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Article de recherche

Pharmacologie en réseau et recherche expérimentale du β-sitostérol dans le traitement de la maladie pulmonaire obstructive chronique via le récepteur glucocorticoïde

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DOI :

10.3791/72018

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7 août 2026

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1Bishan Hospital of Chongqing Medical University, Bishan Hospital of Chongqing, 2Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Geriatrics Department, The Second Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine, 4Department of Traditional Chinese Medicine, Nanjing Yuhua Hospital

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

β-sitosterol a soulagé la MPOC et potentialisé l’efficacité de la dexaméthasone, le récepteur glucocorticoïde médiant cet effet. De plus, le β-sitosterol a réduit l’inflammation, le stress oxydatif et la sénescence cellulaire chez les cellules épithéliales bronchées stimulées par l’ECS et chez les souris BPCO induite par la fumée de cigarette.

Résumé

La maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC) est un trouble respiratoire répandu caractérisé par une inflammation persistante, un stress oxydatif et un déclin progressif de la fonction pulmonaire. Le potentiel thérapeutique du β-sitostérol dans la MPOC reste incertain. Cette étude visait à étudier les effets protecteurs du β-sitostérol contre la MPOC et à élucider son mécanisme sous-jacent. Le dépistage de la base de données a identifié le récepteur glucocorticoïde (GR) comme une cible potentielle du β-sitosterol. Un modèle de souris pour la MPOC induit par la fumée de cigarette et un modèle de cellules BEAS-2B stimulé par extrait de fumée de cigarette (CSE). La fonction pulmonaire, les marqueurs liés aux lésions pulmonaires, l’inflammation, le stress oxydatif et la sénescence cellulaire ont été évalués à l’aide de tests (RT-qPCR), d’analyses fluorescentes DFH-DA et de kits de détection de la sénescence. Les effets du β-sitotérol seul ou en combinaison avec la dexaméthasone (DEX) ont également été évalués. β-sitosterol a significativement amélioré la fonction pulmonaire, a normalisé les marqueurs liés aux lésions pulmonaires et a atténué l’inflammation, le stress oxydatif et la sénescence cellulaire chez les cellules BEAS-2B stimulées par le CSE et chez les souris exposées à la fumée de cigarette. Ces effets protecteurs s’accompagnaient d’une expression accrue de la RG. De plus, le β-sitotérol a amélioré la réactivité au DEX, et un traitement combiné avec β-sitosterol et DEX a produit des améliorations plus importantes de la fonction pulmonaire, des marqueurs de lésions pulmonaires, de l’inflammation, des niveaux d’espèces réactives de l’oxygène et de la sénescence cellulaire que le traitement du DEX seul. Collectivement, ces résultats suggèrent que le β-sitosterol atténue les changements pathologiques associés à la BPCO, au moins en partie, en augmentant l’expression de la GR et en renforçant l’efficacité thérapeutique de la DEX, soulignant son potentiel comme stratégie adjuvante pour le traitement de la BPCO.

Introduction

La maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC) est une maladie respiratoire progressive caractérisée par une inflammation persistante des voies respiratoires, des lésions alvéolaires et une obstruction irréversible du flux d’air qui altère la fonction respiratoire et réduit la qualitéde vie 1. Sa prévalence augmente significativement avec l’âge, et le risque pour les personnes âgées de soixante-cinq ans et plus est environ cinq fois supérieur à celui des moins dequarante-vingt-deux ans. Cette tendance démographique est associée à une augmentation de l’incidence des maladies, de la mortalité et du handicap3. Les projections épidémiologiques indiquent qu’en 2030, la BPCO pourrait devenir la quatrième cause de mortalité mondiale, représentant environ 5 % de tous les décès(4,5,6). À l’heure actuelle, les facteurs de risque identifiés incluent la susceptibilité génétique, la dysplasie pulmonaire, l’exposition aux particules, la bronchite chronique et les infectionsrespiratoires 7.

Parmi les facteurs de risque, la fumée de cigarette est le facteur pathogène le plus important de laBPCO 8. Il contient des milliers de substances chimiques qui peuvent causer des dommages à l’épithélium bronchique, favoriser l’infiltration des cellules inflammatoires et conduire à la remodelation du tissupulmonaire 9. Une exposition prolongée peut induire des lésions épithéliales persistantes et irréversibles, favoriser la libération d’un grand nombre de chimiokines pro-inflammatoires, augmenter significativement la production (ROS) et induire l’apoptose cellulaire10. De nombreuses études ont montré que les niveaux accrus de chimiokines pro-inflammatoires telles que l’interleukine-8 (IL-8) et le facteur de nécrose tumorale α (TNF-α), ainsi que la production excessive d’ROS et la sénescence cellulaire, sont étroitement liées à la gravité de la MPOC11,12. Cela souligne la nécessité d’agents capables de moduler efficacement et en toute sécurité ces facteurs pathogènes clés pour exercer des effets protecteurs et thérapeutiques dans la MPOC.

Les phytostérols sont des composés bioactifs naturels omniprésents dans les membranes cellulaires végétales. Parmi eux, le β-sitosterol est le plus abondant et largement distribué dans les aliments d’origine végétale riches en lipides tels que les légumes, les noix, les graines etl’huile d’olive 13,14,15,16. Des études ont confirmé que l’administration de β-sitotérol à des doses allant jusqu’à 1000 mg/kg chez les rats et les souris n’est pas associée à la cytotoxicité ni à lagénotoxique 17. De plus, des recherches ont montré que le β-sitostérol présente des propriétés antioxydantes grâce à ses effets sur les enzymes antioxydantes et les récepteurs humains à l’œstrogène18.

β-sitostérol présente un large éventail d’activités pharmacologiques, incluant des effetsanti-inflammatoires 19,antipyrétiques 20, analgésiques21 etantidiabétiques 13. Il a également montré un potentiel thérapeutique dans divers modèles pathologiques, tels que la colite et l’inflammationintestinale 22, et possède des propriétés anti-athérosclérosclérosiques23 etimmunomodulatrices 24. De plus, il présente un profil de sécurité favorable. Compte tenu de ces caractéristiques, le β-sitosterol a suscité un intérêt considérable en tant que candidat médicamenteux potentiel. Cependant, son rôle précis et ses mécanismes sous-jacents dans la BPCO restent largement incertains.

Par conséquent, la présente étude visait à étudier les effets thérapeutiques potentiels et les mécanismes sous-jacents du β-sitosterol dans la MPOC. Plus précisément, un modèle de lésion des cellules BEAS-2B induit par l’extrait de fumée de cigarette (CSE) a été utilisé pour évaluer si le β-sitosterol pouvait atténuer efficacement les dommages cellulaires médiés par le CSE, identifiant ainsi une nouvelle molécule candidate pour les stratégies thérapeutiques de la MPOC.

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Protocole

L’étude a été menée conformément aux directives de Pharmacologie et Toxicologie Cliniques de Base et de Toxicologie pour les études expérimentaleset cliniques 25. Tous les protocoles expérimentaux sur les animaux ont été approuvés par le Comité d’éthique animale du Second Hôpital Affilié de la Faculté de Médecine de l’Université du Zhejiang (Approbation n° 20230102), et toutes les expériences ont été réalisées conformément aux directives du Comité d’éthique animale. L’étude a été menée conformément aux directives de l’ARRIVE.

Dépistage des composants clés et cibles via la pharmacologie en réseau

Composantes actives de Fritillaria cirrhosa D. Don, Lonicera japonica Thunb., Glehnia littoralis F. Schmidt ex Miq., et Adenophora stricta Miq. ont été consultés depuis la base de données des systèmes de pharmacologie de médecine traditionnelle chinoise (TCMSP ; consulté le 12 mars 2024). Les composés candidats ont été dépistés selon les critères suivants de l’ADME : biodisponibilité orale (OB) ≥ 30 %, ressemblance du médicament (DL) ≥ 0,18, et perméabilité au Caco-2 ≥ −0,425. Les composés répondant aux trois critères ont été conservés comme principes actifs candidats pour des analyses ultérieures.

La structure canonique SMILES, le système simplifié de saisie de lignes moléculaires d’entrée (SMILES) du β-sitosterol a été obtenue sur PubChem (consulté le 18 mars 2024) et importée dans SwissTargetPrediction (consulté le 21 mars 2024) pour la prédiction de cibles. Homo sapiens a été choisi comme espèce ciblée. Les cibles potentielles ont été prédites sur la base de la similarité structurelle 2D et 3D entre β-sitosterol et les ligands connus dans la base de données. Les cibles prédites avec une probabilité supérieure à 0 ont été conservées, et les entrées en double ont été supprimées.

Les gènes associés à la BPCO ont été extraits de la Therapeutic Target Database (TTD ; consultée le 25 mars 2024) et de la Comparative Toxicogenomics Database (CTD ; consultée le 28 mars 2024) en utilisant le mot-clé « chronic obstructive pulmonary disease ». Après la suppression des gènes dupliqués, les gènes associés à la MPOC ont été croisés avec les cibles β-sitosterol prévues afin d’identifier des cibles candidates potentiellement impliquées dans les effets thérapeutiques du β-sitosterol contre la BPCO.

Amarrage moléculaire du β-sitosterol et de la RG

La structure tridimensionnelle du β-sitotérol au format SDF a été extraite de la base de données PubChem (consulté le 2 juin 2026), tandis que la structure cristalline du récepteur glucocorticoïde (GR) a été obtenue auprès de la Research Collaboratory for Structural Bioinformatics Protein Data Bank (RCSB PDB ; consulté le 3 juin 2026). Après la préparation standard des structures du ligand et des récepteurs, l’amarrage moléculaire a été réalisé via la plateforme en ligne CB-Dock2 (consulté le 3 juin 2026). Les fichiers de ligands et de récepteurs préparés ont été téléchargés sur la plateforme, et les calculs d’amarrage ont été effectués en utilisant les paramètres par défaut.

Analyse d’enrichissement fonctionnel de l’ontologie génique (GO) et Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)

Tous les gènes cibles prédits du β-sitosterol ont été soumis à des analyses d’enrichissement fonctionnel GO et d’enrichissement des voies KEGG. Les résultats d’enrichissement, incluant des processus biologiques significativement enrichis, des composants cellulaires, des fonctions moléculaires et des voies de signalisation, ont été triés et stockés dans le Fichier Supplémentaire 1 pour une analyse bioinformatique ultérieure.

Modélisation animale et regroupement

La taille de l’échantillon a été fixée à six animaux par groupe sur la base d’une étude antérieure ayant réalisé une analyse de puissance a priori à l’aide du logiciel G*Power (α = 0,05, puissance = 0,80) et démontré que n = 6 était suffisant pour détecter des différences biologiquement pertinentes dans des conditions expérimentalescomparables 26. Les mâles C57BL/6 souris âgées de 6 à 8 semaines (20 ± 2 g) ont été répartis aléatoirement dans cinq groupes : groupe témoin, groupe modèle BPCO, groupe MPOC + dexaméthasone (DEX), groupe BPOC + β-sitosterol, et groupe MPOC + DEX + β-sitotérol. Les souris étaient hébergées dans des conditions de laboratoire standard (25 °C, cycle clair/obscurité de 12 heures) avec un accès libre à la nourriture et à l’eau standard, et ont été laissées à s’acclimater pendant une semaine avant l’expérimentation.

Pour l’établissement du modèle BPCO, les souris ont été placées dans une chambre d’exposition à la fumée de cigarette intégrale (63 cm × 55 cm × 45 cm) et exposées à la fumée de cigarette traditionnelle pendant 12 semaines. Chaque cigarette contenait 10 mg de goudron, 0,9 mg de nicotine et 10 mg de monoxyde de carbone. L’exposition à la fumée a été réalisée deux fois par jour (5 jours par semaine) à 9h30 et à 15h00, avec de la fumée générée par 18 cigarettes injectées dans la chambre pendant 90 minutes par session27.

Pour évaluer les effets thérapeutiques des interventions, l’administration de médicaments a été initiée après 8 semaines d’exposition à la fumée de cigarette et s’est poursuivie pendant les 4 semaines restantes. À partir de la 9e semaine, les souris des groupes traités respectifs ont reçu quotidiennement une administration intragastrique de DEX (1 mg/kg)28 ou de β-sitosterol (50 mg/kg)29,30 1 h avant l’exposition à la fumée de cigarette. Des études pharmacocinétiques antérieures ont rapporté une biodisponibilité orale d’environ 4 % pour le β-sitotérol chezles rongeurs 31. De plus, plusieurs études sur la souris ont utilisé des doses allant de 20 à 50 mg/kg 32. Par conséquent, une dose de 50 mg/kg a été choisie afin d’assurer une exposition systémique adéquate tout en restant dans la fourchette couramment utilisée dans les études précliniques.

Les souris du groupe témoin ont été exposées à l’air filtré de la pièce, tandis que celles des groupes modèle et traité ont reçu un volume équivalent de solution physiologique normale en véhicule. À la fin de la période expérimentale, les souris étaient profondément anesthésiées avec de l’isoflurane jusqu’à la perte du réflexe pédal, puis euthanasiées par exsanguination via la collecte sanguine de l’aorte abdominale. La cavité thoracique a été immédiatement ouverte, et les tissus pulmonaires bilatéraux intacts ont été soigneusement excisés, rincés avec du sérum physiologique phosphaté (PBS) glacé, puis placés sur la glace. Pour la collecte du liquide de lavage bronchoalvéolaire (BALF), la trachée a été canulée et lavée avec du PBS froid stérile, qui a été doucement instillé puis retiré à plusieurs reprises pour collecter le liquide de lavage. Les tissus pulmonaires et les échantillons de BALF ont été conservés sur la glace puis traités pour des analyses en aval.

Culture cellulaire BEAS-2B

Les cellules épithéliales bronquiques humaines BEAS-2B ont été maintenues dans le Modified Eagle Medium/F12 (DMEM/F12) de Dulbecco, contenant 10 % de sérum bovin fœtal (FBS) et 1 % de pénicilline/streptomycine sous 5 % de CO₂ à 37 °C.

Préparation de l’ESC et exposition aux cellules BEAS-2B

Les cellules BEAS-2B ont été lavées avec du sérum physiologique tamponné phosphate et ensemées en plaques à 24 puits en triple liaison à une densité de 5 × 104 cellules par puits. Après 12 heures de culture, les cellules ont atteint environ 60 % de confluence et ont ensuite été exposées à l’EEC. Le CSE a été préparé de manière fraîche comme décrit précédemment, avec des modificationsmineures 33. Pendant un court moment, une cigarette commerciale non filtrée était continuellement brûlée, et la fumée principale était projetée en bulle dans 10 mL de milieu sans sérum à l’aide d’une pompe à vide à un débit constant de 1,05 L/min (environ −11 kPa de pression négative) pendant environ 5 minutes jusqu’à ce que la cigarette soit complètement brûlée. La solution obtenue a d’abord été soumise à une préfiltration pour éliminer les grosses particules impures, puis stérilisée via un filtre microporeux stérile de 0,22 μm pour éliminer les particules résiduelles ; la solution d’origine résultante a été définie comme 100 % CSE. Tout le CSE fraîchement préparé était utilisé pour le traitement cellulaire immédiatement après filtration sans stockage. Les cellules ont été stimulées avec un milieu contenant 2,5 % de CSE. Après 24 heures de traitement de l’ECS, les surnadants de culture ont été collectés et stockés à -40 °C pour une analyseultérieure 34.

Réaction en chaîne quantitative en temps réel par polymérase (RT-qPCR)

L’ARN total a été extrait des cellules BEAS-2B à l’aide d’un kit d’extraction totale d’ARN et transcrit en ADN c à l’aide d’un kit de transcription inverse selon les instructions du fabricant. La RT-qPCR a ensuite été réalisée à l’aide d’un système de détection PCR en temps réel et d’un mix maître qPCR basé sur SYBR Green. Toutes les expériences RT-qPCR ont été menées avec trois réplicés biologiques et trois réplications techniques par échantillon afin d’assurer la fiabilité des données.

Chaque réaction qPCR a été effectuée sur un volume total de 20 μL, contenant 10 μL de mélange maître SYBR Green qPCR, 0,4 μL d’amorce directe, 0,4 μL d’amorce inverse, 2 μL de gabarit d’ADNc dilué et 7,2 μL d’eau sans RNase. Les conditions d’amplification étaient les suivantes : dénaturation initiale à 95 °C pendant 3 minutes, suivie de 40 cycles de dénaturation à 95 °C pendant 10 s et de recuit/extension à 60 °C pendant 30 s. Les niveaux relatifs d’expression génique ont été calculés à l’aide de la méthode 2−ΔΔCt, le GAPDH servant de gène de référence interne. Les séquences d’amorces utilisées dans cette étude sont mentionnées dans le Tableau Supplémentaire 1.

Analyse des espèces réactives intracellulaires de l’oxygène (ROS)

La production intracellulaire de ROS dans les cellules BEAS-2B a été évaluée à l’aide du diacétate fluorogénique de sonde fluorogénique 2′,7′-dichlorodihydroescéine (DCFH-DA) et analysée par cytométrie en flux. Lors de l’acquisition cytométrique en écoulement, une stratégie standard de diffusion directe (FSC) et de diffusion latérale (SSC) a été appliquée pour exclure les débris cellulaires et sélectionner des cellules uniques intactes. Un total de 10 000 événements cellulaires valides ont été obtenus pour chaque échantillon. Les longueurs d’onde d’excitation et d’émission ont été réglées respectivement à 488 nm et 525 nm. Les données cytométriques en flux ont ensuite été analysées pour quantifier l’intensité de fluorescence ROS intracellulaire.

Détermination du niveau de malondiadéhyde (MDA)

La teneur en MDA intracellulaire a été mesurée à l’aide d’un kit de test de peroxydation lipidique selon les instructions du fabricant. En résumé, des cellules BEAS-2B traitées ont été prélevées et lysées, puis centrifugées à basse température pour collecter le surnageant. La réaction colorimétrique à l’acide thiobarbiturique (TBA) a ensuite été réalisée, et l’absorption a été mesurée à 532 nm à l’aide d’un lecteur de microplaques. Les niveaux relatifs de MDA ont été calculés selon la courbe standard.

Évaluation de la sénescence cellulaire

La sénescence cellulaire a été évaluée à l’aide d’un test de détection de sénescence basé sur l’activité β-galactosidase (SA-β-gal) associée à la sénescence. Les cellules SA-β-gal-positives ont été quantifiées par cytométrie en flux. Parallèlement, les niveaux d’expression de l’ARNm des marqueurs associés à la sénescence p53 et p21 ont été déterminés par RT-qPCR.

Essai de prolifération cellulaire

La prolifération cellulaire a été évaluée à l’aide d’un kit de test de viabilité cellulaire colorimétrique. L’absorbance a été mesurée à 450 nm à l’aide d’un lecteur de microplaques.

Analyse de démontage GR

La transfection cellulaire a été réalisée à l’aide d’un réactif de transfection à base de lipides. Les oligonucléotides suivants ont été transfectés : l’ARN interférant petit (si-GR) ciblant les récepteurs glucocorticoïdes et le petit ARN interférant témoins négatif (si-NC). Les séquences siRNA candidates ciblant la RG ont été conçues à l’aide de la plateforme de bioinformatique en ligne siDirect 2.0. Après la transfection, les cellules ont été cultivées pendant 48 heures, et tous les siARN ont été utilisés à une concentration finale de 50 nM. L’efficacité du knockdown a été vérifiée en mesurant l’expression de l’ARNm de la GR à l’aide de RT-qPCR.

Les groupes témoins des véhicules ont été inclus à la fois dans les expériences de traitement au β-sitosterol et de transfection. Pour une intervention β-sitosterol, les cellules traitées uniquement avec le solvant du véhicule servaient de groupe témoin du véhicule (noté CSE+0). L’analyse statistique a confirmé qu’aucune différence significative n’a été observée entre les groupes témoins du véhicule et témoins vierge.

Analyse statistique

Tous les résultats quantitatifs ont été exprimés en moyenne ± écart-type de trois expériences in vitro biologiquement indépendantes. Les analyses statistiques ont été réalisées à l’aide d’un logiciel d’analyse statistique. Le test de Shapiro–Wilk a été utilisé pour examiner la normalité de la distribution des ensembles de données avant les tests statistiques ; La correction post-hoc de Bonferroni a été adoptée pour ajuster les valeurs de P lors des comparaisons multiples après analyse de la variance (ANOVA). Les comparaisons entre deux groupes ont été évaluées par un test t de Student non apparié, tandis qu’une ANOVA unidirectionnelle ou bidirectionnelle a été utilisée pour les comparaisons multi-groupes. Une valeur p ≤ 0,05 était considérée comme statistiquement significative.

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Résultats

β-sitostérol était un produit naturel potentiel pour traiter la MPOC

En raison des effets curatifs rapportés de Fritillaria cirrhosa D. Don, fleur séchée de Lonicera japonica Thunb., racine séchée de Glehnia littoralis F. Schmidt ex Miq., et Adenophora stricta Miq. dans le traitement des maladiespulmonaires 35,36,37,38, cette étude a utilisé la base de données TCMSP pour identifier sy...

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Discussion

La BPCO impose un fardeau mondial important en matière de maladie et reste un défi majeur pour la santémondiale 1. La prise en charge actuelle de la MPOC englobe à la fois des interventions pharmacologiques et nonpharmacologiques 42. Parmi les traitements pharmacologiques, les glucocorticostéroïdes (GC) sont largement utilisés dans les troubles inflammatoires chroniques. Ils agissent en se liant à la GR et en recrutant la déacétylase de l’h...

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Déclarations de divulgation

L(s) auteur(s) déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts.

Remerciements

Les auteurs n’ont aucun remerciement.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
BEAS-2B human bronchial epithelial cellsSunnCell, ChinaSC-0218Ligne cellulaire d'épithélium bronchique humain pour l'étude in vitro
C57BL/6 miceVital River Laboratories, China213Modèle animal pour expérience in vivo de BPCO
CB-DOCK2Chinahttps://cadd.labshare.cn/cb-dock2/php/index.phppour la simulation de dock moléculaire entre ligand et protéine récepteur
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)Beyotime Biotechnology, ChinaC0038Détection de la viabilité et de la prolifération cellulaire
CellEvent™ Senescence Green Detection KitThermo Fisher, USAC10851Détection de la sénescence cellulaire
CigarettesHongta, ChinaNot providedCigarette utilisée pour l'exposition à la fumée et la préparation du CSE
CTDUSAhttps://ctdbase.org/pour récupérer les gènes liés à la BPCO
DCFH-DA fluorescent probeSigma-Aldrich, USAD6883-50MGDétection du niveau de ROS intracellulaire
Dexamethasone (DEX)Yeasen, China40323ES03Glucocorticoïde pour l'intervention combinée
DMEM/F12 mediumGibco, USA11330032Milieu de base pour la culture cellulaire BEAS-2B
Fetal bovine serum (FBS)Gibco, USA10270106Supplément pour le milieu de culture cellulaire
GraphPad Prism GraphPad Software, USA9.3.1Analyse statistique des données et dessin de graphiques
IsofluraneRWD Life Science, ChinaR510-22-10Anesthésique inhalé pour l'euthanasie animale
Lipid Peroxidation MDA Assay KitBeyotime Biotechnology, ChinaS0131SDétection de la teneur en malondialdehyde (MDA) intracellulaire
Lipofectamine 2000Thermo Fisher, USA11668030Réactif de transfection pour la livraison de siRNA
Multimode microplate readerThermo Fisher, USAVL0000D0Détection de la valeur d'absorbance et de fluorescence
Navios EX Flow CytometerBeckman Coulter, USAB80912Analyse des ROS et des cellules sénescentes
Penicillin/streptomycinHyClone, USASV30010Antibiotiques pour prévenir la contamination bactérienne
Power SYBR™ Green Master MixThermo Fisher, USA4367659Amplification PCR quantitative fluorescente
PrimeScript™ RT reagent KitTakara, JapanRR037QTranscription inverse pour la synthèse de l'ADNc
PubChem databaseUSAhttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/pour acquérir la séquence SMILES canonique et télécharger les informations structurelles 3D SDF du bêta-sitostérol
QuantStudio Dx PCR InstrumentThermo Fisher, USA4479889Détection RT-qPCR en temps réel
RCSB PDBUSAhttps://www.rcsb.org/pour obtenir le fichier de structure 3D du cristal GR
RNA/Protein Isolation KitBeyotime Biotechnology, ChinaR0018SExtraction d'ARN total à partir de cellules et de tissus pulmonaires
si-GRDesigned in silico via siDirect 2.1Custom synthesisGuide: 5′-UUUUGAAUGGGUGUAGCAA-3′; Passager: 5′-GCUUUCACCCAUUCAAAAGG-3′, knockdown pour GR
si-NCThermo Fisher, USA4390843utilisé comme contrôle de transfection négatif pour les tests cellulaires et in vivo
SwissTargetPrediction databaseSwitzerlandhttp://swisstargetprediction.ch/pour la prédiction in silico des cibles protéiques potentiellement liées aux médicaments
TCMSP databaseChinahttps://www.tcmsp-e.com/pour le criblage des ingrédients à base de plantes et la prédiction des cibles
TTDSingaporehttps://db.idrblab.net/ttd/pour la collecte de gènes de maladie associés à la BPCO validés
Whole-body smoke exposure chamberTeague Enterprise, USATE-2Établissement d'un modèle de BPCO induite par la fumée de cigarette
β-sitosterolChemicalBook, China83-46-5Phytostérol actif pour le traitement médicamenteux

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