Élimination des composés ramifiés et cycliques par adduction d'urée pour la paléothermométrie U^k'₃₇

1. le programme d’installation et préparation du matériel

1. Obtenir un lipide total extrait (TLE) en utilisant une méthode d’extraction par solvant (Sonication, Soxhlet ou Accelerated Solvent Extraction (ASE)).
2. Acheter les matériaux suivants de n’importe quel détaillant de produits chimique : tible borosilicate verre pipettes et ampoules ; eau pure ; hexane ; Dichlorométhane (DCM) ; méthanol ; urée.
   1. Les réactifs doivent être pure et libre à partir d’hydrocarbures. Par ailleurs, l’eau pure peut être faite dans un laboratoire à l’aide d’un système de purification de l’eau.
3. Obtenir des flacons de verre de borosilicate de 4 mL avec bouchons bordées de PTFE.

2. méthodes

1. Faire un mélange de 2:1 DCM:Hexane (v : v).
   1. Dans un erlenmeyer, mélanger 200 mL de DCM et 100 mL d’hexane.
2. Faire un mélange d’urée dans le méthanol (100 mg/mL).
   1. Verser 300 mL de méthanol dans un erlenmeyer.
   2. Ajouter 300 mg d’urée.
   3. Remuer sur une plaque automatique remuer jusqu'à dissolution complète de l’urée.
3. Commencez par l’échantillon sec dans un flacon de 4 mL.
4. Suspendre l’échantillon dans 1,5 mL d’un mélange de 2:1 de DCM:Hexane (v : v).
   1. Si l’échantillon ne se dissout pas complètement, laisser agir pendant 5 min.
5. À ce mélange, ajouter 1,5 mL d’urée dans le méthanol.
   1. Après cet ajout, guettez un précipité blanc de forme. Ceci signale la création de cristaux d’urée.
6. Sécher doucement les cristaux sous atmosphère d’azote, à l’aide de la chaleur douce. S’assurer que tous les solvant s’est évaporée avant de passer à l’étape suivante.
7. Rincer les cristaux 3 x avec environ 1 mL d’hexane. Supprimer l’hexane entre chaque rinçage à l’aide d’une pipette de verre pour le transférer dans un flacon étiqueté « non-adduit. »
8. Dissoudre les cristaux dans 2 mL d’eau pure. Secouer pour assurer une dissolution complète.
9. Extraire la phase aqueuse avec de l’hexane en ajoutant 1 mL et en secouant doucement pendant 5 s.
10. Permettre à l’hexane et eau à complètement séparés avant d’enlever environ 75 % de l’hexane à l’aide d’une pipette de verre et de le transférer dans un flacon étiqueté « adduit. »
11. Répétez l’étape 2.10 deux fois.
12. Jeter la solution d’eau et de l’urée dans un conteneur à déchets approprié.