Le protocole de l'étude a été examiné et approuvé par le Comité d'éthique de l'Hôpital de médecine traditionnelle chinoise et de médecine occidentale intégrées de Cangzhou, province du Hebei (n° d'approbation CZX2023-KY-164) et a été mené conformément à la Déclaration d'Helsinki. Le même comité a dispensé l'exigence de consentement éclairé écrit en raison du caractère rétrospectif de l'étude et de l'utilisation de données entièrement anonymisées.
Conception de l'étude et cadre de mise en œuvre
Il s'agissait d'une étude rétrospective de cohorte comparative menée au Centre hospitalier de médecine traditionnelle chinoise et de médecine occidentale intégrées de Cangzhou, dans la province du Hebei, entre janvier 2022 et décembre 2024. L'objectif de l'étude était d'évaluer les résultats hémostatiques cliniques, les profils exploratoires de biomarqueurs tissulaires et la sécurité du ZHF par rapport au TXA chez des femmes en âge de procréer présentant une hémorragie utérine anormale secondaire à des EP.
Sélection des patientes
Les femmes âgées de 25 à 50 ans ayant subi une évaluation hystéroscopique suivie d'une polypectomie hystéroscopique, avec confirmation histopathologique de polypes endométriaux bénins, ont été sélectionnées pour évaluer leur éligibilité. L'inclusion finale nécessitait une confirmation histopathologique de polypes endométriaux bénins, excluant ainsi les lésions présentant une hyperplasie, une atypie ou une malignité de la cohorte analytique.
Les critères d'inclusion étaient les suivants : cycles menstruels réguliers avant l'apparition des SAU ; diagnostic de PÉ confirmé par échographie ou hystéroscopie ; symptômes de saignement utérin anormal attribuable à des polypes endométriaux (SAU-PE) persistant pendant au moins deux cycles ; et données cliniques, biologiques et de suivi complètes disponibles pour l'analyse. Les critères d'exclusion étaient la présence de fibromes utérins ≥3 cm, d'adénomyose ou d'adhérences intra-utérines ; une grossesse, une lactation ou un statut périménopausique ; l'utilisation d'une thérapie hormonale, de dispositifs intra-utérins ou d'anticoagulants au cours des trois mois précédents ; des antécédents ou un diagnostic histopathologique actuel d'hyperplasie endométriale avec atypie, de lésions endométriales atypiques ou de malignité ; et des dossiers médicaux incomplets ou un suivi inférieur à un cycle de traitement. Après application de ces critères, un total de 181 patientes ont été incluses : 87 ont reçu le ZHF et 94 ont reçu l'ACQ.
Protocoles de traitement
Les patients ont été classés en groupes de traitement selon le régime prescrit dans le cadre de la prise en charge ambulatoire habituelle avant la polypectomie hystéroscopique. Le choix du traitement était déterminé par la pratique clinique courante et non par le protocole de l'étude, et n'a pas été randomisé.
Dans le groupe ZHF, les patients ont reçu une formule Zhuyang-Huazheng standardisée, préparée et dispensée par la pharmacie de médecine traditionnelle chinoise de l'hôpital intégré de médecine traditionnelle chinoise et de médecine occidentale de Cangzhou, Hebei. La composition de la formule est restée fixe pendant toute la durée de l'étude et n'a pas été modifiée individuellement en fonction des symptômes des patients. Chaque prescription quotidienne comprenait : Bupleuri Radix (Chaihu ; Bupleurum chinense DC., racine), 10 g ; Curcumae Rhizoma (Ezhu ; Curcuma phaeocaulis Valeton, rhizome), 10 g ; Paeoniae Radix Alba (Baishao ; Paeonia lactiflora Pall., racine), 15 g ; Sparganii Rhizoma (Sanleng ; Sparganium stoloniferum Buch.-Ham., tubercule), 10 g ; Astragali Radix (Huangqi ; Astragalus membranaceus [Fisch.] Bunge, racine), 20 g ; et Agrimoniae Herba (Xianhecao ; Agrimonia pilosa Ledeb., partie aérienne), 30 g. La composition détaillée, les sources botaniques, les parties médicinales utilisées et les quantités de la formule sont résumées dans le Tableau supplémentaire 1.
Tous les matériaux végétaux bruts ont été obtenus via la pharmacie hospitalière et ont fait l'objet d'inspections d'identité et de qualité conformes aux normes institutionnelles applicables et à la Pharmacopée de la République populaire de Chine. Pour chaque prescription quotidienne, les matériaux végétaux étaient mélangés, trempés dans environ 800 mL d'eau purifiée pendant 30 min, puis décoctés deux fois selon le protocole standardisé de décoction de la pharmacie hospitalière. La première extraction était réalisée pendant 30 min après ébullition, suivie d'une seconde extraction avec environ 600 mL d'eau pendant 25 min. Les deux extraits aqueux étaient filtrés, combinés puis concentrés jusqu'à un volume final d'environ 400 mL. La décoction obtenue était divisée en deux doses uniques de 200 mL, conditionnées séparément et scellées, puis stockées en conditions réfrigérées (2–8 °C) jusqu'à leur distribution. Les patients ont reçu pour instruction de réchauffer la décoction avant administration et d'en prendre 200 mL par voie orale deux fois par jour, le matin et le soir après les repas, pendant 15 jours consécutifs dans le cadre du cycle de traitement préopératoire.
La formulation, la procédure de préparation, la dose et le schéma thérapeutique ont été documentés avec suffisamment de détails pour faciliter la reproductibilité, conformément aux recommandations établies pour la description précise des interventions à base de médecine traditionnelle chinoise11.
Dans le groupe TXA, les patients ont reçu des comprimés d'acide tranexamique à raison de 500 mg trois fois par jour pendant 5 jours consécutifs au cours du cycle de traitement préopératoire correspondant. Les deux groupes ont été invités à maintenir leur alimentation et leurs habitudes d'exercice habituelles, et à éviter l'utilisation concomitante d'hormones ou de médicaments hémostatiques. Par la suite, tous les patients ont subi une résection hystéroscopique de polype à l’aide de techniques électrochirurgicales standard réalisées par des gynécologues expérimentés. La polypectomie hystéroscopique a été programmée de préférence après l'arrêt des saignements menstruels et en phase proliférative précoce, lorsque cela était cliniquement réalisable. Toutefois, comme le traitement et la chirurgie étaient dispensés dans le cadre des pratiques cliniques habituelles, le moment de l'intervention n'a pas été strictement standardisé à une phase identique du cycle menstruel pour tous les patients.
Évaluations cliniques et de laboratoire
Caractéristiques de base :
Les paramètres démographiques et cliniques, notamment l'âge, l'indice de masse corporelle (IMC), la durée du cycle menstruel et la parité, ont été extraits des dossiers médicaux. Une échographie transvaginale a été réalisée en début de phase proliférative afin de mesurer l'épaisseur de l'endomètre et la taille du polype. Le nombre de lésions a été noté comme unique ou multiple.
Critères d'évaluation de l'efficacité :
Le critère principal d'évaluation de l'efficacité était la variation des pertes sanguines menstruelles évaluée à l'aide du tableau d'évaluation pictographique des pertes sanguines (PBAC). Les scores PBAC ont été comparés entre le cycle prétraitement (C–2) et le cycle immédiatement précédent la polypectomie hystéroscopique (C–1).
Critères d'évaluation secondaires :
Concentration en hémoglobine (g/dL) avant et après le traitement ;
Proportion de répondants au PBAC, définie comme une réduction ≥ 50 % du PBAC par rapport à la valeur initiale ;
Délai d'obtention de la stabilité clinique (TtCS), défini comme le nombre de jours nécessaires à l'arrêt ou à la normalisation des saignements utérins au cours du cycle de traitement.
Évaluation histopathologique et des biomarqueurs :
Des prélèvements endométriaux ont été recueillis à partir du tissu polypoïde et de l'endomètre adjacent normal lors de l'intervention chirurgicale hystéroscopique. L'endomètre adjacent a été défini comme un tissu endométrial non polypoïde obtenu chez le même patient au cours de la même procédure hystéroscopique et histologiquement distinct du corps du polype et de la zone de transition immédiate entre le polype et l'endomètre. Seuls les tissus endométriaux morphologiquement évaluables, présentant une architecture glandulaire et stromale préservée, ont été inclus pour l'évaluation comparative. Les échantillons ont été fixés dans du formol tamponné neutre à 10 %, inclus en paraffine et coupés en sections de 4 µm d'épaisseur.
L'immunohistochimie (IHC) a été réalisée à l'aide d'anticorps monoclonaux dirigés contre Ki-67 (clone MIB-1, 1:200) et p53 (clone DO-7, 1:100). Les lames ont été incubées toute la nuit à 4 °C, révélées à l'aide du chromogène DAB et contre-colorées à l'hématoxyline. Les deux tests d'anticorps avaient été validés pour une utilisation diagnostique courante dans le laboratoire d'anatomie pathologique de l'établissement, conformément aux procédures de laboratoire établies. Des coupes témoins positives appropriées ont été incluses lors de chaque cycle de coloration, et la présence d'une coloration positive interne a été systématiquement examinée comme mesure complémentaire de contrôle qualité afin de confirmer une performance adéquate de la coloration. Des préparations témoins négatives, traitées sans anticorps primaire, ont également été évaluées selon le protocole habituel du laboratoire. Seuls les cycles de coloration présentant les résultats attendus pour les témoins ont été considérés comme techniquement valides et inclus dans l'évaluation quantitative.
Avant l'évaluation quantitative, chaque lame a été examinée en faible grossissement afin d'identifier des régions épithéliales représentatives et bien conservées. Cinq champs au fort grossissement, non superposés, ont ensuite été sélectionnés parmi ces régions exploitables pour l'analyse quantitative. Le choix des champs ne s'est pas basé sur les zones présentant l'intensité de coloration la plus élevée. Les zones présentant une inflammation marquée, une hémorragie étendue, une dégradation ou une fragmentation tissulaire, un artefact de broyage ou une conservation tissulaire autrement inadéquate ont été exclues de l'évaluation quantitative. Toutes les lames d'immunohistochimie ont été analysées indépendamment par deux pathologistes ayant été tenus à l'écart des informations concernant les groupes de traitement. Chaque pathologiste a évalué indépendamment les cinq champs au fort grossissement sélectionnés et a noté l'indice Ki-67 et le score H de p53, sans accès à l'évaluation de l'autre pathologiste. Une fois l'analyse indépendante terminée, les cas présentant des évaluations discordantes ont été revus ensemble, et les valeurs finales utilisées pour l'analyse ont été établies par consensus.
L'indice Ki-67 (%) a été calculé comme le pourcentage moyen de noyaux positifs parmi au moins 500 cellules épithéliales. L'expression de p53 a été quantifiée à l'aide de la méthode du score H, allant de 0 à 300 (intensité × pourcentage de noyaux positifs). Comme indiqué ci-dessus, le score H de p53 a été considéré comme une mesure continue exploratoire de l'expression immunohistochimique plutôt que comme une classification formelle du statut de p53 basée sur des profils. Les rapports d'expression polype-tissu adjacent pour Ki-67 et p53 ont été calculés comme des mesures relatives exploratoires de l'expression immunohistochimique entre des compartiments tissulaires appariés.
Évaluation de la sécurité :
Les événements indésirables (EI) ont été recueillis de manière rétrospective à partir des dossiers de consultations externes et des journaux de suivi téléphonique. Les paramètres évalués comprenaient les réactions gastro-intestinales (nausées, vomissements, inconfort abdominal), l'élévation des enzymes hépatiques, les anomalies de la fonction rénale (débit de filtration glomérulaire estimé <60 mL/min/1,73 m2) et les manifestations allergiques. Un critère de jugement principal composite de sécurité, non gastro-intestinal, a été prédéfini comme la survenue d'une anomalie de la fonction hépatique, d'une anomalie de la fonction rénale, d'une manifestation allergique ou de tout événement indésirable grave (EIG).
Analyse de Kaplan-Meier du délai de stabilisation hémostatique clinique :
Des courbes de probabilité cumulée dérivées de la méthode de Kaplan-Meier ont été établies afin de visualiser le déroulement temporel de l'obtention d'une stabilisation hémostatique clinique après l'initiation du traitement. Le délai de stabilisation clinique a été défini comme le nombre de jours entre le début du traitement et l'arrêt ou la normalisation documentés pour la première fois des saignements utérins au cours du cycle thérapeutique. Les profils cumulés de stabilisation des groupes ZHF et TXA ont été comparés à l'aide du test du log-rang.
Analyse statistique
Les variables continues ont été testées pour la normalité à l’aide du test de Shapiro–Wilk et exprimées en moyenne ± écart-type (ET). Les comparaisons entre groupes ont été réalisées à l’aide du test t de Student ou du test de Mann–Whitney U, selon les cas. Les variables catégorielles ont été analysées à l’aide du test χ2 ou du test exact de Fisher. Des tests t appariés ont été utilisés pour les comparaisons intra-groupe avant/après. La méthode de Kaplan–Meier avec test du log-rank a été appliquée pour comparer la probabilité cumulée d’atteindre une stabilité hémorragique clinique entre les groupes de traitement. Des analyses de corrélation de Spearman ont été effectuées afin d’évaluer les associations entre les rapports polype-tissu adjacent de biomarqueurs et les paramètres cliniques liés au saignement. Des analyses exploratoires de régression linéaire univariée et multivariée ont été réalisées en utilisant le score PBAC de base et le temps pour atteindre la stabilité clinique (TtCS) comme variables dépendantes continues. Pour le modèle du score PBAC de base, les covariables candidates incluaient l’âge, l’indice de masse corporelle, l’hémoglobine de base, la taille du polype, la présence de polypes multiples, l’épaisseur de l’endomètre, le rapport Ki-67 polype-tissu adjacent et le rapport p53 polype-tissu adjacent. Pour le modèle TtCS, les covariables candidates incluaient le groupe de traitement, le score PBAC de base, l’hémoglobine de base, la taille du polype, la présence de polypes multiples, le rapport Ki-67 polype-tissu adjacent et le rapport p53 polype-tissu adjacent. Toutes les analyses impliquant l’expression de Ki-67 et de p53, y compris les comparaisons entre groupes, les analyses de corrélation et les modèles de régression, ont été considérées comme exploratoires et génératrices d’hypothèses, et non confirmatoires. Les résultats de régression sont présentés sous forme de coefficients bêta standardisés avec des intervalles de confiance (IC) à 95 %. Une valeur de P bilatérale < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide du logiciel R.