Cette étude a porté uniquement sur des matériaux végétaux et n'a pas inclus d'expériences impliquant des êtres humains ou des animaux. Par conséquent, aucune approbation éthique n'était requise. Les outils de recherche utilisés dans ce protocole sont répertoriés dans le Tableau des matériaux.
1. Site expérimental
L'expérience a été menée au cours des saisons 2023/24 et 2024/25 à la ferme expérimentale de la station de recherche horticole d'El-Qassassin, gouvernorat d'Ismailia, en Égypte (30°53′ N, 31°56′ E), afin d'évaluer la réponse des plants de fenouil (F. vulgare Mill.) à la fertilisation organique et aux applications de biostimulants. Les conditions climatiques durant la période de croissance (novembre à avril) ont été enregistrées par la station météorologique d'Ismailia. Les températures moyennes minimales et maximales de l'air ont varié respectivement entre 12 et 18 °C et entre 22 et 30 °C, tandis que l'humidité relative s'est située entre 50 % et 65 %. Aucun événement météorologique extrême n'a été enregistré durant les périodes expérimentales (Figure 1).

Figure 1 : Représentation schématique du dispositif expérimental en parcelles divisées, montrant les niveaux de thé de compost attribués aux grandes parcelles et les traitements aux biostimulants répartis dans les sous-parcelles sur trois répétitions. Ct.1, Ct.2 et Ct.3 représentent respectivement 360, 480 et 600 litres par hectare (ha) appliqués au sol, tandis que F.1, F.2, F.3, F.4 et F.5, pulvérisés foliairement, représentent 2 cm³/L d'eau pour chacun des extraits Témoin, Azolla, Spirulina, Nostoc et Chlorella, respectivement. Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.
2. Matériel végétal
Les graines de fenouil ont été obtenues auprès du Département de recherche sur les plantes médicinales et aromatiques, Institut de recherche en horticulture, Centre de recherche agricole, Dokki, Gizeh, Égypte. Les graines ont été semées dans des lits de pépinière au cours de la première semaine de novembre, puis les semis ont été éclaircis à une plante par butte après leur installation.
3. Échantillonnage et analyse du sol
Avant la préparation du sol, des échantillons composites de sol (profondeur de 0–30 cm) ont été prélevés, séchés à l'air, tamisés à l'aide d'un tamis de 2 mm et analysés pour leurs propriétés physiques et chimiques selon des protocoles standard13,14 (Tableau 1).
| Distribution de la taille des particules (%) | Classe texturale | *O.M. (%) |
| Sable grossier | Sable fin | Silt | Argile | Sandy | 0.48 |
| 80.65 | 14.06 | 3.8 | 1.49 |
| pH | EC dS/m | SP % | Cations (meq/l) | Anions (meq/l) |
| Ca++ | Mg++ | Na+ | K+ | HCO3- | Cl- | SO4 |
| 8 | 0.79 | 28 | 4 | 2.68 | 1.79 | 0.61 | 1.4 | 4.38 | 2.98 |
| *MO (%) : matière organique |
Tableau 1 : Propriétés physiques et chimiques du sol expérimental. Les caractéristiques comprennent la distribution de la taille des particules, la classe texturale, la teneur en matière organique, le pH, la conductivité électrique, le pourcentage de saturation, ainsi que les cations et anions majeurs.
4. Disposition expérimentale
L'expérience a suivi un plan en parcelles divisées de type bloc aléatoire complet avec trois répétitions. Les niveaux de thé de compost ont été attribués aux grandes parcelles, et les traitements biostimulants aux sous-parcelles (Figure 2). Chaque parcelle mesurait 8,4 m2 et contenait 24 plantes disposées en trois rangées (de 4 m de longueur), avec 70 cm entre les rangées et 50 cm entre les plantes au sein des rangées.
L'irrigation goutte à goutte a été appliquée à l'aide d'émetteurs délivrant 4 L h⁻1 par butte pendant 1 h toutes les deux jours. Afin d'éviter toute interférence entre les traitements, une crête entre les parcelles a été laissée non plantée comme zone tampon.
Toutes les parcelles ont reçu 24 t ha⁻1 de compost lors de la préparation du sol, deux semaines avant la plantation. Les engrais minéraux ont été appliqués à 50 % de la dose recommandée (DR) : 360 kg ha⁻1 de sulfate d'ammonium (20,6 % N), 240 kg ha⁻1 de superphosphate binaire (15,5 % P₂O₅) et 120 kg ha⁻1 de sulfate de potassium (48 % K₂O). Les engrais azotés et potassiques ont été appliqués en trois doses égales à des intervalles de 15 jours, tandis que l'engrais phosphoré a été appliqué en une seule dose de fond. Les pratiques agronomiques courantes ont été suivies tout au long de la période de croissance.

Figure 2: Rendement en huile par hectare (kg ha⁻¹) et son augmentation relative par rapport au traitement témoin (T1 : Ct1 × F1) au cours de la première (S1) et de la deuxième (S2) saison. Ct1 représente le niveau le plus faible d'infusion de compost (360 L ha⁻¹), et F1 représente le témoin non pulvérisé. Les traitements sont définis comme suit : T1 (Ct1 × F1), T2 (Ct1 × F2), T3 (Ct1 × F3), T4 (Ct1 × F4), T5 (Ct1 × F5), T6 (Ct2 × F1), T7 (Ct2 × F2), T8 (Ct2 × F3), T9 (Ct2 × F4), T10 (Ct2 × F5), T11 (Ct3 × F1), T12 (Ct3 × F2), T13 (Ct3 × F3), T14 (Ct3 × F4) et T15 (Ct3 × F5). Les barres d'erreur représentent les erreurs standards de la moyenne (SEM). Veuillez cliquer ici pour visualiser une version agrandie de cette figure.
5. Traitements au thé de compost
Du compost végétal mature a été extrait de manière aérobie dans de l'eau douce pendant 24 à 48 heures. Le thé de compost obtenu présentait une conductivité électrique de 1,2 à 1,6 dS m⁻1 et un pH légèrement alcalin (7,5–8,0). Le thé de compost a été appliqué via irrigation goutte à goutte à des débits de 360, 480 ou 600 L ha⁻1 pendant une période de 16 semaines, à partir d'un mois après le semis.
6. Préparation et application du biostimulant
La biomasse fraîche d'Azolla caroliniana, de Spirulina platensis, de Nostoc muscorum et de Chlorella vulgaris a été homogénéisée dans de l'eau distillée selon un rapport de 1:10 (p/v), filtrée et diluée jusqu'à une concentration finale de 2 cm3 L⁻1 (environ 1200 L ha⁻1). Les extraits ont été préparés fraîchement avant leur application et appliqués sous forme de pulvérisations foliaires trois fois durant la saison de croissance (30, 60 et 90 jours après la plantation), à l'aide d'un pulvérisateur manuel, jusqu'à ruissellement.
7. Données enregistrées
Paramètres de croissance végétative
Six plantes choisies aléatoirement dans chaque unité expérimentale ont été récoltées 65 jours après la plantation. La hauteur des plantes (cm) a été mesurée depuis la base jusqu'au sommet de la tige principale. Le poids frais total de la plante (g) et le poids sec (g) ont été enregistrés, le poids sec étant déterminé après séchage des échantillons en étuve à 70 °C pendant 48 h jusqu'à obtention d'un poids constant. Le nombre de branches par plante a été calculé comme la moyenne du nombre de branches observé sur les plantes échantillonnées.
Extraction de l'huile essentielle (HE)
L'huile essentielle a été extraite à partir de 40 g de fruits récoltés par hydrodistillation pendant 3 h, selon la méthode décrite par Miller15. L'huile extraite a été laissée au repos sans agitation afin de garantir une séparation complète16.
Dosage de la teneur et du rendement en huiles essentielles
La teneur en huile essentielle (% p/p) a été calculée comme suit :

Où :
WEO = masse de l'huile essentielle extraite (g)
Wéchantillon = masse sèche de l'échantillon végétal soumis à l'hydrodistillation (g)
Le rendement en huile essentielle par plante a été calculé comme suit :

Où :
DWplant = poids sec de la plante entière par individu (g)
EO content = pourcentage d'huile essentielle sur la base du poids sec (% p/p)
Remarque : La densité de l'huile essentielle a été supposée d'environ 1 g cm⁻3, permettant ainsi la conversion des grammes en centimètres cubes.
Le rendement en huiles essentielles par hectare a été calculé comme suit :

Où :
rendement en HEpar plante - 1 = rendement en huile essentielle par plante (cm3)
Nplantes = nombre de plantes par hectare
1000 = facteur de conversion des cm3 en L
Remarque : Tous les calculs de rendement en huile étaient basés sur la matière sèche afin d'éviter les variations liées à la teneur en humidité des plantes.
Attribut de rendement
Le nombre d'ombelles par plante a été enregistré au stade de maturation des fruits en comptant toutes les ombelles sur chaque plante.
8. Analyse statistique
Pour chaque caractère et chaque saison, les observations au niveau des répétitions ont été testées pour la normalité à l'aide du test de Shapiro–Wilk. Aucun écart significatif par rapport à la normalité n'ayant été observé (p > 0,05), une analyse paramétrique a été appliquée. Les données ont été analysées par analyse de la variance (ANOVA) pour un dispositif en parcelles divisées à l'aide du logiciel Statistix 8.1 (Analytical Software, 2008), et les moyennes des traitements ont été comparées à l'aide du test de la différence significative minimale (LSD)17.
Une analyse en composantes principales (ACP) a été réalisée comme outil multivarié afin de résumer les relations entre les caractères mesurés. Les valeurs propres ont été utilisées pour déterminer la contribution relative de chaque composante, et la visualisation sous forme de biplot a permis de comparer les traitements et les associations entre caractères18.