Modèle murin de rechute de la leucémie à la chimiothérapie d’induction pour la leucémie lymphoblastique aiguë

Manuella Munuera Rosati; Juliana Ronchi Corrêa; Samara de Sousa Mariano; Amilcar Cardoso; José Andrés Yunes

doi:10.3791/68797

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Article de méthode

Modèle murin de rechute de la leucémie à la chimiothérapie d’induction pour la leucémie lymphoblastique aiguë

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DOI :

10.3791/68797

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17 octobre 2025

Manuella Munuera Rosati¹^,² , Juliana Ronchi Corrêa¹ , Samara de Sousa Mariano¹ , Amilcar Cardoso³ , José Andrés Yunes¹^,³^,⁴

¹Leukemia Biology Laboratory, Boldrini Children's Center, ²Graduate Program in Genetics and Molecular Biology, University of Campinas, ³Boldrini Children's Center, ⁴Department of Translational Medicine, Faculty of Medical Sciences, University of Campinas

Dans cet article

Résumé

Le protocole vise à décrire un modèle murin permettant de générer des rechutes de leucémie lymphoblastique aiguë, en se basant sur la dynamique de la réponse à la chimiothérapie d’induction.

Résumé

La leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) est un néoplasme de cellules précurseurs lymphoïdes immatures et l’une des tumeurs malignes les plus courantes chez l’enfant. Bien que les taux de guérison dans la LAL pédiatrique approchent les 90 %, la rechute et la résistance aux médicaments restent des défis. Dans ce contexte, l’étude de la biologie du cancer in vivo est essentielle, et les xénogreffes dérivées de patients (PDX) utilisant des modèles murins sont largement utilisées à cette fin. Cependant, les PDX provenant d’échantillons en rechute - ou comparés à des échantillons diagnostiques - n’évaluent pas pleinement les mécanismes à l’origine de l’initiation et de la progression de la rechute. Ce protocole repose sur la génération de rechutes de PDX B-ALL chez la souris, permettant la collecte de cellules leucémiques tout au long du processus d’acquisition de la résistance aux médicaments. Les animaux greffés avec des cellules PDX B-LLA, sont traités avec une combinaison de quatre médicaments couramment utilisés dans le traitement de la LAL, représentant des mécanismes d’action distincts : la dexaméthasone, la vincristine, la L-asparaginase et la daunorubicine. Après une phase d’induction de la rémission de 4 semaines, les animaux sont surveillés pour détecter les rechutes pendant une période de repos. Le cycle de traitement et de rechute est répété jusqu’à ce que le temps de rechute se raccourcisse, servant de substitut à l’augmentation de la résistance aux médicaments in vivo. Pour explorer les mécanismes sous-jacents à la rechute et à la résistance, des cellules leucémiques sont prélevées avant et après chaque cycle de traitement pour une analyse phénotypique et génétique. Pour valider le modèle, différents échantillons de LAL pédiatriques ont été testés, y compris les bons et les mauvais répondeurs, comme l’a évalué la présence de blastes dans le sang périphérique après 7 jours de corticothérapie et la maladie résiduelle minimale (MRM) aux jours 15, 33 et 78/96. Les résultats observés chez la souris étaient cohérents avec les données des patients, confirmant la précision du modèle dans l’imitation de la réponse clinique à la chimiothérapie. Cette approche permet l’étude dynamique de la rechute et de la résistance aux médicaments dans la LAL-B, soutenant les investigations mécanistes et le développement de nouvelles stratégies thérapeutiques.

Introduction

La leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) est le cancer le plus répandu chez les enfants. Malgré les taux de guérison élevés atteints au cours des dernières décennies avec une survie globale à 5 ans atteignant 90 % dans les pays à revenu élevé¹ et des efforts importants dans la recherche de nouvelles stratégies thérapeutiques, dans les pays développés, 15 à 20 % des patients rechutent de la maladie, jusqu’à qui le taux de survie varie entre 30 % et 60 % selon que la première rechute survient tôt (moins de 18 mois) ou plus tard (36 mois) après le diagnostic²^,^3<....