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Article de méthode

Identification rapide de Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis et Ureaplasma urealyticum par amplification de l’ARN

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DOI :

10.3791/68413

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20 juin 2025

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1The First People's Hospital of Foshan

Dans cet article

Résumé

Ici, nous présentons un protocole démontrant l’amplification de l’ARN à flux latéral et évaluons l’efficacité pour détecter rapidement Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis et Ureaplasmaurealyticum.

Résumé

Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydia trachomatis (CT) et Ureaplasma urealyticum (UU) sont des agents pathogènes courants associés aux maladies sexuellement transmissibles (MST). NG est l’agent causal de la gonorrhée, qui peut entraîner divers troubles du système génito-urinaire, notamment l’épididymite, la prostatite, la cervicite et l’infertilité. La tomodensitométrie est un micro-organisme responsable de l’urétrite non gonococcique et de la maladie inflammatoire pelvienne. L’UU est associée à l’urétrite non gonococcique, à la cervicite, à la prostatite et à l’infertilité. Les technologies moléculaires actuelles pour l’analyse de NG, CT et UU sont souvent complexes et prennent beaucoup de temps. Les tests moléculaires rapides pour ces agents pathogènes peuvent faciliter le diagnostic précoce des MST. Le test d’amplification d’ARN à flux latéral (RGT) est une méthode qui ne nécessite pas d’extraction d’acide nucléique. Dans ce processus, les échantillons sont lysés pour libérer des fragments d’acide nucléique, qui sont ensuite amplifiés par transcription inverse et transcription. Le produit d’ARN amplifié est reconnu et capturé par des sondes spécifiques, formant un complexe ARN-sonde de détection sonde-sonde d’or qui peut être immobilisé sur une membrane de nitrocellulose par flux latéral pour produire des bandes visibles. L’ensemble de la procédure prend moins de 1 h. Le but de cette étude était d’évaluer l’efficacité de la RGT pour la détection rapide de la NG, de la TDM et de l’UU. Au total, 1 416 échantillons ont été inclus. La cohérence de NG, CT et UU lorsqu’elles sont analysées par RGT par rapport à la méthode de sondage par fluorescence par réaction en chaîne par polymérase (PCR) était de 99,03 % (307/310), 99,38 % (159/160) et 99,02 % (303/306), respectivement. La cohérence de NG, CT et UU lorsqu’analysée par RGT par rapport au séquençage génique était de 99,17 % (238/240), 98,95 % (188/190) et 98,30 % (173/176), respectivement. Comparativement à la méthode de culture d’isolement des agents pathogènes, les taux de détection pour les tests NG, CT et UU étaient de 100,00 % (9/9, 17/17, 8/8). La sensibilité et la spécificité élevées, la facilité d’utilisation et les délais réduits rendent ce test idéal pour la détection rapide et précise de NG, CT et UU.

Introduction

Les infections sexuellement transmissibles (IST) représentent d’importants défis de santé publique à l’échelle mondiale, entraînant de graves morbidités et mortalité génitales et reproductives1. Neisseria gonorrhoeae (NG) est l’agent causal de la gonorrhée, avec environ 87 millions de nouveaux cas signalés chaque année dans le monde2. Cet agent pathogène induit principalement une inflammation en envahissant l’épithélium cylindrique du tractus urogénital3. Chlamydia trachomatis (CT), un autre micro-organisme, est responsable de l’urétrite non gonococcique et des infections pelviennes, représentant environ 130 millions de nouveaux cas chaque année4. Ureaplasma urealyticum (UU), la cellule auto-réplicative la plus simple et la plus petite, envahit facilement les tissus cervicaux endommagés et est associée à l’urétrite non gonococcique, à la cervicite, à la prostatite et à l’infertilité5. Toutes ces infections sont souvent asymptomatiques chez les femmes et les hommes, mais elles peuvent entraîner de graves complications si elles ne sont pas traitées rapidement. Les infections maternelles peuvent entraîner de graves issues défavorables de la grossesse, notamment la mortinaissance, la fausse couche, l’accouchement prématuré et l’infection fœtale directe6. Par conséquent, le développement d’une méthode rapide, sensible, spécifique et conviviale pour la détection des agents pathogènes est d’une importance capitale.

La détection rapide et précise des agents pathogènes est essentielle pour un diagnostic et une gestion efficaces des maladies. Les méthodes de culture traditionnelles, qui nécessitent l’isolement, la culture et l’identification des agents pathogènes, présentent des inconvénients importants, notamment qu’elles prennent du temps et qu’elles sont peu sensibles. Bien que le séquençage des gènes présente un taux de précision élevé, il nécessite un environnement et un équipement complexes, ce qui le rend coûteux et chronophage. Les technologies moléculaires conventionnelles pour l’analyse de NG, CT et UU ont été largement acceptées ; Cependant, ces méthodes sont souvent compliquées et prennent du temps, nécessitant des instruments sophistiqués, des techniciens formés et des délais de traitement prolongés. Par conséquent, il est urgent de disposer d’une méthode de diagnostic moléculaire simple et fiable pour remédier aux limites des approches conventionnelles. Le test d’amplification d’ARN à flux latéral (RGT) offre une alternative rapide, sensible et spécifique sans avoir besoin de procédures complexes 7,8. Dans cette méthode, les échantillons sont directement lysés pour libérer des fragments d’acide nucléique sans extraction d’acide nucléique, et ces fragments sont amplifiés par transcription inverse et transcription. Le produit d’ARN amplifié est ensuite reconnu et capturé par des sondes spécifiques, formant un complexe ARN-sonde de détection-sonde d’or, qui peut être immobilisé sur une membrane de nitrocellulose par flux latéral pour créer des bandes visibles9. L’ensemble du processus prend moins de 1 h, ce qui le rend parfaitement adapté aux tests de laboratoire d’urgence.

Dans cette étude, nous avons recruté 1 416 échantillons pour évaluer l’utilisation de RGT pour la détection de NG, CT et UU. Les échantillons ont été analysés à l’aide de méthodes de culture RGT, PCR, de séquençage de gènes et d’isolement d’agents pathogènes. Les résultats ont indiqué que la méthode RGT était précise et cohérente avec les méthodes de diagnostic conventionnelles. En conclusion, la sensibilité et la spécificité élevées, la facilité d’utilisation et les délais réduits rendent ce test idéal pour la détection rapide et précise de NG, CT et UU, suggérant son application prometteuse dans le diagnostic médical préliminaire des maladies sexuellement transmissibles.

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Protocole

Cette étude a été menée conformément aux directives éthiques et à l’approbation accordée par le Conseil d’examen institutionnel du Premier Hôpital populaire de Foshan, dans la province du Guangdong, en Chine (Document d’examen éthique n°. LR (2025) 136). Au total, 1 416 échantillons d’écouvillonnage génital (716 de femmes, 700 de garçons) ont été prélevés de manière prospective chez des personnes cliniquement suspectées d’être atteintes de MST qui n’avaient pas reçu d’antibiothérapie au cours des 14 jours précédents (tableau supplémentaire 1). Pour chaque participant, des écouvillons appariés ont été obtenus simultanément et analysés en parallèle : l’un par la méthode de test (RGT) et l’autre par la méthode de référence (sonde de fluorescence PCR, séquençage de gènes et culture d’isolement d’agents pathogènes, respectivement). L’accord inter-méthodes a été quantifié à l’aide du coefficient Kappa de Cohen (κ), l’interprétation étant guidée par les critères de Landis et Koch.

REMARQUE : Le protocole de dosage pour la TDM et l’UU suit des étapes procédurales identiques à celles décrites pour le NG, avec des modifications limitées aux réactifs spécifiques de l’agent pathogène. Les formulations détaillées des réactifs sont fournies à l’étape 2.1 (tableau supplémentaire 2, tableau supplémentaire 3 et tableau supplémentaire 4).

1. Prélèvement d’échantillons

  1. Type d’échantillon applicable : Prélever des écouvillons génitaux (écouvillon cervical féminin, écouvillon urétral masculin).
  2. Prélèvement d’échantillons
    1. Insérez l’écouvillon génital dans l’orifice urétral masculin sur 2 à 3 cm ou dans l’orifice cervical féminin sur environ 1 à 2 cm.
    2. Tournez une fois et maintenez la position pendant 10 s.
    3. Retirez l’écouvillon et insérez-le dans le tube de prélèvement contenant 1 ml de solution saline normale.
    4. Cassez et jetez la queue de l’écouvillon, puis serrez le capuchon du tube.
    5. Notez l’heure de collecte et effectuez le test rapidement.
  3. Stockage et transport des échantillons
    1. Transportez les échantillons à température ambiante (RT) dans les 4 h ou à 2-8 °C avec un sac de glace dans les 24 h.
    2. Stocker les pastilles cellulaires restantes des échantillons traités à -20 °C pendant 3 mois ou à -80 °C jusqu’à 6 mois si les essais ne peuvent pas être effectués en temps opportun.

2. Préparation

  1. Réactifs
    1. Pour les réactifs du dosage des acides nucléiques NG, se référer au tableau supplémentaire 2.
    2. Pour les réactifs du dosage des acides nucléiques par tomodensitométrie, se référer au tableau supplémentaire 3.
    3. Pour les réactifs du dosage des acides nucléiques UU, se référer au tableau supplémentaire 4.
    4. Stockage : Stockez tous les réactifs à des températures comprises entre -40 °C et -15 °C et les cartes de détection à des températures comprises entre 2 °C et 30 °C.
      REMARQUE : Le tampon d’amplification et la solution de détection doivent être équilibrés à RT avant utilisation, en fonction des exigences de détection quotidiennes. Une fois qu’ils ont atteint la RT, ils doivent être stockés à 4 °C et peuvent être utilisés pour la prochaine détection. Évitez la congélation et la décongélation répétées. L’enzyme d’amplification doit être stockée à -20 °C, sauf pendant le processus expérimental. Une augmentation de la température de stockage peut entraîner une baisse ou une perte de l’activité enzymatique.
  2. Exigences de l’environnement expérimental
    1. Réalisez l’expérience dans quatre zones physiquement séparées :
      1. Zone de préparation des réactifs : Maintenir à 22 ± 1 °C avec une pression d’air positive (débit d’air filtré à haute efficacité ≥ 0,3 m/s). Stockez les réactifs pré-aliquote dans des armoires stérilisées aux UV.
      2. Zone de préparation des échantillons : Effectuer toutes les manipulations d’échantillons dans une enceinte de sécurité biologique de classe II prétraitée avec de l’éthanol à 70 %.
      3. Zone d’amplification : Faire fonctionner les thermocycleurs sur des tables anti-vibrations.
      4. Zone d’analyse du produit : Utiliser un banc stérilisé aux UV (30 min d’exposition avant/après utilisation).
    2. Régulez le personnel et la circulation de l’air dans chaque section pour prévenir la contamination croisée comme suit :
      1. Maintenir un flux d’air unidirectionnel entre la préparation du réactif et les zones d’analyse du produit.
      2. Assurer une pression négative dans la zone de préparation de l’échantillon (-5 Pa par rapport aux zones adjacentes).
      3. Restreindre les déplacements du personnel ; Décontaminer les gants avec de l’éthanol à 75 % avant les transitions de zone.
      4. Installer des portes de sas avec des systèmes de verrouillage (délai minimum de 30 s entre les ouvertures).
    3. Utilisez des consommables spécifiques à une zone (par exemple, des tubes à centrifuger, des pointes de pipette, etc.) et jetez-les après une seule utilisation.
    4. Maintenir la propreté et le contrôle de la qualité :
      1. Nettoyez les bancs tous les jours avec de l’hypochlorite de sodium à 10 % suivi de l’éthanol à 75 % ou de l’eau distillée.
      2. Valider la stérilité des consommables par le biais d’un test d’endotoxines (dosage du lysat d’amébocytes de Limulus, <0,25 UE/ml).
      3. Surveiller la qualité de l’air chaque semaine à l’aide de plaques de décantation (gélose tryptique de soja [TSA], ≤5 unités formant colonies (UFC)/plaque après 4 h d’exposition).
  3. Qualifications du personnel
    1. Posséder des certificats ou des qualifications liés à la technologie PCR pour assurer l’exactitude et la fiabilité de cette expérience.

3. Lyser les cellules pour extraire l’ARN

  1. Traitement des échantillons
    1. Vortex le tube de prélèvement de l’échantillon à 2 600 fois/min pendant 10 s pour déloger les cellules de la tête de l’écouvillon dans la solution.
    2. Transvaser 1 mL de la solution dans un tube de microcentrifugation de 1,5 mL à l’aide d’une pipette calibrée réglée à 1000 μL.
    3. Centrifugeuse à 12 000 × g pendant 2 min à 25 °C.
    4. Aspirer 950 μL de surnageant sans perturber la pastille. Remettez les granulés en suspension dans 25 μL de solution résiduelle en pipetant 10 fois de haut en bas à l’aide d’une pipette calibrée de 200 μL réglée à 50 μL.
  2. Lyse des échantillons et des matériaux de contrôle de la qualité
    1. Tampon de lyse cellulaire de pré-équilibrage et contrôle négatif à 25 °C pendant 15 min.
    2. Centrifuger les matériaux de contrôle qualité à 1000 × g pendant 10 s à 25 °C pour s’assurer que toutes les poudres se déposent au fond du tube.
    3. Ajouter 30 μL de tampon de lyse aux matériaux de contrôle de la qualité et 20 μL aux échantillons.
    4. Incuber pendant 10 min à 25 °C.
      REMARQUE : Lors de l’utilisation du tampon de lyse cellulaire, il est essentiel de bien le mélanger. Mélanger en pipetant 15 fois (pointe de 200 μL) et ajouter les particules et le liquide au précipité. Manipuler le contrôle positif dans une enceinte de biosécurité de classe II traitée aux UV, suivi d’une décontamination à l’hypochlorite de sodium à 10 %.

4. Amplification isotherme de l’ARN

  1. Pré-équilibrage du tampon d’amplification
    1. Décongelez le tampon d’amplification et équilibrez-le à 25 °C ± 1 °C pendant 15 min.
  2. Configuration du contrôle
    1. Incluez à la fois un contrôle positif et négatif dans chaque cycle expérimental.
  3. Étiquetage des tubes
    1. Étiquetez les tubes d’amplification en fonction du nombre d’échantillons.
  4. Assemblage de réaction
    1. Pipette 17 μL de tampon d’amplification dans chaque tube à l’aide d’une pipette calibrée de 20 μL. Ajouter 2 μL de l’échantillon ou du lysat témoin directement dans la gouttelette tampon.
      REMARQUE : Assurez-vous que le lysat pénètre dans le tampon sans entrer en contact avec la paroi du tube (centrifuger brièvement à 500 × g pendant 5 s si nécessaire). Bouchez immédiatement les tubes pour éviter la contamination par aérosol.
  5. Activation thermique
    1. Incuber les tubes dans un thermocycleur préchauffé selon le programme suivant :
      Étape 1 : 95 °C pendant 2 min (dénaturation)
      Étape 2 : 42 °C pendant 2 min (recuit d’apprêt).
  6. Amplification enzymatique
    1. Ajouter 1 μL d’enzyme d’amplification dans chaque tube et mélanger en remuant le tube 5 fois suivi d’une brève centrifugation (500 × g pendant 5 s). Transférez immédiatement les tubes dans un deuxième thermocycleur préchauffé à 42 °C pendant 45 min.
      REMARQUE : Utilisez des incubateurs séparés pour éviter les fluctuations de température, l’un réglé à 95 °C et l’autre à 42 °C. Pour les analyses de plusieurs échantillons, maintenez les tubes d’amplification restants à 42 °C tout en ajoutant l’enzyme d’amplification dans le dernier tube d’amplification.

5. Dosage à flux latéral

  1. Pré-équilibrage de la solution de détection
    1. Transférez la solution de détection dans l’incubateur à 42 °C pendant 10 min.
  2. Homogénéisation
    1. Vortex la solution de détection à 2 600 fois/min pendant 15 s jusqu’à ce que la couleur soit uniforme.
  3. Maintien de la température
    1. Maintenez la solution de détection à 25 °C ± 2 °C pendant ≤30 min avant de l’utiliser.
  4. Initiation de la réaction
    1. Ajoutez 30 μL de solution de détection dans chaque tube d’amplification à l’aide d’une pipette calibrée de 20 à 200 μL.
      REMARQUE : La pointe de la pipette doit entrer en contact avec la paroi du tube à un angle de 45° pendant la distribution pour éviter la formation de bulles.
  5. Hybridation
    1. Mélangez la solution en pipetant 5 fois de haut en bas et incubez dans un incubateur préchauffé à 53 °C pendant 10 min.
  6. Préparation du dispositif de dosage
    1. Retirez les cartes de détection des pochettes en aluminium.
      REMARQUE : Évitez de toucher la zone d’application de l’échantillon.
  7. Exemple d’application
    1. Transférez l’ensemble du mélange dans l’orifice de l’échantillon de la carte de détection à l’aide d’une pipette de 20 à 200 μL.
    2. Placez immédiatement la carte de détection dans un incubateur à 42 °C pendant 15 min.

6. Analyse des résultats

  1. Environnement contrôlé pour la lecture
    1. Maintenir les cartes de détection dans un incubateur préchauffé à 53 °C pendant l’interprétation visuelle pour stabiliser l’intensité du signal.
  2. Protocole d’interprétation visuelle
    1. Lisez les résultats des tests directement par inspection visuelle des bandes sur les cartes de détection dans un délai de 10 à 20 minutes.
      REMARQUE : Le résultat devient invalide après 20 min.
  3. Pour la matrice d’interprétation de l’interprétation des résultats de RGT, reportez-vous au tableau supplémentaire 5.
    REMARQUE : L’interprétation visuelle du résultat est illustrée à la figure 1.

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Résultats

Cohérence des méthodes de sonde de fluorescence RGT et PCR
Au total, 310 échantillons ont été analysés pour le NG, soit 161 femelles et 149 mâles. Le taux de coïncidence positive était de 98,78 % (IC à 95 % : 93,39 %-99,97 %), tandis que le taux de coïncidence négative était de 99,12 % (IC à 95 % : 96,87 %-99,89 %). Le taux de coïncidence global était de 99,03 % (IC à 95 % : 97,20 %-99,80 %). La valeur de cohérence de Kappa était de 0,975 (IC à 95 % : 0,947-1,...

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Discussion

Dans cette étude, la RGT a été utilisée pour détecter les agents pathogènes des IST, y compris le NG, le CT et l’UU. Lorsqu’il a été réalisé dans le cadre de protocoles opérationnels rigoureux, le test RGT a démontré une forte concordance avec les méthodes de diagnostic établies telles que la sonde de fluorescence PCR, le séquençage de gènes et les techniques de culture d’isolement des agents pathogènes. La sensibilité et la spécificité du test RGT étaient comparables ou supérieures à ce...

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.

Remerciements

Nous remercions Wuhan Zhongzhi Bio-technologies Inc. pour les réactifs et les conseils techniques offerts pour cette étude.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Hypochlorite de sodium à 10 % (p/v)Préparation en laboratoire.Préparation en laboratoire.Solution d’eau de Javel diluée pour la décontamination et l’inactivation des agents pathogènes sur l’équipement ou les surfaces.
Éthanol à 75 % (v/v)Ante Food Co., Ltd (Anhui, Chine)http://www.antegroup.com/product_detail_cn/id/81.htmlSolution aqueuse d’éthanol utilisée pour la désinfection des surfaces
Pipette à volume réglable (0,5 &ndash ; 10 &mu ; L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101004Micropipette monocanal pour une manipulation précise de volumes à l’échelle du microlitre.
Pipette à volume réglable (100&ndash ; 1000 &mu ; L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101014Pipette monocanal calibrée pour la manipulation de liquides de grand volume.
Pipette à volume réglable (10&ndash ; 100 &mu ; L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101008Pipette monocanal optimisée pour les volumes intermédiaires, couramment utilisée dans les protocoles de biologie moléculaire.
Pipette à volume réglable (20 po ; 200 &mu ; L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101009Pipette monocanal pour les transferts de volumes moyens, adaptée à l’aliquotage précis des réactifs.
Enceinte de biosécurité (HF Safe-1200)HealForce Bio-Meditech Holdings Limited (Hong Kong, Chine)HF Safe-1200Une enceinte de biosécurité de classe II assurant la protection du personnel, des échantillons et de l’environnement lors de la manipulation de micro-organismes pathogènes ou de cultures cellulaires.
Centrifuge TubesHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, Chine)Dépôt de dispositif médical Guangzhou Yuexiu n° 20210414Pour l’extraction d’acides nucléiques, la granulation de cellules et d’autres procédures de laboratoire.
Chamydia trachomatis (CT) Dosage des acides nucléiques (amplification de l’ARN-Dosage du flux latéral)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, Chine)A.10.309-STD-RG-002Pour la détection qualitative de l’ARN des acides nucléiques de Chamydia trachomatis dans les échantillons d’écouvillons des voies génitales et urinaires.
Incubateur CO2Thermo Fisher Scientific(Asheville, USA) LLCSN :Utilisé pour la culture cellulaire, fournissant un environnement stable avec une température contrôlée (37° ; C), l’humidité et la concentration de CO2 (généralement 5 %) pour assurer une croissance cellulaire optimale.
Plaque de culture  ;Corning Incorporated (Corning, États-Unis)50 mm & aigu ; 9 mmPour la culture cellulaire adhérente et l’expansion.
Kit de détection de l’acide nucléique à Chamydia trachomatis (CT) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Medical Device Registration Certificate No. 20143402234Pour la détection qualitative de l’acide nucléique de Chamydia trachomatis dans les échantillons d’écouvillons des voies génitales et urinaires.
Kit de détection de l’acide nucléique à Neisseria gonorrhoeae (NG) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Medical Device Registration Certificate No. 20173401080Pour la détection qualitative de l’acide nucléique de Neisseria gonorrhoeae dans les échantillons d’écouvillons des voies génitales et urinaires.
Kit de détection de l’acide nucléique à Ureaplasma Urealyticum (UU) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Medical Device Registration Certificate No. 20173400536Pour la détection qualitative de l’acide nucléique d’Ureaplasma Urealyticum dans les échantillons d’écouvillons des voies génitales et urinaires.
Milieu DMEMThermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, États-Unis 11965092Pour la culture de Chlamydia trachomatis.
Pointes de pipette filtrante (10 &mu ; L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (Guangzhou, Chine)TF-10-BXLPour un pipetage précis dans les expériences.
Pointes de pipette à filtre (200 &mu ; L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (Guangzhou, Chine)TF-200-BXLPour un pipetage précis dans les expériences.
Écouvillon génitalHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, Chine)Hz112Écouvillons stériles à bout de coton pour le prélèvement d’échantillons cliniques sur les surfaces de la muqueuse génitale.
Sérum fœtal bovin Gibco (FBS)Thermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, États-Unis)10270106Pour la culture de Chlamydia trachomatis.
Lames de verreHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, Chine)Dépôt de dispositif médical Guangzhou Yuexiu n° 20210414Lames de verre standard avec traitement anti-décoloration pour la préparation de frottis cellulaires ou de coupes de tissus, compatibles avec les protocoles de coloration de Gram.
Kit de synthèse d’ADNc Goldenstar RT6 Ver2Beijing Tsingke Biotech Co., Ltd (Pékin, Chine)TSK302SPour la synthèse du premier brin d’ADNc dans la première étape de la RT-PCR en deux étapes. Il contient tous les réactifs nécessaires à la synthèse de l’ADNc à partir de l’ARN.
BasoDiagnostics, Inc. (Zhuhai, Chine)BA4012Un kit de coloration contenant du violet cristallin, de l’iode, un décolorant et de la safranine pour différencier Neisseria Gonorrhoeae.  ;
IBM SPSS Statistics (V25.0)International Business Machines Corporation (New York, USA)Version 25.0Pour l’analyse des données.
Stérilisateur infrarougeHuaxixinrui (Qingdao) Analytical Instruments Co., Ltd.MJ-200WPour la décontamination instantanée des boucles d’inoculation ou des pinces, minimisant ainsi la contamination croisée dans les enceintes de biosécurité.
Boucle d’inoculationBKMAM Biotechnology Co., Ltd. (Hunan, Chine)110306002Pour le transfert d’échantillons microbiens, le stries ou l’inoculation.
Microscope inversé (IX-51)Olympus Corporation (Tokyo, Japon)Code d’actif du laboratoire :  ; 71807101Pour l’observation des cellules adhérentes ou de la dynamique des cellules vivantes dans les boîtes de culture.
Système automatisé de spectrométrie de masse microbienne MALDI BiotyperBruker Daltonics GmbH & Co. KG (Brême, Allemagne)Numéro d’enregistrement national d’importation de dispositifs médicaux n° 20182222017Un système basé sur la spectrométrie de masse MALDI-TOF pour l’identification microbienne rapide via le profilage des protéines, permettant l’identification des espèces de bactéries et de champignons dans les laboratoires de microbiologie clinique.
Lignées cellulaires McCoyConservées en laboratoire.Conservé en laboratoire.Pour la culture de Chlamydia trachomatis.
Incubateur thermostatique à microplaques Leopard70-4 (capacité de 4 plaques)Leaptec Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.Leopard70-4Un incubateur de microplaques pouvant accueillir jusqu’à 4 microplaques standard, avec une plage de température ambiante à 70° ; C,  ; utilisé pour les étapes d’incubation.
Microscope (OLYMPUS CX43)Olympus Corporation (Tokyo, Japon)https://lifescience.evidentscientific.com.cn/zh/microscopes/upright/cx43-33/Pour l’observation clinique d’échantillons (par exemple, morphologie cellulaire, échantillons colorés).
Mini bain métallique MiniG-R100Leaptec Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.MiniG-R100Pour la régulation rapide de la température pendant l’expérience, comme le chauffage, l’incubation ou la fin des réactions dans des échantillons de petit volume.
Neisseria gonorrhoeae (NG) Dosage des acides nucléiques (amplification de l’ARN-Dosage à flux latéral)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, Chine)A.10.309-STD-RG-001Pour la détection qualitative de l’ARN des acides nucléiques de Neisseria gonorrhoeae dans des échantillons d’écouvillons des voies génitales et urinaires.
Réactif d’extraction d’acide nucléiqueWuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, Chine)A.10.105-SC-001Pour l’extraction, l’enrichissement et la purification des acides nucléiques.
Milieu de transport d’échantillonsQIAGEN N.V. (Venlo, Pays-Bas)5128-1220Ce milieu est spécialement formulé pour la collecte, la conservation et le transport d’échantillons cliniques, assurant ainsi la viabilité de Chlamydia trachomatis  ; et  ; Neisseria gonorrhoeae  ; pour les tests de diagnostic ultérieurs.
Centrifugeuse thermostatiqueBeckman Coulter, Inc. (Brea, USA)SN : MRZ21L037Pour la granulation d’acides cellulaires, microbiens ou nucléiques.
TM moyenShanghai Yihua Medical Science & Technology Co., Ltd (Shanghai, Chine)dépôt de dispositif médical Pu n° 20140081TM de Shanghai peut être utilisé pour l’isolement, la culture et l’identification de Neisseria gonorrhoeae à partir d’échantillons cliniques afin d’aider au diagnostic de la gonorrhée.
Trypsine-EDTA (0,25 %)Thermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, États-Unis)25200072Pour la dissociation en douceur des cellules adhérentes pendant les procédures de sous-culture ou expérimentales.
Ureaplasma urealyticum (UU) Dosage des acides nucléiques (amplification de l’ARN-Dosage à flux latéral)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, Chine)A.10.309-STD-RG-003Pour la détection qualitative de l’ARN de l’acide nucléique d’Ureaplasma Urealyticum dans des échantillons d’écouvillons des voies génitales et urinaires.
Ureaplasma urealyticum et Mycoplasma hominis Kit de culture, d’identification et de sensibilité aux médicamentsHebei Zhongaisheng Biotechnology Co., Ltd. (Hebei, Chine)Enregistrement de dispositif médical Hebei n° 20152400168Pour l’isolement sélectif, la culture, l’identification et la détermination de la sensibilité aux médicaments d’Ureaplasma urealyticum et de Mycoplasma hominis.
Mélangeur vortexXinkang Medical Instrument Co. Ltd (Jiangsu, Chine)XK80-ADispositif de laboratoire pour l’homogénéisation d’échantillons de liquide par agitation rapide.
300504406 Le milieu de

Références

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