Ce protocole montre comment évaluer les effets de la thymoquinone sur la voie Keap-1/Nrf-2, les biomarqueurs du stress oxydatif et les résultats comportementaux dans un modèle de rat d’exposition subchronique à la deltamétrine.
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Article de méthode
Ce protocole montre comment évaluer les effets de la thymoquinone sur la voie Keap-1/Nrf-2, les biomarqueurs du stress oxydatif et les résultats comportementaux dans un modèle de rat d’exposition subchronique à la deltamétrine.
Les développements récents dans la recherche sur l’exposition aux pesticides ont accru l’intérêt pour les stratégies protectrices basées sur les antioxydants. La thymoquinone (TQ), un composé bioactif d’origine végétale, a été rapporté comme ayant des effets protecteurs contre divers agents toxiques. Cette étude décrit un protocole pour évaluer les effets de la QT sur les paramètres de stress oxydatif, la voie de signalisation Keap-1/Nrf-2, ainsi que les résultats comportementaux chez les rats exposés à de faibles doses de Deltaméthrine (DTM). Ici, 24 rats albinos Wistar mâles adultes (250 ± 20 g) ont été répartis aléatoirement en quatre groupes (n = 6/groupe) : témoin, TQ, DTM et DTM+TQ. La DTM (1,28 mg/kg) et la TQ (10 mg/kg) ont été administrées de façon intragastroque pendant 30 jours. Le poids corporel a été surveillé tout au long de l’étude. L’activité locomotrice et le comportement anxieux ont été évalués à l’aide du test en plein champ au 31e jour, et les comportements de type dépression au 32e jour. À la fin de la période expérimentale, le plasma et les tissus cérébraux ont été prélevés pour des analyses biochimiques, histopathologiques et moléculaires. Des marqueurs de stress oxydatif, incluant le malondiadéhyde, l’oxyde nitrique total, le glutathion et les niveaux de groupe sulfhydryle, ont été mesurés dans des échantillons de plasma et de cortex cérébral. Les niveaux d’expression de la protéine associée ECH de type kelch (Keap-1) et du facteur érythroïde 2 (Nrf-2) liés au facteur nucléaire 2 (Nrf-2) ont été analysés à l’aide de Western blotting et de l’immunohistochimie. Ce protocole offre une approche globale et reproductible pour étudier la neurotoxicité induite par les pesticides et les effets modulateurs des composés antioxydants.
Les insecticides sont largement utilisés en agriculture et dans les environnements domestiques pour contrôler les ravageurs ; Cependant, une exposition chronique à de faibles doses peut entraîner une contamination de l’environnement et des effets néfastes sur la santé, tant chez l’homme que chez les animaux. Une telle exposition, en particulier par des aliments et de l’eau contaminés, a été associée à un risque accru de troubles neurologiques et d’autres toxicitéssystémiques 1.
Les pyréthroïdes ont en grande partie remplacé les insecticides organophosphorés en raison de réglementatio....
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Le Comité local d’éthique de l’expérimentation animale institutionnelle a approuvé le protocole expérimental sous le numéro d’enregistrement 68429034/35. La durée totale de l’étude était de 32 jours. Avant ces expériences, les animaux étaient acclimatés aux conditions standard de laboratoire. Toutes les procédures expérimentales ont été menées en stricte conformité avec les directives institutionnelles et internationales d’éthique animale. Les matériaux expérimentaux utilisés dans ce protocole sont listés dans le tableau des matériaux.
REMARQUE : Les déchets chimiques et biologiques ont été....
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Mesures de poids corporel
Le poids corporel a été enregistré les jours 1, 10, 20 et 30. Les rats des groupes C et TQ ont montré une augmentation progressive du poids corporel sur la période expérimentale, sans différence significative entre ces groupes au 30e jour. En revanche, les rats exposés au DTM ont montré une réduction significative du poids corporel par rapport aux témoins. La co-administration de TQ a atténué la perte de poids associée au DTM. Aucune mortalit.......
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Cette étude démontre que l’exposition orale subchronique au DTM induit des altérations comportementales, biochimiques, moléculaires et histopathologiques constantes chez les rats, et que le TQ atténue efficacement ces effets lorsqu’il est administré concomitantement. En intégrant des tests comportementaux standardisés avec le profilage de stress oxydatif, l’analyse au niveau des voies de signalisation Keap-1/Nrf-2 et l’évaluation histopathologique, le protocole fournit un cadre robuste e.......
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Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts ni intérêts financiers concurrents.
Cette recherche n’a reçu aucun financement externe.
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 5,5'-Dithiobis (acide 2-nitrobenzoïque) | Thermo Scientific & nbsp ; | ; 69-78-3 ; | |
| Centrifugeuse de laboratoire NF048 | Nü ; ve | 43560 | |
| Beta_Actin ; | ThermoFisher Scientific, États-Unis | 7D2C10 | |
| Solution BSA ; | Proteintech, États-Unis) | 66201-1-IG | |
| Hydroxytoluène butylé | Sigma Aldrich | 128-37-0 | |
| Dijital Homojenizatö ; R ; | Daihan Scientific | https://www.artlaboratuv arcihazlari.com/urun/dai han-hg-15d-dijital-homoje nizator-set-a ?srsltid=Afm BOorx_az06ulcHpSzKZs uP8-47Za4BkvLOM22Xh p00tgwWhJ-86Vc | |
| DTM ; ; | Bayer ; | TR01426058O | |
| Hématoxyline et trait de trait ; éosin ; | Bio Optica | W01030708 | |
| Acide chlorhydrique | Merck | 7647-01-0 | |
| Image J logiciel programme ; | NIH ; Washington, États-Unis | https://imagej.net/ij/ | |
| Kit de coloration immunohistochimique ; | Lab VisionTM UltraVisionTM Système de détection à grand volume : anti-polyvalent | HRP, TA-125-HL | |
| Leica Autocut 14051956472 | Allemagne | https://www.leicabiosystems .com/équipement-histologie/mi crotomes/histocore-autocut/ | |
| Microscope optique ; | Nikon, Eclipse ; | Ni-U, 940728 | |
| N-(1-Naphthyl)éthylénediamine | Thermo Scientific & nbsp ; | 1465-25-4 | |
| Lecteur nano microplaque | BMG LABTECH | SPECTROstar Nano | |
| solution physiologique tamponnée phosphate & nbsp ; | Merck | P4417 | |
| Anticorps primaires Keap-1 ; | Proteintech | Catégorie n° 10503-2-AP, 1:200 | |
| Anticorps primaires Nrf-2 & nbsp ; | Proteintech | Catégorie n° 16396-1-AP, 1/100 | |
| Kit de test BR pour la protéine qubit & nbsp ; | ThermoFisher Scientific-INVITROGEN | Q33211 | |
| Citrate de sodium | Merck | 03-04-6132 | |
| Dodécyle sulfate de sodium | Thermo Scientific & nbsp ; | 151-21-3 | |
| Hydroxyde de sodium | Merck | 1310-73-2 | |
| Nitrate de sodium | Merck | 7631-99-4 | |
| Streptavidine Peroxydase ; | Thermo Scientific & nbsp ; | SHRP248-B | |
| Sulfanilamide | Thermo Scientific & nbsp ; | ; 63-74-1 ; | |
| acide thiobarbiturique ; | Merck | 504-17-6 | |
| TQ ; | CAYMAN ; | 490-91-5 | |
| Acide tricarballylique, 99 % | Thermo-Sciences Chimiques | ; 139360500 | |
| Acide trichloroacétique | Thermo-Sciences Chimiques | 76-03-9 | |
| Tris-HCl | Thermo Scientific & nbsp ; | ; 1185-53-1 ; | |
| Chlorure de vanadium(III) | Sigma Aldrich | 7718-98-1 | |
| Substrat chimiluminescent West Pico PLUS et iBright 750 ; | Système scientifique Thermo Fisher | https://www.clinxsci.com/product /mini_chemiluminescence_imagi ng_system ?gad_source=1& GAD _campaignid=16224184202& gbr aid=0AAAAAoN6UOOtoB8UD0d eumBAMD8Xi-1l-& gclid=CjwKCAj wgeLHBhBuEiwAL5gNEXtK2CNS LS1GqllMuNgkrFYDaW7yK585njQ jFja485Fkwj9lRUEKDBoCgLoQA vD_BwE | |
| Solution de sulfate de zinc | Merck | 7733-02-0 |
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