Cette étude a été approuvée par le Comité d’éthique de la recherche clinique de l’Université Ordu (Approbation n° : 09/11/2017–138). L’étude a été menée conformément aux directives éthiques institutionnelles et nationales pertinentes, y compris la Déclaration d’Helsinki. Un consentement éclairé écrit a été obtenu de tous les participants impliqués dans l’étude. Le consentement obtenu couvre explicitement la réalisation de visites à domicile et la collecte d’échantillons de poussière dans les résidences.
1. Conception de l’étude
Il s’agit d’une étude transversale et descriptive de la prévalence des acariens domestiques menée dans la province d’Ordu, en Turquie. Des échantillons de poussière ménagère ont été prélevés sur des surfaces intérieures spécifiques où l’accumulation d’acariens est couramment attendue. Des échantillonnages ont été effectués à partir de matelas, de matériaux de literie (oreillers et quilts), de tapis et de meubles rembourrés situés dans les chambres et les salons. La poussière était collectée avec un aspirateur portable, et des échantillons provenant de différents endroits au sein d’un même foyer étaient assemblés pour former un échantillon composite de poussière domestique.
2. Définition de la population et de la cohorte clinique étudiée
La population étudiée est composée de personnes ayant fréquenté les cliniques ambulatoires de ORL et de médecine interne de l’hôpital d’éducation et de recherche de la Faculté de médecine de l’Université Ordu en raison d’asthme et/ou de plaintes allergiques. Les critères d’inclusion pour les participants étaient d’avoir 18 ans ou plus, de consentir à la collecte d’échantillons de poussière dans leur environnement domestique, et d’accepter de répondre au questionnaire. Les personnes qui n’ont pas consenti à une visite à domicile, n’ont pas donné leur consentement écrit, ou pour lesquelles des échantillons suffisants de poussière domestiques n’ont pas pu être obtenus ont été exclues de l’étude. Les diagnostics cliniques ont été évalués en fonction des auto-rapports des patients et des raisons des visites ambulatoires ; aucune vérification clinique ni test diagnostique n’a été effectué. Chaque patient a été apparié avec un foyer, et des analyses ont été réalisées au niveau du foyer. La province d’Ordu est située dans la région orientale de la mer Noire en Turquie et bénéficie d’un climat humide et tempéré avec une forte humidité toute l’année, des conditions pouvant favoriser la survie et la prolifération des acariens domestiques.
3. Unité d’échantillonnage et méthode d’échantillonnage
L’unité d’échantillonnage principale de cette étude était le ménage. Plusieurs échantillons de sous-poussière ont été prélevés dans différents emplacements intérieurs de chaque foyer, avec un accent particulier sur les chambres et les espaces de vie. Bien que ces sous-échantillons aient été prélevés séparément, ils ont été regroupés et analysés en laboratoire sous forme d’un seul échantillon composite de poussière domestique pour représenter l’exposition globale aux acariens en intérieur. Pour estimer la densité d’acariens, environ 1 g de poussière provenant de chaque échantillon composite domestique a été traité selon la méthode de précipitation à l’acide lactique. Tous les acariens observés dans les lames microscopiques préparées dérivées de cet échantillon de poussière ont été comptés. Le nombre total d’acariens détectés était alors exprimé en nombre d’acariens par gramme de poussière domestique.
Chaque ménage n’a été échantillonné qu’une seule fois, et aucun échantillonnage répété n’a été effectué. Les échantillons de poussière domestiques ont été prélevés à l’aide de sacs jetables attribués à chaque zone d’échantillonnage, ainsi qu’à un aspirateur portable d’une puissance d’aspiration de 1200 W. L’échantillonnage a été réalisé à un rythme standardisé d’environ 2 min/m2 afin d’assurer la cohérence et la reproductibilité dans tous les foyers.
4. Procédures de laboratoire et identification des acariens
Une fois les échantillons apportés au laboratoire, ils étaient tamisés pour éliminer les particules grossières. Les échantillons ont été examinés par la méthode de précipitation à l’acide lactique. La méthode de précipitation à l’acide lactique a été utilisée pour clarifier les échantillons de poussière en dissolvant les débris organiques, facilitant la séparation et la visualisation des acariens et permettant une détection microscopique fiable et une identification morphologique. Un gramme de poussière de maison a été ajouté à 5 mL d’acide lactique à 90 % dans des tubes à essai. Les tubes ont été délicatement mélangés et incubés pendant 1 heure. Après l’incubation, des échantillons prélevés à la surface et au fond du liquide ont été montés entre une lame et une gaine de couverture et examinés au microscope optique à 100×, 200× et 400×grossissements 15. L’identification des espèces a ensuite été réalisée sur des échantillons de poussière dans lesquels des acariens ont été détectés.
Les échantillons où des acariens ont été détectés étaient définis comme « positifs aux acariens ». La présence d’au moins un acarien à n’importe quel stade de développement (larve, nymphe ou adulte) dans un logement était jugée suffisante pour que le logement soit considéré comme positif aux acariens. Pour l’identification des espèces dans des échantillons positifs, les acariens visibles au stéréomicroscope ont été collectés à l’aide d’une aiguille à insuline à pointe fine, après filtration du surnageant sur du papier filtre, et montés dans le milieu de Hoyer. Les spécimens préparés ont été examinés au microscope optique pour identification morphologique. Les analyses statistiques ont été réalisées à l’aide du logicield’analyse statistique 16,17,18,19,20. Les spécimens ont été identifiés selon des niveaux d’espèce, de genre ou de taxonomie supérieurs selon le stade de développement et la disponibilité des caractéristiques diagnostiques. Les spp. de Dermatophagoides comprennent des stades larvaires, protonymphes et deutonymphes qui n’ont pas pu être identifiés de manière fiable au niveau de l’espèce. Oribatida représente les acariens identifiés au niveau de l’ordre. Les larves et nymphes non identifiées désignent des spécimens immatures, et les imago non identifiées des spécimens adultes, qui ne pouvaient pas être classés taxonomiquement en raison de caractéristiques morphologiques insuffisantes ou endommagées. Le nombre total représente le nombre cumulatif de tous les individus d’acariens détectés sur des échantillons positifs.
5. Application de l’enquête et définitions des variables
Une enquête comprenant des questions sur les caractéristiques démographiques, la structure des logements, les facteurs environnementaux et les plaintes allergiques a été réalisée aux participants. Les données ont été évaluées sur la base des déclarations des participants et n’ont pas été vérifiées cliniquement.
6. Analyse statistique
L’association entre variables catégorielles a été examinée à l’aide du test du chi carré, et la variation de la densité d’acariens selon les caractéristiques démographiques et vitales a été examinée à l’aide des tests Mann-Whitney U ou Kruskal-Wallis. La régression logistique binaire a été utilisée pour examiner l’association entre la variable dépendante (positivité des acariens) et les variables indépendantes. Des rapports de cotes (OR) avec intervalles de confiance (IC) à 95 % ont été calculés.