Cette étude de laboratoire a été approuvée par le comité d'éthique institutionnel de l'Université de la Santé et des Technologies de Kocaeli (numéro d'approbation 31/22) et a été réalisée conformément aux principes éthiques énoncés dans la Déclaration d'Helsinki et aux lignes directrices PRILE 202128 (Fichier supplémentaire 1 et Fichier supplémentaire 2). Le consentement éclairé pour l'utilisation des dents extraites a été obtenu auprès des donneurs. Le modèle de spécimen, la préparation de la rainure et l'évaluation ont suivi un protocole décrit8. Tous les matériaux, instruments et logiciels utilisés dans ce protocole sont répertoriés dans le Tableau des matériaux.
Calcul de la taille de l'échantillon
La taille de l'échantillon était basée sur une étude précédente ayant utilisé le même modèle de rainure artificielle et le même système de notation.26. Dans cette étude, une analyse de puissance a priori (taille de l'effet = 0,6, α = 0,05, puissance = 0,95) indiquait n = 12 par groupe, valeur augmentée par les auteurs à 15 afin de compenser d'éventuelles pertes. Pour accroître la précision, la présente étude a utilisé n = 20 par groupe, soit 400 sillons au total. Ce calcul prenait en compte l'effet principal de la technique d'élimination ; aucune analyse a priori distincte n'a été réalisée pour la technique × interaction du scellant. Une analyse de sensibilité a posteriori basée sur la distribution du khi-deux de la statistique de Scheirer-Ray-Hare (statsmodels 0,14,6) a montré que les 200 rainures analysées dans chaque région offraient une puissance de 80 % (α = 0,05) pour détecter une interaction d'une taille d'effet w = 0,24 (4 degrés de liberté) et un effet principal du facteur « sealer » de w = 0,20 (1 degré de liberté), de sorte que des effets de taille inférieure à ceux-ci, en dessous de l'effet moyen de Cohen défini à w = 0,3, auraient pu échapper à la détection.
Critères de sélection de l'échantillon
Deux cents incisives centrales supérieures humaines extraites ont été utilisées. Après l'extraction, les dents ont été désinfectées dans du NaOCl à 2 %, rincées à l'eau distillée, puis conservées dans une solution de thymol jusqu'à leur utilisation. Ont été incluses les dents présentant un canal radiculaire unique et rectiligne ainsi qu'un apex intact, la présence d'un canal unique ayant été confirmée par examen radiographique. Ont été exclues les dents présentant une courbure, une calcification, un traitement préalable, une résorption ou une taille apicale initiale de #30 ou supérieure. Les couronnes ont été sectionnées à une longueur standard, avec une longueur de travail de 18 mm. La randomisation a été effectuée en deux étapes à l'aide d'un générateur de séquence aléatoire en ligne (random.org) : les 200 dents ont d'abord été réparties entre les deux obturateurs (n = 100 chacun), puis les dents de chaque groupe d'obturateur ont été réparties entre les cinq techniques de retrait (n = 20 par groupe), de sorte que la répartition ait été stratifiée selon l'obturateur. Les séquences aléatoires ont été générées et appliquées par un investigateur qui n'a pas effectué l'évaluation, et les échantillons ont été étiquetés avec des identifiants codés afin que les observateurs restent aveugles à la fois sur l'obturateur utilisé et sur la technique de retrait.
ATTENTION : les dents humaines extraites représentent un risque biologique potentiel. Manipulez tous les échantillons avec des équipements de protection individuelle appropriés, notamment des gants, un masque et une protection oculaire.
Préparation de l'échantillon
Après confirmation de la perméabilité à l’aide d’un fichier K de taille ISO 10, les canaux ont été élargis jusqu’à la taille 40/0,04 à la longueur de travail à l’aide d’un système d’instrumentation endodontique rotatif, sous irrigation avec une solution d’hypochlorite de sodium à 3 % (NaOCl), suivie d’un rinçage par 5 mL de NaOCl à 3 % et 5 mL d’acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA) à 17 %. Toutes les solutions de NaOCl ont été préparées à partir d’une solution mère à 5,25 % par dilution avec de l’eau distillée : le NaOCl à 3 % en mélangeant du NaOCl à 5,25 % et de l’eau distillée selon un rapport volumétrique de 4:3 (par exemple, 100 mL de NaOCl à 5,25 % et 75 mL d’eau distillée), et le NaOCl à 5 % selon un rapport volumétrique de 20:1 (par exemple, 100 mL de NaOCl à 5,25 % et 5 mL d’eau distillée).
ATTENTION : L'hypochlorite de sodium est corrosif pour la peau, les yeux et les muqueuses. Préparez et manipulez toutes les solutions avec des gants et une protection oculaire, et évitez toute extrusion au-delà du foramen apical.
Les racines ont été incluses dans un matériau d'empreinte à l'intérieur de tubes de centrifugation et sectionnées longitudinalement à l'aide d'un disque diamanté, sans pénétrer l'espace canal. Toute racine dont l'espace canal avait été pénétré lors de la sectionnement devait être exclue et remplacée par une dent préparée de la même manière ; aucune racine n'a rempli ce critère dans la série actuelle. Deux rainures artificielles, mesurant 4 mm de long, 0,2 mm de large et 0,5 mm de profondeur, ont été réalisées sur la paroi du canal à l'aide d'une pointe de surfaçage montée sur une unité endodontique piézoélectrique ultrasonique à 40 % de puissance, sous microscope opératoire dentaire à un grossissement ×20. Les rainures ont été préparées sur des parois opposées du canal, à 2 à 6 mm et 10 à 14 mm de l'apex (Figure 1). Après la réalisation des rainures, la couche de débris a été éliminée à l'aide de 2 mL d'EDTA à 17 %.
Les rainures de 100 dents ont été remplies avec du CeraSeal, et celles des 100 dents restantes avec du BioRoot Flow à l’aide de pointes de gutta-percha. Le remplissage complet des rainures a été confirmé au microscope opératoire dentaire à un grossissement de ×20. Les moitiés radiculaires ont été réassemblées dans des tubes Eppendorf, la cavité d’accès a été scellée avec un matériau de obturation provisoire, le foramen apical et les surfaces radiculaires ont été recouverts de cire, puis les échantillons ont été conservés à 37 °C et à une humidité de 100 % pendant 30 jours. La prise du ciment a ensuite été vérifiée au microscope opératoire dentaire à un grossissement de ×20.
Procédures de retrait
Les échantillons pour chaque matériau d’obturation ont été répartis en cinq techniques de retrait (n = 20 par groupe), le SNI servant de témoin non activé. Les groupes SNI, PUI, R-SWEEPS et Er,Cr:YSGG ont suivi un même protocole d’irrigation composé de six cycles de délivrance-activation, dont trois avec du NaOCl à 5 % suivis de trois avec de l’EDTA à 17 %. À chaque cycle, 5 mL d’irrigant ont été délivrés en 150 s à 2 mL/min à l’aide d’une pompe d’irrigation, puis l’irrigant présent dans le canal a été activé pendant 20 s selon la technique testée. Les trois cycles de NaOCl ont été réalisés avant les trois cycles d’EDTA, de sorte que chaque échantillon a reçu 15 mL de NaOCl à 5 % et 15 mL d’EDTA à 17 % (30 mL au total) ainsi que six activations de 20 s (trois par irrigant, soit 120 s au total). Le temps de traitement dans les trois groupes activés était donc d’environ 17 min (6 × 150 s de délivrance plus 6 × 20 s d’activation).
Dans le groupe SNI, les irriguants ont été administrés au moyen d'une aiguille de 30 G placée à 2 mm de la longueur de travail sans activation ; ce groupe a reçu les mêmes volumes, le même débit et la même séquence d'irriguants que les groupes activés, mais aucun intervalle d'attente n'a été inséré entre les administrations en remplacement des périodes d'activation, de sorte que son temps d'exposition total était d'environ 15 min (6 × 150 s).
Dans le groupe PUI, l'irriguant a été activé à l'aide d'une pointe IrriSafe de taille 20 montée sur l'unité endodontique piézoélectrique à ultrasons, à 40 % de puissance, la pointe étant positionnée à 2 mm de la longueur de travail, pendant trois cycles de 20 secondes par irriguant.
Dans le groupe R-SWEEPS, l'irrigant a été activé à l'aide d'un laser Er:YAG à 2940 nm en mode R-SWEEPS, en utilisant une pointe radiale (diamètre de 400 µm, longueur de 14 mm) maintenue à l'orifice du canal sans pénétrer dans celui-ci, pendant trois cycles de 20 s par irrigant, la pulvérisation d'air et d'eau étant désactivée. Dans ce mode, chaque impulsion de 15 mJ est délivrée en tant que membre d'une paire synchronisée, à une fréquence de répétition de paires d'impulsions de 15 Hz (30 mJ par paire), ce qui correspond à une puissance moyenne de 0,45 W, à une énergie de 9 J par activation de 20 s, et à 54 J par échantillon ; l'énergie par impulsion correspond à une densité d'énergie de 11,9 J/cm2 à l'extrémité de la pointe de 400 µm.
Dans le groupe Er,Cr:YSGG, l'irrigant a été activé à l'aide d'un laser Er,Cr:YSGG à 2780 nm en mode H (25 mJ par impulsion, 50 Hz, 1,25 W ; 25 J par activation de 20 s et 150 J par échantillon) à l'aide d'une pointe émettrice radiale RFT2 positionnée à 2 mm du trajet de travail, selon trois cycles de 20 s par irrigant, avec les pulvérisations d'air et d'eau désactivées. Dans les deux groupes laser, le canal a été rempli d'irrigant délivré par la pompe avant l'activation du laser, et les paramètres correspondaient aux réglages prédéfinis du fabricant pour l'activation des irrigants endodontiques, utilisés sans modification. Tableau 1 indique les paramètres complets d'irradiation, incluant l'énergie par impulsion, la densité d'énergie et l'énergie totale délivrée.
Dans le groupe GentleWave G4, l'échantillon réassemblé a été conservé dans un tube de centrifugeuse, une plateforme a été construite sur l'extrémité coronaire de la racine à l'aide de la résine SoundSeal du fabricant afin de créer une étanchéité hermétique entre l'instrument d'irrigation endodontique et l'orifice du canal, puis le cycle automatisé du système GentleWave G4 avec le logiciel ProControl a été exécuté en utilisant les fluides de procédure du fabricant selon la séquence suivante : NaOCl à 3 % pendant 5 min, eau distillée pendant 30 s, EDTA à 8 % pendant 2 min, et un rinçage final à l'eau distillée pendant 30 s (environ 8 min au total). L'instrument de procédure a été maintenu en place par la plateforme pendant l'ensemble du cycle. Les concentrations d'irriguant, les débits, le dégazage et les durées de cycle sont prédéfinis par le fabricant et ne peuvent pas être modifiés par l'opérateur ; par conséquent, ce groupe différait des quatre autres groupes par la concentration, le volume et la durée de traitement de l'irriguant (voir la section Discussion).
Évaluation du scellant résiduel
Les moitiés des racines ont été séparées et examinées au microscope chirurgical dentaire avec un grossissement de ×20. Le scellement résiduel dans chaque rainure a été évalué selon une échelle à quatre points29 : 0, absence de scellant dans la rainure ; 1, scellant recouvrant moins de la moitié ; 2, scellant recouvrant plus de la moitié ; et 3, rainure entièrement remplie. Deux observateurs calibrés, aveugles quant au type de scellant et à la technique de retrait, ont évalué indépendamment les rainures ; l'accord entre observateurs était de κ = 0,92 (kappa de Cohen). Les désaccords ont été résolus par consensus.
Analyse statistique
Les données ont été analysées à l'aide de Python 3.9.6 avec les bibliothèques SciPy 1.13.1, statsmodels 0.14.6 et scikit-posthocs 0.14.0. Les sillons apicaux et coronaux ont été analysés séparément. Les scores de scellement résiduel entre les 10 groupes ont été comparés à l'aide du test de Kruskal-Wallis, suivi du test de Dunn avec correction de Bonferroni. L'epsilon carré a été calculé comme mesure de l'effet. Les effets du scellant et de la technique de retrait, ainsi que leur interaction, ont été évalués à l'aide du test de Scheirer-Ray-Hare. Pour chaque technique de retrait, les deux scellants ont été comparés à l'aide du test U de Mann-Whitney avec correction de Bonferroni, et le delta de Cliff avec des intervalles de confiance à 95 % obtenus par rééchantillonnage a été indiqué comme mesure de l'effet. Le seuil de significativité a été fixé à 5 %.