Vérification de la tolérance à la nicotine chez les pucerons Utiliser une alimentation artificielle Experiment

Summary

Dans cette vidéo, et le dosage est démontré que les tests de la tolérance de la nicotine à deux types de pucerons qui infestent les plantes de tabac sur le terrain et celui qui n'en a pas.

Abstract

Les plantes peuvent réguler positivement la production de nombreux métabolites seconday différents en réponse à l'alimentation des insectes. Un de ces métabolites, la nicotine, est bien connu pour avoir des propriétés insecticides. Une réponse de plants de tabac à l'herbivorie, ou d'être rongées par des insectes, est d'augmenter la production de cet alcaloïde neurotoxique. Ici, nous allons montrer comment mettre en place une expérience pour répondre à cette question de savoir si un tabac souche adaptée du puceron vert du pêcher, Myzus persicae, peuvent tolérer des niveaux élevés de nicotine que la souche A de cet insecte qui n'a pas de tabac dans les infestent sur le terrain.

Protocol

Dans cette expérience, 4 pucerons adultes sont enfermés dans une petite tasse en plastique. Ils se nourrissent de l'alimentation liquide pipeté entre 2 couches de parafilm tendue sur le haut de la tasse. Après 3 jours d'alimentation, de la toxicité des diètes contenant différentes concentrations de nicotine est comparée au contrôle des régimes en comptant les adultes et les pucerons des larves dans chaque tasse.

1. Faire des solutions contenant du saccharose et de 20 acides aminés. Les pucerons peuvent subsister sur ce régime, reproduisant à des niveaux normaux, pendant au moins 1 semaine. S'il vous plaît voir le fichier joint pour l'alimentation artificielle.
2. Aliquote de 1 ml de ce régime en 6 tubes eppendorf différents contenant de la nicotine. Les étiqueter à l'égard de diverses concentrations de nicotine utilisés, allant de 0-500 um.
3. Sélectionnez 4 pucerons, rouge ou vert, et de mettre dans ces coupes expérimentales.
4. Lors de la sélection des pucerons, il est important qu'ils soient en âge de cohérent. Typiquement, chercher des pucerons de la même taille et la couleur (rouge, les pucerons deviennent plus sombres quand ils sont plus âgés).
5. Couvrir la tasse avec un morceau de parafilm. Joindre l'alimentation entre les deux morceaux de parafilm. Partiellement étirer le niveau parafilm secondes sur les bords de la tasse. Aliquoter la diète liquide entre les couches, la couche d'étanchéité et de haut en bas.
6. Conservez ces coupes dans la salle des insectes sous les lumières dans une photopériode longue journée pour 3 jours, après quoi les données de l'expérience peuvent être collectées.

S'il vous plaît visitez examens annuels de biologie végétale pour plus d'informations sur ce protocole et l'immunité des plantes aux insectes herbivores.