Développer des approches innovantes et efficaces pour renforcer l’activité antimicrobienne des biocides conventionnels est une stratégie prometteuse pour améliorer le contrôle microbien à des fins de désinfection en santé. Dans ce contexte, nous décrivons un protocole détaillé pour évaluer les effets potenciaisateurs des phytochimiques d’origine végétale sur les biocides synthétiques. Ces produits d’origine végétale sont des candidats attrayants comme adjuvants biocides en raison de leur diversité structurelle, de leur bioactivité et souvent de leur toxicité plus faible. Le flux de travail décrit ici permet de déterminer les concentrations bactéricides minimales (MBC) et de générer systématiquement à la fois des courbes dose-réponse et temps-réponse pour chaque produit testé individuellement (biocides et phytochimiques) et pour leurs combinaisons doubles ou triples. Les données obtenues permettent une modélisation mathématique avancée, notamment la détermination de l’indice fractionnaire de concentration bactéricide (FBCI) et l’évaluation des interactions entre les produits testés concernant les effets synergiques, additifs ou antagonistes à l’aide du logiciel Combenefit. En ce sens, il est possible d’identifier des produits naturels prometteurs comme des agents d’amélioration des biocides, d’optimiser l’efficacité des antimicrobiens et de concevoir des stratégies de désinfection plus durables et plus sûres susceptibles de réduire les concentrations requises des biocides synthétiques. Cela améliore le contrôle microbien et minimise les risques environnementaux et sanitaires associés à une utilisation excessive de biocides.