L’électrostimulation auriculaire combinée et la décoction Sunshi Dingtong soulagent la dysménorrhée primaire avec stagnation du qi et la stase sanguine chez les rats

Résumé

L’électrostimulation auriculaire transcutanée combinée à la décoction Sunshi Dingtong a soulagé les lésions pathologiques utérines et les modifications liées à l’inflammation dans un modèle rat de dysménorrhée primaire avec stagnation du qi et stase sanguine, accompagnée d’une expression altérée de l’ARNm de PPAR-γ2 et COX-2.

Résumé

La dysménorrhée primaire avec stagnation du qi et schéma de stase sanguine est associée à une inflammation et à une douleur utérines, et les traitements pharmacologiques actuels peuvent entraîner des effets indésirables. Cette étude a évalué les effets thérapeutiques combinés de l’électrostimulation du point auriculaire transcutané (TEAP) et de la décoction Sunshi Dingtong (SDD) dans un modèle rat de dysménorrhée primaire de stagnation du qi et de stase sanguine. Trente-six femelles de rats Sprague–Dawley ont été réparties au hasard dans les groupes blank, modèle, SDD, TEAP, TEAP plus SDD et ibuprofène. Le modèle a été induit par sensibilisation au benzoate d’estradiol, stimulation combinée du stress à base d’hydrhydrate d’épinéphrine et administration d’ocytocine. Les rats ont reçu une solution saline normale, un SDD, de l’ibuprofène ou du TEAP à des points auriculaires définis pendant sept jours. La morphologie utérine a été examinée par coloration par hématoxyline et éosine. Les niveaux utérins d’IL-1β, IL-6, TNF-α, PGF2α et PGE2 ont été mesurés par ELISA, et l’expression utérine de PPAR-γ2 et COX-2 a été quantifiée par PCR en temps réel. Les rats modèles ont montré une dégénérescence épithéliale utérine, une infiltration de neutrophiles, une augmentation de l’expression d’ARNm d’IL-1β, IL-6, TNF-α, PGF2α et COX-2, ainsi qu’une diminution de l’expression de l’ARNm de PGE2 et PPAR-γ2. Le TEAP ou la SDD à eux seuls ont partiellement inversé ces changements pathologiques et moléculaires, tandis que la combinaison de TEAP et SDD a produit des améliorations plus marquées, avec des effets comparables à ceux observés dans le groupe ibuprofène. Ces résultats suggèrent que le TEAP combiné à la SDD soulage les lésions pathologiques utérines et les modifications liées à l’inflammation dans la stagnation du qi et la dysménorrhée primaire (QSBSPD) chez les rats, et que ces effets sont associés à la régulation de l’expression de l’ARNm PPAR-γ2 et COX-2.

Introduction

La dysménorrhée primaire (MP), également appelée douleur menstruelle fonctionnelle, se caractérise par l’apparition de dysménorrhée sans aucune pathologie organique identifiable au sein des organes^{reproducteurs 1}. Les patientes souffrant de dysménorrhée sévère se retrouvent souvent incapables d’accomplir les tâches quotidiennes, ce qui impacte significativement leur qualité de vie et nécessite une intervention pharmacologique pour soulager les^{symptômes 2}. La littérature existante indique qu’elle est associée à divers facteurs, notamment les prostaglandines (PG), l’œstrogène, la progestérone, la vasopressine, l’ocytocine (OT), le système immunitaire, les effets neuroendocriniens et des altérations des niveaux de calcium^{des microéléments 3}. Simultanément, des facteurs inflammatoires, tels que le facteur de nécrose tumorale (TNF) et l’interleukine-6 (IL-6), peuvent induire la synthèse ou la sécrétion de PG. Ce processus entraîne une hypercontraction des muscles utérins, entraînant ensuite une douleur ischémique et une^{MP 4}. Actuellement, la prise en charge de la MP en médecine contemporaine est principalement catégorisée en traitement général, traitement pharmacologique et intervention chirurgicale. Parmi les options pharmacologiques, les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS) tels que l’ibuprofène sont fréquemment utilisés. Néanmoins, l’utilisation d’AINS est corrélée à des effets secondaires gastro-intestinaux importants, et une utilisation prolongée ou intensive peut entraîner des complications telles que des ulcères gastro-pénitréens et des saignements gastro-digestifs^{supérieurs 5}. Ainsi, identifier et développer des stratégies plus sûres et plus efficaces pour le traitement de la MP est impératif et nécessaire.

De plus en plus de preuves suggèrent que la dysménorrhée primaire est fréquemment associée à un schéma d’excès dans la médecine traditionnelle chinoise, parmi lesquels la stagnation du qi et la stase sanguine sont fréquemment observées^{cliniquement 6}. Dans ce schéma, une altération des mouvements du qi et de la circulation sanguine est considérée comme contribuant à la stase utérine, à une contraction utérine excessive et à la douleur. Des stratégies thérapeutiques qui régulent le qi, activent la circulation sanguine, réchauffent les méridiens et soulagent la douleur sont donc couramment utilisées pour cette affection. La thérapie ponctuelle auriculaire est une intervention non pharmacologique importante dans la médecine traditionnelle chinoise. Il est simple à appliquer et a été utilisé pour soulager la douleur en modulant les voies analgésiques neuroendocriniennes et^{endogènes 7}. La décoction Sunshi Dingtong (SDD), une formule basée sur l’expérience clinique développée par le département de gynécologie de l’Hôpital de médecine traditionnelle chinoise de Fuzhou, a été utilisée pour la dysménorrhée caractérisée par la stagnation du qi et la stase sanguine. La formule repose sur le principe thérapeutique de réguler le qi et le sang, de favoriser la circulation sanguine, de réchauffer les méridiens et de soulager les douleurs menstruelles. SDD contient Shixiao San, qui comprend le pollen typhae (Puhuang) et les excréments Trogopterori (Wulingzhi), ainsi que le cyperi rhizoma (Xiangfu), la myrrhe (Moyao), le Ramulus cinnamomi (Guizhi), le Radix et Rhizoma Clematidis Chinensis (Weilingxian), l’Herba Salivae Chinensis (Shijianchuan), le Rhizoma Corydalis Yanhusuo (Yanhusuo), le Radix Angelicae Sinensis (Danggui), l’Herba Artemisiae Anomalae (Liujinu) et le Fructus foeniculi (Xiaohuixiang). Cependant, l’efficacité expérimentale de la TDA, en particulier lorsqu’elle est combinée à une électrostimulation auriculaire par point transcutané, n’a pas été systématiquement évaluée dans un modèle animal contrôlé de stagnation du qi et de dysménorrhée primaire en stase sanguine.

Les récepteurs activés par les proliférateurs de peroxysome (PPAR), appartenant à la famille des récepteurs des hormones nucléaires, sont des récepteurs activés par des ligands, essentiels à la régulation de nombreux processus métaboliques intracellulaires. Il existe trois sous-types distincts de PPAR, connus sous les noms de PPAR-α, PPAR-β/δ et PPAR-γ⁸. Des résultats récents indiquent que le PPAR-γ2 est exprimé sur une grande diversité de tissus et présente une association significative avec des processus^{inflammatoires 9}. Selon le rapport, le PPAR-γ supprime l’expression de l’IL-6, de la cyclooxygénase-2 (COX-2), de l’endothéline-1, de la syntase d’oxyde nitrique, de la métalloprotéinase matricielle-9, de la gélatinase et des molécules d’adhésion grâce à l’inactivation du facteur nucléaire κB, de la protéine activée 1, ainsi que du transducteur de signal et de l’activateur des voies de signalisation transcriptionnelle, inhibant ainsi la réponse^{inflammatoire 10}. De plus, Huang et ^al.11 indiquent que COX-2 et PPAR-γ2 pourraient servir de cibles critiques impliquées dans la physiopathologie des troubles de la stagnation du qi et de la stase sanguine (QSBS).

Par conséquent, cette étude a étudié les effets thérapeutiques de l’électrostimulation transcutanée du point auriculaire (TEAP), du SDD, et leur application combinée dans un modèle rat de stagnation du qi et de stase sanguine (dysménorrhée primaire). En intégrant l’histopathologie utérine, le profilage des médiateurs inflammatoires, la mesure des prostaglandines et l’analyse d’ARNm liée à PPAR-γ2/COX-2, cette étude visait à évaluer si une thérapie combinée interne et externe basée sur la médecine traditionnelle chinoise pouvait offrir une protection renforcée contre l’inflammation utérine associée à la dysménorrhée. La nouveauté de ce travail réside dans l’évaluation expérimentale du TEAP combinée à une formule SDD basée sur l’expérience clinique dans un modèle contrôlé de dysménorrhée primaire de stagnation du qi et de stase sanguine (QSBSPD), ainsi que dans l’exploration de son association potentielle avec l’axe régulateur inflammatoire PPAR-γ2/COX-2.

Protocole

Déclaration éthique

Toutes les procédures animales ont été examinées et approuvées par le Comité d’éthique des animaux du laboratoire de biotechnologie Fujian Ambry, numéro d’approbation : IACUC FJABR2024031202). Réaliser toutes les expériences animales conformément au protocole institutionnel approuvé pour les soins et utilisations animales.

SDD et préparation à l’ibuprofène

Le SDD comprend Shixiao San (9 g), Xiangfu (9 g), Moyao (6 g), Guizhi (9 g), Weilingxian (12 g), Shijianchuan (20 g), Yanhusuo (12 g), Danggui (9 g), Liujinu (15 g) et Xiaohuixiang (5 g). Shixiao San se compose de Puhuang (4,5 g) et Wulingzhi (4,5 g). Tous les composants à base de plantes étaient utilisés comme granules concentrés et sont listés dans le Tableau des Matériaux. Préparez la SDD en dissolvant 106 g de granules concentrés dans 200 mL d’eau bouillante pour obtenir une concentration finale de 0,53 g/mL équivalent de drogue brut. Mélangez soigneusement jusqu’à la dissolution complète des granules, laissez la solution refroidir à température ambiante, puis administrez-la par gavage intragastrique à 2,5 mL/kg par administration. Préparez la suspension d’ibuprofène selon la concentration requise pour la gavage intragastrique. Administrez de l’ibuprofène à 0,02 g/kg comme traitement témoin positif.

Animaux et regroupement

Utilisez 36 rats Sprague-Dawley adultes en bonne santé, de catégorie spécifique sans pathogènes, âgés de 2 à 3 mois et pesant entre 200 ± 20 g, sans antécédents de grossesse ou d’accouplement. Maintenez les rats sous un cycle clair/obscur de 12 h/12 h à 22 ± 2 °C et une humidité relative de 50 % à 70 %, avec un accès libre à la nourriture et à l’eau potable standards. Après une semaine d’acclimatation, répartissez aléatoirement les rats en six groupes (n = 6 par groupe) : blanc, modèle, SDD, TEAP, SDD + TEAP, et groupes ibuprofène.

Préparation et administration du modèle QSBSPD

Dans cette expérience, le modèle largement accepté de dysménorrhée induite par l’OT a été utilisé. En résumé, les cycles œstraux chez les rats ont été évalués par frottis vaginaux. Les rats étaient jugés éligibles à l’inclusion dans l’étude si leur durée du cycle œstral était déterminée à 4 à 5 jours.

À l’exception du groupe blanc, les rats des groupes expérimentaux ont reçu quotidiennement une injection sous-cutanée d’estradiol benzoate et d’hydrhydrate d’épinéphrine pendant 10 jours. Après injection d’épinéphrine chlorhydrate à une dose quotidienne de 0,9 mg/kg, les rats ont été exposés à diverses stimulations combinées (A : Stimulation acoustique : les rats ont été exposés à des stimuli acoustiques (90 dB, 1 kHz) pendant 5 min/fois, 3 à 4 fois par jour, avec un intervalle de 2 heures entre chaque fois. B : Stimulation lumineuse : les rats ont été exposés à des stimuli lumineux clignotants pendant 5 minutes/fois, 3 à 4 fois par jour, avec un intervalle de 2 heures entre chaque fois. C : Stimulation électrique : les rats ont été soumis à une stimulation électrique (impulsions biphasiques à ondes carrées) à 30–35 V, avec un courant alternatif appliqué pendant 0,3 s tous les 2 s. Cette stimulation était administrée 5 minutes toutes les 2 heures, 2 à 4 fois par jour. D : Contention : les rats étaient placés dans une cage de contention construite en fil barbelé, mesurant environ 25 cm de long et 5 cm de diamètre. Une fois à l’intérieur de la cage, les extrémités étaient serrées pour immobiliser les rats et restreindre leurs mouvements pendant 2 heures, une fois par jour). De plus, les jours 1 et 10, les rats ont reçu une injection sous-cutanée de 5,0 mg/kg/jour d’estradiol benzoate, et les jours 2 à 9, ils ont reçu 2,5 mg/kg/jour.

À partir du 5e jour d’injection d’estradiol benzoate, les rats ont reçu une administration intragastrique de différents médicaments pendant 7 jours, deux fois par jour à 10h00 et 16h00, sauf le groupe ibuprofène, qui recevait une fois par jour à 10h00. Dans les groupes blanc, modèle et TEAP, les rats ont reçu 2,5 mL/kg de solution saline normale. Dans les groupes SDD et TEAP+SDD, les rats ont reçu 2,5 mL/kg de SDD (préparé sous forme de 106 g de drogue brute dissous dans 200 mL d’eau, 0,53 g/mL) ; Cette dose a été convertie à partir de la dose clinique quotidienne adulte de 106 g basée sur l’équivalence de surface corporelle, aboutissant à une dose équivalente à un rat. Dans le groupe ibuprofène, les rats ont reçu 0,02 g/kg de suspension à l’ibuprofène. Dans les groupes TEAP et TEAP+SDD, les rats ont reçu une stimulation TEAP à partir du 5e jour suivant l’injection d’estradiol benzoate. Fixez les électrodes aux points auriculaires bilatéraux Jiaogan, Shenmen, Neishengzhiji et Neifenmi, tels que définis selon une norme précédemment rapportée pour la localisation des points d’acupuncture^{chez le rat 12}. Ces points sont situés dans la cavité conchale bilatérale de l’oreille, innervés par le nerf vague. Les électrodes étaient connectées à un instrument électronique de thérapie par aiguilles, délivrant une onde continue pendant 20 minutes (fréquence : 20 Hz ; intensité : 1 mA), une fois par jour. Les rats du groupe TEAP+SDD subissaient chaque jour le premier GPA SDD. La stimulation finale du TEAP a été réalisée avant l’injection intrapéritonéale d’OT.

À 24 heures après la dernière injection d’estradiol benzoate, c’est-à-dire au 11e jour, 1 heure après la dernière administration intragastrique, à l’exception des groupes à blanc et TEAP, les rats des autres groupes ont reçu 2 U d’OT par rat avec injection intrapéritonéale. Les rats du groupe TEAP ont subi une injection intrapéritonéale d’OT à une dose de 2 U par rat après la stimulation finale du TEAP. Les rats du groupe blanc n’ont pas reçu d’injection d’OT. Ce protocole a établi avec succès un modèle rat de QSBSPD. La sélection globale de l’animal, la préparation du modèle, le calendrier d’administration des médicaments, les paramètres de stimulation du TEAP et l’emplacement des points auriculaires sont résumés dans la Figure 1.

Coloration de Wright-Giemsa

Le cycle œstral a été déterminé par la coloration Wright-Giemsa des frottis vaginaux. Un coton tige-coton stérile a été humidifié avec une solution de chlorure de sodium à 0,9 % et inséré doucement de 0,5 à 1,0 cm dans le canal vaginal. Le prélèvement a été tourné 1 à 2 fois pour collecter les cellules exfoliées vaginales, et l’échantillon a été étalé uniformément sur une lame de verre propre dans une direction. La tache était séchée à l’air à température ambiante. Une solution de coloration Wright-Giemsa a été ajoutée pour recouvrir la tache et incubée pendant 5 minutes. Un volume égal de solution physiologique tamponnée phosphate a ensuite été ajouté à la solution colorante, puis la coloration a été poursuivie pendant encore 5 minutes. La lame a été délicatement rincée trois fois à l’eau ultrapure, séchée à l’air et examinée au microscope optique. Le stade du cycle œstral a été identifié selon les types cellulaires dominants, incluant les cellules épithéliales nucléées, les cellules épithéliales cornifiées et les leucocytes.

Collecte d’échantillons

Les rats ont été placés dans une boîte d’induction anesthésique avec une concentration d’isoflurane fixée à 3 % à 5 %. Après que les rats eurent perdu connaissance, ils furent transférés sur la table d’opération et maintenus sous anesthésie avec un masque. La concentration a été réduite de 1,5 % à 2,5 %. Le pelage abdominal du rat a été taillé à l’aide de ciseaux puis désinfecté par une application topique d’alcool. Une incision de 2 à 3 cm a été réalisée le long de la ligne médiane de l’abdomen. Un côté de l’utérus, ainsi que ses ligaments, a été extériorisé, et le tissu adipeux adhérant à la surface utérine a été excisé. Le tissu utérin a ensuite été soigneusement isolé. Si le rat est encore en vie après l’échantillonnage, euthanasiez-le par asphyxie au CO₂.

Coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (HE)

Les tissus utérins étaient fixés, intégrés dans la paraffine et sectionnés à une épaisseur de 5 μm. Les sections ont été décirées au xylène deux fois pendant 10 minutes chacune. Les sections ont ensuite été réhydratées séquentiellement dans de l’éthanol absolu deux fois pendant 5 minutes chacune, suivies de 95 %, 90 %, 80 % et 70 % d’éthanol pendant 5 minutes chacune. Les sections ont été rincées dans de l’eau ultrapure. La coloration à l’hématoxyline a été effectuée pendant 5 minutes, puis les sections ont été rincées à l’eau jusqu’à ce qu’il ne reste plus de colorant. Les sections ont été immergées dans du sérum physiologique tamponné phosphate pendant 5 minutes pour le bluissement. Les sections ont ensuite été teintées à l’éosine pendant 1 minute puis rincées à l’eau. Par la suite, les coupes ont été déshydratées à 95 % d’éthanol pendant 10 minutes et en éthanol absolu pendant 10 minutes, dégagées dans du xylène pendant 10 minutes, puis montées avec une résine neutre. Des images représentatives étaient prises à l’aide d’un microscope optique ou d’un scanner de lames numérique.

Dosage immunosorbant lié aux enzymes (ELISA)

Les tissus utérins frais étaient rincés avec du sérum physiologique pré-refroidi et tamponné au phosphate pour éliminer le sang résiduel. Chaque échantillon de tissu a été pesé, découpé en petits morceaux et homogénéisé dans une solution physiologique pré-refroidie et tamponnée phosphate à un ratio tissu-tampon de 1:9. L’homogénéat a été centrifugé à 5000 × g pendant 5 à 10 minutes à 4 °C, puis le surnageant a été collecté pour une analyse ultérieure. Les niveaux d’IL-1β, IL-6, TNF-α, PGF2α et PGE2 ont été mesurés à l’aide de kits ELISA pour rats selon les instructions du fabricant. Tous les réactifs et les bandes de microplaques étaient équilibrés à température ambiante avant utilisation. Des étalons ou échantillons (50 μL) étaient ajoutés aux puits désignés. Un anticorps de détection conjugué à la peroxydase de raifort (100 μL) a été ajouté à chaque puits sauf aux puits blancs, et la plaque a été scellée et incubée à 37 °C pendant 60 minutes. Le liquide était jeté, et chaque puits était lavé cinq fois avec un tampon dilué. Par la suite, 50 μL de substrat A et 50 μL de substrat B ont été ajoutés à chaque puits, suivis d’une incubation à 37 °C dans l’obscurité pendant 15 minutes. Une solution d’arrêt (50 μL) a ensuite été ajoutée à chaque puits, et la densité optique a été mesurée à 450 nm en 15 minutes. Les concentrations d’échantillons ont été calculées à partir des courbes standard.

PCR quantitative en temps réel (qRT-PCR)

L’ARN total a été extrait des tissus utérins à l’aide d’un réactif d’extraction d’ARN total selon les instructions du fabricant. En résumé, le tissu a été broyé dans de l’azote liquide, et 1 mL de réactif d’extraction d’ARN a été ajouté. Le lysat a été incubé à température ambiante pendant 5 minutes. Du chloroforme (200 μL) a ensuite été ajouté, le mélange a été secoué vigoureusement pendant 15 s, incubé à température ambiante pendant 5 minutes, puis centrifugé à 12 000 × g pendant 12 minutes à 4 °C. La phase aqueuse a été transférée dans un nouveau tube, mélangée doucement avec un volume égal d’isopropanol, puis incubée à −20 °C pendant 15 minutes. Les échantillons ont été centrifugés à 12 000 × g pendant 10 minutes à 4 °C, le surnageant a été jeté, et la pellete d’ARN a été lavée à 75 % d’éthanol. Le pellet a été séché à l’air et dissous dans de l’eau sans RNase. La concentration et la pureté de l’ARN ont été déterminées à l’aide d’un spectrophotomètre de microvolume. L’ADN génomique a été retiré, et l’ADNc a été synthétisé selon les instructions du réactif de transcription inverse. Pour l’extraction d’ADN génomique, l’ARN total a été incubé avec le réactif d’élimination de l’ADN génomique à 42 °C pendant 5 minutes, puis placé sur la glace. La transcription inverse a été effectuée à 50 °C pendant 15 minutes, suivie de 75 °C pendant 5 minutes pour mettre fin à la réaction.

La PCR en temps réel a été réalisée à l’aide d’un mélange qPCR basé sur SYBR Green. Chaque réaction de 20 μL contenait 2 μL d’ADNc, 0,4 μL d’amorce directe, 0,4 μL d’amorce inverse, 10 μL de mélange 2× SYBR qPCR, et 7,2 μL d’eau sans nucléase. Le qPCR a été exécuté selon le programme de cyclage suivant : 95 °C pendant 1 minute ; 40 cycles de 95 °C pendant 20 s, 56 °C pendant 20 s, et 72 °C pendant 38 s ; suivie d’une analyse de la courbe de fusion. Le GAPDH a été utilisé comme contrôle interne, et l’expression relative de l’ARNm a été calculée selon la méthode 2^−ΔΔCt . Chaque échantillon biologique a été mesuré en triplique mesure technique. La valeur moyenne de Ct des triplicates techniques a été utilisée pour calculer l’expression de ΔCt et d’ARNm relative pour chaque réplication biologique. Les séquences d’amorces sont les suivantes : PPAR-γ2, 5′-CGGAAGCCTTTTGTGACTT-3′ et 5′-CTCGATGGGCTTCACGTTCA-3′ ; COX-2, avant 5′-AACCAGGTACTTCGTCTATTAGTAG-3′ et 5′-GGTCGTTTGATGTGTCACTGTA-3′ ; GAPDH, 5′-GGTTGTCTCCTGCGACTTCA-3′ et 5′-GGTGGTCCAGGGTCTTACTC-3′.

Analyse statistique

Les données ont été analysées à l’aide de logiciels statistiques. Toutes les données quantitatives ont été présentées comme la moyenne ± l’écart-type. Pour l’analyse qRT-PCR, les triplicates techniques ont d’abord été moyennés pour chaque réplication biologique, et une analyse statistique a été réalisée à l’aide des valeurs de réplication biologique. Des comparaisons entre plusieurs groupes ont été réalisées à l’aide d’une analyse unidirectionnelle de la variance, suivie de tests post-hoc de Bonferroni lorsque les données respectaient les hypothèses de normalité et d’homogénéité de la variance. La signification statistique a été définie comme P < 0,05.

Résultats

Dépistage du cycle œstral chez les rats

Les résultats de la coloration de Wright-Giemsa ont montré que les frottis vaginaux dans le préœstrus présentaient principalement des cellules épithéliales nucléées, avec une faible quantité de kératinocytes. Les noyaux de ces cellules épithéliales semblaient légèrement colorés, agrandis et présentaient des signes de dissolution. Chez l’œstrus, les frottis se caractérisaient par une prédominance de grand...

Discussion

La MP est la douleur abdominale inférieure qui se manifeste avant et pendant les menstruations sans aucun dommage organique détectable dans les régions génitales ou^{pelviennes 1}. Selon l’enquête, environ 45 % à 90 % des femmes dans le monde souffrent de dysménorrhée, dont 10 % à 25 % souffrent de dysménorrhée^{sévère 13}. Il est donc impératif d’identifier des interventions plus sûres et plus efficaces pour la MP et d’en clarifier davantage les...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Solution de chlorure de sodium à 0,9%	Heilongjiang Qiqin Animal Health Products Co., Ltd.	240314A03	Rinçage des tissus et préparation des échantillons
1× tampon de phosphate salin (PBS)	Biosharp	BL601A	Rinçage des tissus, homogénéisation ELISA et procédures de coloration
Système de stimulation acoustique et lumineuse	Fabriqué sur mesure dans l'installation animale	Fabriqué sur mesure	Stimulation combinée du stress lors de la construction du modèle QSBSPD
Lames de microscope adhésives	Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd.	80312-3161	Préparation de coupes paraffinées et d'écouvillonnages vaginaux
Scanner numérique automatisé de lames	Guangzhou Guangying Cell Technology Co., Ltd.	GCell-60	Imagerie numérique des sections colorées par HE
Déshydrateur automatique de tissus	Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.	KH-TS	Déshydratation des tissus avant l'inclusion dans la paraffine
Microscope biologique	Nikon	E200MV	Observation des écouvillonnages vaginaux et des sections de tissus colorés
Bouteille de gaz CO2 et chambre d'euthanasie	Centre animal de l'Hôpital de Fuzhou de médecine traditionnelle chinoise	Système CO2 institutionnel	Euthanasie des animaux
Plateau froid pour la station d'inclusion	Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.	KH-BL	Inclusion dans la paraffine
Moulin cryogénique	Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd.	TISS-24	Homogénéisation des tissus
Danggui (Radix Angelicae Sinensis)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A1070343	Ingrédient SDD; granules concentrés
Eau traitée au DEPC	Meilunbio	MA0018	Réactif qRT-PCR
Instrument de traitement par acupuncture électronique	Suzhou Medical Appliance Factory Co., Ltd.	SDZ-II	Stimulation TEAP et stimulation électrique
Balance analytique électronique	Sartorius Balance Beijing Co., Ltd.	BS 224S	Poids des échantillons et des réactifs
Éosine	Epredia	7111	Coloration HE
Chlorhydrate d'épinéphrine	TargetMol	119091	Construction du modèle QSBSPD
Benzoate d'estradiol	Sigma-Aldrich	E8515	Construction du modèle QSBSPD
Éthanol	Xilong Scientific Co., Ltd.	240403A1	Traitement et déshydratation des tissus
Guizhi (Ramulus Cinnamomi)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A2060533	Ingrédient SDD; granules concentrés
Hématoxyline	Epredia	7211	Coloration HE
Suspension d'ibuprofène	Shanghai Johnson & Johnson Pharmaceutical Co., Ltd.	H20000359	Médicament de contrôle positif; 20 mg/mL
Liujinu (Herba Artemisiae Anomalae)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A210A413	Ingrédient SDD; granules concentrés
Mini centrifugeuse à basse vitesse	Hunan Xiangyi Laboratory Instrument Development Co., Ltd.	WTL-4K	Préparation des échantillons
Microcentrifugeuse réfrigérée	Beckman Coulter	Microfuge 22R	Extraction de l'ARN et préparation de l'homogénéisé tissulaire
Lecteur de microplaques	Guangdong Danli Technology Co., Ltd.	K3	Mesure de l'absorbance ELISA à 450 nm
Lamelles de couverture pour microscope	Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd.	80340-1630	Préparation des lames de microscope
Incubateur pour moules	Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.	W0704	Incubation pendant les procédures de coloration ou d'analyse
Moyao (Myrrhe)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	1107853	Ingrédient SDD; granules concentrés
Balsam neutre	Meilunbio	MB9899	Montage des sections de tissus colorées
NovoScript Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix	Novoprotein	E047-01A	Transcription inverse
NovoStart SYBR qPCR SuperMix Plus	Novoprotein	E096-01B	Amplification qRT-PCR
Injection d'ocytocine	Anhui Fengyuan Pharmaceutical Co., Ltd.	220906-4	Induction du modèle QSBSPD
Cire de paraffine	Hualing	20220918	Inclusion dans la paraffine
Système de PCR	Bio-Rad	PTC-100	Procédures liées à la PCR
Puhuang (Pollen Typhae)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A2092143	Ingrédient SDD; granules concentrés; composant de Shixiao San
Primers qRT-PCR pour PPAR-γ2, COX-2, et GAPDH	Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.	Synthèse sur mesure	Primers qRT-PCR
Kit ELISA pour IL-1β de rat	Meimian Biotechnology	MM-0047R2	Kit ELISA
Kit ELISA pour IL-6 de rat	Meimian Biotechnology	MM-0190R2	Kit ELISA
Kit ELISA pour PGE2 de rat	Meimian Biotechnology	MM-0068R2	Kit ELISA
Kit ELISA pour PGF2α de rat	Meimian Biotechnology	MM-0230R2	Kit ELISA
Cage de contention pour rat	Fabriqué sur mesure dans l'installation animale	Fabriqué sur mesure	Stress de contention lors de la construction du modèle QSBSPD
Kit ELISA pour TNF-α de rat	Meimian Biotechnology	MM-0180R2	Kit ELISA
Système de PCR en temps réel	Applied Biosystems	7300	Analyse qRT-PCR
RNAiso Plus	TaKaRa	9109	Extraction de l'ARN total
Microtome rotatif	Thermo Fisher Scientific	HM325	Sectionnement de la paraffine
Shijianchuan (Herba Salviae Chinensis)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A3052113	Ingrédient SDD; granules concentrés
Rats Sprague–Dawley	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.	SCXK (Jing) 2019-0010	Construction du modèle animal
Cassette d'inclusion de tissus	Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd.	23033	Consommable pour la section de paraffine
Machine d