Effets de l’acupuncture cuchevele de type mouvement sur la microstructure de la capsule externe et l’excitabilité du réflexe spinal dans un modèle de rat de spasticité post-AVC

Résumé

Ce protocole décrit l’acupuncture du cuir chevelu de type mouvement dans un modèle rat de spasticité post-AVC et démontre son évaluation à l’aide d’imagerie comportementale, par résonance magnétique, d’évaluations histologiques et électrophysiologiques pour étudier les modifications de la microstructure de la capsule externe et l’excitabilité du réflexe spinal.

Résumé

La spasticité post-AVC (PSS) altère gravement la fonction motrice et la qualité de vie après un AVC. La perturbation de la voie cortico-réticulospinale et l’inhibition descendante supraspinale altérée sont considérées comme des mécanismes pathologiques importants ; cependant, les mécanismes neuronaux et microstructurels sous-jacents aux effets thérapeutiques de l’acupuncture cuveleuse de type mouvement (MSSA) restent incomplètement compris. Cette étude visait à étudier les effets de la MSSA sur le PSS en utilisant une évaluation multimodale intégrant neuroimagerie, électrophysiologie et histologie dans un modèle de rat d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne. L’imagerie par résonance magnétique pondérée en T2 a été réalisée pour quantifier le volume de l’infarctus cérébral, et l’imagerie par tenseur de diffusion a été utilisée pour évaluer l’intégrité microstructurale de la substance blanche de la capsule externe. La coloration Luxol Fast Blue (LFB) a évalué l’intégrité de la myéline dans la capsule externe, tandis que les enregistrements du réflexe H ont évalué l’excitabilité du réflexe spinal. Des analyses de corrélation ont été réalisées pour examiner les relations entre le volume de l’infarctus, la microstructure de la substance blanche, l’excitabilité du réflexe spinal et la gravité de la spasticité. Le MSSA a réduit le volume de l’infarctus cérébral, atténué les dommages microstructurels de la capsule externe et atténué la démyélinisation. De plus, le MSSA a amélioré les paramètres anormaux du réflexe H, normalisé l’excitabilité du réflexe spinal et réduit la spasticité. Les analyses de corrélation ont montré que les infarctus plus grands étaient associés à une lésion plus importante de la capsule externe, tandis qu’une intégrité mieux préservée de la substance blanche était associée à une meilleure régulation du réflexe spinal et à une spasticité moins sévère. Ces résultats suggèrent que la MSSA pourrait atténuer le PSS en réduisant les lésions cérébrales ischémiques, en préservant l’intégrité microstructurale de la capsule externe et en améliorant la fonction inhibitrice descendante associée à la voie cortico-réticulospinale, fournissant des preuves précliniques soutenant son application thérapeutique.

Introduction

La spasticité post-AVC (PSS) est une séquelle fréquente et invalidante de l’AVC ischémique, définie cliniquement par des augmentations dépendantes de la vitesse et de la longueur du tonus musculaire. Cette condition conduit souvent à une posture anormale des membres et à des mouvements dysfonctionnels, compromettant gravement l’autonomie motrice et la qualité de vie des patients tout en imposant d’importantes charges économiques et pour les aidants dans le monde^{entier 1,2}. En tant que manifestation typique du syndrome du motoneurone supérieur, la pathogenèse du PSS est principalement attribuée à une hyperexcitabilité exagérée des réflexes d’étirement spinal. Des études neuroanatomiques et neurophysiologiques accumulées ont démontré que la perte de la modulation inhibitrice descendante du système extrapyramidal vers les circuits réflexes spinaux est un mécanisme pathologique clé sous-jacant à l’initiation et à la progression du PSS, la voie cortico-réticulospinale servant de circuit neural principal médiant ce contrôle régulateur ^{descendant 3,4,5}.

La technique du needling est un déterminant clé de l’efficacité de l’acupuncture et occupe une place centrale dans la pratique clinique de l’acupuncture. L’acupuncture du cuir chevelu de type mouvement (MSSA) est une technique de needling distinctive, spécifiquement développée pour l’intervention PSS, qui combine l’acupuncture du cuir chevelu avec un exercice simultané actif ou passif des membres³. De nombreux essais cliniques ont montré que la MSSA produit de meilleurs résultats comparés à l’acupuncture du cuir chevelu seule ou à la rééducation physique seule pour réduire la gravité de la spasticité, restaurer la fonction locomotrice et améliorer les activités quotidiennes chez les survivants^d’AVC 6,7,8,9. Nos études animales précédentes ont également démontré que la MSSA exerce des effets antispastiques plus prononcés que l’acupuncture conventionnelle du cuir chevelu dans les modèles rats de PSS. Sur le plan mécanistique, ces effets thérapeutiques ont été associés à une amélioration de la perfusion cérébrale dans la pénombre ischémique, à une réduction de l’excitabilité du réflexe d’étirement spinal et à une expression accrue du cotransporteur de chlorure de potassium 2 (KCC2) dans les motoneurones antérieurs de la corne spinale. Cette modulation moléculaire pourrait renforcer davantage la transmission inhibitrice de l’acide γ-aminobutyrique (GABA)ergique, contribuant ainsi au soulagement de la spasticité^10,11.

Les investigations mécanistiques existantes sur la MSSA restent limitées, aucune étude antérieure n’examinant spécifiquement comment la substance blanche intracérébrale en amont dans les voies descendantes extrapyramidales contribue au PSS. La capsule externe forme un segment critique de la substance blanche de la voie cortico-réticulospinale ; Il contient des fibres cortico-tegmentales qui transmettent les signaux corticales à la formation réticulaire du tronc cérébral, contribuant ainsi au contrôle inhibiteur supraspinal des circuits du réflexe^{spinal 12,13}. Conformément à ce rôle anatomique, de multiples études de cartographie des lésions et symptômes basées sur les voxels ont montré que des lésions de la capsule externe sont associées à une spasticité des membres supérieurs et inférieurs après un^AVC 12,13,14. Ces observations anatomiques et cliniques soutiennent la sélection de la capsule externe comme région principale d’intérêt (ROI). À ce jour, aucune preuve in vivo n’a démontré si la MSSA préserve l’intégrité microstructurale de la capsule externe ou si de telles altérations sont associées à des modifications de l’excitabilité du réflexe spinal. Les évaluations cliniques basées sur des évaluations comportementales, l’imagerie par résonance magnétique conventionnelle (IRM) et les tests électrophysiologiques ne permettent que des analyses corrélationnelles et peuvent être influencées par l’hétérogénéité du patient, la durée de la maladie et d’autres facteurs de confusion clinique. En revanche, les modèles standardisés de PSS chez les rats permettent un contrôle rigoureux des variables expérimentales et des protocoles d’intervention uniformes, offrant ainsi une plateforme complémentaire pour l’investigation mécanistique.

En se concentrant sur la microstructure de la substance blanche cérébrale et la fonction neurophysiologique, cette étude a intégré des approches multimodales, incluant l’imagerie pondérée T2 (T2WI), l’imagerie tensorielle de diffusion (DTI), l’enregistrement électrophysiologique du réflexe H, la coloration ciblée Luxol Fast Blue (LFB) de la capsule externe, ainsi que des évaluations comportementales. En établissant un cadre intégré de corrélation structure-fonction-comportement, cette étude visait à étudier les relations entre l’infarctus cérébral, la microstructure de la capsule externe, l’excitabilité du réflexe spinal et la spasticité après un traitement MSSA dans un modèle rat de PSS. Les résultats visent à fournir des preuves précliniques soutenant l’association entre l’intégrité préservée de la capsule externe et la réduction de l’hyperexcitabilité du réflexe spinal après la MSSA, tout en fournissant une base théorique pour l’application translationnelle de la MSSA dans la rééducation du PSS.

Protocole

Quarante rats adultes mâles Sprague–Dawley (SD) sans agents pathogènes spécifiques (SPF), pesant entre 240 et 280 g, ont été achetés auprès de Beijing Vital River Laboratory Animal Technology [Licence n° : SCXK (Jing) 2021-0011]. Tous les rats étaient hébergés au Centre des animaux de laboratoire de l’Université de médecine chinoise de Pékin dans des conditions contrôlées, avec une température ambiante de 23°C ± 1°C, une humidité relative de 50 % ± 5 %, et un cycle de 12 heures de lumière et 12 heures d’obscurité, avec un accès libre à la nourriture et à l’eau. Les rats ont été acclimatés pendant 5 jours, durant lesquels un entraînement d’acclimatation sur tapis roulant a été effectué simultanément. Les animaux passaient une acclimatation sur tapis roulant une fois par jour à une vitesse de 10 m/min pendant 15 minutes par séance, sans stimulation électrique pour réduire le stress de manipulation.

D’après notre étude précédente, le taux de réussite de l’induction PSS via la méthode d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO) est d’environ 60 ^%. À l’aide d’un tableau de nombres aléatoires, 9 rats ont été sélectionnés au hasard à l’avance comme groupe simulé ; les 31 rats restants ont été utilisés pour l’établissement de modèles. Après une modélisation réussie, ces rats ont été divisés aléatoirement en groupe modèle et groupe MSSA. Au final, neuf rats étaient inclus dans chaque groupe. Cette expérience a été menée conformément aux principes des 3R du bien-être des animaux de laboratoire et a été approuvée par le Comité d’éthique animale de l’Université de médecine chinoise de Pékin (BUCM 20250915-008).

Établissement modèle

Le modèle MCAO a été établi chez les rats en utilisant une technique de filament intraluminal modifié. Les rats ont été anesthésés avec 3 % d’isoflurane pour l’induction, et l’anesthésie a été maintenue avec 1,5 % d’isoflurane administré en oxygène à un débit constant de 1 L/min tout au long de la procédure chirurgicale. Une incision cervicale de la ligne médiane a été réalisée, suivie d’une dissection contondante pour exposer l’artère carotide commune droite (ACC), l’artère carotide externe (ECA) et l’artère carotide interne (ICA). Une suture monofilament en nylon (diamètre 0,36 ± 0,02 mm) a été introduite dans l’ACI via l’ECA et a avancé d’environ 18 à 20 mm jusqu’à l’origine de l’artère cérébrale moyenne (MCA) pour obtenir une occlusion artérielle. Les vaisseaux étaient ligaturés et l’incision fermée. Les rats étaient ensuite placés sur une bouillotte jusqu’à la convalescence de l’anesthésie. Les rats du groupe opéré par simulateur ont subi une exposition chirurgicale identique au CCA, à l’ICA et à l’ECA sans insertion du filament intraluminal.

Après l’opération, tous les rats MCAO ont reçu des soins postopératoires standardisés. Les animaux étaient maintenus sur un coussin chauffant à 37°C pendant les 12 premières heures pour éviter l’hypothermie. Les incisions chirurgicales ont été nettoyées quotidiennement pendant trois jours consécutifs, l’ampicilline (100 mg/kg) a été administrée par injection intrapéritonéale pour la prophylaxie des infections, et des aliments ramollis ont été fournis pour maintenir une nutrition adéquate. L’activité générale, la consommation alimentaire, l’état de la plaie et la fonction motrice des membres ont été surveillées quotidiennement des jours postopératoires 1 à 10.

Les déficits neurologiques ont été évalués par des chercheurs aveugles à l’allocation de groupe à l’aide du score de déficit neurologique Zea Longa, et le tonus musculaire a été évalué à l’aide de l’échelle d’Ashworth modifiée (MAS). Les évaluations ont été réalisées 1 jour avant l’opération (jour −1), le jour de l’opération avant MCAO (jour 0), et les jours postopératoires 1, 3, 5, 7 et 10. Les rats présentant des scores de Zea Longa et MAS ≥1 au troisième jour postopératoire ont été considérés comme ayant établi un modèle PSS réussi.

Traitement MSSA

Les interventions ont commencé au troisième jour postopératoire. Le site de stimulation par acupuncture du cuir chevelu était la ligne ipsilésionale de la SEP 6 (ligne pariétotemporale antérieure). Conformément à la norme nationale pour les manipulations standardisées de l’acupuncture du cuir chevelu (GB/T 21709.2-2021), la lignée MS 6 s’étend de GV 21 (Qianding) à GB 6 (Xuanli).

Des aiguilles d’acupuncture stériles jetables (0,25 × 13 mm) ont été insérées sous la galea aponeurotique au niveau GV 21 à un angle oblique d’environ 15° par rapport à la surface du cuir chevelu et ont avancé vers la GB 6 le long de la ligne oblique pariétotemporale antérieure jusqu’à une profondeur d’environ 10 mm. Une manipulation rapide en rotation (200 tours/min) était appliquée en continu pendant 1 minute. Après 15 minutes de rétention de l’aiguille, la même manipulation de rotation a été répétée une fois, ce qui a donné un temps total de rétention de 30 minutes. Pendant toute la période de rétention des aiguilles, les rats effectuaient simultanément des exercices sur tapis roulant à une vitesse constante de 10 m/min.

Les rats des groupes opérés par simulacre et modèles ne recevaient ni acupuncture ni exercice sur tapis roulant. Pour contrôler la manipulation non spécifique et le stress de contention, ils ont été manipulés et retenus avec douceur dans des supports non compressifs pendant 30 minutes par jour, correspondant à la durée totale quotidienne de l’intervention du groupe MSSA.

Évaluations comportementales

Score Zea Longa pour les déficits neurologiques :

Les déficits neurologiques chez les rats ont été évalués à l’aide du système de notation Zea^{Longa 16}. Les critères suivants ont été appliqués : un score de 0 indiquait qu’aucune altération neurologique et un mouvement normal sans contrainte ; un score de 1 indiquait une extension incomplète du membre antérieur ou du membre postérieur contralatéral au côté affecté ; un score de 2 indiquait un cercle vers le côté controlatéral pendant la locomotion ; un score de 3 indiquait une chute du côté controlatéral en marchant ; et un score de 4 indiquait une perte de conscience sans déplacement spontané.

MAS pour le tonus musculaire :

Le tonus musculaire a été évalué à l’aide du MAS¹⁷. Les critères étaient définis comme suit : grade 0, absence d’augmentation du tonus musculaire ; grade 1, légère augmentation du tonus musculaire, avec un arrêt transitoire ou une résistance minimale à la fin de la flexion et de l’extension passives ; grade 1+, augmentation marquée du tonus musculaire, avec un blocage transitoire en milieu de mouvement et une résistance persistante durant la seconde moitié du mouvement ; grade 2, augmentation marquée du tonus musculaire, avec une résistance évidente sur la majeure partie de la plage de mouvement, bien que le membre restât facilement mobile ; Grade 3, augmentation substantielle du tonus musculaire rendant la flexion et l’extension passives difficiles ; et grade 4, mouvement passif limité dû à la rigidité des articulations. Le grade 1+ s’est vu attribuer un score de 2 points, ce qui a donné un score MAS maximal de 5 points dans cette étude¹⁰.

Neuroimagerie T2WI pour la quantification du volume d’infarctus cérébral

Tous les scans T2WI ont été réalisés à l’aide d’un scanner IRM PharmaScan utilisé avec le logiciel ParaVision 360 (version 3.5). Une séquence d’impulsions d’acquisition turborapide pondérée en T2 avec amélioration de relaxation (T2_TurboRARE, également appelée RARE/écho rapide de spin [FSE]), a été appliquée aux rats MCAO pour quantifier le volume d’infarctus cérébral. Les paramètres d’imagerie étaient configurés comme suit : temps de répétition (TR) = 3000,0 ms, temps d’écho (TE) = 33,0 ms, champ de vision (FOV) = 35,00 × 35,00^{mm 2}, taille de la matrice = 250 × 250, épaisseur de tranche = 0,80 mm, nombre de tranches = 35, nombre d’excitations (NEX) = 3,0, et angle de basculement (FA) = 180,0°. Les régions d’infarctus cérébraux ont été délimitées manuellement tranche par tranche dans le logiciel ITK-SNAP (version 4.4.0) par un seul chercheur aveuglé à l’attribution de groupes, utilisant les changements d’intensité du signal et des caractéristiques morphologiques compatibles avec un infarctus ischémique. Le volume de l’infarctus cérébral était alors calculé automatiquement par le logiciel.

DTI Neuroimagerie pour l’évaluation de l’intégrité microstructurale de la substance blanche

Les données IRM ont été acquises à l’aide d’un scanner à résonance magnétique PharmaScan 7,0 T. L’anesthésie a été induite avec 3 % d’isoflurane administré dans de l’air comprimé (0,4–0,6 L/min) et maintenue avec 1 % d’isoflurane tout au long de l’acquisition de la DTI. La température corporelle centrale a été maintenue à l’aide d’un bain-marie contrôlé par thermostat tout au long de la procédure d’imagerie.

Lors de l’IRM, une séquence de localisation en trois plans a d’abord été appliquée pour positionner le cerveau du rat à l’intérieur de l’aimant. La DTI a été réalisée à l’aide d’une séquence axiale d’imagerie écho-planaire spin-echo à un seul tir avec les paramètres suivants : TR/TE = 3000/27 ms, matrice = 90 × 75, FOV = 20 × 15 mm², épaisseur de tranche = 0,7 mm, 30 directions de gradient de diffusion et valeurs b de 0 et 1000 s/^{mm 2}. Pour l’analyse DTI, des régions d’intérêt ont été dessinées dans la capsule externe sur des tranches cérébrales situées à 1,3 mm postérieure à la brème. Les cartes paramétriques de l’anisotropie fractionnaire (FA), de la diffusivité moyenne (DM), de la diffusivité axiale (DA) et de la diffusivité radiale (RD) ont été reconstruites à l’aide du logiciel ParaVision 360. Les données sont exprimées comme le rapport entre l’hémisphère affecté et l’hémisphère sain controlatéral.

Coloration LFB pour l’évaluation de la lésion de la myéline et la rémyélinisation

Une coloration LFB a été réalisée pour évaluer les dommages structurels aux axones myélinisés dans la capsule externe. La lésion de la myéline, caractérisée par la raréfaction et la vacuolisation de la myéline, a été quantifiée en mesurant la densité optique intégrée (IOD) des fibres myélinisées colorées au LFB dans le ROI dans la capsule externe à l’aide du logiciel ImageJ (version 6.0 ; seuil en niveaux de gris, 35–225). Sur la base de l’atlas stéréotaxique cérébral^{de rat 18}, trois coupes coronales ont été analysées pour chaque animal à des brèmes +1,0 mm, −1,3 mm et −1,6 mm, correspondant aux parties antérieure, moyenne et médiane-postérieure de la capsule externe. La moyenne de l’IOD sur les trois sections a été calculée pour représenter chaque animal (n = 4 par groupe). Les valeurs de la DIO ipsilatérale ont été normalisées du côté controlatéral et exprimées en^{pourcentage 19}.

Enregistrements électrophysiologiques pour l’évaluation de l’excitabilité du réflexe spinal

Le réflexe H monosynaptique spinal a été enregistré à l’aide d’un système d’expérience de fonction biologique. Les rats ont été légèrement anesthésés avec α-chloralose (50 mg/kg, intrapéritonéale) afin de préserver l’excitabilité du réflexe spinal lors des enregistrements électrophysiologiques. Le nerf sciatique gauche a été exposé par dissection contondante et placé sur des électrodes à crochet bipolaire pour stimulation électrique. Une solution vitaminique huileuse a été appliquée de façon intermittente sur le nerf exposé pour maintenir l’hydratation des tissus et la viabilité neuronale. Une paire d’électrodes d’enregistrement en acier inoxydable a été insérée dans les muscles interosseux de la patte arrière gauche, et une électrode de terre a été placée dans la queue. Le H-reflex a été déclenché à l’aide d’un stimulateur d’impulsion monopolaire-bipolaire d’une durée d’impulsion de 100 μs. Le seuil du réflexe H et le seuil moteur (MT) ont été déterminés par stimulation électrique incrémentale, le courant augmentant par pas de 0,05 mA jusqu’à une intensité maximale de 3,0 mA afin d’éviter une lésion irréversible du nerf périphérique.

En utilisant la même intensité de stimulation qui a déclenché le réflexe H maximal (H_max), des stimuli pulsés de fréquences variables (0,3, 5 et 10 Hz) ont été administrés pour obtenir des amplitudes du réflexe H à différentes fréquences de stimulation. Une stimulation pulsée répétée à 0,3 Hz a été appliquée pour vérifier que l’amplitude de l’onde M restait dans 95 % de sa valeur initiale ; sinon, le jeu de données était abandonné. La dépression dépendante de la fréquence (FDD) du réflexe H a été calculée comme le pourcentage du rapport d’amplitude H/onde M (rapport H/M) à 5 Hz et 10 Hz par rapport à 0,3 Hz, le rapport H/M à 0,3 Hz servant de référence^{de référence de base 10}.

Analyse des données

Les analyses statistiques ont été réalisées à l’aide du logiciel SPSS (version 20.0). Les données continues sont présentées sous forme de la moyenne ± de l’écart-type (DE). La normalité des données a été évaluée à l’aide du test de Shapiro–Wilk. L’analyse unidirectionnelle de la variance (ANOVA) a été utilisée pour comparer les résultats d’imagerie conventionnelles et d’autres variables quantitatives entre groupes. Lorsque l’homogénéité de la variance était satisfaite, des tests post-hoc de Bonferroni étaient réalisés ; sinon, le test T3 de Dunnett a été appliqué. Les données comportementales ont été analysées à l’aide d’ANOVA bidirectionnelle, avec le groupe expérimental et le point temporel postopératoire comme facteurs fixes. L’analyse de corrélation de Spearman a été utilisée pour évaluer les associations entre les variables de l’étude. Une valeur de p < 0,05 était considérée comme statistiquement significative.

Résultats

La MSSA atténue les déficits fonctionnels neurologiques

L’ANOVA à mesures répétées bidirectionnelles a révélé des effets principaux significatifs du temps (F[2,613, 62,71] = 315,3, p < 0,001) et du groupe (F[2, 24] = 142,9, p < 0,001), ainsi qu’une interaction significative du groupe en temps × (F[12, 144] = 99,94, p < 0,001) pour les scores neurologiques de Zea Longa. Un jour avant l’opération, tous les rats des groupes opérés par simulation, modèle et MSSA avaient un score Zea Longa de 0, indiquant une fonction neurologique de base intacte sans déficits neurologiques. À partir du premier jour postopératoire, les scores de Zea Longa ont progressivement augmenté à la fois dans le groupe modèle et MSSA. Aucune différence significative n’a été observée entre ces groupes du jour 1 postopératoire au jour 5 (p > 0,05). Avec une intervention continue, les scores de Zea Longa dans le groupe MSSA étaient significativement plus faibles que ceux du groupe modèle aux jours postopératoires 7 et 10 (p < 0,001), indiquant une amélioration de la fonction neurologique (Figure 1A).

Figure 1. L’acupuncture du cuir chevelu de type mouvement améliore les déficits neurologiques et réduit le tonus musculaire chez les rats atteints de spasticité post-AVC. (A) Les scores de déficit neurologique de Zea Longa mesurés avant l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO ; jour −1), immédiatement avant MCAO (jour 0), et lors des jours postopératoires 1, 3, 5, 7 et 10. (B) Scores modifiés de l’échelle d’Ashworth mesurés aux moments correspondants. La ligne verticale pointillée indique MCAO au jour 0. Les données sont présentées sous forme de la moyenne ± de l’écart-type (DE). Les barres d’erreur représentent SD. ***p < 0,001 pour les comparaisons indiquées entre crochets. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

Le MSSA réduit le volume de l’infarctus cérébral

Les rats opérés par simulacre ont présenté des résultats normaux de T2WI, avec une intensité homogène du signal parenchymateux dans tout le cerveau. Aucune hyperintensité pathologique, infarctus cérébral, anomalies morphologiques ou dilatation ventriculaire n’a été observée (Figure 2A). En revanche, le groupe modèle a présenté une hyperintensité T2 marquée dans l’hémisphère cérébral ipsilatéral, correspondant à la région de l’infarctus ischémique, ainsi qu’un élargissement ventriculaire évident (Figure 2A). L’analyse morphométrique quantitative a montré que le volume d’infarctus cérébral était significativement réduit dans le groupe MSSA par rapport au groupe modèle (p < 0,001 ; Figure 2B). L’intervention MSSA est illustrée à la Figure 2C.

Figure 2. L’acupuncture du cuir chevelu de type mouvement réduit le volume d’infarctus cérébral chez les rats présentant une spasticité post-AVC. (A) Images cérébrales représentatives à imagerie pondérée T2 (T2WI) provenant des groupes d’acupuncture du cuir chevelu opérée simulée, modèle et de type mouvement (MSSA) à 1,00, 0,20, −0,92 et −1,88 mm par rapport au bregma. (B) Quantification du volume de l’infarctus cérébral à partir de T2WI. Les symboles individuels représentent des animaux individuels. (C) Photographie de l’intervention MSSA réalisée en même temps que l’exercice sur tapis roulant. Les données sont présentées sous forme de moyenne ± SD. Les barres d’erreur représentent SD. ***p < 0,001 par rapport au groupe de modèles. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

La MSSA atténue la spasticité musculaire post-AVC

Pour les scores MAS, l’ANOVA à mesures répétées à deux sens a révélé des effets principaux significatifs du temps (F[2,158, 51,79] = 183,7, p < 0,001) et du groupe (F[2, 24] = 57,68, p < 0,001), ainsi qu’une interaction significative du temps × groupe (F[10, 120] = 58,70, p < 0,001). Tous les rats ont présenté un score MAS de 0 un jour avant l’opération et le premier jour postopératoire, reflétant un tonus musculaire de base normal sans spasticité. À partir du troisième jour postopératoire, les scores MAS ont progressivement augmenté dans les groupes modèle et MSSA, indiquant le développement d’une spasticité du membre post-AVC, sans différence significative observée entre les deux groupes à ce moment-là. Du jour 5 au jour 10 postopératoire, les scores MAS dans le groupe MSSA étaient significativement plus faibles que dans le groupe modèle (p < 0,01 à p < 0,001), indiquant que MSSA atténuait le PSS (Figure 1B).

Le MSSA préserve l’intégrité microstructurale de la substance blanche dans la capsule externe

Des cartes représentatives des paramètres DTI sont présentées à la Figure 3A. Au jour 10 postopératoire, comparé au groupe simulé opéré, le groupe modèle a montré une réduction marquée du rapport d’anisotropie fractionnaire (rFA) dans la capsule externe (p < 0,001 ; Figure 3B), accompagnées d’augmentations significatives des rapports de diffusivité moyenne (rMD) et de diffusivité radiale (rRD) (toutes deux p < 0,001 ; Figure 3C,D). Comparé au groupe de modèles, la MSSA a significativement augmenté la rFA (p < 0,001 ; Figure 3B) et une diminution significative de la rMD et de la rRD (toutes deux p < 0,01 ; Figure 3C,D). Aucune différence significative dans le rapport de diffusivité axiale (rAD) n’a été observée entre les groupes (p > 0,05 ; Figure 3E). Le positionnement des rats lors de l’acquisition du DTI et la localisation anatomique de la capsule externe ROI sont illustrés à la Figure 3F,G.

Figure 3. L’acupuncture du cuir chevelu de type mouvement modifie les paramètres d’imagerie du tenseur de diffusion chez les rats présentant une spasticité post-AVC. (A) Mappage représentative de l’anisotropie fractionnaire (FA), de la diffusivité moyenne (DM), de la diffusivité axiale (DA) et de la diffusivité radiale (RD) provenant des groupes d’acupuncture du cuir chevelu opérée par simulation, modèle et de type mouvement (MSSA) à −1,30 mm par rapport au bregma. (B–E) Quantification des rapports entre l’A ipsilésionale et la FA contralatérale (rFA), la MD (rMD), la RD (rRD) et la DA (rAD), respectivement. Les symboles individuels représentent des animaux individuels. (F) Photographie d’un rat positionné pour l’imagerie tensorielle de diffusion (DTI). (G) Image schématique et correspondante de résonance magnétique montrant les régions de capsule externe controlatérale et ipsilésionale d’intérêt. Les données sont présentées comme la moyenne ± SD. Les barres d’erreur représentent SD. #p < 0,05 et ###p < 0,001 par rapport au groupe opéré par simulacre ; **p < 0,01 et ***p < 0,001 par rapport au groupe de modèles. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

La MSSA améliore l’intégrité de la myéline dans la capsule externe

Une coloration LFB a été réalisée pour évaluer l’intégrité de la myéline dans la capsule externe. Histologiquement, les fibres myélinisées présentaient une morphologie intacte et une disposition régulière dans le groupe opéré par le simulateur, tandis qu’une perte de myéline évidente et une désorganisation structurelle ont été observées dans la capsule externe des rats modèles MCAO (Figure 4A). L’analyse quantitative a montré que l’IOD relatif de la coloration LFB était significativement plus faible dans le groupe modèle que dans le groupe simulé (p < 0,001 ; Figure 4B). Comparé au groupe modèle, le groupe MSSA présentait des valeurs relatives d’IOD significativement plus élevées (p < 0,001 ; Figure 4B), indiquant une amélioration de l’intégrité myéline dans la capsule externe après le traitement MSSA.

Figure 4. L’acupuncture du cuir chevelu de type mouvement atténue la lésion de la myéline de la capsule externe chez les rats présentant une spasticité post-AVC. (A) Sections cérébrales panoramiques colorées au Luxol Fast Blue (LFB) et vues agrandies des régions de la capsule externe controlatérale et ipsilésionale d’intérêt (ROI) provenant des groupes d’acupuncture du cuir chevelu opérée simulée, modèle et de type mouvement (MSSA). Les encadrés bleus et rouges sur les images panoramiques indiquent respectivement les ROI controlatérales et ipsilésiales. Barres d’échelle dans les images agrandies = 50 μm. (B) Quantification de la densité optique intégrée relative (IOD) de la coloration LFB dans la capsule externe ipsilésionale normalisée vers le côté controlatéral. Les symboles individuels représentent des animaux individuels ; n = 4 par groupe. Les données sont présentées sous forme de moyenne ± SD. Les barres d’erreur représentent SD. ###p < 0,001 par rapport au groupe exploité par simulacre ; p < 0,001 contre le groupe de modèles ; △p < 0,05 pour la comparaison indiquée par le crochet. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

La MSSA inhibe l’hyperexcitabilité du réflexe H spinal

Des enregistrements représentatifs des ondes M et H sont présentés à la Figure 5A, et la configuration d’enregistrement électrophysiologique est montrée à la Figure 5B. Au 10e jour postopératoire, l’évaluation électrophysiologique a montré que, comparé au groupe opéré par simulateur, le groupe modèle présentait un seuil moteur significativement accru (MT ; p < 0,001) et le rapport d’amplitude maximale de l’onde H/amplitude maximale de l’onde M (H_max/_{M max}) (p < 0,001), une légère augmentation de la latence de l’onde M (p < 0,05), et une diminution correspondante de la latence du réflexe H (p < 0,05 ; Figure 5C–H). Comparé au groupe modèle, le groupe MSSA présentait un taux MT significativement plus bas (p < 0,001) et un ratio H_max/_{M max} (p < 0,001), ainsi qu’un seuil du réflexe H nettement plus élevé (p < 0,001 ; Figure 5C–H). Aucune différence significative dans l’intensité de stimulation nécessaire pour obtenir H_max exprimé en multiple de MT n’a été observée entre le modèle et les groupes MSSA (Figure 5H). De plus, lorsqu’elle est normalisée au rapport H/M à 0,3 Hz, la DFD du réflexe H diminue progressivement avec l’augmentation de la fréquence de stimulation dans les trois groupes (Figure 5I). À 5 Hz et 10 Hz, le rapport H/M était significativement plus faible dans le groupe MSSA que dans le groupe modèle ( tous deux p < 0,001), indiquant une restauration partielle de la FDD du réflexe H vers le schéma physiologique (Figure 5J ; Tableau 1).

Figure 5. L’acupuncture de type mouvement du cuir chevelu réduit l’hyperexcitabilité du réflexe spinal chez les rats présentant une spasticité post-AVC. (A) Des traces représentatives superposées d’ondes M et d’ondes H provenant des groupes d’acupuncture du cuir chevelu (MSSA) opérés par simulacration, modèles et de type mouvement. (B) Photographie de l’installation d’enregistrement électrophysiologique montrant le site de stimulation du nerf sciatique, les électrodes d’enregistrement et l’électrode de masse. (C–H) Quantification du seuil moteur (MT), du rapport d’amplitude maximale H-onde/maximale M-wave (H_max/_{M max}), de la latence H-wave, du seuil H-reflex, de la latence M-wave, et de l’intensité de stimulation provoquant H_max exprimé respectivement comme un multiple de MT. Les symboles individuels représentent des animaux individuels. (I) Traces représentatives du réflexe H obtenues à des fréquences de stimulation de 0,3 Hz, 5 Hz et 10 Hz dans chaque groupe. (J) Dépression dépendante de la fréquence du réflexe H, exprimée comme le rapport H/M à 5 Hz et 10 Hz normalisé au rapport H/M à 0,3 Hz. Les régions ombragées représentent la DS des valeurs moyennes. Les données sont présentées comme la moyenne ± SD. Les barres d’erreur représentent SD. #p < 0,05 et ###p < 0,001 contre le groupe opéré par simulacre ; p < 0,001 contre le groupe de modèles. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

Groupe	MT (mA)	Mmax (mV)	Hmax (mV)	Latence M (ms)	Latence H (ms)	Seuil du réflexe H (×MT)	Hmax (×MT)	Rapport H/M (0,3 Hz)	Rapport H/M (5 Hz)	Rapport H/M (10 Hz)
Sham (n = 9)	0,808 ± 0,218	11.119 ± 7.802	2,804 ± 2,896	4,567 ± 0,731	11.311 ± 0.849	1,296 ± 0,251	1,554 ± 0,264	0,452 ± 0,264	0,304 ± 0,155	0,176 ± 0,137
Modèle (n = 9)	1,855 ± 0,203###	3.282 ± 2.040##	2,307 ± 1,296	5,333 ± 0,893	10.456 ± 1.056	0,729 ± 0,299	1,517 ± 0,303	0,826 ± 0,120##	0,741 ± 0,129###	0,684 ± 0,131###
MSSA (n = 9)	0,663 ± 0,236	5,908 ± 2,751	1,497 ± 0,688	4,744 ± 0,590	10,978 ± 0,602	1,939 ± 0,819	1,832 ± 1,557	0,556 ± 0,238*	0,390 ± 0,193**	0,142 ± 0,134

Tableau 1 : Paramètres électrophysiologiques du réflexe H chez les rats présentant une spasticité post-AVC. Mesures électrophysiologiques obtenues auprès des groupes d’acupuncture du cuir chevelu opérée simulée, modèle et de type mouvement (MSSA), incluant le seuil moteur (MT), l’amplitude maximale de l’onde M (M_max), l’amplitude maximale de l’onde H (H_max), la latence des ondes M, la latence des ondes H, le seuil du réflexe H exprimé comme un multiple de la MT (×MT), l’intensité de stimulation provoquant un H_max exprimées comme un multiple de MT (×MT), et des rapports H/M mesurés à des fréquences de stimulation de 0,3, 5 et 10 Hz. Les données sont présentées en moyenne ± SD. ##p < 0,01 et ###p < 0,001 contre le groupe simulé ; *p < 0,05, **p < 0,01, et ***p < 0,001 contre le groupe de modèles.

Les corrélations entre le volume d’infarctus cérébral mesuré par les métriques T2WI et DTI de la capsule externe ont d’abord été examinées. Dans l’analyse groupée, le volume d’infarctus était fortement corrélé négativement avec la rFA (ρ = −0,902, p < 0,001) et positivement corrélé avec la rMD et la rRD (ρ = 0,511, p = 0,03 ; ρ = 0,661, p = 0,003 ; Figure 6A–D). Aucune corrélation significative entre le volume d’infarctus et les paramètres DTI n’a été observée dans les analyses de sous-groupes. Les relations entre les métriques DTI de la capsule externe, les indices électrophysiologiques de l’excitabilité du réflexe spinal et le tonus musculaire évalués par le MAS ont ensuite été évaluées. Dans l’analyse groupée, un rFA plus faible était associé à un ratio H_max/_{M max} plus élevé (ρ = −0,895, p < 0,001), tandis qu’une rRD plus élevée était associée à un seuil de réflexe H plus bas (ρ = −0,504, p = 0,03 ; Figure 6E, F). De plus, des ratios H_max/_M max plus élevés et des seuils plus bas du réflexe H étaient associés à des scores MAS plus élevés (ρ = 0,760, p < 0,001 ; ρ = −0,479, p = 0,01 ; Figure 6G, H). Les analyses de sous-groupes ont montré une corrélation négative significative entre le seuil du réflexe H et le score MAS uniquement dans le groupe modèle (ρ = −0,736, p = 0,03), tandis qu’aucune corrélation significative n’a été observée dans les groupes opérés par simulacre ou MSSA.

Figure 6. Associations entre le volume de l’infarctus cérébral, les paramètres d’imagerie du tenseur de diffusion, les indices du réflexe H et le tonus musculaire chez les rats présentant une spasticité post-AVC. (A–D) Associations du volume d’infarctus cérébral dérivé de l’imagerie pondérée T2 (T2WI) avec les rapports ipsilésional/controlatéral de l’anisotropie fractionnaire (rFA), de la diffusivité moyenne (rMD), de la diffusivité radiale (rRD) et de la diffusivité axiale (rAD), respectivement. (E) Association entre rFA et le rapport d’amplitude maximale des ondes H/maximales des ondes M (H_max/M_max). (F) Association entre le seuil de rRD et du réflexe H. (G) Association entre H_max/_{M max} et le score Modified Ashworth Scale (MAS). (H) Association entre le seuil du réflexe H et le score MAS. Les cercles, carrés et triangles représentent respectivement les groupes d’acupuncture du cuir chevelu de type « smo-operated, modèle » et de type « motion » (MSSA). Les lignes pointillées correspondent à la courbe d’ajustement de régression linéaire générée à partir des données mesurées. Les coefficients de corrélation de Spearman globaux et spécifiques à chaque groupe (ρ) ainsi que les valeurs p correspondantes sont affichés dans chaque case. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figurine.

Disponibilité des données :

Toutes les données générées ou analysées lors de cette étude sont incluses dans cet article publié et dans le Matériel Supplémentaire. Les ensembles bruts de données soutenant les résultats de cette étude sont fournis dans le Tableau Supplémentaire 1.

Tableau supplémentaire 1. Ensembles de données bruts soutenant les analyses quantitatives présentées dans cette étude. Le cahier contient les données expérimentales brutes utilisées pour les évaluations comportementales, l’analyse du volume des infarctus pondérée par imagerie T2 (T2WI), les métriques d’imagerie par tenseur de diffusion (DTI), la quantification de coloration par Luxol Fast Blue (LFB) et les mesures électrophysiologiques du réflexe H pour tous les groupes expérimentaux. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Discussion

Du point de vue de la médecine traditionnelle chinoise, le PSS relève de la catégorie des troubles musculaire-tendons, avec une pathogenèse centrale décrite comme une lésion cérébrale comme cause principale et la spasticité des membres comme manifestation^{superficielle 20}. Les stratégies thérapeutiques doivent donc traiter à la fois la lésion cérébrale primaire et les manifestations périphériques^{secondaires 21}. La logique sous-jacente au MSSA met l’accent sur une régulation holistique du cerveau ischémique aux membres spastiques, avec pour objectifs thérapeutiques de favoriser la circulation sanguine, de débloquer les méridiens, de relaxer les tendons et d’atténuer la spasticité. La technique du needling est essentielle à l’efficacité de l’acupuncture, et choisir une technique adaptée au schéma pathologique est essentiel pour obtenir des résultats cliniques favorables. La MSSA est une modalité caractéristique d’acupuncture du cuir chevelu pour le PSS qui combine l’acupuncture du cuir chevelu avec un mouvement actif ou passif des membres pendant la rétention de^{l’aiguille 3}. Une récente revue systématique et méta-analyse ont démontré que la MSSA produit des effets supérieurs dans la réduction de la spasticité musculaire, l’amélioration de la fonction motrice et l’amélioration des activités quotidiennes chez les patients atteints de PSS, comparé à l’acupuncture conventionnelle du cuir chevelu ou à la rééducation physique^seule9. Notamment, l’administration simultanée d’acupuncture du cuir chevelu et de rééducation par l’exercice, telle que mise en œuvre dans la MSSA, produit de meilleurs résultats que l’intervention asynchrone, comme le confirment les preuves cliniques de qualité^{modérée 9}. La SEP 6, telle que définie dans GB/T 21709.2-2021, est une ligne d’acupuncture oblique pariétotemporale antérieure du cuir chevelu sélectionnée pour sa pertinence anatomique et son utilité clinique^{établie 9}. Il recouvre les cortex moteurs primaire et secondaire, qui sont les principales sources de projections corticofuges descendantes modelant la sortie réticulaire du tronc cérébral et modulant l’excitabilité du réflexe spinal. Cliniquement, la MS 6 est la ligne d’acupuncture du cuir chevelu la plus couramment utilisée pour le PSS, comme le confirme la méta-analyse mentionnée ci-dessus, ce qui en fait une cible optimale pour moduler les voies motrices dans la présente étude. Ces résultats mettent en lumière les caractéristiques procédurales distinctives et les avantages cliniques potentiels de la MSSA dans la prise en charge du PSS. Des études précliniques ont également montré que le MSSA améliore la perfusion cérébrale dans la pénombre ischémique et module l’excitabilité des motoneurones de la corne antérieure spinale, fournissant un soutien mécanistique préliminaire pour son application^{thérapeutique 10,11}.

Dans la théorie neurologique moderne, la pathogenèse du PSS est principalement attribuée à trois processus pathologiques interreliés : une inhibition descendante supraspinale altérée, un traitement anormal du signal intraspinal et des propriétés intrinsèques modifiées des muscles. Parmi celles-ci, les mécanismes par lesquels les voies descendantes supraspinales régulent l’excitabilité du réflexe spinal restent incomplètement comprises². Le faisceau réticulo-spinal (TSR) joue un rôle essentiel dans le maintien de l’équilibre de l’arc réflexe d’étirement. La TSR latérale reçoit des entrées excitatrices du cortex prémoteur controlatéral et de la zone motrice supplémentaire via la voie cortico-réticulaire, descend dans le funicululus dorsolatéral de la moelle épinière et exerce un contrôle inhibiteur sur l’activité du réflexe d’étirement spinal. En revanche, la TSR médiale n’est pas régulée par le cortex controlatéral, descend à l’intérieur du funicule ventromédial et facilite l’activité du réflexe d’étirement. L’AVC cortical perturbe la voie cortico-réticulaire, réduit l’apport excitateur à la formation médullaire réticulaire et entraîne la prédominance de l’activité RST médiale. Ce déséquilibre contribue à l’hyperexcitabilité du réflexe d’étirement spinal et à la manifestation clinique de la spasticité des membres³. Des études cliniques de neuroimagerie ont lié le PSS à des lésions impliquant le cortex prémoteur, le putamen, le membre postérieur de la capsule interne et la capsule externe^12,14,22. Parmi celles-ci, la capsule externe représente un conduit clé de la substance blanche au sein de la voie cortico-réticulospinale, un important faisceau extrapyramidal qui intègre les entrées corticales, les synapses dans les noyaux réticulaires du tronc cérébral, et projette vers la moelle épinière pour exercer un contrôle inhibiteur descendant sur les α-motoneurones et les interneurones²³. Ce cadre anatomique est soutenu par la traçabilité neuronale et des études DTI, qui identifient systématiquement la capsule externe comme une connexion principale entre le cortex cérébral, les ganglions de la base et le tronc cérébral^23,24. Notamment, la spasticité est de plus en plus reconnue comme un trouble au niveau du réseau résultant d’une perturbation de l’équilibre entre plusieurs systèmes moteurs descendants, y compris les voies corticospinales et extrapyramidales, plutôt que d’un dysfonctionnement d’un seul tract. Dans ce contexte, la capsule externe sert de structure représentative pour sonder les contributions extrapyramidales au PSS, car son implication a été systématiquement associée à une activité exagérée du réflexe spinal, tandis que les lésions corticospinales isolées produisent plus fréquemment une faiblesse sans spasticité proportionnelle. En conséquence, nous avons sélectionné la capsule externe comme principal ROI pour étudier les modifications microstructurales de la substance blanche associées à la gravité de la spasticité. Conformément à ce cadre, la T2WI n’a révélé aucun infarctus cérébral évident dans le groupe opéré par simulacre, tandis que des lésions infarctiques proéminentes ont été observées dans le groupe modèle. Le traitement MSSA a significativement amélioré la fonction neurologique, selon l’échelle Zea Longa, suggérant un effet neuroprotecteur contre les lésions cérébrales ischémiques. L’effet d’épargne des farces de la MSSA peut impliquer plusieurs mécanismes synergiques. Premièrement, il a été démontré que le MSSA améliore la perfusion cérébrale régionale dans la pénombre ischémique¹⁰, créant ainsi un microenvironnement plus favorable à la survie neuronale. De plus, bien que les preuves directes de l’existence de MSSA soient actuellement limitées, des études mécanistiques sur l’acupuncture du cuir chevelu ont suggéré plusieurs autres voies pouvant également contribuer, notamment la promotion de l’angiogenèse par l’activation de la voie de signalisation MATN2/WNT3a/β-caténine²⁵ et atténuation de la neuroinflammation post-ischémique par suppression de la différenciation Th17 médiée par RORγt et restauration de l’équilibre Th17/Treg²⁶. Ces résultats soulèvent la possibilité que la MSSA puisse engager des mécanismes neuroprotecteurs similaires au-delà de ses effets hémodynamiques. Cependant, la contribution relative de chaque voie reste à déterminer et mérite une enquête approfondie.

La DTI permet une évaluation quantitative sensible de la microstructure de la substance blanche, l’AF reflétant l’intégrité de la fibre, la RD servant de marqueur de démyélinisation, et l’AD reflétant l’intégrité^{axonale 23}. Dans la présente étude, la capsule externe a été sélectionnée comme ROI pour évaluer les altérations microstructurelles associées à la voie cortico-réticulospinale dans le PSS. Comparés au groupe opéré par simulacre, les rats modèles ont montré des réductions significatives de l’AO relatif ainsi que des augmentations marquées de la MD et de la RD relatives, indiquant une intégrité de la substance blanche perturbée, un œdème cérébral et une démyélinisation au sein de la capsule externe. La coloration LFB a également démontré une perte et une désorganisation évidentes de myéline des faisceaux de substance blanche, fournissant un soutien histologique aux résultats DTI. Collectivement, les résultats neuroimageriques et histologiques indiquent que la lésion ischémique est associée à une altération microstructurale marquée de la capsule externe, qui a été atténuée après un traitement MSSA. Le réflexe H est une mesure électrophysiologique bien établie pour évaluer l’excitabilité du pool de α-motoneurones spinaux et la régulation descendante^{supraspinale 27}. Le rapport H_max/_{M max} reflète l’excitabilité globale des motoneurones spinaux, tandis que le seuil du réflexe H reflète une inhibition présynaptique médiée par des interneurones spinaux ainsi que des entrées descendantes supraspinales^{intégrées 27}. La perturbation de la voie cortico-réticulospinale induite par un AVC affaiblit la régulation inhibitrice descendante, entraînant une hyperexcitabilité des motoneurones spinaux caractérisée par un_{rapport H max}/_M max accru et un seuil de réflexe^{H réduit de 27}. Nos expériences préliminaires ont exploré les mécanismes moléculaires sous-jacents aux effets antispastiques de la MSSA, démontrant que cette thérapie pourrait augmenter l’expression de KCC2 spinale et restaurer la fonction inhibitrice du^{GABAergique 10}. S’appuyant sur ces découvertes moléculaires spinales, la présente étude éclaire davantage les mécanismes supraspinaux en amont responsables des réflexes spinaux exagérés en démontrant que la lésion microstructurelle de la capsule externe dans la voie cortico-réticulospinale est associée à une excitabilité spinale nettement accrue. Pris ensemble, ces résultats suggèrent que la MSSA pourrait favoriser la reconstruction des voies inhibitrices descendantes supraspinales et inverser l’hyperexcitabilité du réflexe spinal chez les rats atteints de PSS.

Compte tenu de la nature transversale des données présentes, toutes les analyses de corrélation doivent être interprétées comme exploratoires et génératrices d’hypothèses plutôt que comme des preuves de relations causales. Des analyses de corrélation ont été réalisées pour étudier les relations entre la charge infarctique, l’intégrité microstructurale de la capsule externe, l’excitabilité du réflexe spinal et la gravité de la spasticité. Chez tous les animaux, des volumes d’infarctus plus importants étaient associés à une perturbation microstructurale plus sévère dérivée de la DTI au sein de la capsule externe, suggérant un lien entre une lésion ischémique primaire et des changements secondaires de la substance blanche le long de la voie cortico-réticulospinale. Notamment, ces corrélations globales semblaient principalement être dues aux différences intergroupes plutôt qu’à la variation individuelle au sein du groupe, car aucune corrélation significative n’a été observée au sein d’un groupe individuel. Un FA relatif (rFA) plus élevé était associé à un rapport H_max/_{M max} plus faible, tandis qu’un rapport de réflexe H (rRD) plus élevé était associé à un seuil plus bas du réflexe H, ce qui correspond à l’idée que l’intégrité préservée de la capsule externe est associée à une régulation inhibitrice descendante plus efficace. De plus, des rapports H_max/_M max plus élevés et des seuils plus bas du réflexe H étaient tous deux associés à des scores MAS plus élevés, soutenant une association entre altérations électrophysiologiques et sévérité de la spasticité. Les analyses par sous-groupes ont également révélé que les schémas de corrélation globaux étaient principalement attribuables aux différences entre groupes. Notamment, une corrélation négative significative entre le seuil du réflexe H et le score MAS n’a été observée que dans le groupe modèle, suggérant qu’une inhibition présynaptique altérée pourrait être associée à une plus grande spasticité dans des conditions pathologiques non traitées.

Plusieurs limites doivent être reconnues. Premièrement, l’absence de groupes témoins uniquement à acupuncture et à exercice seul empêche la dissection de leurs contributions indépendantes et synergiques. De futures études intégrant ces groupes de comparaison aideraient à clarifier les mécanismes sous-jacents à l’intervention combinée. Deuxièmement, la période d’observation était limitée à la phase aiguë (jours postopératoires 0–10), sélectionnée sur la base de la fenêtre de spasticité maximale dans le modèle MCAO permanent. Reste inconnu si la MSSA confère des bénéfices thérapeutiques durables au-delà du stade aigu, et la validation dans les modèles de PSS chronique sera importante pour déterminer son potentiel translationnel à long terme. Troisièmement, bien que le MAS soit largement utilisé pour évaluer le tonus musculaire, il est intrinsèquement subjectif et semi-quantitatif. Pour compléter cette limitation, le réflexe H a été simultanément évalué comme une mesure électrophysiologique objective de l’excitabilité du réflexe spinal. Quatrièmement, la taille de l’échantillon était modeste en raison des exigences techniques associées aux évaluations multimodales, et des études incluant un plus grand nombre d’animaux amélioreraient la puissance statistique et la robustesse des résultats. Enfin, tous les critères ont été évalués uniquement au jour 10 postopératoire. De futures études intégrant des évaluations longitudinales à plusieurs moments permettraient de mieux comprendre la trajectoire temporelle des changements neuroplastiques induits par l’EMS.

De futures études pourraient étudier les mécanismes de la neurogenèse et de la remyélinisation après une intervention MSSA. Comme le DTI ne peut pas visualiser directement la régénération neuronale, des approches complémentaires telles que le traçage neuronal et l’immunohistochimie peuvent caractériser davantage la plasticité neuronale et la remyélinisation. D’un point de vue translationnel, les métriques DTI de la capsule externe, en particulier la FA et la RD, peuvent aider à stratifier les patients victimes d’AVC selon la gravité des lésions cortico-réticulospinales et à identifier ceux qui sont les plus susceptibles de bénéficier de la MSSA. Une telle approche pilotée par les biomarqueurs pourrait faciliter la sélection des patients et la stratification des traitements dans de futurs essais cliniques, bien que son utilité clinique reste à valider dans les cohortes prospectives d’AVC. En conclusion, cette étude a étudié les mécanismes neuronaux associés au traitement MSSA pour le PSS en utilisant un cadre intégré comprenant l’évaluation des infarctus basée sur le T2WI, l’évaluation DTI de la microstructure de la substance blanche, l’électrophysiologie du réflexe H et l’analyse histologique des LFB. Les résultats suggèrent que la MSSA est associée à une réduction du volume d’infarctus cérébral, à la préservation de l’intégrité microstructurale de la capsule externe et à une meilleure régulation inhibitrice descendante de la voie cortico-réticulospinale. Ces changements ont été accompagnés d’une normalisation de l’excitabilité du réflexe spinal et d’une réduction de la spasticité. Collectivement, les résultats fournissent des perspectives mécanistes et des preuves précliniques soutenant l’application translationnelle potentielle de la MSSA dans la prise en charge du PSS.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
α-Chloralose	GoldBio	C-118-250	Anesthésique pour enregistrements H-réflexe
Ethanol absolu	Beijing Tong Guang Fine Chemicals Co., Ltd.	VS104021-500 mL	Réactif histologique
Aiguilles d'acupuncture (0,25 × 13 mm)	Beijing Zhongyan Taihe Acupuncture Needle Co., Ltd.	NA	Aiguilles stériles jetables pour l'acupuncture du cuir chevelu
Ampicilline	Beijing Rui Da Heng Hui Technology Development Co., Ltd.	HD-3018-500g	Antibiotique pour la prophylaxie des infections postopératoires
Système d'expérience de fonction biologique (BL420N)	Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd.	NA	Système d'enregistrement électrophysiologique
Logiciel d'analyse d'imagerie tensorielle de diffusion (ParaVision 360)	Bruker	NA	Acquisition IRM et reconstruction DTI
Solution de déparaffinage et de clarification écologique	Servicebio	G1128-500ML	Réactif histologique
Microtome rotatif entièrement automatique	Leica Microsystems	RM2255	Section de tissus
Tapis chauffant	Suzhou Caiyang Electric Heating Technology Co., Ltd.	TT180×150-1XD	Maintien de la température postopératoire
ImageJ 6.0	National Institutes of Health	NA	Analyse d'image quantitative
Isoflurane	Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.	I8000-25g	Anesthésique inhalé
ITK-SNAP 4.4.0	University of Pennsylvania	NA	Segmentation des infarctus cérébraux
Solution de bleu de Luxol rapide	Servicebio	G1030-100ML	Coloration de la myéline
Fil de nylon monofilament (0,36 ± 0,02 mm)	Beijing Cinontech Co., Ltd.	NA	Induction MCAO
Paraformaldéhyde (4% dans le PBS)	Servicebio	TBAB0102	Fixation des tissus
Scanner de résonance magnétique PharmaScan 7.0 T	Bruker	NA	Acquisition IRM
SPSS Statistics 20.0	IBM	NA	Analyse statistique
Rats Sprague–Dawley (SPF, mâle)	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.	NA	Animaux expérimentaux
Système de bain d'eau thermostatique	Shanghai Zhixin Experimental Instrument Technology Co., Ltd.	ZX-5A	Maintien de la température pendant l'IRM
Tapis roulant pour rongeurs	Clever	TreadScan	Entraînement physique pendant l'acclimatation et le MSSA