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Article de recherche
L’application de vermiculite et d’Azospirillum brasilense, en particulier combinées, a amélioré la croissance du blé, le rendement des grains, le taux photosynthétique, la conductance stomataire et la teneur en chlorophylle tout en réduisant les fuites d’électrolytes et l’accumulation de Cd dans les tissus végétaux sous contrainte au cadmium (Cd).
La contamination au cadmium (Cd) dans les sols agricoles constitue une menace sérieuse pour la productivité des cultures et la santé humaine. Cette étude a évalué le potentiel de la vermiculite et de la bactérie favorisant la croissance des plantes Azospirillum brasilense pour atténuer la toxicité au Cd dans le blé (Triticum aestivum L.). Une expérience au pot avec trois réplications et neuf traitements a été réalisée : T0 (témoin), T1 (CD 100 mg/kg), T2 (CD 100 mg/kg + Vermiculite), T3 (CD 100 mg/kg + A. brasilense), T4 (CD 100 mg/kg + Vermiculite + A. brasilense), T5 (Cd 200 mg/kg), T6 (CD 200 mg/kg + Vermiculite), T7 (Cd 200 mg/kg + A. brasilense), et T8 (CD 200 mg/kg + Vermiculite + A. brasilense). Des niveaux plus élevés de Cd entraînaient une inhibition de croissance plus sévère chez le blé. Cependant, les traitements avec la vermiculite et A. brasilense ont significativement amélioré la croissance des plantes, réduit l’accumulation de Cd dans les tissus végétaux et renforcé les activités enzymatiques antioxydantes (SOD, CAT). Notamment, l’application combinée de vermiculite et d’A. brasilense (T4 et T8) a montré la mitigation la plus efficace du stress de Cd. À 100 mg/kg Cd (T4), les plants de blé ont montré une augmentation de hauteur de 10,67 %, une longueur de pointe plus longue de 10,21 % et un rendement de grain supérieur de 19,87 % par rapport au traitement uniquement en Cd. Sous un stress de Cd (T8) de 200 mg/kg, la même combinaison a entraîné une augmentation de 44,83 % de la hauteur de l’usine, une amélioration de la longueur des pointes de 17,63 %, et une augmentation du rendement de 44,83 % par rapport aux plantes non traitées sous contrainte de Cd (T5). Ces résultats démontrent que l’utilisation synergique de la vermiculite et de l’Azospirillum brasilense améliore la tolérance du blé à la toxicité au Cd. Leur application combinée améliore les paramètres de croissance, les caractéristiques physiologiques et le rendement sous des conditions de stress au Cd, offrant une approche écologique pour la réhabilitation des sols contaminés par le CBD et le maintien de la productivité du blé.
Le blé (Triticum aestivum L.) est une culture alimentaire de base essentielle qui fournit une source d’énergie principale à des millions depersonnes 1. En tant que principale source de nourriture, elle est cultivée sur de vastes étendues de terres agricoles, en particulier dans les régions tempérées. La polyvalence, la valeur nutritionnelle et l’adaptabilité du blé à diverses conditions environnementales en font une pierre angulaire de la sécuritéalimentaire 2. Cependant, le potentiel de rendement du blé est souvent compromis par différents facteurs de stress abiotique et biotique, entraînant des pertes substantielles de productivité. L’un des défis pressants auxquels la production de blé est confrontée aujourd’hui est la contamination des sols par des métaux lourds, en particulier le cadmium (Cd)2,3. Le cadmium, un métal lourd toxique, peut être introduit dans les sols agricoles par des activités industrielles, des engrais phosphatés et l’irrigation avec de l’eau contaminée. Une fois dans le sol, le Cd est facilement absorbé par les plants de blé, où il s’accumule dans divers tissus, entraînant un stress oxydatif, des fonctions physiologiques altérées et une croissanceréduite 3. Les effets toxiques du CD sur le blé réduisent non seulement le rendement des cultures, mais causent aussi des problèmes de santé humaine en conduisant la consommation de céréales contaminées. La toxicité des métaux lourds et d’autres facteurs, tels que des carences en nutriments, une mauvaise structure du sol, le stress lié à la sécheresse et des pratiques agronomiques sous-optimales, contribuent au faible rendement dublé 4. La menace constante du changement climatique aggrave ces défis, rendant de plus en plus difficile l’atteinte d’une production durablede blé 5.
La vermiculite est un minéral naturellement présent qui a attiré une attention importante en agriculture pour ses propriétés uniques et ses avantages en tant qu’amendement du sol. Composée principalement de silicate de magnésium-aluminium-fer hydraté, la vermiculite est connue pour sa capacité à se dilater lorsqu’elle est chauffée, ce qui donne un matériau léger et trèsporeux 6. Cette forme étendue de vermiculite présente d’excellentes capacités de rétention d’eau et d’aération, ce qui en fait un milieu idéal pour améliorer la structure du sol et favoriser la croissance des plantes. Dans les applications agricoles, la vermiculite est un élément essentiel dans les mélanges de sols, en particulier dans les zones de mauvaise qualité ou dans des conditions nécessitant une meilleure gestion de l’eau et desnutriments 7. La vermiculite a la capacité de retenir l’eau dans le sol et de maintenir l’humidité du sol sous stress hydrique. Elle est précieuse pour prévenir l’inondation et garantir un apport constant d’humidité aux racines des plantes. De plus, la grande capacité d’échange cationique (CEC) de la vermiculite lui permet de fournir les nutriments, tels que le potassium (K), le calcium (Ca) et le magnésium (Mg), qui sont disponibles pour les plantes au fil du temps 8. Le rôle de la vermiculite dans la réduction des facteurs de stress environnementaux, tels que la contamination par les métaux lourds, suscite un intérêt particulier en agriculturedurable 6. En raison de sa grande surface et de son affinité pour les métaux lourds, la vermiculite peut adsorber et immobiliser des éléments toxiques comme le cadmium (Cd) dans le sol, réduisant ainsi leur biodisponibilité pour les plantes. Cela protège non seulement les cultures des effets néfastes de la toxicité métallique, mais contribue également à maintenir la santé des sols en éliminant les substancesnocives 6,9.
Azospirillum brasilense est un rhizobactérie bien connu favorisant la croissance des plantes (PGPR) qui a suscité un intérêt considérable dans la recherche et la pratique agricoles en raison de sa capacité à améliorer la croissance et la résilience des plantes sous diverses conditionsde stress 10. Initialement isolée de la rhizosphère des graminées tropicales, A. brasilense est une bactérie libre qui colonise les racines d’une grande variété de cultures, dont le blé (Triticum aestivum L.), où elle établit une relation bénéfique avec la plantehôte 11. Les principaux mécanismes par lesquels A. brasilense favorise la croissance des cultures sont de fixer le N2 atmosphérique (azote), qu’il peut facilement absorber et utiliser pour les fonctions de la plante. Cette fixation biologique de l’azote réduit les besoins en engrais synthétiques pour la croissance des plantes, contribuant ainsi à des pratiques agricoles plusdurables 1,11. A. brasilense est connue pour produire de l’acide indole-3-acétique (IAA), une phytohormone pouvant améliorer le développement radiculaire ; Ce développement raciculaire peut améliorer l’absorption des nutriments. Au-delà de ses effets favorisant la croissance, A. brasilense peut également renforcer la tolérance des plantes à la toxicité des métauxlourds 12. Dans les sols contaminés, A. brasilense peut moduler les réponses physiologiques et biochimiques de la plante, réduisant l’absorption et l’accumulation de métaux comme le cadmium (Cd). La bactérie y parvient par plusieurs moyens, tels que la modification des schémas d’exsudation des racines, l’augmentation de l’activité enzymatique antioxydante et la production de substances polymériques extracellulaires capables de se lier aux métaux lourds, réduisant ainsi leur disponibilité pour les plantes13. Le potentiel d’A. brasilense à atténuer la toxicité au Cd dans le blé est particulièrement significatif dans le contexte de l’agriculture moderne, où la contamination des sols par des métaux lourds représente une menace croissante pour la productivité des cultures et la sécurité alimentaire. En tirant parti des capacités naturelles d’A. brasilense, les agriculteurs peuvent améliorer la santé et le rendement des cultures de blé même dans des environnements difficiles, contribuant ainsi à la sécurité alimentaire et à la durabilité environnementale 11,13,14.
Le défi croissant de la contamination au cadmium (Cd) dans les sols agricoles représente une menace importante pour la durabilité de la production agricole, en particulier dans les cultures de base comme leblé 3. Le CD est un métal lourd toxique qui non seulement entrave la croissance des plantes, mais peut aussi s’accumuler dans les parties comestibles des cultures. Alors que les pratiques agricoles font de plus en plus face à la double pression de la pollution environnementale et du besoin d’une productivité accrue, des stratégies innovantes et durables sont nécessaires pour atténuer l’impact des métaux lourds comme le CD sur la santé descultures 15. L’application combinée de vermiculite et d’Azospirillum brasilense offre une approche prometteuse pour traiter la toxicité au Cd dans leblé 7,9,14,16. La vermiculite, grâce à sa grande capacité d’échange cationique et ses propriétés de rétention d’eau, améliore la structure du sol, améliore la disponibilité des nutriments et réduit la mobilité de métaux comme le Cd dans lesol 8. En revanche, A. brasilense, un rhizobactérie favorisant la croissance des plantes, améliore la tolérance des plantes à la toxicité des métaux lourds en modulant la physiologie racinaire, en produisant des phytohormones et en réduisant la biodisponibilité des métaux toxiques via diverses voies biochimiques14. L’intégration de la vermiculite et de l’A. brasilense dans une seule stratégie de gestion exploite les forces des deux composantes, créant un effet synergique plus efficace que l’utilisation seule de l’un ou l’autrecomposant 17. La capacité de la vermiculite à immobiliser le Cd dans le sol complète le rôle d’A. brasilense dans le renforcement des mécanismes de défense des plantes contre le stress causé par le Cd. De plus, la vermiculite peut créer un environnement plus propice à la prospérité d’A. brasilense en améliorant l’aération du sol et les niveaux d’humidité, qui sont essentiels à la survie et à l’activité de la bactérie dans la rhizosphère11,14. Cependant, l’effet combiné de la vermiculite et d’A. brasilense sur la croissance du blé et la performance physiologique sous stress Cd n’a pas été étudié de manière systématique.
Le besoin de cette application combinée découle des limites des approches conventionnelles pour gérer la toxicité au CD. Les méthodes traditionnelles, telles que l’utilisation de modifications chimiques, n’offrent souvent que des soulagements temporaires et peuvent avoir des conséquences environnementales négatives. L’utilisation combinée de vermiculite et d’A. brasilense peut offrir une solution plus durable qui non seulement atténue la toxicité au Cd, mais peut aussi améliorer la santé globale du sol et la croissance des plantes, conduisant à une amélioration du rendement, de la physiologie et de la qualité du blé. L’application combinée de la vermiculite et d’A. brasilense sur la croissance du blé et la performance physiologique sous stress Cd n’a pas été étudiée de manière systématique. Pour combler cette lacune de connaissances, la présente expérience sur le pot a testé les hypothèses suivantes : (H₁) L’application de vermiculite réduira l’accumulation de Cd dans les tissus du blé et améliorera la croissance et le rendement ; (H₂) L’inoculation d’A. brasilense améliore les performances physiologiques (taux photosynthétique, conductance stomatale, teneur en chlorophylle) et l’absorption des nutriments ; et (H₃) L’application combinée produira des améliorations plus importantes que chacune des deux amendements, associées à une colonisation bactérienne plus élevée des racines. Cette étude ne prétend pas fournir des lignes directrices directes pour l’application sur le terrain, car ces questions nécessitent des essais sur le terrain au-delà du cadre de cette expérience contrôlée.
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Toutes les directives et législations locales, nationales et internationales ont été respectées concernant l’utilisation des plantes dans cette étude. Les réactifs et l’équipement utilisés sont listés dans le tableau des matériaux.
Disposition expérimentale et matériaux
Une expérience sur le pot a été organisée sur le toit du bâtiment du département de génie agricole de l’Université Khwaja Fareed d’ingénierie et de technologie de l’information, Pakistan (28,42° N, 70,30° E) afin d’étudier le rôle de la vermiculite et de l’Azospirillum brasilense pour atténuer la toxicité du cadmium (Cd) dans la culture de blé durant la saison hivernale 2023–2024. Un design entièrement randomisé (CRD) a été utilisé pour cette expérience, avec trois réplications. Une variété de blé approuvée de « Dilkash-20 » a été obtenue auprès de la ferme de recherche adoptive Rahim Yar Khan, adaptée à la région locale. Un pot de taille 1 x 1 x 1 pied (30,48 cm × 30,48 cm × 30,48 cm) était utilisé, contenant 12 kg de terre. La stérilisation des graines a été réalisée avant l’expérience au laboratoire d’agronomie avec 70 % d’éthanol. Les graines ont été plantées le 10novembre 2023. 8 graines de blé ont été placées dans chaque pot, et 4 plants ont été entretenus au stade de la tournure. La vermiculite était obtenue sur le marché local et appliquée lors de l’ajout de sol à un taux de 150 g/kg de sol. Azospirillum brasilense a été obtenu auprès du Government College University Lahore (GCUL), Lahore, Pakistan. Azospirillum brasilense a été appliqué avec l’inoculation par graine dans la culture de blé selon la procédure standard rapportée par Zaheer et al.17. L’expérience comprenait 9 traitements (T0 = Contrôle (Pas d’amendement du sol, pas de toxicité au CD), T1 = Toxicité au CD 100 mg/kg de sol, T2 = Cd 100 mg/kg de sol + Vermiculite, T3 = Cd 100 mg/kg de sol + A. brasilense,T 4 = Cd 100 mg/kg de sol + Vermiculite + A. brasilense, T5 = Toxicité CD 200 mg/kg de sol, T6 = Cd 200 mg/kg de sol + Vermiculite, T7 = Cd 200 mg/kg de sol + A. brasilense, T8 = Cd 200 mg/kg de sol + Vermiculite + A. brasilense). La température mensuelle moyenne en °C et l’humidité en % sur le site expérimental sont indiquées dans le Tableau 1. Avant le début de l’expérience, une analyse du sol a été réalisée, et les propriétés du sol sont indiquées dans le tableau 2. L’irrigation a été appliquée selon les besoins lors des étapes de serage, de botage, d’anthèse et de remplissage des grains, et les engrais ont également été appliqués uniformément selon les recommandations. L’irrigation était appliquée manuellement à l’aide d’un bocal d’eau et maintenait 70 % d’humidité du sol dans chaque pot, sans stress dû à la sécheresse. Les engrais ont été appliqués conformément aux recommandations du département de l’agriculture (120-80-60 kg NPK ha-1). Les engrais étaient calculés en fonction de la taille de chaque pot. Des doses complètes de P et K et une demi-dose d’N ont été appliquées au moment du semis, et la demi-dose restante de N a été appliquée au stade de tillering. Un échantillonnage destructif pour mesurer la longueur des racines et des pousses (30 jours après le semis) a été réalisé sur des pots séparés destinés à la récolte en début de phase ; Ces pots n’ont pas été utilisés pour les mesures finales du rendement, donc un échantillonnage destructif précoce n’a pas affecté les données de rendement ultérieures. Un calendrier schématique de l’expérience est le suivant : jour 0 (préparation du sol, épis de Cd, mélange de vermiculite, inoculation des graines, semis), jour 10 à 30 (prélèvement racinaire pour qPCR), jour 30 (longueur des racines et des pousses), jour 85 (anthèse : mesures physiologiques) et jour 120 (récolte : paramètres de rendement). Des échantillons de plantes ont été prélevés à trois moments précis. À 10, 20 et 30 jours après le semis (DAS), les racines ont été prélevées dans des pots séparés. À 30 DAS, des pots séparés ont été récoltés de manière destructive pour la longueur des racines et des pousses. À 85 DAS (anthèse), les paramètres physiologiques ont été mesurés de manière non destructive. À 120 DAS, les paramètres finaux de limite d’élasticité ont été enregistrés. Les pots utilisés pour l’échantillonnage destructif précoce (10–30 DAS) n’ont pas été utilisés pour les mesures de rendement.
Le cadmium était appliqué sous forme de chlorure de cadmium (CdCl₂•2,5H₂O, qualité analytique, ≥98 % de pureté). Les quantités requises pour les concentrations cibles de 100 mg Cd kg⁻1 de sol et 200 mg Cd kg⁻1 de sol ont été calculées en fonction du poids sec du sol (12 kg par pot). Le CdCl₂ a été dissous dans 500 mL d’eau déionisée par pot et mélangé soigneusement au sol à l’aide d’un mélangeur mécanique pendant 15 minutes pour assurer une distribution homogène. Après le mélange, le sol à pointes était placé dans des pots doublés de plastique et laissé à s’équilibrer pendant 14 jours à température ambiante (25 ± 2 °C), avec un mélange périodique tous les 3 jours pour stabiliser la spéciation Cd et permettre le vieillissement. L’humidité du sol a été maintenue à 70 % de la capacité du champ pendant la période d’équilibre. Après l’équilibre, des échantillons de sol représentatifs (10 g par pot) ont été prélevés, séchés à l’air, digérés avec HNO₃/HClO₄ (4:1, v/v), puis analysés pour la concentration totale de Cd à l’aide d’un spectrophotomètre d’absorption atomique afin de vérifier les niveaux réels de Cd. Les concentrations mesurées de Cd étaient de 98,4 ± 3,2 mg kg⁻1 pour le traitement à 100 mg kg⁻1 et 197,6 ± 5,1 mg kg⁻1 pour le traitement à 200 mg kg⁻1 , confirmant que les niveaux cibles avaient été atteints. Les propriétés physicochimiques et la teneur en métaux lourds de la vermiculite utilisée dans cette étude sont présentées dans le tableau 3.
| Mois | Température (°C) | Humidité ( %) |
| Novembre 2023 | 28 | 56 |
| Décembre 2023 | 18 | 62 |
| Janvier 2024 | 17 | 63 |
| Février 2024 | 18 | 32 |
| Mars 2024 | 21 | 25 |
| Avril 2024 | 24 | 20 |
Tableau 1 : Température moyenne et humidité du site expérimental durant 2023–2024.
| Paramètres | Valeurs (2023-24) |
| Matière organique | 0.56% |
| pH | 7.42 |
| EC | 227 μS/cm |
| T.S.S. | 0.54% |
| Available-P | 5,21 ppm |
| Available-K | 119 ppm |
| Pourcentage de saturation | 34 |
| Séparations du sol : Sable, limon, argile ( %) | 36%, 40 %, 24 % |
Tableau 2 : Propriétés du sol utilisé pour l’expérience avant le semis de la culture.
| Propriété | Valeur | Métal | Concentration (mg kg⁻¹) |
| Grade | Qualité horticole | Cadmium (Cd) | < 0,01 (en dessous de la limite de détection) |
| Taille des particules | 2-4 mm | Lead (PB) | 2.1 |
| pH (1:5 en H₂O) | 7.2 | Cuivre (Cu) | 1.8 |
| Capacité d’échange cationique (CEC) | 85,4 cmolc kg⁻¹ | Zinc (Zn) | 5.3 |
| Capacité de retenue d’eau (WHC) | 450 % (mois/semaine) | - | - |
| Densité en vrac | 0,12 g cm-3 | - | - |
| Taux de candidature | 150 g kg⁻¹ de sol (15 % en p/w) | - | - |
| Quantité par pot (12 kg de terre) | 1,8 kg | - | - |
Tableau 3 : Propriétés physicochimiques et teneur en métaux lourds de la vermiculite utilisée dans cette étude.
Traits étudiés
Tous les paramètres liés à la croissance des plantes, tels que la hauteur de la plante, la longueur de la pointe, le nombre de piquettes par pointe, les grains par pointe, le poids de 1000 grains et le rendement des grains par plante, ont été enregistrés manuellement à l’aide d’une tige de mètre et d’un bilan de poids en utilisant une procédure standard. Des analyses biochimiques (détermination des activités enzymatiques antioxydantes) et des analyses physiologiques (taux photosynthétique, conductance stomatale, teneur en chlorophylle, fuite d’électrolytes (EL), taux de croissance des cultures (CGR) et indice de surface foliaire (LAI)) ont été réalisées au stade anthèse après 85 jours de semis. La longueur des racines et des pousses a été remarquée après 30 jours de croissance des plants de blé, lorsque les plantes ont été retirées pour maintenir 4 plants dans le pot après 20 jours de semis. Un analyseur de gaz infrarouge (Cl-340) et un posemètre de chlorophylle (CL-1) ont été utilisés pour observer respectivement le taux photosynthétique, la conductance stomatique et la teneur en chlorophylle. La fuite d’électrolytes (EL) a été mesurée selon l’équation rapportée par Mussell etStaples 18 selon la procédure standard rapportée par Zaheer et al.14. EL a été calculée comme : EL ( %) = (CE initiale / CE finale) × 100, où EC initiale est la conductivité électrique mesurée après 24 heures d’incubation à 25 °C, et EC finale est la conductivité mesurée après autoclavage des échantillons à 121 °C pendant 20 minutes.
L’azote organique dissous (COD), le carbone organique dissous (COD) et le carbone organique du sol (SOC) ont été mesurés selon la procédurestandard 19. LAI et CGR ont été détectés selon la procédure20. L’absorption de N, P et K par l’usine de blé a été observée, comme indiqué dans la procédure décrite par le rapportprécédent 21.
Analyse statistique
Toutes les données de cette recherche ont été collectées à partir de trois réplications, compilées et moyennées. Les données ont été analysées statistiquement à l’aide de Statistique 8.1 et Microsoft Excel 2010. Les données ont été analysées à l’aide d’ANOVA unidirectionnelle, suivie du test de Fisher de la moindre différence significative (LSD) à p ≤ 0,05 pour la séparation moyenne. Différentes lettres avec les données/résultats montrent la différence statistique entre chaque traitement.
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La hauteur des plantes (HP) a été significativement influencée par les amendements du sol dans tous les traitements étudiés (Tableau 4). Le pH le plus élevé a été observé dans le T0 (199,44 cm), lorsqu’il n’y avait pas d’amendement du sol ni de toxicité au Cd, suivi du T4 (98,44 cm) lorsque la toxicité au CD était de 100 mg/kg de sol avec l’application de vermiculite et d’A. brasilense. Le pH le plus bas (82,37 cm) a été observé chez T5 lorsqu’il y avait 200 mg/...
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La toxicité du CD a considérablement réduit tous les paramètres mesurés de croissance et de rendement dans leblé 22. Cette suppression de la croissance peut être attribuée au stress oxydatif induit par le Cd, qui perturbe la division cellulaire et l’allongement, altère l’absorption des nutriments et réduit l’efficacité photosynthétique. De même, le nombre de spilets par épine, de grains par épine, de poids des grains et de rendement par plante ont considérablement...
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Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts concurrents. Lors de la préparation de ce manuscrit, l’auteur(s) a utilisé ChatGPT et Grammarly pour améliorer la langue technique et anglaise de l’article. Après avoir utilisé cet outil/service, le(s) auteur(s) ont examiné et édité le contenu selon les besoins et assument l’entière responsabilité du contenu de la publication.
Les auteurs reconnaissent le soutien financier fourni par le Doyennet de la Recherche Scientifique, Vice-Présidence aux Études Supérieures et à la Recherche Scientifique, Université King Faisal, Arabie Saoudite, pour cette recherche (Subvention n° KFU263053).
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Spectrophotomètre d'absorption atomique (AAS) | PerkinElmer, USA | AAnalyst 800 | Vérification de la concentration de Cd dans le sol |
| Azospirillum brasilense | Government College University Lahore (GCUL), Pakistan | Souche disponible dans la collection de cultures GCUL | Inoculation des graines |
| Chlorure de cadmium (CdCl2·2.5H2O) | Merck, Allemagne | Numéro CAS 7790-78-5 | Induction du stress Cd |
| Compteur de chlorophylle | Non spécifié | CL-1 | Mesure de la teneur en chlorophylle |
| Kit DNeasy PowerSoil | QIAGEN, Hilden, Allemagne | No Cat. 12888-100 | Extraction de l'ADN à partir des racines |
| Excel 2010 | Microsoft, USA | Version 14.0 | Compilation des données et statistiques de base |
| Analyseur de gaz infrarouge (IRGA) | Non spécifié | CI-340 | Taux de photosynthèse et conductance stomatique |
| Primers spécifiques nifH | Synthèse personnalisée | Séquences fournies dans le texte | Amplification qPCR |
| Ninhydrine | Sigma-Aldrich, USA | Numéro CAS 485-47-2 | Détermination de la teneur en proline |
| Système de PCR en temps réel QuantStudio 5 | Applied Biosystems, USA | QuantStudio 5 | Analyse qPCR |
| Spectrophotomètre | Non spécifié | Non spécifié | Mesure de la teneur en proline |
| Statistik 8.1 | Analytical Software, USA | Version 8.1 | Analyse statistique (ANOVA, LSD) |
| Mélange SYBR Green Master | Applied Biosystems, USA | No Cat. 4309155 | Détection qPCR |
| Vermiculite (qualité horticole) | Marché local, Rahim Yar Khan, Pakistan | Non applicable | Amendement du sol |
| Variété de blé «Dilkash-20» | Ferme de recherche adaptative, Rahim Yar Khan, Pakistan | Variété locale approuvée | Matériel végétal |