Déclaration éthique : l'étude a été réalisée conformément aux lignes directrices institutionnelles et aux principes éthiques de la Déclaration d'Helsinki. Une approbation éthique a été obtenue auprès du Comité d'éthique de l'Université de Bisha (UBCOM-RELOC), sous le numéro d'approbation H-06-BH-087/(0802.23). La participation était volontaire et un consentement éclairé écrit a été obtenu de tous les participants avant leur inclusion. Les matériaux, équipements et procédures analytiques utilisés dans l'étude sont résumés dans le Tableau des matériaux.
Conception de l'étude et cadre d'étude
Une étude rétrospective transversale a été menée à l'Hôpital de maternité et pour enfants de Bisha, Arabie saoudite, entre décembre 2022 et mai 2023, afin d'évaluer le statut en fer et d'examiner les facteurs associés au déficit en fer chez les femmes enceintes de la région nord d'Asir.
Population étudiée et méthodologie d'échantillonnage
Un total de 200 participantes ont été recrutées, dont 135 femmes enceintes suivies dans des consultations de soins prénatals et 65 femmes non enceintes appariées par âge qui ont servi de groupe témoin. Les participantes ont été recrutées dans des consultations externes par échantillonnage de convenance pendant la période d'étude. Les femmes éligibles se présentant pendant les heures de consultation ont été approchées de manière consécutive, et le recrutement a été poursuivi jusqu'à atteinte de la taille d'échantillon cible. Afin de réduire un éventuel biais de sélection dans ce cadre, les témoins ont été appariées par âge à l'aide d'un échantillonnage aléatoire simple parmi les participantes éligibles non enceintes présentes aux consultations.
Les femmes enceintes étaient éligibles à l'inclusion si elles avaient 18 ans ou plus et une grossesse d'un âge gestationnel compris entre 12 et 36 semaines. Les participantes éligibles ont été recrutées indépendamment de leur statut en fer, puis classées comme femmes enceintes avec anémie ferriprive (IDA) ou sans IDA, selon les résultats des analyses de laboratoire. Selon les critères de l'OMS, l'anémie pendant la grossesse était définie par des concentrations d'hémoglobine (Hb) < 11,0 g/dL pendant le premier et le troisième trimestre, et < 10,5 g/dL pendant le deuxième trimestre. L'IDA était diagnostiquée chez les femmes qui présentaient un taux d'hémoglobine inférieur au seuil spécifique à la grossesse et des signes de carence en fer, notamment une ferritine sérique < 15 ng/mL, un fer sérique < 10 µmol/L et une capacité totale de fixation du fer (TIBC) ≥ 68 µmol/L17,18. Les femmes enceintes ne remplissant pas ces critères diagnostiques ont été classées dans le groupe des femmes enceintes sans IDA. Les femmes non enceintes en âge de procréer, sans grossesse en cours et sans troubles hématologiques connus, ont servi de groupe témoin. Les critères d'exclusion pour les deux groupes comprenaient un antécédent documenté de maladies chroniques ou systémiques associées à une altération du métabolisme du fer ou à un état inflammatoire, telles que l'insuffisance rénale chronique, les troubles auto-immuns, les cancers, le syndrome de l'intestin irritable, les maladies hépatiques chroniques ou les troubles héréditaires du fer (par exemple, l'hémochromatose). Étaient également exclues les femmes présentant une infection aiguë au moment du prélèvement, celles ayant reçu un traitement par fer intraveineux ou une transfusion sanguine au cours des trois mois précédents, ainsi que celles sous traitement immunosuppresseur à long terme. L'indice de masse corporelle (IMC) et l'origine ethnique ont été notés pour toutes les participantes ; toutefois, ces variables n'ont pas été utilisées comme critères d'exclusion et ont plutôt été considérées comme des covariables potentielles dans l'analyse.
Détermination de la taille de l'échantillon
La taille de l'échantillon a été calculée à l'aide d'un logiciel épidémiologique de calcul de taille d'échantillon19, en se basant sur une prévalence attendue de l'anémie ferriprive chez les femmes enceintes en Arabie saoudite de 40 %6, avec un niveau de confiance de 95 % et une marge d'erreur de 5 %. La taille minimale requise de l'échantillon a été estimée à 182 participants ; par conséquent, un total de 200 participants ont été recrutés afin d'améliorer la précision statistique.
Collecte des données
Questionnaire
Les données ont été recueillies à l’aide d’un questionnaire structuré et validé. Le questionnaire a été élaboré suite à une revue approfondie de la littérature et évalué par un comité d’experts spécialisés, comprenant des obstétriciens, des nutritionnistes et des épidémiologistes, afin d’assurer sa validité de contenu. Une étude pilote impliquant 20 participants, qui n’ont pas été inclus dans l’analyse finale, a été menée pour évaluer la clarté, la fiabilité et la faisabilité. La cohérence interne du questionnaire était satisfaisante, avec un alpha de Cronbach de 0,81.
Le questionnaire final comprenait trois sections composées au total de 35 éléments (Fichier supplémentaire 1) :
Section 1 (données sociodémographiques, 10 éléments) : âge, niveau d'éducation, profession, lieu de résidence, nationalité et antécédents familiaux d'anémie.
Section 2 (habitudes alimentaires, 12 éléments) : fréquence de consommation d'aliments riches en fer (viande rouge, viande blanche, poisson, légumes et céréales enrichies), apports en thé et café, et régime alimentaire. Les variables alimentaires ont été choisies a priori en fonction de leur pertinence établie concernant l'apport en fer, la biodisponibilité du fer et les facteurs alimentaires pouvant influencer l'absorption du fer. Le questionnaire comprenait les principales sources alimentaires de fer, notamment la viande rouge, la volaille, le poisson, les légumes-feuilles verts et les céréales enrichies. Les aliments riches en vitamine C, en particulier les agrumes, ont été évalués car la vitamine C peut améliorer l'absorption du fer non hémique. En revanche, la consommation de thé et de café a été évaluée car les polyphénols alimentaires peuvent inhiber l'absorption du fer non hémique lorsqu'ils sont consommés pendant ou autour des repas. Le régime alimentaire et la consommation de restauration rapide ont également été évalués afin d'indiquer les habitudes alimentaires globales et l'adéquation nutritionnelle. Les éléments alimentaires sélectionnés ont été déterminés à partir d'une revue de la littérature effectuée lors de l'élaboration du questionnaire, puis évalués par des experts en obstétrique, nutrition et épidémiologie afin de garantir leur validité de contenu.
Section 3 (Antécédents cliniques et symptômes, 13 éléments) : âge gestationnel, parité, antécédents de transfusion sanguine, fatigue, vertiges, fièvre et autres symptômes couramment associés à l'anémie.
Évaluation biochimique
Pour chaque participant, un échantillon de 5 mL de sang veineux a été prélevé après un jeûne nocturne. Les échantillons ont été centrifugés à 2000 × g pendant 15 minutes afin de séparer le sérum, qui a ensuite été analysé immédiatement. La concentration en hémoglobine a été mesurée à l’aide d’un analyseur hématologique automatisé et exprimée en grammes par décilitre (g/dL). Les taux de ferritine sérique ont été évalués par immunoessai par électrochimiluminescence (ECLIA) sur un analyseur immunoanalytique automatisé et exprimés en nanogrammes par millilitre (ng/mL). Le fer sérique, la capacité totale de fixation du fer (TIBC) et la capacité de fixation du fer non saturée (UIBC) ont été déterminés par une méthode colorimétrique sur un analyseur biochimique automatisé, les résultats étant rapportés en micromoles par litre (µmol/L). La saturation de la transferrine (TR-SAT) a été calculée comme le rapport entre le fer sérique et la TIBC, multiplié par 100, et exprimée en pourcentage.
Statistiques et analyses des données
Les données ont été codées et analysées à l'aide d'un logiciel normalisé d'analyse statistique. Des statistiques descriptives, incluant les moyennes, les écarts types et les pourcentages, ont été utilisées pour résumer les variables sociodémographiques, alimentaires, cliniques et biochimiques. Les comparaisons entre groupes ont été effectuées à l'aide d'un test t de Student non apparié ou d'une analyse de variance à un facteur (ANOVA), selon le cas. Le seuil de significativité statistique a été fixé à p < 0,05. Les représentations graphiques ont été réalisées à l'aide de logiciels de création de graphiques et d'analyse statistique.
Afin d'examiner les facteurs indépendamment associés à l'ACI, un modèle de régression logistique multivariée a été appliqué. Le statut d'ACI a été défini comme la variable dépendante binaire (ACI = 1, non-ACI/témoin = 0). Les variables indépendantes ont été sélectionnées a priori selon leur plausibilité biologique et des preuves provenant d'études antérieures, et comprenaient des caractéristiques sociodémographiques (lieu de résidence, antécédents familiaux d'anémie), l'état physiologique (grossesse) et des variables alimentaires (consommation de viande rouge, de volaille et de fruits agrumes).
Les variables catégorielles ont été codées à l'aide de variables fictives, et les variables d'apport alimentaire ont été classées comme faibles ou adéquates selon la fréquence de consommation déclarée (≤2 fois par semaine contre >2 fois par semaine). Toutes les variables sélectionnées ont été introduites simultanément dans le modèle de régression afin d'estimer leurs associations indépendantes tout en tenant compte des facteurs de confusion potentiels. Des rapports de cotes ajustés (OR) avec des intervalles de confiance à 95 % (IC) ont été rapportés, les valeurs d'OR supérieures à 1 indiquant une probabilité plus élevée d'anémie ferriprive (IDA). Un résumé visuel des OR et des IC à 95 % correspondants a été présenté à l'aide d'un diagramme en forêt généré à l'aide d'un logiciel de tableur.