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Article de recherche

Lycopus lucidus Extrait améliore le syndrome des ovaires polykystiques expérimental par le remodelage du microbiote intestinal et du métabolome

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DOI :

10.3791/71084

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28 août 2026

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1Department of Gynecology, Cangzhou Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Hebei Province, 2Department of Gynecology, Heilongjiang Provincial Institute of Traditional Chinese Medicine Science

Dans cet article

Résumé

L'extrait de ZeLan a amélioré les phénotypes endocriniens et métaboliques chez les rats présentant un SOPK induit par la DHEA. L'analyse intégrée du séquençage de l'ARNr 16S et du métabolome sérique a révélé une restauration partielle de la diversité microbienne alpha intestinale, des modifications de la composition microbienne et des changements de métabolites impliquant des hormones stéroïdiennes, des acides biliaires et des acides gras à chaîne courte.

Résumé

Cette étude a examiné les effets thérapeutiques de l'extrait de ZeLan sur le syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) et a évalué son association avec la remodélisation du microbiote intestinal et du métabolome. Vingt-quatre rats femelles Sprague-Dawley ont été répartis aléatoirement en trois groupes : contrôle, modèle de SOPK induit par la déhydroépiandrostérone (DHEA) et traitement par ZeLan (n = 8 par groupe). Après 28 jours d'intervention, les taux hormonaux sériques ont été mesurés par ELISA ; la composition du microbiote intestinal a été analysée par séquençage du gène ARNr 16S, et les profils métaboliques sériques ont été caractérisés par UHPLC-Q-TOF-MS. Une analyse de corrélation de Spearman avec correction pour tests multiples a été effectuée afin d'explorer les associations entre microbiote et métabolome. ZeLan a significativement amélioré les phénotypes associés au SOPK, réduisant le poids corporel, le taux de testostérone (0,92 contre 1,85 ng/mL, P < 0,05), le ratio LH/FSH et les niveaux d'insuline par rapport au groupe modèle. Le séquençage a montré que ZeLan restaurait partiellement la diversité microbienne alpha (indice de Shannon : 5,79 contre 4,19) et diminuait le ratio Firmicutes sur Bacteroidetes. ZeLan était associé à un enrichissement en Lactobacillus et Ruminococcus, ainsi qu'à une abondance réduite de Bacteroides, Prevotella et Escherichia. L'analyse métabolomique a identifié 52 caractéristiques métaboliques modifiées, avec des changements clés concernant les hormones stéroïdiennes, les acides biliaires tels que l'acide lithocholique, et les acides gras à chaîne courte tels que l'acide butyrique. Ces résultats suggèrent que ZeLan atténue les troubles endocriniens et métaboliques liés au SOPK et qu'il est associé à une remodélisation des profils microbiens intestinaux et métaboliques sériques.

Introduction

Le syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) représente l'un des troubles endocriniens les plus fréquents affectant les femmes en âge de procréer, avec une prévalence mondiale estimée entre 6 % et 20 %, selon les critères diagnostiques utilisés1. Ce trouble métabolique et reproducteur complexe se caractérise par un ensemble de manifestations cliniques, notamment l'hyperandrogénie, un dysfonctionnement ovulatoire et une morphologie ovarienne polykystique, qui contribuent ensemble à des conséquences reproductrices, métaboliques et psychologiques importantes2. Au-delà de son impact immédiat sur la fertilité, le SOPK est de plus en plus reconnu comme une affection systémique associée à des complications à long terme pour la santé, telles que le diabète de type 2, les maladies cardiovasculaires et le carcinome de l'endomètre, imposant ainsi des fardeaux considérables tant pour les patientes que pour les systèmes de santé à travers le monde3. La physiopathologie du SOPK n'est pas encore entièrement élucidée, bien qu'il soit généralement admis qu'elle implique des interactions complexes entre une prédisposition génétique, des facteurs environnementaux et des déterminants liés au mode de vie, qui aboutissent aux perturbations hormonales et métaboliques caractéristiques observées chez les personnes touchées4.

Les approches thérapeutiques actuelles du SOPK se concentrent principalement sur la prise en charge symptomatique par des interventions pharmacologiques, notamment l'utilisation de contraceptifs oraux pour la régulation du cycle menstruel, de la métformine pour la sensibilisation à l'insuline et d'anti-androgènes pour le contrôle de la hirsutisme5. Toutefois, ces traitements conventionnels offrent souvent un soulagement incomplet des symptômes et sont fréquemment associés à des effets indésirables qui limitent leur applicabilité à long terme, en particulier chez les femmes souhaitant avoir des enfants6. Par conséquent, l'intérêt croissant s'oriente vers l'exploration de médecines complémentaires et alternatives, notamment la médecine traditionnelle chinoise (MTC), qui dispose de plusieurs siècles d'expérience empirique dans le traitement des troubles gynécologiques grâce à des mécanismes régulateurs globaux7. Parmi les nombreuses plantes médicinales étudiées pour la prise en charge du SOPK, Lycopus lucidus Turcz. (connue couramment sous le nom de ZeLan en médecine chinoise) a suscité un intérêt considérable en raison de ses utilisations traditionnelles visant à favoriser la circulation sanguine, à résoudre les stagnations et à réguler les menstruations8. Des études phytochimiques publiées indiquent que L. lucidus contient des fractions riches en polyphénols et en flavonoïdes, dotées d'une activité antioxydante et anti-inflammatoire8,9. Ainsi, la teneur totale normalisée en flavonoïdes a été utilisée comme indice chimique de contrôle qualité de l'extrait dans la présente étude, bien que l'identification des monomères actifs spécifiques responsables de la régulation du microbiote et du métabolisme nécessite une analyse phytochimique ciblée à l'avenir.

Le microbiote intestinal s'est imposé comme un régulateur essentiel du métabolisme hôte et de la fonction endocrine, des données croissantes soutenant son implication dans la pathogenèse de divers troubles métaboliques, notamment le syndrome des ovaires polykystiques (PCOS)10Le concept de l'axe intestin-ovaire a été proposé pour décrire la communication bidirectionnelle entre les micro-organismes intestinaux et la fonction ovarienne, médiée par les métabolites microbiens, la signalisation immunitaire et les voies neuroendocrines.11Les femmes atteintes de SOPK présentent de manière constante une dysbiose intestinale caractérisée par une diversité microbienne réduite, un rapport Firmicutes sur Bacteroidetes modifié et une abondance diminuée de bactéries bénéfiques telles que les espèces de Lactobacillus et de Bifidobacterium.12On pense que ces perturbations microbiennes contribuent à la physiopathologie du syndrome des ovaires polykystiques par plusieurs mécanismes, notamment une perméabilité intestinale accrue, une inflammation systémique de bas grade, ainsi qu'un métabolisme altéré des acides biliaires et des acides gras à chaîne courte (AGCC), ce qui influence par la suite la sensibilité à l'insuline et la biosynthèse des androgènes.13Importamment, les interventions ciblant le microbiote intestinal, notamment les probiotiques, les prébiotiques et les modifications alimentaires, ont montré des résultats prometteurs dans l'amélioration des symptômes du SOPK, appuyant ainsi l'axe intestin-ovaire comme cible thérapeutique.14.

La métabolomique, analyse exhaustive des métabolites de petite taille dans les systèmes biologiques, constitue une approche puissante pour caractériser les perturbations métaboliques associées aux états pathologiques et pour évaluer les effets biochimiques des interventions thérapeutiques15. L'intégration du séquençage du gène ARNr 16S pour le profilage du microbiome avec la métabolomique non ciblée permet d'explorer systématiquement les relations entre les communautés microbiennes intestinales et le métabolisme de l'hôte, offrant des aperçus sur les interactions microbiote-métabolome pouvant accompagner à la fois la pathogenèse des maladies et les réponses au traitement. Malgré le fondement théorique du ciblage de l'axe intestin-ovaire dans la prise en charge du SOPK et les indications traditionnelles du ZeLan dans les troubles gynécologiques, aucune étude à ce jour n’a investigué systématiquement si l'extrait de ZeLan module l'interface microbiote-métabolome dans le SOPK. Ce manque de connaissances limite notre compréhension des réponses biologiques associées au ZeLan et entrave l'optimisation rationnelle de cette intervention botanique pour le traitement du SOPK.

La présente étude avait pour objectif d'évaluer l'efficacité thérapeutique de l'extrait de ZeLan dans un modèle de rat induit par la DHEA pour le syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) et d'analyser les modifications associées du microbiote intestinal et du métabolome par une approche intégrée combinant le séquençage de l'ARNr 16S et une analyse métabolomique non ciblée. Plus précisément, nous avons évalué les effets de l'extrait de ZeLan sur les phénotypes liés au SOPK, notamment le poids corporel, le taux sérique de testostérone, le rapport entre l'hormone lutéinisante et l'hormone folliculo-stimulante (LH/FSH) et les niveaux d'insuline ; caractérisé les modifications de la composition du microbiote intestinal et de la diversité alpha après traitement par ZeLan ; identifié les métabolites sériques différentiellement exprimés et les voies métaboliques enrichies associées à l'intervention par ZeLan ; et exploré les corrélations entre des taxons microbiens intestinaux spécifiques et des métabolites clés. En abordant ces objectifs, nous avons cherché à fournir des preuves multi-omiques associatives d'une modulation par ZeLan de l'axe intestin-ovaire dans le SOPK.

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Protocole

Toutes les procédures expérimentales menées dans la présente étude ont été réalisées conformément au Guide pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire des National Institutes of Health et ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins aux animaux et d'utilisation (Numéro d'approbation : IACUC-2023-0156).

Animaux

Des rats femelles Sprague-Dawley (n = 24, âgés de 6 semaines, poids corporel de 180 à 200 g) ont été obtenus auprès du centre des animaux de laboratoire de l'institution affiliée et élevés dans des conditions environnementales contrôlées (température de 22 ± 2°C, humidité de 50 ± 10 %, cycle lumière/obscurité de 12 heures) avec un accès ad libitum à une nourriture standard pour rongeurs et à de l'eau purifiée. Après une période d'acclimatation d'une semaine, les animaux ont été répartis aléatoirement en trois groupes expérimentaux (n = 8 par groupe) : contrôle, modèle de SOPK et traitement par ZeLan. La taille de l'échantillon a été déterminée d'après des études antérieures portant sur les modifications du microbiote intestinal chez les modèles de SOPK, une analyse de puissance indiquant que 8 animaux par groupe permettraient d'obtenir une puissance de 80 % pour détecter une différence d'un facteur 1,5 dans les indices de diversité alpha à α = 0,05.

Établissement du modèle de SOPK et protocole de traitement

Le modèle de SOPK a été établi à l'aide d'un protocole bien validé, impliquant une injection sous-cutanée de déhydroépiandrostérone (DHEA ; Sigma-Aldrich, États-Unis) dissoute dans de l'huile de sésame au niveau de la région dorsale du cou, à une dose de 6 mg/100 g de poids corporel, administrée quotidiennement pendant 21 jours consécutifs. Les animaux témoins ont reçu des volumes équivalents d'huile de sésame servant de véhicule. La durée totale de l'expérience comprenait 7 jours d'acclimatation, 21 jours d'induction du modèle et 28 jours d'intervention, avec un prélèvement final au jour 56 du protocole, incluant la période d'acclimatation (Figure 1). L'extrait de ZeLan a été préparé à partir de la plante authentifiée Lycopus lucidus Turcz. par extraction aqueuse et a été standardisé pour contenir au moins 2,5 % de flavonoïdes totaux, mesurés par chromatographie liquide à haute performance, ce qui a constitué le critère de contrôle qualité chimique de l'extrait botanique. À partir de la fin de l'induction du modèle par le DHEA, les rats du groupe ZeLan ont reçu par gavage oral l'extrait de ZeLan à une dose de 200 mg/kg de poids corporel, administré quotidiennement pendant 28 jours consécutifs, tandis que les groupes Témoin et Modèle ont reçu des volumes équivalents d'eau distillée. La dose de 200 mg/kg a été choisie comme dose pharmacologique exploratoire, sur la base d'expériences antérieures d'utilisation d'extraits botaniques chez l'animal et de considérations préliminaires de tolérabilité ; une évaluation formelle de la relation dose-réponse n'a pas été incluse dans la présente étude. Le poids corporel a été enregistré hebdomadairement tout au long de la période expérimentale. Dans cette conception expérimentale, la réussite de l'établissement du modèle de SOPK a été évaluée à l'aide du protocole d'induction par le DHEA, combiné aux phénotypes endocriniens et métaboliques finaux, incluant le poids corporel, la testostérone sérique, le rapport LH/FSH et l'insuline à jeun. L'examen histopathologique ovarien, le décompte des follicules, la quantification des corps jaunes et le suivi en série du cycle œstral n'ont pas été inclus comme critères de confirmation du modèle, et l'interprétation du dysfonctionnement ovarien s'est donc appuyée sur des paramètres endocriniens et métaboliques, plutôt que sur une évaluation directe au niveau tissulaire.

Prélèvement et traitement des échantillons

Des échantillons (sérum et fèces) ont été prélevés chez les trois groupes (n = 8 par groupe) en vue d'analyses biochimiques, de microbiote et de métabolomique ultérieures. Les prélèvements terminaux ont été effectués le matin après un jeûne nocturne afin de réduire les variations liées au rythme circadien et à l'alimentation. Les échantillons sanguins ont été collectés de l'aorte abdominale sous anesthésie et centrifugés à 3 000 × g pendant 15 minutes à 4 °C pour obtenir le sérum, qui a été aliquoté et stocké à -80 °C jusqu'à l'analyse des hormones et de la métabolomique. Des échantillons fécaux frais ont été prélevés directement du caecum en conditions aseptiques dans des cryotubes stériles, maintenus sur de la glace sèche pendant le transfert, congelés instantanément dans l'azote liquide dans les 10 minutes suivant le prélèvement, puis stockés à -80 °C jusqu'au séquençage du gène ARNr 16S.

Mesures hormonales sériques

Les concentrations sériques de testostérone, d'hormone lutéinisante (LH), d'hormone folliculo-stimulante (FSH) et d'insuline ont été quantifiées à l'aide de kits commerciaux de dosage immunoenzymatique (ELISA) (Cusabio Biotech, Wuhan, Chine), conformément aux instructions du fabricant. Le rapport LH/FSH a été calculé comme un indice composite du déséquilibre gonadotrope caractéristique du SOPK. Tous les échantillons ont été analysés en double, et les mesures dont les coefficients de variation en double étaient supérieurs à 15 % ont été répétées. Les coefficients de variation intra-essai et inter-essai devaient rester respectivement inférieurs à 10 % et 15 %. Les valeurs potentiellement aberrantes ont été vérifiées par rapport aux données d'origine et aux informations sur la performance des dosages, et aucune valeur n'a été exclue uniquement pour des raisons statistiques sans justification technique documentée.

Séquençage du gène ARNr 16S et analyse bioinformatique

L'ADN génomique bactérien total a été extrait à partir du contenu cæcal à l'aide du kit QIAamp DNA Stool Mini Kit (Qiagen, Allemagne), conformément au protocole du fabricant. La qualité et la quantité d'ADN ont été évaluées par spectrophotométrie NanoDrop et électrophorèse sur gel d'agarose, et les extraits d'ADN ont été stockés à -80 °C avant la construction des bibliothèques. Les régions hypervariables V3-V4 du gène ARNr 16S ont été amplifiées à l'aide des amorces universelles 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3') et 806R (5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3') munies de séquences adaptateurs Illumina. Les bibliothèques d'amplicons ont été construites, purifiées, quantifiées, regroupées à des concentrations équimolaires, puis séquencées sur la plateforme Illumina NovaSeq 6000 (Novogene, Pékin, Chine) en utilisant des lectures en lecture double de 250 pb.

Les lectures de séquençage brutes ont été traitées à l'aide du pipeline QIIME2 (version 2022.2). Les lectures en lecture bidirectionnelle ont été démultiplexées, assemblées, filtrées en qualité en utilisant un seuil de score Phred d'au moins 20, puis traitées avec DADA2 pour éliminer les séquences chimériques et générer des variants de séquence d'amplicon (ASV). La classification taxonomique a été réalisée à l'aide de la base de données de référence SILVA 138 en utilisant un classificateur naïf de Bayes. Les métriques de diversité alpha, incluant l'indice de Shannon, l'indice de Simpson et l'estimateur de Chao1, ont été calculées afin d'évaluer la diversité et la richesse intra-échantillon. Les résultats liés à la profondeur de séquençage, incluant les résumés de lectures, les tableaux d'abondance des ASV, la couverture de Good et les fichiers de courbes de raréfaction, ont été considérés comme faisant partie du jeu de données microbiomiques décrit dans la section Disponibilité des données. L'analyse linéaire discriminante de la taille de l'effet (LEfSe) a été utilisée pour identifier les taxons associés à la maladie dans la comparaison Contrôle versus Modèle, en utilisant un seuil de score LDA supérieur à 2,0 et une valeur P < 0,05 ; le rétablissement associé à ZeLan a été évalué en comparant le sens des variations d'abondance taxonomique dans le groupe ZeLan par rapport au groupe Modèle.

Analyse de métabolomique non ciblée

Le profilage métabolomique sérique a été réalisé à l'aide de la chromatographie liquide à ultra-haute performance couplée à un spectromètre de masse à quadrupôle et à temps de vol (UHPLC-Q-TOF-MS ; Agilent 1290 Infinity II/6550, USA). Des échantillons sériques (100 μL) ont été mélangés avec 400 μL de méthanol froid : acétonitrile (1:1, v/v) contenant des étalons internes, agités au vortex puis incubés à -20°C pendant 1 heure afin de précipiter les protéines. Après centrifugation à 14 000 × g pendant 15 minutes, les surnageants ont été séchés sous flux d'azote et reconstitués dans 100 μL d'acétonitrile : eau (1:1, v/v) pour l'analyse. La séparation chromatographique a été effectuée sur une colonne ACQUITY UPLC HSS T3 (2,1 × 100 mm, 1,8 μm) maintenue à 40°C, en utilisant de l'eau contenant 0,1 % d'acide formique comme phase mobile A et de l'acétonitrile contenant 0,1 % d'acide formique comme phase mobile B, à un débit de 0,30 mL/min. Un programme en gradient augmentant la phase organique de 5 % à 95 %, suivi d'un lavage de la colonne et d'une rééquilibration, a été utilisé pour la séparation des métabolites. Les données de spectrométrie de masse ont été acquises en modes d'ionisation électrospray positif et négatif, avec une plage de balayage de m/z 50–1200 ; les paramètres de la source comprenaient une tension de capillaire de 3,5 kV, un débit de gaz de séchage de 10 L/min, une température de gaz de séchage de 325°C, une pression de nébulisation de 35 psi et une tension de fragmenteur de 120 V.

Les fichiers de données brutes ont été convertis au format mzXML et traités à l'aide du package XCMS dans R pour la détection des pics, l'alignement des temps de rétention et l'intégration des aires de pics. Des échantillons de contrôle de qualité, préparés en mélangeant des aliquotes égales de tous les extraits sériques, ont été insérés tout au long de la séquence analytique afin de surveiller la stabilité de l'instrument. Les caractéristiques présentant un taux élevé de valeurs manquantes ou une reproductibilité instable dans les contrôles de qualité ont été éliminées avant la modélisation statistique. L'identification des métabolites a été réalisée en comparant la masse exacte, le temps de rétention et les profils de fragmentation en spectrométrie de masse tandem (MS/MS) avec ceux de la base de données Human Metabolome Database (HMDB), de METLIN et de bibliothèques spectrales internes. Des analyses statistiques multivariées ont été effectuées à l'aide de MetaboAnalyst 5.0. Les caractéristiques métabolomiques conservées pour le rapport final ont été priorisées selon un critère combiné intégrant la contribution discriminante multivariée, la direction du changement d'abondance et les preuves statistiques ; les valeurs P ont été ajustées selon la méthode de Benjamini-Hochberg afin de tenir compte des tests multiples. Le tableau complet annoté, contenant 52 caractéristiques métabolomiques, est fourni en Tableau supplémentaire 1. Une analyse d'enrichissement des voies métaboliques a été réalisée à l'aide de la base de données Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG).

Analyse statistique

Toutes les analyses statistiques ont été réalisées à l'aide du logiciel SPSS version 26.0 (IBM Corporation, Armonk, NY, USA) et du logiciel R (version 4.2.1). Les données continues ont été exprimées en moyenne ± écart type (ET) et leur normalité a été évaluée à l'aide du test de Shapiro-Wilk avant les tests inférentiels. Pour les données normalement distribuées, une analyse de variance à un facteur (ANOVA) suivie du test post hoc de Tukey a été utilisée pour les comparaisons entre plusieurs groupes ; pour les données non normalement distribuées, le test de Kruskal-Wallis avec le test post hoc de Dunn a été appliqué. Les corrélations entre les taxons microbiens intestinaux et les métabolites sériques ont été évaluées à l'aide du coefficient de corrélation de rang de Spearman et visualisées sous forme de cartes thermiques regroupées hiérarchiquement. Les valeurs P des corrélations ont été ajustées pour les tests multiples selon la méthode de taux de faux découvertes de Benjamini-Hochberg, et seules les corrélations dont le sens était cohérent et qui étaient statistiquement significatives ont été interprétées. Une valeur P bilatérale < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative, sauf indication d'un seuil de valeur P ajustée.

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Résultats

Effets de l'extrait de ZeLan sur les phénotypes cliniques du SOPK

L'administration de DHEA a induit chez le rat des phénotypes endocriniens et métaboliques semblables à ceux du SOPK, comme en témoignent des augmentations significatives du poids corporel, de la concentration sérique de testostérone, du rapport LH/FSH et des taux d'insuline à jeun par rapport au groupe témoin (tous P < 0,05). L'évaluation de la distribution à l'aide du test de Shapiro-Wilk a permis une analys...

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Discussion

La présente étude fournit des preuves que l'extrait de ZeLan améliore les phénotypes endocriniens et métaboliques liés au SOPK dans un modèle de rat induit par la DHEA, et que ces effets sont associés à des modifications favorables de la composition du microbiote intestinal et des profils métaboliques sériques. L'approche intégrée multi-omique a montré que le traitement par ZeLan améliore l'hyperandrogénie, le ratio élevé LH/FSH et la résistance à l'insuline, tout en restaurant partiellement la diversité alpha du microbi...

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont aucun conflit d'intérêts à déclarer.

Remerciements

Cette étude a été financée par le projet de planification de la recherche scientifique de l'Administration provinciale de la médecine traditionnelle chinoise du Hebei (subvention no 2021316).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
AcétonitrileFisher Chemical / Thermo Fisher ScientificA955-4Qualité Optima LC-MS, 4 L ; phase mobile et reconstitution des échantillons
Colonne ACQUITY UPLC HSS T3Waters Corporation186003539100 Å, 1,8 μm, 2,1 × 100 mm ; séparation UHPLC
Système d'électrophorèse sur gel d'agaroseBio-Rad Laboratories1704486Système d'électrophorèse horizontal Mini-Sub Cell GT ; évaluation de la qualité de l'ADN
Agilent 1290 Infinity II/6550 UHPLC-Q-TOF-MSAgilent TechnologiesG7120A/G7167B/G7116B/G6550BModule UHPLC 1290 Infinity II couplé au spectromètre de masse Q-TOF 6550 iFunnel ; plateforme de métabolomique non ciblée sur sérum
Algorithme DADA2BioconductorVersion 1.24.0Génération d'ASV et élimination des chimères ; version déduite pour correspondre au flux de travail R 4.2.1/Bioconductor 3.15
Déhydroépiandrostérone (DHEA)Sigma-Aldrich / MilliporeSigmaD4000Induction du modèle SOPK ; 6 mg/100 g de poids corporel ; CAS 53-43-0
Eau distilléeInvitrogen / Thermo Fisher Scientific10977015Eau distillée UltraPure sans DNase ni RNase ; véhicule pour la gavage oral dans les groupes Témoin et Modèle
Acide formiqueFisher Chemical / Thermo Fisher ScientificA117-50Qualité Optima LC-MS, 50 mL ; ajout de 0,1 % aux phases mobiles LC-MS
Base de données du métabolome humainUniversité de l'Alberta / HMDBHMDB 5.0Base de données d'annotation des métabolites
Plateforme Illumina NovaSeq 6000Illumina20012850Système de séquençage utilisé par le prestataire pour le séquençage apparié de 250 pb de l'ARNr 16S
Plante médicinale Lycopus lucidus Turcz.Beijing Tongrentang Chinese Medicine Co., Ltd.Lot ZL-20230315Matière première botanique authentifiée pour l'extrait aqueux de ZeLan
MéthanolFisher Chemical / Thermo Fisher ScientificA456-4Qualité Optima LC-MS, 4 L ; précipitation des protéines pour la métabolomique du sérum
Base de données METLINScripps ResearchMETLIN Classic 2023Base de données d'annotation des spectres de masse des métabolites
Spectrophotomètre NanoDropThermo Fisher ScientificND-ONE-WSpectrophotomètre UV-Vis microvolume NanoDrop One ; évaluation de la quantité et de la pureté de l'ADN
Kit QIAamp Fast DNA Stool MiniQiagen51604Extraction de l'ADN à partir du contenu cæcal ; kit d'extraction d'ADN fécal (50 préparations)
QIIME2Équipe de développement QIIME2Version 2022.2Traitement des séquences d'ARNr 16S
Logiciel RFondation RVersion 4.2.1Analyse statistique et traitement XCMS
Kits ELISA sériques pour la testostérone, LH, FSH et insulineCusabio BiotechCSB-E05100r ; CSB-E12654r ; CSB-E06869r ; CSB-E05070rKits ELISA pour la quantification de la testostérone, LH, FSH et insuline chez le rat dans le sérum
Huile de sésameSigma-Aldrich / MilliporeSigmaS3547Véhicule pour l'injection de DHEA
Pentobarbital de sodiumSigma-Aldrich / MilliporeSigmaP3761Anesthésie ; 50 mg/kg par voie intrapéritonéale
Logiciel SPSSIBM CorporationVersion 26.0Analyse statistique
Amorces universelles d'ARNr 16S 338F/806RSangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.Synthèse personnalisée : 338F/806RAmplification des régions V3-V4 ; 338F ACTCCTACGGGAGGCAGCAG, 806R GGACTACHVGGGTWTCTAAT
Package XCMSBioconductor / RVersion 3.18.0Détection des pics, alignement du temps de rétention et intégration
Extrait ZeLanExtrait aqueux préparé en laboratoireLot ZLE-20230402Traitement par gavage oral ; flavonoïdes totaux standardisés ≥2,5 %

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