 100 mg/mL Xylazine |
Références
- Bowman, Z. S., et al. Risk factors for placenta accreta: A large prospective cohort. Am J Perinatol. 31 (9), 799-804 (2014).
- Miller, D. A., Chollet, J. A., Goodwin, T. M. Clinical risk factors for placenta previa-placenta accreta. Am J Obstet Gynecol. 177
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Réimpressions et autorisations
