Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de recherche

Effet régulateur de la moxibustion sur la polarisation et la migration des macrophages chez les rats modèles de RA et rôle de TIM-3

175 vues

⸱

DOI :

10.3791/70436

⸱

27 mars 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Acupuncture and Tuina School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Dans cet article

Résumé

Cette étude examine les effets régulateurs de la moxibustion sur la polarisation et la migration des macrophages dans des modèles rats de polyarthrite rhumatoïde, en mettant l’accent sur le rôle de l’immunoglobuline des lymphocytes T et de la protéine contenant le domaine mucine 3 (TIM-3), afin d’élucider les mécanismes thérapeutiques de la moxibustion dans cette maladie.

Résumé

Cette étude visait à examiner les effets régulateurs de la moxibustion sur la polarisation et la migration des macrophages dans un modèle rat de polyarthrite rhumatoïde, ainsi que le rôle de l’immunoglobuline des lymphocytes T et de la protéine contenant le domaine mucine 3 (TIM-3) dans ce processus. Le jour 0 de l’expérience, les rats Sprague–Dawley (SD) ont été divisés en cinq groupes. L’adjuvant complet de Freund (CFA) a été injecté dans les coussinets postérieurs pour établir le modèle de la polyarthrite rhumatoïde. De plus, une interférence d’ARN Havcr2 médiée par lentivirus (LV-Havcr2-ARNi) a été injectée dans les coussinets postérieurs pour inhiber l’expression de TIM-3. À partir du septième jour, les rats ont suivi un traitement par moxibustion en cycles comprenant six jours de traitement et un jour de repos, pour un total de trois cycles complets. Après la fin de la thérapie par moxibustion, le statut inflammatoire a été évalué par analyse histologique et mesure de l’épaisseur de la patte. Les marqueurs phénotypiques des macrophages M1 et M2 ont été évalués par un test immunosorbent lié aux enzymes (ELISA) et par immunofluorescence. L’expression de TIM-3 a été détectée via une réaction en chaîne quantitative en temps réel par polymérase (qRT-PCR) et le Western blot. De plus, des macrophages exsudés péritonéaux (PEM) ont été isolés chez d’autres rats SD, et la migration des macrophages a été examinée à l’aide d’un test de Transwell. L’étude a révélé qu’après l’injection de CFA, les rats présentaient une rougeur et un gonflement importants des pattes, ainsi qu’un déséquilibre dans l’expression du phénotype des macrophages. De plus, les tests de migration de Transwell ont révélé que les rats modèles induits par la CFA ont montré une migration des macrophages accrue par rapport aux spécimens témoins. Cependant, le traitement par moxibustion a atténué ces changements. Les résultats ont également démontré que la moxibustion augmentait l’expression de TIM-3, et après une intervention lentivirale, les niveaux de TIM-3 ont été nettement réduits, entraînant une exacerbation des manifestations inflammatoires et un déséquilibre des macrophages. Ces résultats indiquent que TIM-3 sert de médiateur clé dans la régulation par moxibustion de la polarisation et de la migration des macrophages.

Introduction

La polyarthrite rhumatoïde (PR) est un trouble auto-immun systémique répandu qui se manifeste cliniquement par une arthrite inflammatoire symétrique. L’inflammation cible principalement la membrane synoviale, le cartilage et l’os, entraînant la destruction des tissus et aboutissant à une déformation articulaireirréversible 1. La prise en charge pharmacologique actuelle de la PR repose principalement sur des médicaments antirhumatismales modificateurs de la maladie (DMARD)2, qui nécessitent souvent une administration à vie. Cependant, ces agents thérapeutiques sont associés à divers effets indésirables. Par conséquent, un nombre significatif de patients recherchent des thérapies complémentaires sûres et efficaces pour soulager les symptômes cliniques et potentiellement réduire leur dépendance aux schémas médicamenteux conventionnels. En tant que composante clé de la médecine traditionnelle chinoise, la moxibustion pourrait constituer une thérapie complémentaire prometteuse pour la PR. Elle exerce ses effets thérapeutiques par des mécanismes systémiques anti-inflammatoires etimmunomodulateurs 3. Les preuves indiquent que la moxibustion peut soulager les symptômes et protéger les structuresarticulaires 4. De plus, comparée à la toxicité hépatorénale potentielle, aux risques d’infection et aux coûts élevés associés aux DMARD, la moxibustion offre une sécurité supérieure et un coût moindre. Cependant, la moxibustion n’est pas une panacée et ne peut pas remplacer entièrement les DMARD pour gérer la PR. La moxibustion nécessite généralement des séances de traitement répétées et de longue durée pour obtenir ses effets. Lors des exacerbations aiguës de la PR, elle peut ne pas permettre un contrôle rapide des symptômes. De plus, le résultat thérapeutique de la moxibustion dépend fortement des compétences et de l’expérience du praticien, introduisant une variabilité. Par conséquent, l’intégration de la moxibustion avec les DMARD devrait être envisagée pour obtenir un effet synergique d'« efficacité accrue avec toxicité réduite », ce qui en fait une stratégie viable pour la gestion à long terme de laPR 5.

Bien que de nombreuses études aient confirmé l’efficacité thérapeutique de la moxibustion chezla PR 6,7,8, ses mécanismes d’action précis restent flous. Cette étude étudie les effets de la moxibustion sur la polarisation et la migration des macrophages dans la PR, en utilisant l’immunoglobuline des lymphocytes T et la protéine contenant le domaine mucine 3 (TIM-3) comme point d’entrée mécanistique. Cette approche vise à élucider une voie immunomodulatrice potentielle par laquelle la moxibustion exerce ses effets anti-arthritiques.

En tant que cellules immunitaires pivotales, les macrophages jouent un rôle central dans la pathogenèse et la progression de l’AR 9,10. Au début de l’inflammation, les macrophages résident dans les tissus libèrent une variété de cytokines et de chimiokines. Ces molécules de signalisation agissent sur les cellules endothéliales vasculaires, favorisant la différenciation des monocytes circulants en macrophages et leur recrutement ultérieur dans les tissusenflammés 11,12. Ces macrophages infiltrants amplifient encore davantage la réponse inflammatoire en produisant des médiateurs supplémentaires, qui recrutent à leur tour davantage de macrophages et aggravent l’infiltration tissulaire, établissant ainsi un cercle vicieux d’inflammation et d’infiltration tissulaire.

Selon les stimuli environnementaux, les macrophages présentent une plasticité significative en se polarisant en phénotypes fonctionnels distincts, principalement M1 (activé classiquement) et M2 (activé alternativement)13. Dans des conditions physiologiques, la polarisation des macrophages maintient un équilibre dynamique entre les phénotypes M1 et M2. Cependant, dans la PR, cet équilibre est perturbé, caractérisé par une polarisation accrue de la M1 avec une libération accrue de médiateurs pro-inflammatoires, notamment l’interféron (IFN)-γ et la synthase inductible d’oxyde nitrique (iNOS), qui aggrave les réponses inflammatoires. Parallèlement, la polarisation de M2 est affaiblie, accompagnée d’une diminution de la libération de facteurs anti-inflammatoires, notamment l’interleukine (IL)-4 et CD206, ce qui affaiblit leur capacité à inhiber l’activation et la prolifération des lymphocytes T, aggravant ainsi la progressionde la maladie 14. Plusieurs études ont révélé que la modulation de l’équilibre macrophage M1/M2 peut atténuer la progression del’AR 15,16.

TIM-3, identifié comme une glycoprotéine de surface des lymphocytes T, s’exprime largement sur un spectre de cellules immunitaires, incluant les lymphocytes T, les macrophages et les cellules tueuses naturelles, où il se lie à des ligands spécifiques pour exercer des fonctionsimmunorégulatrices 17. La signalisation TIM-3 exerce une influence définitive sur l’expression et la polarisation des cytokines inflammatoires des macrophages. Notamment, TIM-3 est fortement exprimé sur les macrophages M2, où il favorise le phénotype M2 tout en supprimant le phénotype M1. Inversement, les recherches indiquent que l’inhibition de TIM-3 produit l’effet inverse, entraînant la polarisation M1 et atténuant la polarisation M2 18,19,20. De plus, les preuves mettent en avant TIM-3 comme un régulateur clé du comportement migratoire des macrophages21,22. Ainsi, une intervention thérapeutique ciblant TIM-3 pour contrôler la polarisation des macrophages et la dynamique de migration montre un potentiel considérable en tant que stratégie de traitement de la PR.

Sur la base de la logique mentionnée ci-dessus, cette étude a été menée pour contribuer à l’augmentation des connaissances sur les mécanismes par lesquels la moxibustion exerce ses effets thérapeutiques dans la PR.

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Protocole

Déclaration éthique et précautions de sécurité
Toutes les expériences animales ont été approuvées par le Comité d’éthique de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (2024029). Lors de toutes les procédures d’injection, y compris l’administration de CFA et de lentivirus, les opérateurs doivent porter un équipement de protection individuelle (EPI) composé de gants jetables, de lunettes de protection et de blouses de laboratoire. Ces procédures doivent être menées dans une armoire de biosécurité ou dans un environnement bien ventilé. Tous les objets tranchants ayant été en contact avec des réactifs doivent être immédiatement jetés dans des contenants désignés pour objets tranchants. Tout au long du traitement de moxibustion, l’opérateur surveillait de près la réponse de l’animal. Le cône de moxa a été rapidement remplacé pour éviter les dommages thermiques à la peau. De plus, les matériaux inflammables doivent être maintenus à l’écart du moxa en feu pour éliminer les risques d’incendie.

1. Établissement du modèle RA

Trente rats SD mâles (poids : 200 ± 20 g), âgés de six semaines (numéro de licence : SCXK 2020-030), ont été divisés aléatoirement en cinq groupes (n = 6) : groupe témoin, groupe modèle RA (groupe RA), groupe de traitement RA + moxibustion (groupe Mox), groupe d’interférence lentivirale RA + TIM-3 (groupe RA + TIM-3), et groupe de traitement par interférence lentivirus RA + TIM-3 (groupe RA + TIM-3 + groupe Mox »). Avant l’expérience, les rats étaient acclimatés pendant sept jours dans un environnement contrôlé avec une température de 22 à 24 °C, une humidité de 20 % et un cycle naturel lumière/obscurité, avec un accès libre à la nourriture et à l’eau. Au 23e jour de l’expérience, cinq mâles SD de trois semaines supplémentaires ont été achetés auprès de la même société. Ces rats ont été acclimatés pendant cinq jours dans des conditions de logement identiques avant d’être utilisés pour l’extraction de PEM. Un schéma résumant la procédure expérimentale et des photographies procédurales représentatives sont présentés à la Figure 1.

Au jour 0 de l’expérience, 0,5 mL/kg de CFA a été injecté dans les coussinets de la patte postérieure de tous les rats sauf ceux du groupe témoin pour induire la PR. Le même volume de solution saline a été administré au même endroit chez les rats du groupe témoin. L’épaisseur de la patte a été utilisée comme critère pour évaluer l’établissement réussi du modèleRA 23.

2. Injection de lentivirus

Les rats des groupes RA + TIM-3- et RA + TIM-3- + Mox ont reçu l’injection de LV-Havcr2-ARNi (94435-1) dans les coussinets des pattes postérieures (3,5 × 107 TU/mL ; 10 μL par coussine) dès le premier jour de l’expérience. Tous les autres rats ont reçu des injections identiques de solution saline normale au même siteanatomique 24.

3. Moxibustion

Au septième jour de l’expérience, les rats des groupes Mox et RA + TIM-3- + Mox ont reçu un traitement par moxibustion. Pour faciliter la procédure, les cheveux situés dans une zone d’environ 1 × 1 cm autour des points d’acupuncture BL23 et ST36 ont été rasés (cette procédure a également été réalisée pour les rats des groupes restants). Lors de la moxibustion, chaque rat était délicatement attaché à un bloc de bois légèrement plus grand que sa taille corporelle à l’aide de deux élastiques pour exposer complètement les zones traitées (les rats d’autres groupes étaient également retenus). Par la suite, des cônes moxa en forme de grain ont été appliqués aux deux points d’acupuncture. Pour assurer la cohérence de la stimulation thermique chez les individus, chaque cône de moxa (diamètre : 2 mm ; hauteur : 5 mm ; teneur en laine de moxa : 60 %) a été préparé à partir d’une portion standardisée de 5 mg de laine de moxa. Chaque jour, cinq cônes étaient appliqués sur les deux points d’acupuncture d’un côté du corps, le traitement alternant vers le côté controlatéral le lendemain. Ce protocole de traitement alterné a été maintenu pendant trois semaines, avec une période de repos d’un jour tous les sept jours.

Après trois cycles de traitement par moxibustion, les rats ont été anesthésés à l’aide d’isoflurane (induction à 4 %, 2 % d’entretien, inhalation), et 5 mL de sang artériel ont été prélevés dans l’aorte abdominale. Après centrifugation (2 000 × g, 15 min, 4 °C), le sérum surnageant était transféré dans des tubes de microcentrifugation et stocké à −20 °C. Après un prélèvement sanguin, les rats ont été euthanasiés par luxation cervicale. Les articulations de la cheville ont été soigneusement disséquées et fixées à 4 % de paraformoldéhyde. Les tissus synoviaux et la rate étaient rapidement congelés à l’aide d’azote liquide et stockés à −80 °C.

4. Mesure de l’épaisseur des pattes de rat

Les points médians des pattes postérieures des rats étaient marqués avec un marqueur étanche pour assurer un positionnement cohérent des mesures. L’épaisseur de la patte a été mesurée à l’aide d’un étrier vernier avant la modélisation, après modélisation réussie, et entre chaque traitement (les jours 0, 7, 14, 21 et 28 de l’expérience).

5. Analyse histologique

Après fixation dans 4 % de paraformélade, les articulations de la cheville du rat ont été placées dans des tubes centrifugeuses contenant un volume suffisant de solution de décalcification (acide formique à 10 %). Les tubes étaient montés sur un shaker et soumis à une légère agitation à température ambiante pendant 30 heures. Pendant cette période, la solution de décalcification a été remplacée à intervalles réguliers et l’état des tissus a été surveillé pour éviter la sur-décalcification. Par la suite, les tissus ont été transférés dans une solution de thiosulfate de sodium à 5 % pour neutralisation sur 6 heures, suivie d’un rinçage approfondi de 4 heures sous l’eau du robinetcourante pendant 25 heures. Les tissus ont ensuite été déshydratés et intégrés dans des blocs de paraffine. Les sections étaient découpées transversalement à une épaisseur de 5 μm. Après la déparaffinisation et l’hydratation, les sections ont été colorées à l’hématoxyline pendant 3 minutes, rincées à l’eau, différenciées brièvement (5 s), rincées à nouveau, puis bleuillées pendant 5 s, suivies d’un rinçage approfondi sous l’eau du robinet courante. Par la suite, les coupes ont été déshydratées à 95 % d’éthanol pendant 1 minute et contre-colorées à l’éosine pendant 15 secondes. Enfin, les sections étaient déshydratées, dégagées et montées avec une housse pour observation au microscope optique. Avec cette coloration, les noyaux apparaissaient bleus, tandis que le cytoplasme, les fibres de collagène et les globules rouges étaient visualisés dans différentes nuances de rose ; La couche kératinisée était généralement teintée de rouge vif.

6. ELISA

Suivant le protocole du fabricant, une aliquote de 100 μL de chaque échantillon sérique (pré-dilué 1:2) a été ajoutée aux puits désignés. Des puits vierges et standards étaient inclus en parallèle. Après le scellement, la plaque était incubée à 37 °C pendant 90 minutes. Après une étape de lavage, l’anticorps de détection a été ajouté et incubé à 37 °C pendant 60 minutes. Après un autre lavage, le conjugué streptavidine–HRP a été ajouté. Après un lavage approfondi, la solution de substrat a été ajoutée pour le développement des couleurs, qui a été arrêtée par l’ajout de solution d’arrêt. L’absorption a été mesurée à 450 nm (OD₄₅₀). Les concentrations d’IL-4 et IFN-γ sur les échantillons ont été déterminées par interpolation à partir de la courbe standard, et les concentrations finales ont été calculées en multipliant par le facteur de dilution respectif.

7. qRT-PCR

L’ARN total a été extrait d’échantillons séromiques à l’aide d’un réactif TRIzol selon un protocole modifié. En résumé, 100 μL de sérum ont été homogénéisés avec 1 mL de réactif TRIzol par pipetage vigoureux. Par la suite, 100 μL de chloroforme ont été ajoutés, et le mélange a été vigoureusement secoué pendant 15 s, suivi d’une incubation à température ambiante pendant 3 minutes. L’échantillon a ensuite été centrifugé à 12 000 × g pendant 15 minutes à 4 °C pour obtenir une séparation de phase. La phase aqueuse supérieure a été soigneusement transférée dans un nouveau tube, mélangée à 0,5 mL d’isopropanol, puis incubée à température ambiante pendant 10 minutes. Par la suite, l’ARN total a été pelleté par centrifugation à 12 000 × g pendant 10 minutes à 4 °C. Le pellet d’ARN obtenu a été lavé une fois avec 1 mL d’éthanol à 75 % (centrifugation à 8 000 × g pendant 5 minutes à 4 °C) puis séché à l’air avant la dissolution finale. L’ARN obtenu a subi une transcription inversée à l’aide d’un kit de synthèse d’ADNc. L’analyse de l’expression génique a été réalisée par qRT-PCR à l’aide d’un logiciel de système de PCR quantitative en temps réel. β-actine était utilisée comme gène de maintien de la maison pour la normalisation. L’expression relative de l’ARNm TIM-3 a été calculée à l’aide de la méthode 2−ΔΔCt . Les détails des amorces sont ajoutés dans le tableau 1.

8. Tache occidentale

La rate extraite a été lavée trois fois avec une solution physiologique phosphatée tamponnée pré-refroidie (PBS), coupée en petits morceaux, puis lysée en ajoutant un tampon de lyse à un volume dix fois supérieur à celui du tissu. L’homogénéisation a été réalisée à l’aide d’un tube homogénéiseur. L’homogénéate a été placé sur glace pendant 30 minutes pour la lyse, avec cinq à six cycles de vortex pour assurer une perturbation complète des tissus. Les échantillons ont été centrifugés à 12 000 × g pendant 10 minutes à 4 °C, et le surnageant a été prélevé comme extrait protéique total. Les concentrations de protéines cibles ont été mesurées à l’aide du test à base d’acide bicinchoninique (BCA) selon le protocole du kit.

Après séparation par électrophorèse en gel de dodécyle sulfate de sodium à 10 % (SDS–PAGE), les échantillons de protéines extraits ont été transférés dans une membrane de polyvinylidène difluorure (PVDF). La membrane a été bloquée à température ambiante pendant 1 h avec du sérum sérum Tween 20 (TBST) tamponné avec un traitement tris-tamponné, complété avec 5 % de lait écrémé, suivi d’une incubation nocturne à 4 °C avec des anticorps primaires. Après un lavage approfondi, la membrane a été incubée avec des anticorps secondaires conjugués à la peroxydase de raifort (HRP) à 37 °C pendant 2 heures. Enfin, les images ont été capturées à l’aide d’un système d’imagerie chimioluminescence et analysées pour l’intensité en niveaux de gris à l’aide d’un logiciel d’analyse ChemiScope. Les détails des anticorps primaires et secondaires sont listés dans le tableau 1.

9. Détection par immunofluorescence

Le tissu synovial extrait a été immergé dans 4 % de paraformoldéhyde, déshydraté et intégré dans de la paraffine avant d’être coupé en tranches de 5 μm d’épaisseur. Les coupes ont été décirées séquentiellement dans le xylène I, le xylène II et le xylène III (10 min chacune), suivies de trois lavages dans l’éthanol absolu (5 min chacun) et d’un dernier rinçage à l’eau distillée.

Après la récupération d’antigènes dans l’acide éthylénédiaminetétraacétique (EDTA), les lames ont été lavées trois fois dans du sérum physiologique tamponné phosphate (PBS) (5 min chacun) avec une légère agitation. Les sections ont ensuite été bloquées par incubation avec de 3 % d’albumine sérique bovine (BSA) pendant 30 minutes à température ambiante. Après blocage, des anticorps primaires, dont la synthase anti-inductible d’oxyde nitrique (iNOS) (1:500) et l’anti-CD206 (1:400), ont été appliqués et incubés à 4 °C pendant 24 heures.

Après trois lavages PBS de 5 minutes, les coupes ont été incubées pendant 50 minutes à 37 °C dans l’obscurité avec un anticorps secondaire (Cy3 conjugué à Cy3 anti-lapins anti-lapin, IgG, 1:300). La coloration nucléaire a été réalisée en lavant les lames trois fois avec du PBS (5 min par lavage), suivie d’un traitement avec une solution de coloration 4′,6-diamidino-2-phénylindole (DAPI) et d’une incubation de 10 minutes à température ambiante dans l’obscurité. Les images ont été examinées au microscope à fluorescence.

10. Isolement des PEM

Après l’euthanasie par luxation cervicale, les rats ont été désinfectés à 75 % d’éthanol pendant 10 minutes puis transférés dans un cabinet de biosécurité stérile. La peau abdominale a été incisée avec des ciseaux stériles, suivie d’une injection intrapéritonéale de 15 mL de solution physiothérale tamponnée phosphatée (PBS) à l’aide d’une seringue. L’abdomen était doucement massé avant que le liquide péritonéal ne soit aspiré dans la seringue et transféré dans des tubes centrifugeuses pour obtenir des suspensions de macrophages.

La suspension cellulaire a été lavée trois fois avec du PBS avant d’être ensemencée dans le milieu Eagle modifié (DMEM) de Dulbecco, contenant 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). Les cellules ont été cultivées pendant 24 heures dans une atmosphère humidifiée à 5 % de CO₂ à 37 °C. Les cellules adhérentes obtenues après cette période d’incubation ont été identifiées comme étant des macrophages.

11. Transwell

Le test de migration a été réalisé à l’aide de plaques à 24 puits. Après 24 heures de famine sérique, 4 × 104 macrophages dans 300 μL de DMEM complétés avec 1 % de sérum bovin fœtal (FBS) et 1 % d’antibiotiques (50 U/mL de pénicilline, 50 μg/mL de streptomycine) ont été ajoutés dans la chambre supérieure, tandis que 700 μL de DMEM contenant 10 % de FBS et 1 % d’antibiotiques ont été introduits dans la chambre inférieure. Les cellules ont été prétraitées avec du sérum provenant de différents groupes de rats pendant 24 heures. Par la suite, les plaques ont été incubées à 37 °C dans un environnement à 5 % de CO₂ pendant 24 heures. Après la coloration au violet cristallin, la chambre supérieure a été prélevée pour retirer les cellules non migrées. Les cellules migratrices ont été quantifiées par comptage manuel sur quatre champs de vision sélectionnés au hasard sous un microscope optique.

12. Analyse statistique

Les analyses statistiques ont été réalisées à l’aide de la version 25.0 de SPSS. Les ensembles de données ont d’abord été testés pour la normalité et l’homogénéité des variances. Lorsque ces hypothèses paramétriques étaient remplies, des comparaisons intergroupes étaient réalisées à l’aide d’une analyse unidirectionnelle de la variance (ANOVA), suivie d’une analyse post hoc par différence minimale significative (LSD). Pour les données enfreignant ces hypothèses, le test non paramétrique de Kruskal–Wallis a été appliqué, suivi des tests Mann–Whitney U avec une correction appropriée pour les comparaisons multiples. Toutes les valeurs étaient exprimées en moyenne ± écart-type, et P < 0,05 était considéré comme statistiquement significatif.

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

Disponibilité des données
Les données brutes générées lors de l’étude en cours sont disponibles dans le dépôt Figshare (https://doi.org/10.6084/m9.figshare.31550197)

Pathologie articulaire et épaisseur des pattes chez les rats après traitement par moxibustion
Les rats injectés avec la CFA ont développé un gonflement et une rougeur évidents des pattes. La coloration de l’h...

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Discussion

La gestion actuelle de la PR repose principalement sur les DMARD. Cependant, ces agents pharmacologiques sont souvent coûteux et associés à des effets indésirables non négligeables, notamment une insuffisance hépatorénale et des infectionsgraves, imposant un fardeau important aux individus et aux systèmes de santé. En revanche, en tant que traitement externe, la moxibustion présente un profil de sécurité favorable avec un risque minimal rapporté de toxicité systém...

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (Subvention n° 82374587) et la Fondation des sciences naturelles de la province du Sichuan (Subvention n° 2024NSFSC2113). Nous remercions l’Université de Médecine Traditionnelle Chinoise de Chengdu pour la fourniture d’installations de laboratoire et de soutien technique. Une gratitude particulière à l’École d’Acupuncture et de Tuina pour leurs conseils sur les protocoles de moxibustion. Nous remercions également l’équipe de soins animaliers pour son aide à maintenir les modèles de rats. Enfin, nous adressons notre reconnaissance à tous les collègues ayant contribué aux analyses histologiques et moléculaires.

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Complètement Freund s Adjuvant (CFA)Sigma-AldrichF5881Utilisé pour induire la polyarthrite rhumatoïde (PR) chez les rats
Lentivirus (ARN TIM-3)GenChem Biotechnology, Shanghai3,5 & fois ; 107 TU/mLUtilisé pour étouffer l’expression du gène TIM-3
Cônes de moxa (taille blé)Fournisseur de médecine traditionnelle chinoiseN/AUtilisé pour la moxibustion aux points d’acupuncture BL23 et ST36

Références

  1. Gravallese, E. M., Firestein, G. S. Rheumatoid Arthritis - Common Origins, Divergent Mechanisms. N Engl J Med. 388 (6), 529-542 (2023).
  2. Di Matteo, A., Bathon, J. M., Emery, P. Rheumatoid arthritis. Lancet. 402 (10416), 2019-2033 (2023).
  3. Hao, F., et al. Effect of moxibustion on autophagy and the inflammatory response of synovial cells in rheumatoid arthritis model rat. J Tradit Chin Med. 42 (1), 73-82 (2022).
  4. Chen, Y., et al. Moxibustion of Zusanli (ST36) and Shenshu (BL23) Alleviates Cartilage Degradation through RANKL/OPG Signaling in a Rabbit Model of Rheumatoid Arthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2019, 6436420(2019).
  5. Shang, J., et al. The efficacy and safety of warming acupuncture and moxibustion on rheumatoid arthritis: A protocol for a systematic review and meta-analysis. Medicine (Baltimore). 99 (34), e21857(2020).
  6. Gong, Y., et al. Effect of Moxibustion on HIF-1α and VEGF Levels in Patients with Rheumatoid Arthritis. Pain Res Manag. 2019, 4705247(2019).
  7. Liao, C., et al. The Effects and Potential Mechanisms of Moxibustion for Rheumatoid Arthritis-Related Pain A Randomized, Controlled Trial. J Pain Res. 16, 1739-1749 (2023).
  8. Tao, S., et al. The Efficacy of Moxibustion on the Serum Levels of CXCL1 and β-EP in Patients with Rheumatoid Arthritis. Pain Res Manag. 2021, 7466313(2021).
  9. Zheng, Y., et al. Macrophage polarization in rheumatoid arthritis: signaling pathways, metabolic reprogramming, and crosstalk with synovial fibroblasts. Front Immunol. 15, 1394108(2024).
  10. Kurowska-Stolarska, M., Alivernini, S. Synovial tissue macrophages in joint homeostasis, rheumatoid arthritis and disease remission. Nat Rev Rheumatol. 18 (7), 384-397 (2022).
  11. Kemble, S., Croft, A. P. Critical Role of Synovial Tissue-Resident Macrophage and Fibroblast Subsets in the Persistence of Joint Inflammation. Front Immunol. 12, 715894(2021).
  12. Huang, Q. Q., et al. Critical role of synovial tissue-resident macrophage niche in joint homeostasis and suppression of chronic inflammation. Sci Adv. 7 (2), eabd0515(2021).
  13. Mosser, D. M., Hamidzadeh, K., Goncalves, R. Macrophages and the maintenance of homeostasis. Cell Mol Immunol. 18 (3), 579-587 (2021).
  14. Tardito, S., et al. Macrophage M1/M2 polarization and rheumatoid arthritis: A systematic review. Autoimmun Rev. 18 (11), 102397(2019).
  15. Liu, X., et al. KLF11 alleviates rheumatoid arthritis by regulating M1 macrophage polarization via downregulation of YAP1 expression. Arthritis Res Ther. 27 (1), 171(2025).
  16. Wen, Y., et al. Wuwei Ganlu and Myricetin alleviate rheumatoid arthritis by inhibiting M1 macrophage polarization through modulation of SHBG/SREBP1-mediated lipid metabolism. Phytomedicine. 146, 157167(2025).
  17. Zhao, L., Cheng, S., Fan, L., Zhang, B., Xu, S. TIM-3: An update on immunotherapy. Int Immunopharmacol. 99, 107933(2021).
  18. Du, X., et al. Increased Tim-3 expression alleviates liver injury by regulating macrophage activation in MCD-induced NASH mice. Cell Mol Immunol. 16 (11), 878-886 (2019).
  19. Ni, X., et al. Interrogating glioma-M2 macrophage interactions identifies Gal-9/Tim-3 as a viable target against PTEN-null glioblastoma. Sci Adv. 8 (27), eabl5165(2022).
  20. Yang, H., et al. Tim-3 aggravates podocyte injury in diabetic nephropathy by promoting macrophage activation via the NF-κB/TNF-α pathway. Mol Metab. 23, 24-36 (2019).
  21. Guo, Q., et al. Cancer cell intrinsic TIM-3 induces glioblastoma progression. iScience. 25 (11), 105329(2022).
  22. Li, G., et al. Peripheral Injection of Tim-3 Antibody Attenuates VSV Encephalitis by Enhancing MHC-I Presentation. Front Immunol. 12, 667478(2021).
  23. Haiyan, Z., et al. Efficacy of Moxa-burning heat stimulating Zusanli (ST36) and Shenshu (BL23) on expressions of macrophage migration inhibitory factor and macrophage apoptosis in rabbits with adjuvant-induced arthritis. J Tradit Chin Med. 42 (6), 980-987 (2022).
  24. Tang, Q., et al. RNAi Silencing of IL-1β and TNF-α in the Treatment of Post-traumatic Arthritis in Rabbits. Chem Biol Drug Des. 86 (6), 1466-1470 (2015).
  25. Glasson, S. S., Chambers, M. G., Van Den Berg, W. B., Little, C. B. The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse. Osteoarthritis Cartilage. 18 (Suppl 3), S17-S23 (2010).
  26. Miao, W., Yan, Z., Hui, Z., Hongfang, Z. Moxibustion enables protective effects on rheumatoid arthritis-induced myocardial injury transforming growth factor beta1 signaling and metabolic reprogramming. J Tradit Chin Med. 43 (6), 1190-1199 (2023).
  27. Tao, S. Y., et al. Moxibustion as an adjunctive treatment for rheumatoid arthritis and its effects on the serum levels of SOST and β-catenin. Zhongguo Zhen Jiu. 43 (12), 1384-1389 (2023).
  28. Hao, F., et al. [Effect of moxibustion on PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in foot-pad synovium in rats with rheumatoid arthritis]. Zhongguo Zhen Jiu. 40 (11), 1211-1216 (2020).
  29. Zhong, Y. M., Zhang, L. L., Lu, W. T., Shang, Y. N., Zhou, H. Y. Moxibustion regulates the polarization of macrophages through the IL-4/STAT6 pathway in rheumatoid arthritis. Cytokine. 152, 155835(2022).
  30. Linlin, Z., et al. Moxibustion of Zusanli (ST36) and Shenshu (BL23) alleviates the inflammation of rheumatoid arthritis in rats through regulating macrophage migration inhibitory factor/glucocorticoids signaling. J Tradit Chin Med. 44 (2), 353-361 (2024).
  31. Zhu, L., et al. Effect of moxibustion at "Xinshu" (BL15) and "Feishu" (BL13) on expression of TRPV1 and CGRP in the myocardial tissue of chronic heart failure rats. Zhen Ci Yan Jiu. 49 (6), 551-557 (2024).
  32. Zhang, X. N., et al. Electroacupuncture and moxibustion-like stimulation activate the cutaneous and systemic hypothalamic-pituitary-adrenal axes in the rat. Acupunct Med. 40 (3), 232-240 (2022).
  33. Zhu, Y., et al. [Effect of moxibustion at "Zusanli"(ST36) and "Shenshu"(BL23) on miR-155-mediated TLR4/NF-κB signaling involving amelioration of synovitis in rheumatoid arthritis rats]. Zhen Ci Yan Jiu. 46 (3), 194-200 (2021).
  34. Wu, R., et al. Effects of Tim-3 silencing on the viability of fibroblast-like synoviocytes and lipopolysaccharide-induced inflammatory reactions. Exp Ther Med. 14 (3), 2721-2727 (2017).
  35. Nozaki, Y., et al. Inhibition of the TIM-1 and -3 signaling pathway ameliorates disease in a murine model of rheumatoid arthritis. Clin Exp Immunol. 218 (1), 55-64 (2024).
  36. Li, X., Zhao, Y. Q., Li, C. W., Yuan, F. L. T cell immunoglobulin-3 as a new therapeutic target for rheumatoid arthritis. Expert Opin Ther Targets. 16 (12), 1145-1149 (2012).
  37. Skejoe, C., et al. T-cell immunoglobulin and mucin domain 3 is upregulated in rheumatoid arthritis, but insufficient in controlling inflammation. Am J Clin Exp Immunol. 11 (3), 34-44 (2022).
  38. Zhang, Y., et al. Tim-3 negatively regulates IL-12 expression by monocytes in HCV infection. PLoS One. 6 (5), e19664(2011).
  39. Kun, L., et al. Moxibustion inhibits the macrophage M1 polarization toll-like receptor 4/myeloid differentiation factor 88/nuclear factor kappa B signaling pathway by regulating T-cell immunoglobulin and mucin-containing protein-3 in rheumatoid arthritis. J Tradit Chin Med. 44 (6), 1227-1235 (2024).
  40. Liu, X., et al. Tim-3 Regulates Tregs' Ability to Resolve the Inflammation and Proliferation of Acute Lung Injury by Modulating Macrophages Polarization. Shock. 50 (4), 455-464 (2018).
  41. Wang, F., et al. Overexpression of Tim-3 reduces Helicobacter pylori-associated inflammation through TLR4/NFκB signaling in vitro. Mol Med Rep. 15 (5), 3252-3258 (2017).
  42. Dixon, K. O., Lahore, G. F., Kuchroo, V. K. Beyond T cell exhaustion: TIM-3 regulation of myeloid cells. Sci Immunol. 9 (93), eadf2223(2024).
  43. Paul, S., Chhatar, S., Mishra, A., Lal, G. Natural killer T cell activation increases iNOS(+)CD206(-) M1 macrophage and controls the growth of solid tumor. J Immunother Cancer. 7 (1), 208(2019).
  44. Luo, M., Zhao, F., Cheng, H., Su, M., Wang, Y. Macrophage polarization: an important role in inflammatory diseases. Front Immunol. 15, 1352946(2024).
  45. Peng, Y., et al. Regulatory Mechanism of M1/M2 Macrophage Polarization in the Development of Autoimmune Diseases. Mediators Inflamm. 2023, 8821610(2023).
  46. Lazarov, T., Juarez-Carreño, S., Cox, N., Geissmann, F. Physiology and diseases of tissue-resident macrophages. Nature. 618 (7966), 698-707 (2023).
  47. Gomez Perdiguero, E., et al. Tissue-resident macrophages originate from yolk-sac-derived erythro-myeloid progenitors. Nature. 518 (7540), 547-551 (2015).
  48. Chang, J. W., et al. Nesfatin-1 Stimulates CCL2-dependent Monocyte Migration And M1 Macrophage Polarization: Implications For Rheumatoid Arthritis Therapy. Int J Biol Sci. 19 (1), 281-293 (2023).
  49. Takayanagi, H. Osteoimmunology: shared mechanisms and crosstalk between the immune and bone systems. Nat Rev Immunol. 7 (4), 292-304 (2007).
  50. Harada, S., Rodan, G. A. Control of osteoblast function and regulation of bone mass. Nature. 423 (6937), 349-355 (2003).

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Th rapie par moxibustionmigration des macrophagesrats atteints de polyarthrite rhumato deexpression de TIM 3interf rence ARN lentiviraleessai Transwellanalyse ELISAmarquage par immunofluorescenceWestern blot
Contactez-nous
Recommander à la bibliothèque

Confidentialité

Conditions d'utilisation

Politiques

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Tous droits réservés.