Cette étude a été examinée et approuvée par le Comité d’éthique de la recherche médicale de l’Hôpital populaire de Heyuan (Numéro d’approbation : YXYJLL-SFKJ202461 ; Date d’approbation : 15 mai 2024). Le certificat d’éthique a été téléchargé en tant que fichier complémentaire. Le patient, le parent ou le tuteur d’un mineur a signé une déclaration lors de l’enregistrement indiquant « J’accepte que mes échantillons et données biologiques cliniques soient utilisés pour la recherche scientifique, l’innovation technologique et la recherche clinique approuvée par le Comité d’éthique de la recherche médicale après suppression des informations personnelles identifiables », et que cette analyse ne présentera aucun risque supplémentaire pour le patient et respecte les réglementations applicables. Tous les matériaux utilisés dans cette étude sont listés dans le tableau des matériaux.
Matières
Au total, 1 559 patients masculins ayant visité le service ambulatoire de l’Hôpital populaire de Heyuan et ayant subi un test de dépistage du HPV entre janvier 2021 et décembre 2024 ont été inclus dans l’étude. Les sujets avaient entre 2 et 80 ans (La population étudiée est composée de patients masculins ayant des résultats valides de tests d’acide nucléique du HPV issus de consultations externes dans cet établissement médical entre 2021 et 2024 ; L’objectif principal est de fournir un aperçu complet des tests et des schémas d’infection du HPV chez les patients masculins de la région ; De plus, les voies de l’infection par le HPV incluent non seulement l’activité sexuelle, mais aussi la friction ou le contact avec la surface cutanée et les muqueuses, ainsi que la transmission verticale de la mère à l’enfant. Par conséquent, aucune restriction d’âge n’a été imposée, avec un âge moyen de (34,2 ± 10,7) ans.
Méthodes
Cette étude a utilisé un plan transversal rétrospectif pour analyser tous les patients masculins qui ont visité le service ambulatoire de notre hôpital et ont subi des tests HPV ; seuls les résultats d’échantillonnage initiaux ont été inclus pour ceux qui ont subi des tests répétés.
Collection de spécimens
Les échantillons de cellules exfoliées ont été prélevés par des cliniciens formés à l’aide de brosses stériles et spécialisées. Les sites de prélèvement comprenaient les surfaces dorsale et ventrale du pénis, les sillons coronanels internes et externes, le gland pénis, l’urètre distal, ainsi que toute lésion verruque visible, la sélection du site étant déterminée en fonction des observations individuelles du patient ; Après la collecte, les têtes de brosse étaient cassées dans une solution dédiée à la conservation des échantillons. Conditions de conservation des spécimens : Après l’échantillonnage, les spécimens étaient immédiatement conservés au réfrigérateur à 2–8 °C, et le test était achevé en moins de 3 jours.
Extraction d’ADN
Après que chaque échantillon ait été oscillé et mélangé, 200 μL ont été ajoutés séquentiellement au réactif d’extraction ou de purification des acides nucléiques. L’extraction de l’ADN a été réalisée à l’aide de la technologie des billes magnétiques avec le réactif d’extraction dans l’instrument d’extraction entièrement automatisé des acides nucléiques SP96.
Détection du HPV
Le test HPV-ADN a été réalisé à l’aide du kit de détection du génotypage du papillomavirus humain (type 23), qui combine une amplification in vitro basée sur PCR et une hybridation par reverse dot blot à l’ADN pour le génotypage du HPV. Des amorces spécifiques ont été conçues en fonction des caractéristiques génétiques du HPV, et des fragments cibles de 23 génotypes de HPV ont été amplifiés. Les produits amplifiés ont été hybridés avec les sondes de typage fixées sur la membrane, incluant 17 HR-HPV (HPV16,51,52,53,18,58,59,31,33,45,56,66,35,39,68,73,82) et 6 LR-HPV (HPV6,11,42,43,81,83). En fonction de la présence ou de l’absence de signaux d’hybridation, le statut d’infection de ces génotypes HPV a été déterminé. La procédure de laboratoire spécifique consistait à utiliser une pointe de pipette filtrée pour ajouter 5 μL d’ADN extrait au mélange de réaction PCR, portant le volume total à 25 μL. Par la suite, une amplification PCR a été réalisée. Après amplification, tous les produits amplifiés ont été ajoutés à l’hybrideur isotherme contenant des bandes membranaires pour l’hybridation colorimétrique. Une fois le développement des couleurs terminé, les résultats peuvent être interprétés.
Analyse statistique
Le logiciel SPSS 23.0 était utilisé pour l’analyse statistique. Les données de comptage étaient exprimées en nombre de cas (n) et en pourcentage ( %). La comparaison entre groupes a été réalisée par le test χ2 . p < 0,05 était considéré comme statistiquement significatif. Parmi les 23 génotypes du HPV, la positivité pour un génotype individuel indique une infection par le HPV ; la positivité pour un seul génotype indique une seule infection ; et la positivité pour deux génotypes ou plus indique une infection multiple. Les infections multiples sont ensuite classées en fonction du nombre de génotypes coexistants en double infection, triple infection, quadruple infection, pentuple infection, infection hexagonale, et plus. » Le rapport à la fréquence totale de détection » a été calculé en utilisant le nombre total de détections de génotypes (1 238) comme dénominateur, les patients avec plusieurs infections ayant contribué à plusieurs génotypes.