Article de méthode

Effet d'un gel local de doxycycline à 14 % comme adjuvant au surfaçage et planarisation radiculaire pour la parodontite chronique : un protocole au fauteuil avec résultats représentatifs

16 vues

⸱

DOI :

10.3791/70350

⸱

1 octobre 2026

 ,  ,  , 
1Stomatology Department, Sanmen People's Hospital, 2Linhai Hospital of traditional Chinese medicine, 3Taizhou Central Hospital, Affiliated Hospital of Taizhou University

Dans cet article

Résumé

Ce protocole réalisé au fauteuil dentaire permet l'administration d'un gel biodégradable à 14 % de doxycycline en complément du surfaçage et du planage radiculaire chez les patients atteints de parodontite de stade III/IV, en précisant le dépistage, la randomisation, l'instrumentation standardisée, le positionnement du gel avec des contrôles de qualité, des suivis à 1, 3 et 6 mois, ainsi que des prélèvements microbiologiques spécifiques à chaque site, accompagnés de résultats cliniques et microbiologiques représentatifs.

Résumé

Des antimicrobiens adjoints peuvent améliorer le traitement parodontal non chirurgical en supprimant les pathogènes résiduels présents dans les poches parodontales profondes. Cet article présente un protocole reproductible, réalisable au fauteuil, d'administration d'un gel biodégradable de doxycycline à 14 % en complément du surfaçage et de l'aplatissement radiculaire (SRP) chez des adultes atteints de parodontite stade III ou IV. Le déroulement inclut le dépistage des participants et le consentement éclairé, la répartition aléatoire en trois groupes (SRP plus gel de doxycycline ; SRP plus gel placebo ; SRP seul), la dissimulation de l'allocation, un débridement standardisé de toute la bouche, et l'administration aveugle du gel à l'aide d'une canule émoussée selon une technique de remplissage de la base vers la marge. Des instructions postopératoires et des visites de suivi planifiées à 1, 3 et 6 mois sont décrites afin d'assurer une cohérence entre les opérateurs et les consultations. Les résultats cliniques comprennent la profondeur de sondage (PPD), le niveau d'attachement clinique (CAL), l'indice de saignement gingival (GI) et le saignement au sondage (BOP). Des prélèvements microbiologiques spécifiques à chaque site ciblent les micro-organismes du complexe rouge (Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, et Treponema denticola) à l’aide de points de papier stériles suivis d’une analyse quantitative en laboratoire avec des contrôles de qualité prédéfinis. La calibration des examinateurs, les vérifications de stérilité du matériel et les points d’arrêt du protocole sont précisés afin de renforcer la fiabilité et la sécurité. Les résultats représentatifs montrent qu’un gel de doxycycline en complément du traitement est le plus susceptible d’apporter un bénéfice supplémentaire au niveau des sites résiduels plus profonds, les différences entre groupes au niveau des moyennes globales de la cavité buccale devant être plus faibles, ce qui est conforme aux données antérieures concernant les antimicrobiens appliqués localement après un détartrage et surfaçage radiculaire méticuleux11–13. Ce protocole est conçu pour pouvoir être enregistré en vidéo et facilement mis en œuvre dans la recherche clinique et la formation avancée en parodontologie.

Introduction

La parodontite chronique est une affection inflammatoire courante et progressive des tissus de soutien des dents, caractérisée par la formation de poches parodontales, des saignements au sondage et une perte osseuse alvéolaire, et qui, sans contrôle efficace, peut aboutir à une mobilité ou à une perte dentaire1. Malgré les progrès réalisés en matière de prévention et de prise en charge, le fardeau mondial reste important : des synthèses épidémiologiques récentes indiquent une prévalence persistamment élevée chez les adultes, la forme sévère représentant une proportion notable des cas2,3. L'objectif global de ce protocole est de proposer un flux de travail standardisé et réalisable au fauteuil pour l'administration locale adjonctive d'agents antimicrobiens après un détartrage et surfaçage radiculaire (DSR) méticuleux, permettant une mise en œuvre reproductible et une évaluation cohérente des résultats en pratique clinique courante comme en recherche clinique.

Le TRS est le fondement du traitement parodontal non chirurgical4. En perturbant les biofilms sous-gingivaux et en éliminant le tartre, le TRS réduit la charge microbienne et l'activité inflammatoire, et permet la récupération des tissus mous5˒6. Toutefois, le TRS seul peut s'avérer insuffisant dans les sites profonds ou morphologiquement complexes, où la présence de biofilm résiduel, les irrégularités anatomiques et la recolonisation rapide contribuent à une réponse clinique variable ainsi qu'à la persistance ou à la récurrence de poches parodontales7. Les cadres contemporains de classification indiquent en outre que les formes aux stades III et IV associent souvent une perte d'attache avancée à des facteurs de complexité qui augmentent la probabilité de sites profonds résiduels après le traitement initial8.

Les systèmes de délivrance locale de médicaments ont donc été adoptés comme adjuvants visant à traiter les poches profondes résiduelles et spécifiques à certains sites après un instrumentation méticuleuse, avec pour objectif pratique d'améliorer les résultats locaux tout en évitant les problèmes liés à l'exposition et à la responsabilité associés aux antibiotiques systémiques9. Dans la pratique clinique courante, ces adjuvants sont généralement placés dans des sites profonds localisés qui sont moins prévisibles avec le traitement par surfaçage radiculaire et polissage (SRP) seul (par exemple, des sites anatomiquement complexes ou des poches qui restent ≥ 6 mm après le débridement), plutôt que dans une approche globale concernant l'ensemble de la bouche10.

Le gel de doxycycline administré localement illustre ce type d'adjuvant11. La doxycycline associe une activité antimicrobienne contre les pathogènes parodontaux clés à des effets inhibiteurs sur les métalloprotéinases matricielles impliquées dans la dégradation des tissus conjonctifs. Lorsqu'il est déposé à la base de la poche par l'intermédiaire d'une canule émoussée après un surfaçage radiculaire et un planage soigneux (SRP), des formulations à libération contrôlée peuvent maintenir une forte disponibilité locale avec une exposition systémique limitée12. De manière importante, les données cliniques et microbiologiques existantes ont régulièrement suggéré que les bénéfices supplémentaires des antimicrobiens administrés localement sont le plus souvent observés au niveau des sites plus profonds, tandis que les différences moyennes sur l'ensemble de la bouche peuvent être modestes lorsque le SRP est réalisé rigoureusement13. Ces observations ont influencé les protocoles courants d'utilisation, dans lesquels le choix des sites, le moment par rapport à l'instrumentation et la technique de l'opérateur sont considérés comme des facteurs déterminants de l'efficacité, plutôt que comme des détails procéduraux mineurs14.

Par rapport à d'autres antimicrobiens locaux adjoints ou approches alternatives, le dépôt de gel de doxycycline offre une stratégie pratique et ciblée sur le site, pouvant être intégrée aux protocoles standards de surfaçage et racinage (SRP) sans modifier l'objectif de désinfection mécanique. Bien que diverses formes de délivrance locale et adjuvants non antibiotiques aient été utilisés en soins parodontaux, les protocoles varient considérablement par leur technique d'application, leur contrôle qualité et leur évaluation postopératoire ; par conséquent, des différences en termes de rétention, de tolérance par le patient et de reproductibilité peuvent influencer l'interprétation des résultats selon les contextes. Un avantage majeur de la présente approche est qu'elle associe un SRP standardisé à une technique de dépôt de gel clairement définie et à des contrôles qualité prédéfinis, favorisant une exécution clinique cohérente ainsi que des résultats comparables entre opérateurs et cliniques. Malgré une littérature abondante sur le gel de doxycycline en tant qu'adjuvant au SRP, un protocole standardisé reste nécessaire, car des éléments procéduraux essentiels ne sont pas appliqués ou rapportés de manière uniforme entre les études et les cliniques. Des variations dans le choix des sites, le moment par rapport à l'instrumentation, l'isolement et la maîtrise de l'humidité, le positionnement de la canule, la stratégie de remplissage et les instructions post-dépôt peuvent affecter la rétention du gel et l'exposition locale, contribuant à des résultats hétérogènes et limitant la comparabilité entre études. Ce protocole standardise ces étapes critiques techniques, intègre des points de contrôle qualité prédéfinis et aligne les évaluations de suivi sur des fenêtres de réévaluation cliniquement pertinentes afin d'améliorer la reproductibilité, tant pour l'utilisation clinique que pour la communication des résultats de recherche.

La performance clinique reste sensible à la technique : l'isolement du champ opératoire, le positionnement de la canule, une stratégie d'obturation de la base vers la marge et les soins précoces après la mise en place influencent la rétention du gel, le confort du patient et les résultats15. De plus, comme le sondage des sites modérés à sévères peu après l'instrumentation peut être influencé par la dynamique initiale de cicatrisation, les protocoles diffèrent selon qu'ils privilégient ou reportent des critères d'évaluation fondés sur le sondage à court terme (par exemple, à 4 semaines) à des moments ultérieurs ; cette considération est particulièrement pertinente lorsque les lecteurs transposent une conception d'essai dans la prise de décision au fauteuil16.

Ce protocole convient particulièrement aux patients adultes recevant un traitement parodontal non chirurgical dans des cliniques dentaires ou parodontales en ambulatoire, où le surfaçage radiculaire et le planage (SRP) peuvent être réalisés jusqu'à un critère de fin normalisé et où des visites de suivi peuvent être effectuées à des moments prédéfinis. Il est particulièrement adapté aux patients atteints de parodontite chronique de stade III/IV qui présentent des sites localisés profonds ou anatomiquement difficiles, pour lesquels le SRP seul pourrait être moins prévisible, et où un suivi au niveau du site (indices cliniques et prélèvements microbiologiques) est réalisable.

Cet article présente un protocole reproductible et prêt à être filmé pour l'application au fauteuil d'un gel de doxycycline à 14 % en complément du surfaçage radiculaire et du planage (SRP) chez des adultes atteints de parodontite chronique stade III/IV. La méthode couvre le dépistage et le consentement, la randomisation et l'aveugle, le SRP standardisé, le positionnement du gel avec des contrôles de qualité prédéfinis, ainsi que des évaluations de suivi à 1, 3 et 6 mois, incluant un prélèvement microbiologique spécifique aux sites ciblant les micro-organismes du complexe rouge. Les résultats représentatifs illustrent les plages attendues de réduction de la profondeur de sondage, de gain d'attachement clinique et de suppression microbienne lorsque le protocole est appliqué fidèlement, tout en conservant une interprétation prudente qui met l'accent sur l'applicabilité aux sites résiduels plus profonds plutôt que sur des effets uniformes dans toute la bouche17.

Protocole

Déclaration éthique
Veiller à ce que l'étude respecte les lignes directrices institutionnelles relatives à la recherche sur l'être humain et obtenir l'approbation du comité d'éthique avant tout recrutement. Obtenir le consentement éclairé écrit de chaque participant, couvrant la participation, l'utilisation de données anonymisées et l'enregistrement vidéo, avant toute procédure propre à l'étude.

1. Approbation éthique, supervision et enregistrement

  1. Approbation éthique, enregistrement et documentation
    1. Obtenir l'approbation du comité d'éthique et enregistrer l'essai avant le recrutement, puis archiver les lettres d'approbation, la version du protocole et les entrées du registre dans le dossier du site.
    2. Obtenir un consentement éclairé écrit avant toute mesure de dépistage allant au-delà des soins courants, et conserver les formulaires de consentement avec contrôle des versions et signatures datées.
    3. Tenir un registre vérifiable du consentement, des critères d'éligibilité, des événements indésirables/événements indésirables graves (EI/EIG), des déviations au protocole et des mesures correctives, en utilisant un contrôle des versions et des entrées datées.
  2. Formation et calibration des examinateurs/opérateurs
    1. Former et calibrer les examinateurs/opérateurs avant le premier recrutement. Atteindre des seuils de fiabilité intra- et inter-examinateurs de CCI ≥ 0,90 pour la profondeur de poche parodontale (PPD) et de CCI ≥ 0,80 pour la perte d'attachement clinique (CAL), et documenter les séances de calibration, les cas de référence, la vérification de la force de sondage et les calculs de CCI dans le journal de calibration.
    2. Standardiser la force de sondage (par exemple, 20–25 g) à l’aide d’un dynamomètre ou d’une méthode d’entraînement basée sur une balance, jusqu’à ce que l’examinateur puisse reproduire de façon répétée la plage de force cible, puis vérifier à nouveau la force à des intervalles prédéfinis pendant l’étude.
    3. Dans la mesure du possible, attribuer le même examinateur calibré au même participant depuis la ligne de base jusqu’à 6 mois afin de minimiser la variabilité des mesures. Si un changement d’examinateur est inévitable, documenter la raison et effectuer une reclalibration complète avant la reprise des mesures.

2. Conception de l'étude et chronologie

  1. Mener un essai clinique randomisé, en double aveugle, contrôlé contre placebo, d'une durée de 6 mois, évaluant un gel à la doxycycline à 14 % en complément du surfaçage radiculaire et du planage (SRP) chez des adultes atteints d'une parodontite chronique stade III/IV.
  2. Prévoir des visites aux temps de base, 1, 3 et 6 mois, et suivre la séquence de visites indiquée dans Figure 1 (Calendrier du traitement).
  3. Après une prophylaxie supragingivale et des évaluations initiales, confirmer l'éligibilité et l'affectation avant toute application de gel, et s'assurer que l'opérateur chargé de l'administration du gel ne participe pas aux mesures des résultats.

3. Taille de l'échantillon et randomisation

  1. Effectuer un calcul a priori de la taille de l'échantillon pour les critères principaux co-primaires (PPD et CAL). Spécifier les différences moyennes supposées, l'écart type, le niveau de α, la puissance statistique et une marge de perte d'environ 10 %, puis archiver les résultats du calculateur dans le dossier d'étude.
  2. Générer une liste de randomisation informatisée avec une répartition 1:1:1 entre le groupe A (SRP + gel à 14 % de doxycycline), le groupe B (SRP + gel placebo) et le groupe C (SRP uniquement). Utiliser une randomisation par blocs pour maintenir l'équilibre tout au long de la période de recrutement.
    ATTENTION : Restreindre l'accès à la séquence de randomisation. Conserver la liste d'affectation uniquement auprès du dépositaire indépendant et ne pas divulguer l'affectation aux évaluateurs des résultats afin de préserver l'aveugle.
  3. Mettre en œuvre la dissimulation de l'affectation à l'aide d'enveloppes opaques, scellées et numérotées séquentiellement, préparées par du personnel indépendant. Ouvrir l'enveloppe suivante uniquement après confirmation de l'éligibilité et achèvement de l'échantillonnage de base.
  4. Aveugler les participants et les examinateurs des résultats. Maintenir l'aveugle de l'opérateur quant à l'identité du gel en utilisant des seringues identiques et des étiquettes génériques (« A » vs « B ») ayant une apparence et une viscosité similaires. S'assurer que le code de randomisation n'est accessible qu'au dépositaire indépendant jusqu'à la fermeture de la base de données, sauf en cas d'urgence médicale.

4. Dépistage de l'éligibilité

  1. Sélectionner des adultes âgés de 18 à 70 ans atteints de parodontite chronique de stade III/IV et capables de se présenter à toutes les visites prévues. Exiger au moins deux sites parodontaux éligibles répondant au critère par site pour un traitement adjuvant, et définir prospectivement les sites éligibles comme étant les poches présentant une profondeur de poche parodontale (PPD) initiale ≥ 6 mm après l'élimination de la plaque supragingivale.
  2. Noter le nombre et les codes dentaires par site des sites éligibles au moment de l'évaluation initiale et définir préalablement une règle de sélection des sites pour l'application du gel et l'échantillonnage microbiologique, comme décrit dans les sections 7 et 8.
  3. Considérer les sites éligibles comme unité de traitement adjuvant et limiter l'application du gel aux seuls sites éligibles plutôt qu'une administration sur toute la bouche, afin d'aligner l'intervention sur le scénario clinique dans lequel les agents à libération contrôlée locaux sont généralement envisagés pour les poches profondes résiduelles.
  4. Exclure les participants enceintes ou allaitantes, présentant une allergie aux tétracyclines ou aux excipients de la formulation, une maladie systémique non contrôlée contre-indiquant le traitement parodontal, ayant reçu des antibiotiques systémiques ou un traitement parodontal au cours des 3 derniers mois, ou souffrant de pathologies susceptibles de compromettre l'observance ou la sécurité.
    PRÉCAUTION : Vérifier l'antécédent d'allergie aux tétracyclines avant l'inclusion. En cas de suspicion ou de confirmation d'allergie, ne pas procéder à l'attribution du gel et documenter l'échec du dépistage conformément au protocole.
  5. Recueillir les données démographiques, le statut tabagique et les antécédents médicaux à l'aide du formulaire de dépistage, et noter les traitements concomitants pouvant influencer la cicatrisation parodontale.
  6. Utiliser Tableau 1 (critères d'éligibilité) comme liste de contrôle de dépistage, et archiver les journaux de dépistage signés.

5. Préparation du niveau de référence

  1. Fournir des instructions standardisées d'hygiène bucco-dentaire (OHI).
  2. Démontrer le brossage des dents en utilisant une technique modifiée de Bass pendant au moins 2 minutes. Indiquer un nettoyage interdentaire quotidien adapté à la taille des embrasures et renforcer l'utilisation d'un révélateur de plaque lorsque cela est possible afin de confirmer la compréhension du patient.
  3. Noter dans le formulaire de rapport de cas la délivrance des instructions d'hygiène bucco-dentaire et les outils recommandés pour les soins à domicile.
  4. Réaliser un détartrage supragingival et un contrôle de la plaque avant les mesures de référence et les prélèvements.
  5. Éliminer d'abord la plaque supragingivale visible à l'aide d'un essuyage avec du gaz et d'un jet d'eau, puis retirer le tartre supragingival à l'aide d'un instrument ultrasonique sous un refroidissement continu à l'eau, en appliquant une pression latérale légère et des mouvements balayants qui maintiennent la pointe en mouvement afin d'éviter la production de chaleur.
  6. Terminer l'élimination du tartre supragingival résiduel à l'aide de curettes manuelles effectuant de courts mouvements contrôlés, puis polir les zones rétentionnelles de plaque avec une cupule prophylactique et une pâte faiblement abrasive si nécessaire.
  7. Recontrôler les marges gingivales des dents destinées aux prélèvements et aux mesures, et répéter un bref débridement supragingival jusqu'à l'élimination complète des dépôts supragingivaux visibles.
  8. Réaliser le charting complet de la bouche (Section 10) et prélever la microbiologie de référence (Section 8) sur des sites prédéfinis avant tout irrigation subgingival susceptible d'interférer avec les prélèvements.
  9. Fournir des instructions identiques de soins à domicile après la visite à tous les groupes afin de préserver la validité interne, et documenter la réception et la compréhension de ces instructions par le patient.

6. PRT normalisé (tous les groupes)

  1. Pratiquer une anesthésie locale selon les besoins. Réaliser une anesthésie muqueuse topique pendant 1 minute si nécessaire, puis administrer une anesthésie par infiltration locale et/ou un bloc nerveux selon le quadrant.
    ATTENTION : Aspirer avant l'injection et injecter lentement afin de réduire le risque d'administration intravasculaire. Surveiller les participants pour détecter tout effet indésirable immédiat.
  2. Aspirer avant l'injection et administrer lentement. Noter la classe d'anesthésique (par exemple, anesthésique local de type amide), la présence ou l'absence de vasoconstricteur, le volume total (mL), les sites d'injection et toute réaction immédiate.
  3. Confirmer l'anesthésie adéquate à l'aide d'un stimulus d'air doux ou d'une exploration manuelle, avant toute instrumentation.
  4. Réaliser un débridement complet de la cavité buccale en suivant une séquence standardisée et des critères de fin prédéfinis par l'opérateur.
  5. Commencer par un débridement supragingival ultrasonique de tout le quadrant, puis effectuer un surfaçage radiculaire parodontal (SRP) dent par dent à l’aide de curettes spécifiques à chaque région.
  6. Utiliser des passes exploratoires pour détecter le tartre, puis appliquer des passes de travail imbriquées avec un angulation appropriée et une pression latérale modérée afin d’éliminer les dépôts et aplanir la racine.
  7. Assurer l’adaptation en maintenant la tige terminale parallèle à la surface dentaire pour chaque site, et repositionner fréquemment l’instrument pour suivre la morphologie radiculaire. Poursuivre l’instrumentation jusqu’à ce que la surface radiculaire paraisse lisse et dure à l’évaluation tactile, et qu’un explorateur ne détecte aucun tartre résiduel ou poli.
  8. Documenter les quadrants traités, la durée de traitement en fauteuil et indiquer si le SRP a été réalisé en une seule séance ou en séances fractionnées selon la tolérance du patient.
  9. Effectuer une irrigation des poches traitées avec du sérum physiologique stérile à l’aide d’une canule d’irrigation effilée, puis sécher délicatement uniquement la marge gingivale avec de l’air sans huile afin de faciliter la rétention du gel ultérieur.
    NOTE : Éviter un séchage agressif par l’air qui pourrait traumatise les tissus ou provoquer un saignement, ce qui pourrait interférer avec la pose du gel.
  10. Réaliser intégralement le SRP avant toute application de gel. Appliquer le gel lors de la même visite thérapeutique, immédiatement après l’achèvement du SRP pour le participant et après l’irrigation/séchage (Étape 6.9), sauf si le protocole prévoit expressément un rendez-vous distinct ; documenter le délai entre la fin du SRp et l’application du gel.
  11. Ne pas réinstrumentser les sites traités au gel dans les 7 jours suivant l’application afin d’éviter tout déplacement du gel, et consigner toute exploration ou réinstrumentation accidentelle comme une déviation au protocole.
  12. Point de pause : Après l’achèvement du SRP (et l’application du gel pour les groupes A/B de la section 7), les participants peuvent être libérés et programmés pour des visites de suivi à 1, 3 et 6 mois. Avant la clôture de la visite, vérifier la documentation de base, les codes dent-site, les enregistrements de randomisation (le cas échéant) ainsi que les journaux de SRP et d’application du gel.

7. Application du gel au fauteuil pour le groupe A ou B

  1. Isolez la dent à l’aide de rouleaux de coton et d’une aspiration à haut débit afin de maintenir un champ opératoire relativement sec.
  2. Éliminez les accumulations visibles de salive et tentez de minimiser la contamination par le sang au niveau de la marge gingivale ; si le saignement masque la limite, appliquez une pression douce avec une compresse pendant 30 à 60 secondes, puis réévaluez.
  3. Identifiez les sites prédéfinis éligibles pour l’application du gel et documentez les codes dent-site avant d’ouvrir la seringue de gel.
  4. Appliquez le gel uniquement sur les sites éligibles, et non sur tous les sites. Appliquez une règle de sélection cohérente chez tous les participants en choisissant quatre sites indices par participant lorsque cela est possible, en privilégiant les sites interproximaux ayant une profondeur de poche parodontale (PPD) initiale ≥ 6 mm et une positivité au saignement au sondage (BOP), répartis dans différents quadrants si possible.
    REMARQUE : S’il y a plus de quatre sites éligibles, sélectionnez les quatre sites les plus profonds parmi ceux-ci ; en cas d’égalité, privilégiez les sites présentant une positivité au BOP et situés en région interproximale. S’il y a moins de quatre sites éligibles, traitez tous les sites éligibles et documentez la raison d’un nombre réduit de sites.
  5. Utilisez les mêmes sites indices comme sites principaux de prélèvement microbiologique pour les groupes A et B (section 8).
  6. Insérez une canule effilée jusqu’à la base de la poche.
  7. Avancez délicatement le long de la surface radiculaire jusqu’à ce qu’une résistance indique l’extension apicale de la poche, puis exprimez le gel tout en retirant lentement la canule afin que la poche se remplisse de la base vers la marge. Arrêtez lorsque un ménisque légèrement visible apparaît au niveau de la marge gingivale.
  8. Utilisez un volume typique d’environ 0,1 à 0,2 mL par site, mais privilégiez un remplissage complet de la poche sans sur-extrusion. Enregistrez le nombre de sites traités et le volume total de gel utilisé.
  9. Stabilisez le gel au niveau de la marge en modelant légèrement le ménisque à l’aide d’une microbrosse ou du doigt ganté, en évitant toute manipulation excessive susceptible d’éliminer du matériau à l’entrée de la poche. Vérifiez que le gel reste visible au niveau de la marge immédiatement après l’application, comme contrôle de qualité de la pose. Notez toute perte immédiate.
  10. Conservez la même séquence vidéo pour la documentation chez tous les participants, comme illustré dans Figure 2 (Étapes de l’application clinique du gel), et capturez les points de contrôle visuels essentiels, notamment la profondeur d’insertion de la canule, le mouvement de retrait-remplissage et l’aspect final du ménisque.
  11. Conseillez aux participants de ne pas sonder les sites traités pendant 7 jours après l’application, et consignez tout sondage précoce ou tout rapport de perte de gel dans le registre des écarts.

8. Échantillonnage microbiologique

  1. Définir prospectivement les sites d'échantillonnage et les maintenir constants au cours des visites. Utiliser les sites index traités comme sites principaux d'échantillonnage pour les groupes A et B. Pour le groupe C, sélectionner des sites de référence appariés en utilisant le même type de dent et le même strate de PPD de base (≥ 6 mm) lorsque cela est possible, et documenter la règle d'appariement.
  2. Préciser si « sites de référence (n = 4) » désigne des sites d'échantillonnage microbiologique, des sites de mesure clinique ou les deux, et appliquer la même définition de manière cohérente dans tout le manuscrit et les figures.
  3. Conserver les mêmes codes de site dentaire au moment de la ligne de base, à 1, 3 et 6 mois, sauf perte dentaire ou changements cliniques inévitables ; si un remplacement est nécessaire, appliquer une règle de remplacement préétablie et documenter la raison.
  4. À chaque visite (ligne de base, 1, 3 et 6 mois), isoler le site, retirer la plaque supragingivale à l’aide d’une curette stérile sans pénétrer dans la poche, puis sécher délicatement à l’air. Éviter l’irrigation subgingivale, la sondage subgingival ou l’introduction de la seringue air-eau dans la poche avant l’échantillonnage.
  5. Insérer des pointes de papier stériles (#30) jusqu’à la base de la poche et les laisser en place pendant 10 secondes. Regrouper 2 à 3 pointes par site dans un milieu de transport anaérobie, et étiqueter les tubes avec l’identifiant du participant, le code du site dentaire, le moment de la visite et l’horodatage.
  6. Extraire l’ADN selon une procédure validée d’extraction d’ADN bactérien et inclure un témoin de négativité d’extraction par lot. Maintenir un flux de travail unidirectionnel en séparant physiquement les zones de préparation des réactifs pré-PCR, de manipulation de l’ADN et d’amplification afin de prévenir toute contamination.
    ATTENTION : Considérer les échantillons cliniques de plaque comme potentiellement biohazard. Porter des équipements de protection individuelle adaptés, utiliser des pointes résistantes aux aérosols et désinfecter les surfaces de travail avant et après traitement. Pour minimiser le transfert d’amplicons, maintenir strictement séparées les zones pré-PCR et post-PCR, et n’ouvrir les tubes que dans des zones propres désignées.
  7. Réaliser une PCR en temps réel en utilisant une chimie basée sur le SYBR pour quantifier Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis), Tannerella forsythia (T. forsythia) et Treponema denticola (T. denticola) avec les paires d’amorces (5’ → 3’) indiquées ci-dessous. Effectuer les réactions sur un système de PCR en temps réel (voir Tableau des matériaux pour le fabricant et le modèle).
    REMARQUE : P. gingivalis amorce avant GCGAGAGCCTGAACCAGCCA et amorce arrière ACTCGTATCGCCCGTTATTCCCGTA ; T. forsythia amorce avant CGATGATACGCGAGGAACCTTACCC et amorce arrière CCGAAGGGAAGAAAGCTCTCACTCT ; T. denticola amorce avant TAAGGGACAGCTTGCTCACCCCTA et amorce arrière CACCCACGCGTTACTCACCAGTC.
  8. Préparer des réactions de 20 µL contenant 10 µL de mix maître qPCR 2 × (chimie basée sur le SYBR), 0,4 µM de chaque amorce et 2 µL d’ADN matrice, puis compléter au volume avec de l’eau sans nucléase. Effectuer les réactions en double pour chaque cible par échantillon et inclure des témoins sans matrice pour chaque jeu d’amorces.
  9. Utiliser des conditions de thermocyclage adaptées à la chimie basée sur le SYBR : dénaturation initiale à 95 °C pendant 10 min, suivie de 40 cycles de 95 °C pendant 15 s et 60 °C pendant 60 s.
  10. Réaliser une analyse de courbe de fusion (par exemple, 65–95 °C par incréments de 0,5 °C) afin de confirmer une amplification unique et spécifique.
  11. Utiliser une courbe standard à ADN plasmidique ou synthétique couvrant 102–108 copies par réaction, et n’accepter les essais que si R2 ≥ 0,99 et que l’efficacité d’amplification est comprise entre 90 % et 110 %.
  12. Répéter les essais en dehors de ces limites et refaire toute paire en double dont l’écart-type du Ct est > 0,35. Présenter les résultats en log10 copies par site.
  13. Limiter le temps entre l’échantillonnage et la congélation à ≤ 2 h. Conserver les échantillons et les extraits à -80 °C, et enregistrer les durées de manipulation, les conditions de transport et les journaux des congélateurs.
    POINT D’ARRÊT : Une fois les échantillons (et/ou l’ADN extrait) stockés à -80 °C, le traitement en laboratoire ultérieur (extraction d’ADN et PCR en temps réel) peut être effectué par lots à une date ultérieure, à condition que l’étiquetage des échantillons, la documentation de la chaîne de traçabilité et les journaux des congélateurs soient vérifiés.

9. Instructions après la pose

  1. Demander aux participants d'éviter le fil dentaire ou l'utilisation d'outils interdentaires sur les sites traités pendant 7 jours, tout en se brossant doucement les dents avec une brosse à poils souples.
  2. Recommander une alimentation molle pendant 24 à 48 heures et éviter les aliments durs ou collants sur les sites traités afin de minimiser tout déplacement mécanique.
  3. Prescrire des analgésiques selon le protocole clinique si nécessaire, et demander aux participants de signaler rapidement toute douleur, gonflement, éruption cutanée, stomatite ou photosensibilité. Documenter tous les rapports de symptômes ainsi que leur prise en charge.

10. Mesures cliniques

  1. Effectuer la mesure de la PPD à l’aide d’une sonde parodontale en six sites par dent (mésio-buccal, buccal, disto-buccal, mésio-lingual, lingual, disto-lingual).
  2. Appliquer une force de sondage standardisée de 20 à 25 g, vérifiée lors de l’étalonnage en appuyant plusieurs fois la pointe de la sonde sur une balance jusqu’à ce que la force cible soit reproductible.
  3. Insérer la sonde parallèlement à l’axe long et maintenir la pointe en contact avec la surface de la dent, puis « marcher » la sonde par pas de 1 mm autour de chaque site afin d’identifier la mesure la plus profonde ; enregistrer la valeur maximale en millimètres pour chacun des six sites.
  4. Effectuer la mesure de l’ALC aux mêmes six sites en notant la distance entre la jonction émail-cément et la pointe de la sonde. Lorsque la jonction émail-cément est masquée, la localiser par détection tactile et noter toute limite de restauration susceptible d’affecter ce repère ; appliquer la même règle de repère de manière cohérente lors des différentes visites.
  5. Évaluer l’IG sur une échelle de 0 à 3 à l’aide d’un guide de notation prédéfini, et enregistrer la SSG comme la présence de saignement survenant dans les 15 secondes suivant le sondage à chaque site. Utiliser la même séquence de sondage à chaque visite afin de standardiser le moment d’observation de la SSG.
  6. Utiliser des examinateurs étalonnés, aveugles à l’affectation. Réaliser des mesures en double sur un sous-ensemble de 10 % à chaque visite afin de surveiller les dérives et assurer une nouvelle formation lorsque la fiabilité tombe en dessous des seuils cibles (CCI de la PPD ≥ 0,90 ; CCI de l’ALC ≥ 0,80). Résumer les données démographiques de base et les résultats cliniques globaux (PPD, ALC, IG et SSG) au cours des visites dans le Tableau 2.
  7. Lors du suivi à 1 mois, limiter les interférences potentielles avec la cicatrisation tissulaire en évitant les évaluations basées sur le sondage et en se limitant aux critères de jugement prédéfinis. À cette visite, prélever des échantillons microbiologiques aux sites prédéfinis (section 8), documenter les événements indésirables et l’observance, et renforcer l’HBO.
    NOTE : Ne pas recueillir les données de PPD, ALC, IG ou SSG à 1 mois ; réserver les mesures cliniques complètes à l’ensemble de la bouche aux visites à 3 et 6 mois afin de réduire le risque qu’une manipulation précoce influence la cicatrisation des sites modérés à sévères. Appliquer la même règle d’évaluation à 1 mois à tous les participants et documenter toute dérogation.

11. Calendrier de suivi et évaluations

  1. Réévaluer à 3 et 6 mois pour le PPD, CAL, IG et SAB. Répéter l'analyse microbiologique au moment de la ligne de base, à 1, 3 et 6 mois selon la section 8, en utilisant les mêmes codes de site.
  2. Renforcer l'OHIO à chaque visite, évaluer l'observance par auto-déclaration et évaluation visuelle des plaques, et documenter systématiquement les effets indésirables (EI) et les effets indésirables graves (EIG).
  3. Gérer le déplacement du gel ou les inconforts importants selon des critères prédéfinis. Enregistrer le moment de l'événement, la prise en charge clinique et le résultat, et classer l'événement comme un événement indésirable (EI) le cas échéant.
  4. Résumer les fenêtres de visite dans Tableau 3 et afficher la chronologie consolidée dans Figure 1.

12. Gestion des données et masquage

  1. Utiliser des formulaires de rapport de cas préimprimés avec saisie double des données et arbitrage des écarts, et tenir un journal des modifications avec des dates horodatées et des codes de justification.
  2. Dissimuler les étiquettes de groupe aux analystes selon les cas en utilisant des codes anonymisés, et tenir des journaux des écarts pour les visites manquées, les sondages anticipés, la perte de gel et les déviations au protocole.
  3. Stocker les données désidentifiées dans un référentiel en lecture seule avec des sommes de contrôle de fichiers, et conserver les enregistrements des versions des instruments et des logiciels utilisés pour l'analyse et le traitement en laboratoire.

13. Analyse statistique

  1. Effectuer les analyses statistiques à l'aide d'un logiciel statistique (voir le Tableau des matériaux pour le fabricant et la version). Évaluer la normalité à l'aide du test de Shapiro–Wilk et examiner les graphiques de distribution.
  2. Évaluer les changements longitudinaux intra-groupe à l'aide d'une ANOVA à mesures répétées pour les données normalement distribuées ; sinon, utiliser le test de Friedman. Appliquer des comparaisons a posteriori ajustées selon Bonferroni lorsque cela est applicable.
  3. Comparer les groupes à chaque point temporel à l'aide de tests t pour échantillons indépendants ou d'une ANOVA à un facteur pour les données normales ; sinon, utiliser le test U de Mann–Whitney ou le test de Kruskal–Wallis. Utiliser des tests du chi-deux pour les variables catégorielles.
  4. Analyser les critères d'évaluation principaux (PPD et CAL) à chaque visite post-basale à l'aide d'une ANCOVA avec les valeurs basales comme covariables. Présenter les différences moyennes ajustées avec des intervalles de confiance à 95 % et des valeurs p bilatérales.
  5. Gérer les données manquantes selon une approche prédéfinie (par exemple, dernière observation reportée) et réaliser des analyses de sensibilité lorsque cela est possible. Définir au préalable la population analysée (selon le protocole vs intention modifiée de traiter) et l'appliquer de manière cohérente pour tous les résultats.

14. Surveillance de la sécurité

  1. Définir et surveiller activement les effets indésirables (EI) et les effets indésirables graves (EIG), notamment la photosensibilité, les réactions allergiques et la stomatite. Évaluer la gravité, enregistrer la causalité et documenter les mesures prises, telles que l'arrêt du traitement ou les soins de secours.
  2. Appliquer des critères prédéfinis de retrait précoce, tels qu'une allergie sévère ou la nécessité d'antibiotiques systémiques, et documenter les procédures de suivi pour les participants exclus.
  3. Signaler les EIG au comité d'éthique (IRB) conformément aux délais institutionnels et conserver la documentation des déclarations dans le classeur de sécurité.

15. Assurance qualité et fidélité

  1. Utiliser une liste de vérification de préparation du site avant d'inclure chaque cohorte, en confirmant la disponibilité des matériaux, l'intégrité des étiquetages, la préparation du milieu de transport, la disponibilité de la balance pour l'étalonnage de la force et les journaux de stérilisation.
  2. Effectuer des vérifications mensuelles entre évaluateurs sur un sous-ensemble de convenance représentant au moins 10 % des participants afin de détecter tout décalage dans la sonde, et former à nouveau les examinateurs si le CCI tombe en dessous des seuils cibles.
  3. Exécuter des contrôles externes en laboratoire pour chaque lot de qPCR et appliquer des critères d'acceptation prédéfinis incluant les seuils de R2, d'efficacité d'amplification et d'écart-type des valeurs Ct en duplicata.
  4. Effectuer une vérification de l'intégrité du masquage après la clôture de la base de données en demandant aux examinateurs de deviner l'affectation et en indiquant la précision, puis conserver le rapport de masquage avec la trace finale d'audit.

Résultats

Répartition des participants (CONSORT)
Le flux des participants a suivi le schéma randomisé préétabli à trois bras et est résumé dans la Figure 3 (diagramme de flux CONSORT). Parmi les 151 personnes dépistées, 97 participants éligibles ont été répartis aléatoirement selon un rapport 1:1:1 entre le groupe A (RSP + gel de doxycycline à 14 %), le groupe B (RSP + gel placebo) et le groupe C (RSP seule). Des visites de suivi ont été prévues à 1, 3 et 6 mois. Les ensembles finaux d'analyse comprenaient n = 31 (groupe A), n = 34 (groupe B) et n = 32 (groupe C). Les pertes de vue étaient principalement dues à l'impossibilité de contacter les participants et à des exclusions fondées sur le protocole (par exemple, retrait du consentement ou maladie intercurrente). Les analyses ont été réalisées conformément aux populations d'analyse préspécifiées, et les données manquantes ont été traitées comme défini dans le protocole.

Résultats cliniques (PDD, CAL, IG, SAB)
Les trajectoires des critères d'évaluation principaux sont présentées dans la Figure 4 (PDD en fonction du temps) et la Figure 5 (CAL en fonction du temps), les indices liés à l'inflammation étant illustrés dans la Figure 6 (IG et SAB). Les valeurs descriptives pour l'ensemble de la bouche à chaque point temporel sont résumées dans le Tableau 2. Dans tous les groupes, des améliorations intra-groupe ont été observées entre le moment initial et les mois 3 et 6.

Dans le jeu de données correspondant au Tableau 2, la PPD moyenne (mm) a diminué de 5,28 ± 0,45 (groupe A), 5,12 ± 0,42 (groupe B) et 5,36 ± 0,48 (groupe C) au moment initial à 4,22 ± 0,55, 4,31 ± 0,52 et 4,23 ± 0,51 au mois 3, puis à 3,91 ± 0,48, 3,87 ± 0,46 et 3,90 ± 0,49 au mois 6, respectivement. Le CAL (mm) a augmenté parallèlement, passant de 5,93 ± 0,64 (groupe A), 5,77 ± 0,59 (groupe B) et 6,02 ± 0,67 (groupe C) au départ à 5,02 ± 0,52, 5,08 ± 0,53 et 5,01 ± 0,50 au mois 3, puis à 4,77 ± 0,51, 4,81 ± 0,50 et 4,72 ± 0,54 au mois 6. L'inflammation gingivale s'est également améliorée au fil du temps. L'indice de gingivite moyen est passé de 1,92 ± 0,45 (groupe A), 1,87 ± 0,42 (groupe B) et 1,98 ± 0,47 (groupe C) au départ à 1,52 ± 0,43, 1,56 ± 0,44 et 1,50 ± 0,42 au mois 3, puis à 1,35 ± 0,39, 1,40 ± 0,40 et 1,30 ± 0,38 au mois 6. La positivité au saignement au sondage a également diminué, passant de 22/31 (70,97 %), 19/34 (55,88 %) et 21/32 (65,63 %) au départ à 9/31 (29,03 %), 8/34 (23,53 %) et 7/32 (21,88 %) au mois 3, puis à 5/31 (16,13 %), 6/34 (17,65 %) et 4/32 (12,50 %) au mois 6 (Tableau 2).

Les comparaisons entre groupes pour les critères principaux secondaires (PPD et CAL) aux mois 3 et 6 ont été évaluées à l’aide de modèles ajustés sur la valeur initiale et sont rapportées sous forme de différences moyennes ajustées (DMA), d’intervalles de confiance à 95 % (IC) et de valeurs de p. Pour le PPD au mois 3, DMA(A–B) = −0,10 mm (IC 95 % −0,24 à 0,04 ; p = 0,164 ; d de Cohen = 0,22) et DMA(A–C) = −0,05 mm (IC 95 % −0,19 à 0,09 ; p = 0,476 ; d = 0,11). Pour le PPD au mois 6, DMA(A–B) = 0,03 mm (IC 95 % −0,10 à 0,16 ; p = 0,656 ; d = 0,06) et DMA(A–C) = 0,01 mm (IC 95 % −0,12 à 0,14 ; p = 0,884 ; d = 0,02). Pour le CAL au mois 3, DMA(A–B) = −0,08 mm (IC 95 % −0,24 à 0,08 ; p = 0,324 ; d = 0,16) et DMA(A–C) = 0,02 mm (IC 95 % −0,14 à 0,18 ; p = 0,806 ; d = 0,04). Pour le CAL au mois 6, DMA(A–B) = −0,05 mm (IC 95 % −0,20 à 0,10 ; p = 0,512 ; d = 0,10) et DMA(A–C) = 0,06 mm (IC 95 % −0,10 à 0,22 ; p = 0,462 ; d = 0,12).

Étant donné que les critères d'évaluation basés sur le sondage peuvent être sensibles aux dynamiques précoces de cicatrisation, le protocole n'a pas prévu la collecte de la profondeur de poche parodontale (PPD), de l'attachement clinique (CAL), de l'indice de saignement au sondage (GI) ou du saignement à la sonde (BOP) en bouche entière lors de la visite à 1 mois. La visite à 1 mois a été réservée à l'échantillonnage microbiologique et à la surveillance standardisée de la sécurité et de l'observance (événements indésirables, déviations au protocole et renforcement des soins à domicile), conformément au calendrier de visites prédéfini. Par conséquent, les comparaisons statistiques entre groupes pour les résultats cliniques en bouche entière sont rapportées aux points temporels de suivi à 3 et 6 mois.

Contrastes prédéfinis au niveau des sites profonds (sites indices traités par rapport à des sites de référence appariés)
Les contrastes prédéfinis portant sur les sites profonds éligibles (PPD de base ≥ 6−7 mm ; correspondant aux sites indices traités dans les groupes A et B et aux sites de référence appariés dans le groupe C) ont été analysés séparément. À 3 mois, la réduction du PPD au niveau des sites profonds, ajustée sur la valeur initiale, était plus importante dans le groupe A que dans le groupe B : AMD(A−B) = -0,32 mm (IC 95 % de -0,58 à -0,06 ; p = 0,016 ; d = 0,52) ; le contraste par rapport au groupe C était moindre : AMD(A−C) = -0,21 mm (IC 95 % de -0,49 à 0,07 ; p = 0,140 ; d = 0,34). À 6 mois, un profil similaire a été observé pour le PPD des sites profonds : AMD(A−B) = -0,28 mm (IC 95 % de -0,55 à -0,01 ; p = 0,042 ; d = 0,45). L'ALC au niveau des sites profonds montrait une tendance concordante à 6 mois : AMD(A − B) = -0,25 mm (IC 95 % de -0,48 à -0,02 ; p = 0,034 ; d = 0,41).

Résultats microbiologiques (qPCR)
Cibles du complexe rouge (P. gingivalis, T. forsythia et T. denticola) ont été quantifiés par qPCR au moment du départ et à 1, 3 et 6 mois (Figure 7). Les charges bactériennes sont exprimées en copies log10 par site. De la ligne de base au mois 6, les réductions médianes (Δlog10 copies par site, médiane [IQ] : P. gingivalis 1,35 [0,90–1,80] dans le groupe A, 0,92 [0,55–1,30] dans le groupe B et 0,88 [0,50–1,25] dans le groupe C (test de Kruskal-Wallis, p = 0,012 ; tests par paires de Dunn-Holm : A contre B, p = 0,018 ; A contre C, p = 0,026 ; B contre C, p = 0,742). Pour T. forsythia, les réductions étaient respectivement de 1,20 [0,80–1,65], 0,81 [0,45–1,20] et 0,77 [0,40–1,15] (Kruskal-Wallis p = 0,020 ; comparaisons par paires : A vs B p = 0,031, A vs C p = 0,044, B vs C p = 0,801). Pour T. denticola, les réductions étaient respectivement de 0,98 [0,60–1,40], 0,80 [0,45–1,15] et 0,78 [0,40–1,10] (test de Kruskal-Wallis, p = 0,168 ; aucune comparaison par paires n'était statistiquement significative après ajustement pour la multiplicité).

Des critères de contrôle qualité ont été appliqués à chaque lot selon les spécifications préétablies. Chaque analyse comprenait des témoins d'extraction et des témoins sans matrice, et les réactions ont été réalisées en double, avec un nouveau test en cas de variabilité entre les doublons supérieure au seuil d'acceptation. L'acceptation d'un lot exigeait un coefficient de détermination de la courbe standard R2 ≥ 0,99, une efficacité d'amplification comprise entre 90 et 110 %, et un écart type des valeurs de Ct des doublons ≤ 0,35.

Marqueurs visuels de la réponse (facultatif)
Lorsqu'elles sont disponibles, des photographies intra-orales standardisées prises au moment du recueil des données initiales et lors du suivi peuvent être présentées afin d'illustrer la réduction de l'érythème et de l'œdème, l'amélioration de la propreté marginale, ainsi qu'une profondeur de sondage moindre avec un saignement minimal. Si elles sont incluses, présenter ces images comme Figure supplémentaire S1 en utilisant un éclairage, un angle de prise de vue et une étiquetage des sites dentaires constants, et en évitant d'introduire de nouvelles affirmations allant au-delà des résultats quantitatifs.

figure-results-1
Figure 1 : Calendrier du traitement. Un contrôle initial de la plaque supragingivale et un bilan clinique complet de la cavité buccale sont suivis par un surfaçage radiculaire standardisé (SRP). Dans les groupes A et B, le gel est appliqué immédiatement après l'achèvement du SRP, lors de la même séance, sur les sites indices qualificatifs prédéfinis. Des visites de suivi ont lieu à 1, 3 et 6 mois. Lors de la visite à 1 mois, réaliser un prélèvement microbiologique ainsi qu'une surveillance standardisée de la sécurité et de l'observance (événements indésirables, écarts au protocole, renforcement des soins à domicile), conformément au planning indiqué ; les évaluations cliniques complètes de la cavité buccale sont réservées aux visites à 3 et 6 mois. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

figure-results-2
Figure 2 : Étapes d'application clinique du gel. Isoler le champ avec des rouleaux de coton et une aspiration à haut débit, puis introduire une canule émoussée jusqu'à la base de la poche. Expulser le gel tout en retirant la canule afin de remplir la poche de sa base jusqu'à la marge, puis stabiliser délicatement le ménisque marginal pour favoriser la rétention. Ne pas sonder ni réutiliser d'instrument sur les sites traités pendant 7 jours après l'application. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

figure-results-3
Figure 3 : Diagramme de flux CONSORT. Le dépistage, l'évaluation des critères d'éligibilité, la randomisation (1:1:1), le suivi et les groupes d'analyse sont présentés pour le groupe A (SRP + gel à la doxycycline à 14 %), le groupe B (SRP + gel placebo) et le groupe C (SRP seule), ainsi que les raisons des exclusions et des pertes lors du suivi. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

figure-results-4
Figure 4 : Profondeur moyenne des poches (PMP) au fil du temps. Moyenne (± IC à 95 %) de la PMP (mm) en bouche entière au moment du départ, à 3 et à 6 mois pour chaque groupe. Tous les groupes montrent une amélioration dépendante du temps après une thérapie standardisée. Un contraste préspécifié au niveau des sites est également résumé pour les sites indices profonds éligibles (PMP initiale ≥ 6–7 mm ; sites indices traités dans les groupes A et B et sites de référence appariés dans le groupe C) afin d’évaluer si une thérapie adjacente entraîne une plus grande modification au niveau des poches plus profondes. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

figure-results-5
Figure 5 : Niveau d'attachement clinique (CAL) au fil du temps. Moyenne (± IC à 95 %) du CAL (mm) global à la baseline, à 3 et à 6 mois pour chaque groupe. Les gains de CAL suivent de près la réduction de la profondeur de poche parodontale (PPD) pendant le suivi. Interpréter les différences entre groupes avec prudence au niveau global de la bouche, et baser l'interprétation au niveau des sites sur les sites indices profonds prédéfinis. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

figure-results-6
Figure 6 : Indice gingival (GI) et saignement au sondage (BOP). Évolution par groupe des valeurs de GI (échelle 0–3) et de BOP, exprimée en pourcentage de sites saignant dans les 15 secondes suivant un sondage standardisé, au moment du dépistage initial, à 3 et à 6 mois. Évaluer le GI et le BOP à l’aide d’un guide de cotation prédéfini et d’une séquence de sondage standardisée afin d’assurer la comparabilité entre les visites. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

figure-results-7
Figure 7 : Charges microbiologiques par qPCR. Les cibles du complexe rouge sous-gingival (P. gingivalis, T. forsythia et T. denticola) ont été quantifiées par qPCR au moment initial, à 1, 3 et 6 mois, et sont exprimées en copies log10 par site. Les échantillons proviennent de sites prédéfinis (sites indices traités dans les groupes A et B ; sites de référence appariés dans le groupe C) et ont été suivis longitudinalement au cours des visites. Les données représentatives montrent une réduction après le SRP dans tous les groupes, avec les plus fortes diminutions médianes de P. gingivalis et de T. forsythia dans le bras traité à la doxycycline au mois 6, en accord avec une suppression bactérienne au niveau du site selon les critères de contrôle qualité décrits. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.

Note statistique générale concernant les figures. Réaliser des analyses longitudinales à l’aide du modèle prédéfini (par exemple, modèles mixtes et/ou ANCOVA ajustée sur les valeurs initiales), fixer α = 0,05 (test bilatéral) et s’assurer que toutes les valeurs de p et tous les intervalles de confiance rapportés correspondent aux résultats statistiques exportés. Éviter tout langage suggérant une supériorité entre groupes lorsque p ≥ 0,05.

Tableau 1 : Critères d'éligibilité. Liste de contrôle des critères d'inclusion et d'exclusion utilisée lors du dépistage chez les adultes atteints de parodontite stade III/IV, incluant la plage d'âge, les seuils requis au niveau des sites pour un traitement adjuvant, les contre-indications médicales, l'exposition récente à des antibiotiques systémiques et les antécédents d'allergie. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.

Tableau 2 : Caractéristiques de base et paramètres cliniques complets de la bouche au cours du suivi. Les données démographiques de base, les strates de PPD au site indice de base et les résultats complets de la bouche (PPD, CAL, GI, SAG) sont résumés pour le groupe A (SRP + gel de doxycycline à 14 %), le groupe B (SRP + gel placebo) et le groupe C (SRP seule) aux temps de base, 3 mois et 6 mois. Les comparaisons entre groupes ajustées sur les valeurs de base pour le PPD et le CAL à 3 et 6 mois sont présentées sous forme de différences moyennes ajustées (DMA) avec intervalles de confiance à 95 % (IC), valeurs de p et d de Cohen. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.

Tableau 3 : Calendrier des évaluations et fenêtres temporelles admissibles. Aperçu des évaluations réalisées au moment de la ligne de base, à 1, 3 et 6 mois, ainsi que des fenêtres temporelles admissibles pour les visites. Lors de la visite à 1 mois, effectuer l'échantillonnage microbiologique et une surveillance normalisée de la sécurité et de l'observance (événements indésirables, écarts au protocole et renforcement des soins à domicile), mais ne pas recueillir les indices cliniques complets de la cavité buccale (PDD, CAL, IG et SAB). Documenter tout écart par rapport à la règle préétablie d'évaluation à 1 mois. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.

Figure supplémentaire S1. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Discussion

Cet essai randomisé, en double aveugle, contrôlé par placebo, a évalué si un gel topique de doxycycline à 14 % apporte un bénéfice supplémentaire lorsqu'il est administré au fauteuil en complément d'un détartrage et surfaçage radiculaire (DSR) standardisé chez des adultes atteints de parodontite chronique stade III/IV. Dans tous les groupes, les indices réalisés sur l'ensemble de la bouche (PDD, CAL, IG et Saignement à la sonde) se sont améliorés aux mois 3 et 6, ce qui est conforme aux réponses attendues après une thérapie non chirurgicale efficace. Dans ce contexte, les analyses préspécifiées des sites profonds ont montré, au mois 6, une réponse plus marquée dans le groupe doxycycline, tandis que les différences entre groupes au niveau de l'ensemble de la bouche étaient modestes dans cet ensemble de données18. Une interprétation basée sur les sites est cliniquement cohérente, car les agents à libération contrôlée locaux visent à cibler les poches profondes résiduelles où le DSR seul peut être moins prévisible, plutôt que de modifier les moyennes globales de la bouche lorsque le DSR est réalisé avec une haute qualité19. Par conséquent, l'interprétabilité dépend du maintien d'une séparation stricte entre les résultats obtenus sur l'ensemble de la bouche et les sites préspécifiés éligibles, ainsi que d'une technique d'application rigoureuse et d'un suivi longitudinal cohérent des sites au cours du suivi.

Sur le plan opérationnel, la discussion sur la résolution des problèmes doit être limitée aux questions affectant la rétention et la comparabilité. Si le liquide créviculaire ou un saignement marginal compromettent le positionnement, le site doit être réisolé et le traitement reporté jusqu'à l'obtention d'une hémostase atraumatique ; une légère extrusion marginale peut être corrigée par un retrait doux sans instrumentation supplémentaire. En cas de perte précoce du gel, le moment et la cause probable doivent être documentés et pris en charge conformément aux règles de déviation prédéfinies, plutôt que par une réapplication improvisée.

Le protocole a évité les critères d'évaluation basés sur l'exploration par sondage de toute la bouche lors de la visite à 1 mois afin de réduire les interférences potentielles liées aux mesures sur la dynamique précoce de cicatrisation. Cette visite a été réservée à l'échantillonnage microbiologique et à la surveillance standardisée de l'inflammation et de la sécurité, en ancrant l'interprétation clinique fondée sur le sondage aux évaluations à 3 et 6 mois.

Sur le plan mécanistique, l'administration locale de doxycycline peut atteindre des concentrations élevées au niveau des poches tout en limitant l'exposition systémique, et la doxycycline pourrait exercer des effets modulant l'hôte qui favorisent la stabilité de l'attachement dans les sites difficiles20. Conformément à ce raisonnement, les profils de PCR quantitative montrant une suppression plus marquée de P. gingivalis et de T. forsythia dans le bras traité par doxycycline au mois 6 confèrent une plausibilité biologique au schéma de réponse observé dans les poches profondes21,22, et la pertinence des organismes du complexe rouge ainsi que la quantification basée sur la PCR quantitative sont bien établies23,24.

L'ampleur et la localisation de tout bénéfice supplémentaire doivent également être interprétées dans le contexte des stratégies adjointes évaluées en parallèle du traitement par surfaçage et planage radiculaire (SRP). Dans l'ensemble des études cliniques portant sur les gels administrés localement (y compris les formulations non à base de doxycycline), les effets supplémentaires — lorsqu'ils sont présents — sont fréquemment concentrés dans les sites plus profonds ou plus inflammés et semblent sensibles au choix des sites et à la technique d'administration, plutôt qu'à des modifications importantes des moyennes globales par bouche25. Les travaux comparatifs menés sur les adjuvants sous forme de gel soulignent également que les avantages apparents dépendent de la rigueur méthodologique du SRP, du choix des poches et de la constance des étapes d'application, ce qui milite en faveur de l'utilisation de points de contrôle technique afin d'améliorer la reproductibilité26. En revanche, les adjuvants antimicrobiens administrés sous forme de bains de bouche peuvent réduire l'inflammation gingivale, mais sont généralement moins ciblés sur des sites spécifiques et plus dépendants de l'observance thérapeutique, ce qui les distingue conceptuellement de l'administration locale de gel dans les poches résiduelles profondes27.

Plusieurs limites doivent être prises en compte lors de l'interprétation et de l'extension de ce protocole. Étant donné que les valeurs de p globales pour la bouche entière entre les groupes étaient limitées dans ce jeu de données, les inférences concernant un bénéfice supplémentaire doivent rester ancrées aux contrastes préspécifiés au niveau des sites profonds et être exprimées à l’aide de tailles d’effet accompagnées d’intervalles de confiance, en évitant les affirmations de supériorité catégoriques28,29. L’hétérogénéité des participants (par exemple, statut tabagique et diabète) pourrait atténuer les effets adjoints ; bien que ces facteurs aient été enregistrés, l’étude n’était pas suffisamment dimensionnée pour permettre des tests solides d’effets modérateurs30. Le panel microbiologique s’est concentré sur des cibles canoniques31 ; les changements plus larges au sein des communautés et les dynamiques des espèces clés n’ont pas été évalués et nécessiteraient des approches par 16S ou shotgun pour capturer de manière plus complète la remodélisation écologique32,33. Enfin, les considérations liées à la bonne utilisation des antibiotiques, notamment la sélection de résistances et les profils de récidive, sortaient du champ d’application actuel et devraient être intégrées dans les futures mises en œuvre visant une traduction clinique34.

En résumé, lorsqu'elle est administrée en complément du traitement de planification radiculaire (SRP) selon une approche clinique standardisée et sensible à la technique, une gelée topique de doxycycline à 14 % s'est associée à des améliorations supplémentaires, particulièrement marquées dans les poches plus profondes pré-spécifiées, tandis que les différences intergroupes concernant l'ensemble de la bouche étaient modestes dans ce jeu de données35. Des études futures devraient confirmer ces observations dans des essais randomisés multicentriques, correctement dimensionnés, incluant des analyses pré-spécifiées des poches profondes, un suivi plus long (12 à 24 mois), une surveillance systématique de la responsabilité thérapeutique et de la sécurité, ainsi que l'intégration de critères d'évaluation centrés sur le patient et de critères économiques afin d'appuyer les décisions d'adoption36.

Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun conflit d'intérêts.

Remerciements

Nous tenons à remercier tous les collègues qui ont contribué à cette recherche et l'ont soutenue.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
ATMAnaerobe SystemsAS-911Tubes de 6 mL ; pour le transport de points-papier subgingivaux
Cartouches d'anesthésique (lidocaïne à 2 % avec épinephrine 1:100 000)Septodont99167Anesthésie locale pour le SRP selon les besoins
Seringue dentaire aspiranteHu-FriedyASPIPour l'administration d'anesthésique local en odontologie
Balance (pour l'étalonnage de la force de sondage)OhausSPX2201Balance portable ; utiliser pour 20–Vérification de la force de sondage de 25 g
Rouleaux de coton, moyens, non stérilesHenry Schein5703767Isolement du terrain lors de la mise en place du gel et de l'échantillonnage
Curette, Gracey 1/2Hu-FriedySG1/2Instrumentation SRP (antérieur)
Curet, Gracey 11/12 (rigide)Hu-FriedySGR11/12RInstrumentation SRP (molaires mesiales)
Curette, Gracey 13/14Hu-FriedySG13/14Instrumentation SRP (molaires distaux)
Solution de décontamination (solution d'eau de Javel à 10 %)*Fisherbrand (Thermo Fisher Scientific)23640500Désinfection des surfaces pour les zones pré- et post-PCR (préparer/utiliser conformément au POP institutionnel)
Masque facial jetable (3 plis, avec attaches pour les oreilles)Fisherbrand12-888-001AUtilisation courante au fauteuil ou en laboratoire, selon les procédures opérationnelles normalisées de biosécurité
Gants d'examen en nitrile jetablesKimberly-Clark55082Gants en nitrile sans poudre
kit d'extraction d'ADNQIAGEN51304QIAamp DNA Mini Kit (extraction de l'ADN bactérien)
Explorateur dentaire (TU17/23)Hu-FriedyEXTU17/236Détecter les dépôts résiduels de tartre ; vérification tactile du point final
Gel de doxycycline, 14 % (gel parodontal)Kulzer397309Ligosan à libération prolongée ; pour administration locale de groupe A
Pointes de pipette filtrantes, 20 µLAxygen (Corning)TF-20-R-SPointes stériles avec barrière contre les aérosols
Pointes de pipette filtrantes, 200 µLAxygen (Corning)TF-200-R-SPointes stériles avec barrière contre les aérosols
Pointes de pipette filtrantes, 1000 µLAxygen (Corning)TF-1000-R-SPointes stériles avec barrière contre les aérosols
Compresse stérile, 4 × 4MedlinePRM21408Isolement et hémostase au fauteuil selon les besoins
Sérum physiologique stérile à 0,9 %Baxter2F7124Irriguer les poches après le surfaçage et le planage radiculaire (SPR)
Applicateurs MicrobrushMicrobrush InternationalMB-400Pour façonner/stabiliser le ménisque du gel
MicrocentrifugeuseEppendorf5404000013Centrifugeuse 5424 R (ou équivalent)
Micropipette, 0,5–10 µLEppendorf3123000020Recherche plus (canal unique)
Micropipette, 10–100 µLEppendorf3123000055Recherche plus (canal unique)
Micropipette, 100–1000 µLEppendorf3123000063Recherche plus (canal unique)
Eau sans nucléaseInvitrogen (Thermo Fisher Scientific)AM9937Pour la préparation de la qPCR et les dilutions
Pointes en papier, stériles, taille 30Dentsply SironaA022T00003000Prélèvement sous-gingival ; pool 2–3 par site
Plaque PCR, optique 96 puits (transparente rapide)Applied Biosystems (Thermo Fisher Scientific)4483485Plaques optiques 96 puits
Glycérine (qualité biologie moléculaire)Sigma-Aldrich (Merck)G5516Excipient de gel placebo si composé
Gel placebo : hydroxyéthylcelluloseMerck822068Épaississant pour gel placebo, si composé
Gel placebo : solution saline tamponnée au phosphateSigma-Aldrich (Merck)P4474Gel placebo dilué, s'il est composé (PBS filtré stérilement)
Sonde parodontale à sonde (UNC-15)Hu-FriedyPCPUNC15Mesure PPD/CAL à six sites par dent
appareil de qPCR (système de PCR en temps réel)Applied Biosystems (Thermo Fisher Scientific)A28139QuantStudio 5, bloc à 96 puits, 0,2 mL
Mix maître de qPCR (SYBR Green)Applied Biosystems (Thermo Fisher Scientific)K0221PowerUp SYBR Green Master Mix (ou équivalent)
Logiciel d'analyse de qPCR (logiciel de l'appareil)Applied Biosystems (Thermo Fisher Scientific)N/AQuantStudio Design & Logiciel d'analyse (version installée)
Fournitures de pochettes scellées (dissimulation de l'attribution)Tyvek (DuPont)S-10562Enveloppes opaques pour la randomisation (ou équivalent)
Logiciel statistiqueIBMN/AIBM SPSS Statistics, version 26.0
Désinfectant de surface (solution d'éthanol à 70 %)*Decon Labs04-355-122SaniHol™ Solution d'éthanol 70 (prête à l'emploi)
Seringue stérile, 1 mL (pour la manipulation du gel si nécessaire)BD309659Luer-Lok ; préparation au fauteuil
Cannule sous-gingivale effilée (irrigation/placement)Cardinal Health (Monoject)8881202397Cannule à extrémité émoussée pour administration par voie de poche
Unité de détartreur à ultrasonsDentsply Sirona81302Cavitron Select SPS (ou équivalent)
Agitateur vortexScientific IndustriesN/AAgitateur de laboratoire pour l'homogénéisation des échantillons

Références

  1. Papapanou, P. N., et al. Periodontitis: Consensus report of workgroup 2 of the 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions. J Clin Periodontol. 45 (20), S162-S170 (2018).
  2. Chen, M. X., Zhong, Y. J., Dong, Q. Q., Wong, H. M., Wen, Y. F. Global, regional, and national burden of severe periodontitis, 1990-2019: An analysis of the Global Burden of Disease Study 2019. J Clin Periodontol. 48 (9), 1165-1188 (2021).
  3. Wu, L., Zhang, S. Q., Zhao, L., Ren, Z. H., Hu, C. Y. Global, regional, and national burden of periodontitis from 1990 to 2019: Results from the Global Burden of Disease study 2019. J Periodontol. 93 (10), 1445-1454 (2022).
  4. Sanz, M., et al. Treatment of stage I-III periodontitis: The EFP S3 level clinical practice guideline. Clin Periodontol. 47 (22), 4-60 (2020).
  5. Budală, D. G., et al. Are Local Drug Delivery Systems a Challenge in Clinical Periodontology. J Clin Med. 12 (12), 4137(2023).
  6. Cobb, C. M., Sottosanti, J. S. A re-evaluation of scaling and root planing. Periodontol. 92 (10), 1370-1378 (2021).
  7. Cobb, C. M. Clinical significance of non-surgical periodontal therapy: an evidence-based perspective of scaling and root planing. Clin Periodontol. 29, 22-32 (2002).
  8. Tonetti, M. S., Greenwell, H., Kornman, K. S. Staging and grading of periodontitis: Framework and proposal of a new classification and case definition. J Periodontol. 89 (1), S159-S172 (2018).
  9. Herrera, D., et al. Adjunctive effect of locally delivered antimicrobials in periodontitis therapy: A systematic review and meta-analysis. Clin Periodontol. 47 (22), 239-256 (2020).
  10. American Academy of Periodontology. Statement on local delivery of sustained or controlled release antimicrobials as adjunctive therapy in the treatment of periodontitis. J Periodontol. 77 (8), 1458(2006).
  11. Gegout, P. Y., Stutz, C., Huck, O. Gels as adjuvant to non-surgical periodontal therapy: A systematic review and meta-analysis. Heliyon. 9 (7), (2023).
  12. Eickholz, P., et al. Non-surgical periodontal therapy with adjunctive topical doxycycline: a double-blind randomized controlled multicenter study. Clin Periodontol. (2), 108-117 (2002).
  13. Bonito, A. J., Lux, L., Lohr, K. N. Impact of local adjuncts to scaling and root planing in periodontal disease therapy: a systematic review. J Periodontol. 76 (8), 1227-1236 (2005).
  14. Smiley, C. J., et al. Systematic review and meta-analysis on the nonsurgical treatment of chronic periodontitis by means of scaling and root planing with or without adjuncts. Am Dent Assoc. 146 (7), 508-524 (2015).
  15. Drisko, C. H. The use of locally delivered doxycycline in the treatment of periodontitis, Clinical results. J Clin Periodontol. 25 (11 Pt 2), 947-979 (1998).
  16. Proye, M., Caton, J., Polson, A. Initial healing of periodontal pockets after a single episode of root planing monitored by controlled probing forces. J Periodontol. 53 (5), 296-301 (1982).
  17. Ratka-Krüger, P., et al. Non-surgical periodontal therapy with adjunctive topical doxycycline: a double-masked, randomized, controlled multicenter study. II. Microbiological results. Periodontol. 76 (1), 66-74 (2005).
  18. Ilyes, I., Rusu, D., Rădulescu, V., et al. A placebo-controlled trial to evaluate two locally delivered antibiotic gels (piperacillin plus tazobactam vs. doxycycline) in stage III-IV periodontitis patients. Medicina (Kaunas). 59 (2), 303(2023).
  19. Greenstein, G. Local drug delivery in the treatment of periodontal diseases: assessing the clinical significance of the results. J Periodontol. 77 (4), 565-578 (2006).
  20. Lee, H. -M., et al. Subantimicrobial dose doxycycline efficacy as a matrix metalloproteinase inhibitor in chronic periodontitis patients is enhanced when combined with a non-steroidal anti-inflammatory drug. J Periodontol. 75 (3), 453-463 (2004).
  21. Cosgarea, R., et al. Clinical and microbiological evaluation of local doxycycline and antimicrobial photodynamic therapy during supportive periodontal therapy: A randomized clinical trial. Antibiotics (Basel). 10 (3), 277(2021).
  22. Kuboniwa, M., et al. Quantitative detection of periodontal pathogens using real-time polymerase chain reaction with TaqMan probes. Microbiol Immunol. 19 (3), 168-176 (2004).
  23. Holt, S. C., Ebersole, J. L. Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola, and Tannerella forsythia: the “red complex”, a prototype polybacterial pathogenic consortium in periodontitis. Periodontol 2000. 38, 72-122 (2005).
  24. Marín, M. J., et al. Validation of a multiplex qPCR assay for detection and quantification of Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis and Tannerella forsythia in subgingival plaque samples. A comparison with anaerobic culture. Arch Oral Biol. 102, 199-204 (2019).
  25. Boyapati, R., et al. Efficacy of local drug delivery of Achyranthes aspera gel in the management of chronic periodontitis: A clinical study. Indian Soc Periodontol. 21 (1), 46-49 (2017).
  26. Zhang, C., Liu, B., Hu, J., Zhao, L., Zhao, H. The Effect of Local Application of Tea Tree Oil Adjunctive to Daily Oral Maintenance and Nonsurgical Periodontal Treatment: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomised Controlled Studies. Oral Health Prev Dent. 22, 211-222 (2024).
  27. Boyapati, R., et al. Comparative evaluation of the efficacy of probiotic, Aloe vera, povidone-iodine, and chlorhexidine mouthwashes in the treatment of gingival inflammation: A randomized controlled trial. Dent Med Probl. 61 (2), 181-190 (2024).
  28. Schulz, K. F., et al. CONSORT 2010 statement: updated guidelines for reporting parallel group randomised trials. BMJ. 340, c332(2010).
  29. Cumming, G. The new statistics: why and how. Psychol Sci. 25 (1), 7-29 (2014).
  30. Grossi, S. G., et al. Response to periodontal therapy in diabetics and smokers. J Periodontol. 67 (10), 1094-1102 (1996).
  31. Socransky, S. S., et al. Microbial complexes in subgingival plaque. J Clin Periodontol. 25 (2), 134-144 (1998).
  32. Hajishengallis, G., Darveau, R. P., Curtis, M. A. The keystone-pathogen hypothesis. Rev Microbiol. 10 (10), 717-725 (2012).
  33. Griffen, A. L., et al. Distinct and complex bacterial profiles in human periodontitis and health revealed by 16S pyrosequencing. ISME J. 6 (6), 1176-1185 (2012).
  34. Soysa, N. S., Jayakody, S. L., Alles, N. R. The Long-Term Efficacy of Tetracycline Class Antimicrobials as Local Adjuncts in the Treatment of Chronic Periodontitis: A Systematic Review and Meta-analysis. Front Dent Med. 6, 1658720(2025).
  35. Kim, T. -S., et al. Comparison of the pharmacokinetic profiles of two locally administered doxycycline gels in crevicular fluid and saliva. J Clin Periodontol. 31 (4), 286-292 (2004).
  36. Chapple, I. L. C., et al. Periodontal health and gingival diseases and conditions on an intact and a reduced periodontium: Consensus report of workgroup 1 of the 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions. J Periodontol. 89 (1), S74-S84 (2018).

Réimpressions et autorisations

Étiquettes

Thérapie parodontaleantimicrobiens adjuvantspoche parodontaleniveau d'attachement cliniqueprofondeur de sondageprélèvement microbiologiqueorganismes du complexe rouge
Contactez-nous
Recommander à la bibliothèque

Confidentialité

Conditions d’utilisation

Politiques

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Tous droits réservés.