Pathologie striatale induite par les lentiviraux comme modèle préclinique des ataxies spinocérébelleuses polyglutamine

Tiago Moreira-Gomes; Inês T. Afonso; Rafael G. Costa; David V. C. Brito; Pedro Alexandre Ricardo; Clévio Nóbrega

doi:10.3791/69550

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Article de méthode

Pathologie striatale induite par les lentiviraux comme modèle préclinique des ataxies spinocérébelleuses polyglutamine

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DOI :

10.3791/69550

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13 mars 2026

Tiago Moreira-Gomes¹^,² , Inês T. Afonso¹^,² , Rafael G. Costa¹^,² , David V. C. Brito¹^,²^,³ , Pedro Alexandre Ricardo¹ , Clévio Nóbrega¹^,²

¹ABC-RI, Algarve Biomedical Center Research Institute, ²Faculdade de Medicina e Ciências Biomédicas, Universidade do Algarve, ³ABC Collaborative Laboratory: Integrated Ageing and Rejuvenation Solutions (ABC CoLAB - Ageing Better)

Dans cet article

Résumé

Les ataxies spinocérébelleuses à la polyglutamine sont causées par des expansions CAG produisant des protéines sujettes à l’agrégation. Ce protocole décrit la production de vecteurs, la délivrance stéréotaxique et l’analyse des inclusions et de la perte de marqueurs neuronaux, fournissant une plateforme contrôlée pour étudier les mécanismes et évaluer les thérapies ciblées pour les maladies neurodégénératives.

Résumé

Les ataxies spinocérébelleuses polyglutamine sont un groupe de six maladies neurodégénératives causées par une mutation du tractus trinucléotidique CAG dans la région codante de chaque gène causal. Cette mutation entraîne un étirement anormalement étendu de la polyglutamine dans la protéine, la rendant sujette à l’agrégation et entraînant la formation d’inclusions intraneuronales, caractéristiques de ces maladies. Les mécanismes moléculaires sous-jacents à la pathogenèse de ces maladies sont complexes et pas entièrement compris. Jusqu’à présent, ces maladies restent incurables. Comprendre les mécanismes moléculaires dans les régions cérébrales vulnérables est essentiel au développement thérapeutique. Des plateformes expérimentales flexibles et spécifiques à chaque région sont nécessaires pour tester rapidement les mécanismes et interventions sans le temps ni le coût de générer plusieurs lignées transgéniques, sans toutefois traiter la vulnérabilité sélective. Ces dernières années, nous et d’autres avons développé plusieurs modèles basés sur des lentiviraux pour étudier l’impact de l’expansion de l’expression protéique dans des régions spécifiques du cerveau. Ces modèles présentent des caractéristiques neuropathologiques et comportementales qui imitent certaines pathologies, soulignant leur importance pour comprendre la pathogenèse et développer de nouvelles stratégies thérapeutiques. Dans cet article, nous décrivons le développement d’un modèle striatal en utilisant SCA2 comme exemple. Nous mettons en avant le développement et la production de vecteurs lentiviraux, ainsi que l’injection stéréotaxique des vecteurs exprimant la forme étendue de l’ataxine-2 (la protéine responsable de la maladie). Enfin, nous caractérisons deux principales caractéristiques neuropathologiques : la formation des inclusions et la perte des marqueurs neuronaux. En fournissant une plateforme contrôlée qui reproduit ces caractéristiques pathologiques clés, ce modèle constitue un outil précieux pour disséquer les mécanismes spécifiques à la région de la neurodégénérescence et évaluer les interventions thérapeutiques ciblées.

Introduction

Les ataxies spinocérébelleuses polyglutamine (polyQ SCA) sont un groupe de six troubles neurodégénératifs autosomiques dominants causés par des expansions répétées des trinucléotidiques CAG dans divers gènes causaux, entraînant des tractus toxiques de polyglutamine (polyQ) au sein des protéines^{codées 1}. Parmi eux, les SCA polyQ les plus fréquents sont la maladie de Machado-Joseph et la maladie de Machado-Joseph et la maladie de Machado-Joseph les plus fréquentes. Ces troubles affectent principalement les cellules neuronales dans des régions cérébrales spécifiques, y compris le cervelet e....