Article de recherche

L’électroacupuncture orchestre le remodelage de la flore intestinale : un pas en avant pour soulager la vasculopathie induite par un taux élevé de sel

DOI :

10.3791/69783

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13 janvier 2026

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1Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

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Cette étude a étudié l’effet de l’électroacupuncture (EA) sur la dysfonction vasculaire induite par un faible taux de sel. L’EA a inversé les lésions vasculaires et la dysbiose intestinale, possiblement en modulant des microbes intestinaux spécifiques.

Résumé

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cette étude vise à étudier le potentiel thérapeutique et les mécanismes de l’électroacupuncture (EA) pour soulager les dysfonctionnements vasculaires causés par des régimes riches en sel, en mettant l’accent sur la modulation du microbiote intestinal. Nous avons divisé aléatoirement 21 rats en groupes Contrôle Normal, Modèle à haute teneur en sel et Intervention EA (n = 7 par groupe). Le modèle du « syndrome de stase sanguine à haute teneur en sel » chez les rats Wistar a été induit par une perfusion intragastrique de 12 % de NaCl. Les traitements ont été réalisés entre 17h00 et 19h00, heure de Pékin : les rats ont été retenus avec un tissu doux, suivis d’une stimulation EA de 20 minutes à BL23 et KI3. Après l’expérience, des échantillons de sang de rat, de vaisseaux sanguins et de matières fécales ont été prélevés. Les effets vasculaires ont été évalués par test de fonction coagulante, analyse hémorhéologique et évaluation histopathologique artérielle. Le séquençage 16S rDNA a été utilisé pour analyser la composition et les variations d’abondance du microbiote intestinal. Les résultats ont révélé qu’une consommation chronique élevée de sel perturbait la viscosité sanguine, endommageait l’intégrité endothéliale vasculaire et provoquait une dysbiose microbienne intestinale. Fait remarquable, le traitement EA a effectivement inversé ces changements pathologiques. L’analyse de corrélation a également identifié des microbiotes intestinaux spécifiques (par exemple, Lachnospiraceae et Ruminococcaceae) fortement corrélés à des paramètres de viscosité sanguine modifiés (P < 0,05). Par conséquent, la présente étude conclut que la vasculopathie induite par un régime riche en sel peut être inversée par un traitement d’EA, ce qui peut être attribué à la capacité de l’EA à réguler le microbiote intestinal impliqué dans le métabolisme des acides biliaires et la synthèse des acides gras à chaîne courte.

Introduction

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Le sel alimentaire joue un rôle crucial dans le maintien de l’équilibre des liquides et de l’homéostasie cellulaire, mais une consommation excessive représente un facteur de risque bien établi pour les maladies cardiovasculaireset cérébrovasculaires 1. L’Organisation mondiale de la santé recommande de limiter l’apport quotidien en sodium à moins de 5 grammes pour les adultes enbonne santé 2. Des recherches ont démontré qu’un régime riche en sel (HSD) altère la fonction vasculaire et que les maladies cardiovasculaires (MCV), la maladie la plus répandue au monde, sont souvent accompagnées d’une vasculopathie3. Ces résultats soulignent que la réparation des lésions endothéliales vasculaires causées par le HSD constitue une stratégie cruciale pour prévenir la progression des MCV. Le « syndrome de stase sanguine » (caractérisé par une circulation sanguine stagnante et une accumulation interne de sang) s’inscrit dans le contexte quantifiable des dysfonctionnements de la coagulation en médecine moderne. Les principaux biomarqueurs de validation incluent un temps de prothrombine (PT) significativement réduit et un temps de thromboplastine partielle activée (APTT), ainsi qu’une augmentation marquée du fibrinogène (FIB) et du temps de thrombine (TT). Ces indicateurs reflètent un état hypercoagulable, correspondant directement aux caractéristiques pathologiques de la stase sanguine.

Le microbiote intestinal, présent dans tout le tractus gastro-intestinal, agit comme des régulateurs clés des processus immunométaboliques et de l’homéostasie intestinale tout en influençant diverses voies physiologiques etpathologiques 4. Les preuves émergentes indiquent qu’une consommation excessive de sel induit une dysbiose intestinale et un déséquilibre nutritionnel, déclenchant une activation immunitaire pro-inflammatoire qui se manifeste par une inflammation localisée tout en favorisant des lésions microcirculatoires, un remodelage vasculaire et un dysfonctionnement endothélialsystémique 1,5. Le HSD chronique a été rapporté comme provoquant une augmentation relative des niveaux de Bacteroides intestinalis, Aspergillus et Prevotella spp. chez la souris, et a été associé au développement de l’hypertension et de l’inflammation vasculaire6.

L’acupuncture, pierre angulaire de la médecine traditionnelle chinoise (MTC), utilise l’insertion précise d’aiguilles à des points d’acupuncture spécifiques comme thérapie complémentaire et alternative fondée sur des preuves en pratique clinique. Les National Institutes of Health (NIH) et l’Organisation mondiale de la santé (OMS) reconnaissent l’acupuncture comme une intervention cliniquement validée pour de multiples pathologies. Les preuves émergentes démontrent que l’acupuncture possède un double mécanismethérapeutique 7,8 : moduler la composition du microbiote intestinal tout en supprimant les médiateurs inflammatoires vasculaires, atténuant ainsi collectivement la progression pathologique dans les troubles apparentés. Il est important de noter que l’acupuncture est efficace pour abaisser la pression artérielle et restaurer la fonction endothéliale dans les vaisseaux sanguinsendommagés.

L’EA a été choisie plutôt que l’acupuncture manuelle pour ses paramètres de stimulation standardisés et quantifiables, qui réduisent la variabilité dépendante de l’opérateur et améliorent la reproductibilité des résultats. Nous avons donc étudié l’effet du traitement de l’AE sur le microbiote intestinal chez les rats présentant le modèle du syndrome de stase sanguine à haute teneur en sel (HSBS) et évalué l’efficacité de l’AA sur la vasculopathie induite par un taux élevé de sel par rhéologie sanguine et modifications histopathologiques vasculaires. Pour mieux comprendre le rôle du microbiote intestinal dans l’amélioration des lésions vasculaires par la thérapie EA, nous avons réalisé une analyse de corrélation entre différents genres de microbiote intestinal et la fréquence de coupe du sang total ainsi que la sédimentation sanguine.

Nous avons donc émis l’hypothèse que l’EA soulage la vasculopathie induite par le HSD en restaurant l’homéostasie du microbiote intestinal. Pour tester cela, nous avons visé à : (i) quantifier les effets protecteurs de l’EA sur la fonction et la structure vasculaires, et (ii) identifier les taxons microbiens intestinaux spécifiques modulés par l’EA qui corrèlent avec ces améliorations. De plus, l’analyse de corrélation de Pearson a identifié des relations significatives entre microbiote et vasculaires, en particulier entre les fluctuations différenciellement abondantes des genres et les anomalies hémorhéologiques. À notre connaissance, il s’agit de la première étude à explorer les mécanismes protecteurs de l’EA dans l’amélioration de la vasculopathie induite par un régime riche en sel du point de vue du microbiote intestin. Le plan expérimental de cette étude est illustré à la Figure 1.

Figure 1
Figure 1 : Schéma technique expérimental. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Protocole

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L’ensemble de l’expérience a été menée au Centre expérimental de l’École de médecine fondamentale de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu. Toutes les procédures de bien-être animal et expérimentales ont été approuvées par le Comité d’éthique du bien-être animal de laboratoire de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (n° d’éthique 2024078). Les expériences ont été réalisées en suivant strictement le NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (révision 1986, publication 86-23).

Animaux et régime alimentaire
Les rats Wistar mâles et femelles sans agents pathogènes spécifiques (SPF), âgés de 6 à 8 semaines, pesaient 200 ± 20 g. Tous les rats étaient logés dans des pièces bien ventilées avec un cycle clair-obscur de 12 heures et avaient un accès libre à la nourriture et à l’eau.

Modèles et groupes
Les modèles animaux ont été induits en se référant à l’expérience de rechercheantérieure 10. Après une période d’acclimatation de 7 jours, 21 rats Wistar (répartition mâle/femelle à 50 %) ont été répartis aléatoirement dans trois groupes expérimentaux (n = 7/groupe) à l’aide du générateur de nombres aléatoires dans Excel, le nombre de rats mâles et femelles dans chaque groupe étant maintenu à peu près équilibré afin de minimiser l’impact du sexe sur lesrésultats 11. Contrôle normal (NC) : Reçu une dose quotidienne de gavage gastrique (1 mL/100 g) d’eau purifiée. Modèle à haute teneur en sel (HS) et intervention EA (EA) : Solution de NaCl à 12 % (1 mL/100 g) administrée par une injection quotidienne. Toutes les interventions ont été maintenues pendant 30 jours consécutifs.

Traitement EA
Le traitement a été initié le lendemain de la modélisation réussie. L’EA a été choisie plutôt que l’acupuncture manuelle pour ses paramètres de stimulation standardisés et quantifiables, qui réduisent la variabilité dépendante de l’opérateur et améliorent la reproductibilité des résultats. Les emplacements de BL23 (Shenshu, méridien de la vessie) et KI3 (Taixi, méridien rénal) ont été déterminés en fonction des critères de localisation des points d’acupuncture chez les rats de la Chinese Acupunctureand Moxibustion Society 12. BL23 est située à 6 mm latéralement par rapport à la ligne médiane dorsale, inférieure à la deuxième vertèbre lombaire. KI3 se trouvait à la dépression médiane entre le point le plus élevé du malléol médian et la bordure postérieure du tendon d’Achille. Les poils locaux aux points d’acupuncture ont été retirés et stérilisés. Des aiguilles d’acupuncture stériles jetables (0,18 mm × 13 mm) étaient utilisées pour perforer verticalement les points d’acupuncture, avec des profondeurs d’insertion de 4 à 6 mm pour BL23 et 3 à 5 mm pour KI3. Le clip d’électrode positif de l’appareil d’électroacupuncture était relié à la poignée de l’aiguille de l’aiguille d’acupuncture à BL23 d’un côté, et le clip d’électrode négatif à celui de KI3 du même côté. Paramètres du dispositif d’électroacupuncture : Forme d’onde : onde dense-clairsemée (10/50 Hz) ; Fréquence : 5 s pour les ondes clairsemées, 10 s pour les ondes denses ; Intensité : 1-2 mA, ajustée selon les réactions convulsives et douloureuses des rats (cris, comportements de résistance) ; Largeur de pouls : ≤ 1 MS. Protocole de stimulation : L’intervention a été réalisée quotidiennement de 17h00 à 19h00 (heure de Pékin), durant 20 minutes à chaque fois. Cycle : Un cycle de traitement comprenait 7 jours, avec un total de 4 cycles et 1 jour de repos entre chaque cycle. Le processus spécifique est montré à la Figure 2 (Créée avec BioGDP.com13).

Figure 2
Figure 2 : Chronologie expérimentale. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

Collecte et préparation des échantillons
Un mois après le va-et-à-corps, du sang veineux orbitaire a été prélevé sur des rats avant l’intervention de l’EA. Des échantillons de plasma ont été extraits par centrifugation à 1 000 × g pendant 15 minutes à 4 °C. À la fin du traitement, des excréments frais ont été prélevés sur chaque groupe de rats. Les rats ont été anesthésés avec 10 % d’isoflurane émulsifié (30 mg/kg) et euthanasiés. La cavité abdominale a été ouverte, et environ 5 mL de sang ont été prélevés sur l’aorte abdominale pour mesurer la viscosité du taux de cisaillement du sang total (WBSRV) en moins de 4 heures. Des tissus de l’aorte abdominale ont été prélevés pour une analyse histopathologique. Tous les échantillons étaient stockés à -80 °C pour une utilisation ultérieure.

Test WBSRV
Après la modélisation, environ 4 à 5 mL de sang total ont été prélevés sur l’aorte abdominale des rats à l’aide d’une aiguille de collecte de sang et placés dans des tubes anticoagulants à l’héparine sodique. Les tubes furent doucement secoués pour assurer un mélange complet des échantillons de sang avec l’anticoagulant. En 4 heures, le WBSRV et le taux de sédimentation des érythrocytes (ESR) ont été mesurés à l’aide d’un analyseur hémorhéologique entièrement automatisé.

Histopathologie vasculaire
Les tissus vasculaires ont été fixés dans une solution de paraformaldéhyde à 4 % pendant au moins 24 heures et sectionnés à une épaisseur de 3 μm pour une coloration à l’hématoxyline-éosine (HE). Les images ont été prises à des grossissements de 100× et 400×.

Séquençage 16S rDNA
L’ADN génomique a été extrait d’échantillons fécaux de chaque groupe. Les séquences d’amorce V3-V4 (341F : 5'-CCTACGGGNGGCWGCAG-3' ; 805R : 5'-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3') ont été utilisées pour l’amplification par PCR de l’ADN total. Le programme d’amplification PCR était le suivant : pré-dénaturation à 98 °C pendant 30 s, dénaturation à 98 °C pendant 10 s, recuit à 54 °C pendant 30 s, et extension à 72 °C pendant 45 s, avec un total de 32 cycles, suivie d’une extension finale à 72 °C pendant 10 min. Les produits PCR étaient purifiés et quantifiés. Le séquençage par extrémités jumelées (2×250 pb) était réalisé sur la plateforme de séquençage NovaSeq 6000. Les lectures à extrémités jumelées ont été fusionnées et filtrées pour obtenir des données de haute qualité. En utilisant le plugin DADA2 dans QIIME 2, le filtrage de longueur et le débruit ont été effectués. Ce processus générait des variantes de séquence d’amplicons (ASV) et des tables d’abondance ASV, suivies par la suppression des ASV singleton. Des annotations taxonomiques et un profilage d’abondance ont été réalisés à partir du fichier de séquences ASV utilisant la base de données SILVA pour étudier les différences d’espèces et la composition des communautés entre les échantillons. La diversité des espèces et les variations de l’abondance relative ont été évaluées via des analyses de α-diversité et β-diversité, et la visualisation des données a été réalisée sur ce site web (https://www.omicstudio.cn/home).

Analyses statistiques
Les analyses statistiques ont été réalisées à l’aide de SPSS 26.0. Une valeur de P < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative. Pour les données à variances homogènes, l’ANOVA unidirectionnelle a été utilisée pour les comparaisons intergroupes, suivie de tests de différence de moindre significative (LSD) post-hoc si des différences significatives étaient trouvées. Pour les données à variances hétérogènes, l’ANOVA unidirectionnelle non paramétrique de Kruskal-Wallis par rangs a été utilisée. L’analyse du test Mann-Whitney U a été appliquée pour évaluer les changements dans la composition du microbiote intestinal et la structure de la communauté. L’analyse de corrélation par rang de Pearson a été utilisée pour évaluer les corrélations entre les bactéries intestinales à abondance différentielle et d’autres indicateurs. L’analyse de corrélation de Pearson a été employée car les données respectaient les hypothèses de normalité et de linéarité, validées par le test de Shapiro-Wilk et le test de Durbin-Watson. Des graphiques statistiques et des cartes thermiques ont été générés à l’aide de GraphPad Prism 10.

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Résultats

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Validation du modèle animal
Les quatre paramètres de coagulation jouent un rôle central dans la recherche sur les lésions vasculaires en surveillant les anomalies de la fonction coagulante étroitement liées aux changements pathologiques vasculaires. L’évaluation post-modélisation du sang du plexus veineux rétro-orbitaire a révélé des altérations significatives des paramètres de coagulation (PT, APTT, FIB, TT) entre les groupes HS/EA et les contrôles NC (Figure 3). Les val...

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Discussion

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Les lésions vasculaires sont un facteur critique dans le développement et les manifestations pathologiques de divers troubles cardiovasculaires et métaboliques. Leurs effets néfastes incluent un dysfonctionnement vasculaire, une coagulation sanguine anormale, une dépôt lipidique et la formation de plaques, ce qui peut entraîner une élévation de la pression artérielle, une thrombose et le développement de plaques artérielles, aboutissant finalement à diversesMCV 14...

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Déclarations de divulgation

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Les auteurs déclarent ne pas exister de conflit d’intérêts.

Remerciements

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Cette recherche a été financée par le Département provincial des sciences et technologies du Sichuan (Subvention n° 2024NSFSC0717). Merci à Figdraw pour l’aide apportée à la préparation des figures.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Aiguilles d’acupunctureSuzhou Medical Supplies Factory Co., Ltd.2420590,18 et fois ; 13 mm
Kit de test du temps de thromboplastine partielle activée (APTT) (méthode de coagulation)Beijing Succeeder Technology Inc.R21D24C4
Billons XP AMPureBeckman Coulter GénomiqueA63881
Analyseur automatique de coagulationBeijing Succeeder Technology Inc.SF-8050
Kit de test de fibrinogène (FIB) (méthode de coagulation)Beijing Succeeder Technology Inc.R31D24D2
Testeur de rhéologie sanguine entièrement automatiqueBeijing Succeeder Technology Inc.SA-5600
GraphPad Prism 10GraphPad Software, Inc.
H& Solution de coloration EWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdG1005
Kit de quantification de la bibliothèque IlluminaKapa Biosciences7960166001
IsofluraneSciences de la vie RWDR510-22-10100 mL
Kit d’extraction d’ADN génomique de selles à base de billes magnétiquesBiotekAU46111-96
Microscope blanc vertical Nikon Eclipse Ci-LNikon
QIIME 2https://qiime2.org/
Dispositif électronique d’acupuncture SDZ-II HuatuoSuzhou Medical Supplies Factory Co., Ltd.SDZ-II
Base de données SILVARelease 138, https://www.arb-silva.de/
Chlorure de sodiumChengdu Jinshan Chemical Reagents Co., Ltd.20231008500 g
Rats Wistar SPFSPF (Beijing) Biotechnology Co., Ltd.SCXK (Pékin) 2024-0001
Kit de test Thrombin Time (TT) (Méthode de coagulation)Beijing Succeeder Technology Inc.R4D24E1

Références

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