Méthode de l'addition standard

1. préparation des réactifs

1. Al^{3 +} solution étalon de 100 ppm : dissoudre 0,9151 g de nitrate basique d’aluminium (Al (NO₃)₃•9H₂O) dans une fiole jaugée de 1 L avec l’eau distillée.
2. 8HQ solution dans l’acide acétique 1 M (2 % wt/vol) : ajouter 2,0 g de 8-Hydroxyquinoléine dans une fiole jaugée de 100 mL.
3. Soigneusement ajouter 5,74 mL d’acide acétique glacial à la fiole de 100 mL, puis compléter au trait avec l’eau distillée. Cela permet à la 8-Hydroxyquinoléine de dissoudre en phase aqueuse.
4. 1 M NH₄⁺/NH₃ tampon (pH ~ 8) : ajouter 20 g d’acétate d’ammonium (NH₄OAc) dans une bouteille de 100 mL.
5. Ajouter 7 mL d’hydroxyde d’ammonium 30 % à cette bouteille de 100 mL et compléter au trait avec l’eau distillée. Cela aide à neutraliser l’acide dans la solution 8HQ lorsqu’il est combiné.
6. Les autres réactifs comprennent sulfate de sodium anhydre (Na₂SO₄) et le chloroforme (qualité technique).

2. préparation des échantillons

1. Préparer une Al^{3 +} solution titrée de 1,00 ppm en ajoutant 1,0 mL de l’étalon de 100 ppm Al^{3 +} solution avec une pipette dans une fiole jaugée de 100 mL.
2. Placez les six 125 mL ampoule à entonnoirs dans les anneaux qui se trouvent sur un stand de grand anneau situé dans la hotte. Ils doivent être étiquetés comme suit : BL, 0, 1, 2, 3, 4. Veillez à ce que toute la verrerie est rigoureusement propre, car il est difficile d’obtenir des résultats quantitatifs si petites perles du chloroforme collent aux parois de la verrerie.
3. Ajouter 25,00 mL de la solution^{3 +} Al inconnue à cinq cheminées ampoule à marqué 0, 1, 2, 3, & 4. Dans cet exemple, la concentration inconnue est 0,110 ppm.
4. Ajouter 0, 1.00, 2.00, 3.00 et 4,00 mL de la solution^{3 +} 1,00 ppm étalon Al, respectivement, pour les 5 cheminées avec une pipette 1 mL.
5. Préparer un blanc en ajoutant 25,00 mL d’eau distillée à l’ampoule à décanter étiquetée BL.
6. Ajouter 1,0 mL de la solution de 8-Hydroxyquinoléine avec une pipette à chacune des six solutions.
7. Ajouter 3,0 mL de solution tampon avec une pipette à chacune des six solutions.
8. Extraire chaque solution deux fois avec 10 mL de chloroforme, secouer vigoureusement pendant 1 min à chaque fois. N’oubliez pas de ventiler occasionnellement l’ampoule à décanter pour libérer l’accumulation de pression. (Remarque : une bonne extraction n’a lieu que lorsqu’il y a beaucoup de liquide-liquide de contact entre les phases).
9. Recueillir le chloroforme dans un bécher étiqueté de 100 mL propre et sec. Chloroforme a une densité de près de 1,5 g/cm³, donc c’est la couche inférieure. Il ne devrait y avoir aucune trace de gauche de couleur jaune dans la phase aqueuse après une extraction complète.
10. Transférer le combinés de chloroforme extrait chaque bécher dans leur respectif fiole jaugée de 25 mL et compléter au trait avec du chloroforme. N’oubliez pas de placer des bouchons dans chaque fiole pour garder toute chloroforme de s’évaporer.
11. Ajouter environ 1 g de sulfate de sodium anhydre (Na₂SO₄) à chacun des six béchers de 100 mL de l’étape 2,9. Le sulfate de sodium aide à éliminer toute trace d’eau qui peut-être être présent dans l’extrait de chloroforme.
12. Transférer les solutions à leurs gobelets respectés. Agiter soigneusement pour faciliter la déshydratation de l’eau dans l’échantillon.
13. Décanter les extraits de chloroforme dans une cellule de fluorimètre quartz (Note : chloroforme se dissoudra une cellule en plastique polystyrène).

3. sélectionner la longueur d’onde d’Excitation

Déterminer les longueurs d’onde d’excitation et d’émission en exécutant des analyses, puis simplement lire et enregistrer l’intensité de la fluorescence de tous les échantillons à ces valeurs. Les bandes passantes d’excitation et d’émission sont préréglées à 5 nm. Le complexe absorbe dans l’UV proche, donc la longueur d’onde d’excitation doit être environ 385 nm. Au début, surveiller la fluorescence à 500 nm de la branche des émissions.

1. Sur le fluorimètre, vérifiez que les deux les internes et externes ventilateurs de refroidissement dans le fluorimètre sont allumés avant d’allumer la Lampe xénon. La Lampe xénon devient très chaude et nécessite un refroidissement continu.
2. Activez la haute tension (HT) pour le détecteur PMT à 400 V.
3. Ouvrez les deux des volets.
4. Ouvrez le programme d’acquisition de données sur l’ordinateur, c’est ici « 100nmFluorScan ».
5. Placez le « Sample + 2 mL ajouté » solution (2) dans la cellule de quartz à utiliser pour déterminer les longueurs d’onde d’excitation et d’émission exemplaires.
6. Avec la longueur d’onde d’émission initialement fixé à 500 nm, exécuter une analyse de l’excitation de 335-435 nm avec une vitesse de balayage de 2 nm/s.
7. De la parcelle résultant de la fluorescence, déterminer maximum longueur d’onde de fluorescence excitation (EXλ_max) et la valeur de l’instrument à cette valeur.

4. sélection de la longueur d’onde d’émission

1. Définissez la longueur d’onde d’émission de fluorimètre à 450 nm.
2. Définissez la plage de longueur d’onde d’émission à scanner 100 nm de 450 à 550 nm.
3. Pour lancer la numérisation, cliquez sur le bouton de « début du procès » sur le programme en même temps après avoir appuyé sur le bouton « Démarrer » sur le panneau avant du fluorimètre.
4. De la parcelle résultant de la fluorescence, déterminer la longueur d’onde des émissions maximales de fluorescence (EMλ_max) et la valeur de l’instrument à cette valeur (Figure 2).

La figure 2. Détermination optimale EXλ_max et EMλ_max longueurs d’onde.

5. mesure de la Fluorescence des échantillons

1. Tous les échantillons sont exécutés à EMλ_max et EXλ_max. Les analyses ne sont pas nécessaires pour chaque échantillon, mais seulement la valeur de fluorescence à ces conditions. À partir de l’échantillon plus diluée (vide), placer dans une cellule de quartz, puis dans l’instrument. Enregistrer l’intensité de fluorescence dans le cahier de laboratoire.
2. Répétez pour tous les autres échantillons.
3. N’oubliez pas que l’intensité Relative de vide doit être soustraite de l’intensité Relative de chacune des solutions avant de créer le tableau de calibrage.

6. créer l’intrigue des ajouts dosés

1. Tracer l’intensité de fluorescence vs µg de Al^{3 +} ajouté.
2. Déterminer la valeur de la méthode des moindres carrés de l’intrigue qui en résulte et enregistrer la pente et l’intersection.
3. Déterminer les µg de Al^{3 +} dans l’échantillon inconnu de l’équation µg Al^{3 +} = -b/m
4. Sachant que l’aluminium inconnu avait un volume de 25,0 mL ajouté à chaque échantillon, déterminer la concentration de l’aluminium dans l’inconnu.