L’étude a été réalisée conformément à la Déclaration d’Helsinki et aux directives éthiques de l’hôpital, et a été approuvée par le Second Hôpital Populaire de Wuxi, le Centre Médical de l’Université du Jiangnan, ainsi que les comités éthiques (Éthique n° 2024-Y-231). Tous les échantillons biologiques humains (sang veineux et aliquotes sériques) ont été manipulés en stricte conformité avec les réglementations sur la biosécurité (GB 19489-2008). Toutes les opérations ont été réalisées dans un cabinet de biosécurité afin d’éviter la contamination des échantillons et l’exposition du personnel. L’élimination des échantillons biologiques usés, des pointes de pipette contaminées et des tubes de microcentrifuge a été effectuée conformément aux normes de gestion des déchets médicaux : les échantillons et matériaux contaminés ont été autoclavés à 121 °C pendant 30 minutes, puis remis à des institutions qualifiées d’élimination des déchets médicaux pour un traitement centralisé afin d’assurer la biosécurité.
Conception de la recherche
Il s’agissait d’une étude de cohorte rétrospective monocentrique visant à étudier la valeur pronostique des niveaux préopératoires de HGF sérique et du SII sur les résultats pathologiques postopératoires des patients OSCC. Cette conception d’étude suit les recommandations REMARK (Tumor Marker Prognostic Study Report Recommendations). La population ayant fréquenté le département dentaire du Second Hôpital Populaire de Wuxi, Centre médical universitaire de Jiangnan, de janvier 2020 à décembre 2022, a été sélectionnée comme population étudiée. Un total de 170 cas d’informations ont été collectés, 165 cas inclus après exclusion, 7 cas perdus pendant la période de suivi, et enfin 79 cas dans le groupe A (groupe témoin sain, personnes en bonne santé admises à l’hôpital pour examen physique durant la même période) et 79 cas dans le groupe B (groupe OSCC, les patients atteints de CCO) étaient incluses. Le diagramme de flux de cette étude est illustré à la Figure 1. A récupéré les sujets éligibles via le système de dossier médical électronique de l’hôpital et la base de données du centre d’examen physique, et a collecté des données clinicopathologiques détaillées du groupe A (groupe témoin sain) et du groupe B (groupe OSCC). Un suivi postopératoire des patients du groupe B au cours de l’étude pour enregistrer la récidive, la métastase et la survie. A inclus uniquement un groupe témoin sain pour identifier l’expression différentielle des marqueurs inflammatoires entre les patients OSCC et les individus en bonne santé, fournissant une base rationnelle pour fixer la valeur de seuil pour le SIBI auto-construit. Évaluation de la valeur pronostique du SPI et vérification au sein de la cohorte de patients OSCC en fonction de leurs résultats pathologiques postopératoires. Cette conception d’étude a garanti l’exactitude des données et la validité scientifique de l’étude grâce à des critères stricts de regroupement, un processus standardisé de tests en laboratoire et un mécanisme de suivi systématique, fournissant un cadre de recherche rigoureux pour analyser la valeur pronostique des niveaux de HGF et des scores IBPS dans les résultats pathologiques postopératoires de l’OSCC, ce qui devrait fournir une base scientifique pour le développement de protocoles d’évaluation pronostique personnalisés et de traitements Stratégies en clinique.
Critères d’inclusion et d’exclusion
Critères d’inclusion : (1) Patients diagnostiqués avec uneOSCC 21 ; (2) Âge 40–65 ans ; (3) Avec des informations cliniques complètes ; (4) A reçu un plan de traitement séquentiel complet basé sur la chirurgie et complété par une radiothérapie sélective ; (5) Patients ayant une bonne adhésion et une volonté de coopérer avec le plan de traitement élaboré par l’étude ; (6) L’état mental global des patients est bon, leur corps est globalement sain, et ils peuvent exprimer honnêtement leurs plaintes concernant leurs symptômes et répondre aux questions pertinentes des professionnels de santé ; (7) Les patients et leurs familles ont été informés, ont accepté et ont signé un formulaire de consentement éclairé.
Critères d’exclusion : (1) Patients présentant des tumeurs malignes combinées autres que l’OSCC ; (2) Patients atteints d’une combinaison de maladies systémiques graves ou de maladies du système immunitaire ; (3) Patients souffrant d’un dysfonctionnement coagulant hémorragique combiné, ou de défauts fonctionnels cardiaques, hépatiques ou rénaux sévères, de maladies cardiovasculaires sévères ou d’autres maladies plus graves ; (4) Maladies infectieuses chroniques combinées, combinées à d’autres maladies sexuellement transmissibles (par exemple syphilis, gonorrhée, etc.) ; (5) Anomalies combinées de la fonction cérébrale, cardiaque, hépatique et rénale ; (6) Patients ayant participé à des essais cliniques ou des études cliniques ; (7) Demander l’arrêt du traitement ou la sortie automatique pour des raisons personnelles ; (8) D’autres conditions qui, selon le médecin de l’étude, ne devraient pas être incluses ; (9) D’autres circonstances affectant les indicateurs de l’observation de suivi.
Méthode de regroupement
A divisé les sujets de l’étude en deux groupes : groupe A : groupe témoin sain (n = 79), groupe B : groupe OSCC (n = 79).
Collecte des indicateurs
J’ai recueilli les informations de base sur les patients des deux groupes.
Collecte d’échantillons
Prélèvement d’échantillons de sang veineux à jeun (5 mL) de tous les participants tôt le matin avant l’opération et maintenus à température ambiante (25 ± 2 °C) pendant le transport. Traiter les échantillons de sang dans les 30 minutes (1 800 s) suivant la collecte. Transférer le sérum surnageant dans des aliquotes de 0,5 mL à l’aide de tubes microcentrifugateurs stériles en polypropylène après centrifugation à 3 000 × g pendant 15 minutes à température ambiante (25 ± 2 °C). Placez immédiatement toutes les aliquotes dans un congélateur à température ultra-basse à -80 °C pour un stockage à long terme jusqu’à l’analyse, et évitez les cycles répétés de gel-dégel (pas plus d’un cycle gel-dégel autorisé si nécessaire).
Taux sérique de HGF
Déterminé les concentrations sériques de HGF à l’aide d’un kit commercial d’immunosorbent lié aux enzymes (ELISA) selon les instructions dufabricant 22. En résumé, des échantillons de sérum décongelés à 4 °C pendant 30 minutes pour éviter la dénaturation des protéines, puis dilués à un ratio 1:1 avec le tampon de dilution fourni par le kit. Ajout d’étalons, témoins et échantillons séromiques dilués (100 μL par puits) à la plaque ELISA et incubé à 37 °C pendant 60 minutes. Après avoir lavé la plaque 5 fois avec le tampon de lavage fourni, j’ai ajouté le conjugué primaire d’anticorps et incubé à 37 °C pendant 30 minutes supplémentaires. Après un second lavage, le substrat chromogène a été ajouté, et la réaction a été incubée à 37 °C dans l’obscurité pendant 15 minutes, puis la réaction a été interrompue par la solution d’arrêt. J’ai mesuré l’absorbance à 450 nm à l’aide d’un lecteur ELISA dans les 10 minutes suivant la terminaison. A mis en œuvre des procédures standard de contrôle qualité tout au long de l’essai, y compris l’utilisation de calibrateurs et de contrôles fournis par le kit. Le coefficient de variation intra-test (CV) était de < 5 % et le CV inter-essais était de < 8 %, confirmant une performance analytique fiable.
Calcul IBPS
Analyse des échantillons séromiques à l’aide de l’analyseur hématologique automatique XN3000 et des réactifsassociés 23. Les échantillons de sérum ont été décongelés à 4 °C pendant 20 minutes et équilibrés à température ambiante (25 ± 2 °C) pendant 10 minutes avant le test. Des analyses sanguines de routine ont été réalisées à 25 ± 2 °C pour obtenir le nombre de leucocytes, neutrophiles, lymphocytes et plaquettes, puis les NLR (nombre de neutrophiles/nombre des lymphocytes) et le PLR (nombre de plaquettes/nombre des lymphocytes) ont été calculés. Une calibration régulière des instruments de test a été réalisée à 25 °C, avec une CV intra-batch < 3 % et une CV inter-batch < 5 % pour les indicateurs sanguins. J’ai utilisé un test immunoturbidimétrique pour mesurer la teneur en CRP sérique dans l’analyseur biochimique automatique. Les échantillons séromiques ont été décongelés à 4 °C pendant 20 minutes et équilibrés à 37 °C pendant 5 minutes avant la détection. A effectué le test à 37 °C avec un temps d’incubation de 10 minutes, et a surveillé la réaction en continu à 546 nm. L’instrument était utilisé strictement conformément au manuel d’instructions pour compléter le test. La détection de la CRP avec une CV intra-batch < 4 % et une CV inter-lots < 6 %. Le notation a été réalisée selon notre échelle IBPS faite maison. Le système de notation IBPS fait référence à la méthode de construction des scores antérieurs de pronostic inflammatoire, et ajuste les pondérations des indicateurs en fonction des résultats pré-expérimentaux de cette étude. La valeur NLR ≤3,0 était notée à 0 point, 3,0–5,0 à 1 point, >5,0 à 2 points. Les valeurs de PLR ≤150 étaient notées à 0 point, 150 à 300 à 1 point, et >300 à 2 points. La teneur en CRP ≤50 mg/L était de 0 points, 50–100 mg/L de 1 point, et >100 mg/L de 2 points. Score total IBPS = score CRP + score NLR + score PLR. Critères de stratification : ≤ 4 points pour le risque moyen-faible, 5 à 6 points pour le risque élevé. Les valeurs de seuil et les critères de notation pour NLR, PLR et CRP ont été déterminés sur la base de scores pronostiques inflammatoires publiés précédemment, combinés à une analyse exploratoire des données dans la population étudiée actuelle, plutôt que d’utiliser une optimisation statistique telle que l’indice de Youden ou l’analyse de la courbe caractéristique de fonctionnement du récepteur.
Visites de suivi
Dans cette étude, un suivi standardisé de 20 mois a été réalisé pour évaluer les résultats postopératoires chez les patients. L’heure de début du suivi était le jour de l’opération chirurgicale pour les patients du groupe B (groupe OSCC), et la date de fin était le 31 août 2024. Une combinaison de suivi ambulatoire et de suivi téléphonique a été adoptée. A effectué l’examen physique et l’imagerie à chaque suivi afin de confirmer la présence de récidive tumorale ou de métastase. Les principaux indicateurs pronostiques étaient la survie globale (OS) et la survie sans maladie (DFS). L’OS était défini comme le temps allant du jour de l’opération jusqu’au décès pour une cause quelconque. La DFS était définie comme le temps allant du jour de l’opération à la récidive, à la progression ou au décès de la tumeur d’origine tumorale.
Calcul de la taille de l’échantillon
Cette étude a utilisé G*Power 3.1.9.7 pour l’estimation de la taille de l’échantillon afin de clarifier la valeur pronostique des niveaux d’HGF et des scores IBPS pour les résultats pathologiques postopératoires chez les patients OSCC. Fixez un niveau de test de α de 0,05 (bilatéral), une efficacité de test de 85 %, et un facteur inflammatoire AUC prédit de 0,75, calculé par le logiciel, et 75 cas dans chaque groupe étaient nécessaires pour répondre aux exigences statistiques d’analyse de la courbe ROC et de régression multifactorielle. Compte tenu des incertitudes liées au risque potentiel d’abandon et de données manquantes, la taille de l’échantillon de cette étude a finalement été fixée à 79 cas par groupe afin de garantir une efficacité statistique suffisante pour tirer des conclusions fiables.
Analyse statistique
J’ai utilisé le logiciel statistique SPSS 28.0 pour l’analyse des données. GraphPad Prism 9.0 est utilisé pour tracer des courbes de survie, tandis que Lucidchart sert à dessiner des organigrammes. J’ai d’abord testé les données de l’étude pour la distribution normale. Comparez les caractéristiques de base entre le groupe A et le groupe B à l’aide d’un test t par échantillons indépendants pour les données de mesure et d’un test χ2 pour les données de comptage. Décrivait les caractéristiques de base comme le nombre [n ( %)] et les données de mesure (exprimées en x ± s). Des indicateurs tels que HGF, NLR, PLR et CRP ont été exprimés en x ± s, et des comparaisons intergroupes de ces indicateurs ont également été réalisées à l’aide d’un test t d’échantillons indépendants. L’analyse de régression logistique binaire a été utilisée pour étudier l’association entre les niveaux de HGF, les scores IBPS et les résultats pathologiques postopératoires (variable dépendante, 1 = adverse, 0 = favorable), avec des coefficients de régression positifs indiquant une corrélation positive entre les indicateurs et les résultats défavorables. La méthode Kaplan-Meier a été utilisée pour tracer les courbes OS et DFS des groupes A et B, et le test log-rank a été appliqué pour comparer les différences statistiques des taux de survie entre les groupes. La valeur pronostique des indicateurs ci-dessus pour les patients atteints de CCOS a été analysée à l’aide de la courbe de caractéristique de fonctionnement du récepteur (ROC) et de la surface sous la courbe (AUC) afin de déterminer la valeur de coupure optimale, la sensibilité et la spécificité. Les données de comptage ont été présentées comme n ( %), et la comparaison entre le groupe A et le groupe B a été analysée à l’aide du test χ2 . Tous les tests statistiques étaient bidirectionnels, et P < 0,05 indiquait une différence statistiquement significative.