Soins de base

Étant donné que les souris et les rats représentent plus de quatre-vingt-dix pour cent des animaux utilisés pour la recherche biomédicale, il est essentiel de prendre soin de ces organismes pour obtenir des résultats des expériences. Ces procédures de soins commencent dès le début, par le déballage des animaux des conteneurs d’expédition, le changement de cage, le maintien de conditions de logement appropriées, la fourniture d’un régime alimentaire approprié et la garantie d’un environnement approprié. Bien qu’il existe des procédures générales qui s’appliquent à la majorité des souris et des rats en laboratoire, certains animaux, tels que ceux qui sont immunodéprimés, nécessitent une attention supplémentaire afin de les maintenir à des fins expérimentales.

Cette vidéo décrit les normes et les procédures de soins essentiels pour les animaux immunocompétents et immunodéprimés. Enfin, nous illustrerons quelques exemples d’expériences montrant comment les scientifiques utilisent ces connaissances à différentes fins de recherche.

La réception d’animaux d’autres institutions présente un risque pour les animaux déjà hébergés dans l’établissement, car pendant le transport, les boîtes de transport peuvent entrer en contact avec des agents pathogènes. Par conséquent, une procédure appropriée doit être utilisée lors du déballage des conteneurs d’expédition.

Avant de manipuler des animaux, il est important de porter l’équipement de protection individuelle (EPI) approprié. L’EPI minimum à porter est une blouse de laboratoire, des gants, des lunettes de sécurité et un masque de type chirurgical qui réduira l’exposition à la poussière et aux allergènes. L’étape suivante consiste à sélectionner des cages appropriées pour les animaux qui arrivent. Ensuite, fournissez à la cage une litière et des matériaux de nidification appropriés. Et apportez les cages préparées dans la salle de réception à température contrôlée, afin qu’elles soient prêtes pour le transfert avant l’arrivée des animaux.

À l’arrivée de l’expédition, placez les boîtes de transport dans un endroit sûr dans la salle de réception. Examinez le récipient pour détecter tout dommage et désinfectez les surfaces extérieures pour détruire tout agent pathogène nocif. Assurez-vous que le désinfectant est en contact avec la boîte pendant au moins 15 à 30 minutes, conformément aux recommandations du fabricant. Ensuite, placez le récipient dans la station de transfert d’animaux, ou ATS. Cette station offre un flux d’air unidirectionnel filtré HEPA (High Efficiency Particulate Air, ou HEPA) à l’intérieur de la hotte. HEPA protège l’utilisateur des allergènes et protège les animaux de l’air ambiant, minimisant ainsi les risques de contamination. Ensuite, ouvrez le conteneur d’expédition et évaluez la santé globale des rongeurs. Prenez note de tout animal qui semble blessé ou malade. Après cela, placez-les dans la cage déjà assemblée dans les groupes de taille appropriée, couvrez la cage avec le couvercle de la barre métallique et fixez le séparateur pour créer deux zones. Sélectionnez l’aliment approprié et placez-le d’un côté et laissez le deuxième côté ouvert pour permettre une meilleure circulation de l’air. Enfin, si les animaux ne sont pas placés sur un support avec abreuvement automatique, ajoutez une bouteille d’eau pour assurer un approvisionnement en eau adéquat. N’oubliez pas que l’ATS doit être désinfecté à la fin de chaque session et que le ventilateur doit être éteint lors de la désinfection.

Pour le changement de cage, placez les deux cages - une cage fraîche avec le matériau de litière approprié et la cage utilisée avec les animaux - dans l’ATS. On peut transférer les animaux de l’ancienne cage à la nouvelle cage à la main ou à l’aide d’une pince rembourrée. Ces deux méthodes ont été abordées dans une autre vidéo de cette collection. N’oubliez pas qu’une seule cage d’animaux peut être ouverte à la fois. Pour les souris mâles ou les femelles avec une portée, il a été démontré que le transfert de la zone de nidification des souris dans la cage propre aide les animaux à faire la transition. Une fois que le haut de la cage est placé sur la nouvelle cage, transférez la nourriture de l’ancien haut de la cage au nouveau dessus et ajoutez plus de nourriture si nécessaire. Ensuite, placez le dessus de la barrière et remettez la cage dans le support. Il est recommandé de changer de gants entre les cages ou entre les groupes.

La procédure de déballage pour les animaux immunodéprimés est un peu différente, car les choses doivent être stériles. Il est recommandé que le ventilateur à l’intérieur de la hotte soit allumé au moins 24 heures avant utilisation. Comme pour les animaux immunocomposants, à l’arrivée de l’expédition, vaporisez le récipient avec une solution désinfectante dans la salle de réception et laissez-le non ouvert pendant 15 à 30 minutes. Dans le STA désigné pour les souris immunodéprimées, vaporisez la hotte à flux laminaire avec de l’éthanol à 70 % 30 minutes avant de manipuler les animaux. L’idéal est que deux personnes participent à cette activité de déballage : l’une serait le technicien stérile portant la blouse stérilisée à la vapeur et une double paire de gants stériles pour manipuler les animaux à l’aide de techniques aseptiques et l’autre serait le technicien non stérile portant une blouse d’isolement propre et une paire de gants pour manipuler les articles contaminés. Les deux doivent porter un masque, un bonnet et des lunettes de sécurité.

Avant d’ouvrir le conteneur d’expédition à l’intérieur de la hotte, placez toutes les fournitures et les cages dans ceux-ci et vaporisez leur extérieur avec de l’alcool. Et à l’arrivée de l’expédition, placez la boîte d’animaux reçue dans la cagoule et vaporisez-la également avec de l’éthanol à 70 %. Il existe deux options pour les cages stériles : soit les cages standard qui ont été emballées et stérilisées à la vapeur, soit les unités jetables qui ont été stérilisées par irradiation par le fournisseur.

Commencez la procédure de déballage en ouvrant les aliments stériles, puis en ouvrant la boîte de transport. À ce stade, le manipulateur doit jeter la première paire de gants stériles. Ensuite, la personne non stérile déballe la cage stérile et la passe aseptiquement au préposé aux animaux qui retire ensuite le bonnet et le couvercle de la barre, et les place à l’envers dans le capot. Par la suite, le tube d’aspiration de la cage est rempli d’eau au niveau de la station située dans la hotte. Enfin, le préposé place l’animal dans la cage, le fixe à l’aide du couvercle de la barre métallique, ajoute de la nourriture et met le chapeau en place. Notez que le ventilateur de la hotte doit rester allumé en tout temps pour maintenir un environnement stérile. À la fin, la personne non stérile retire la cage peuplée de la hotte et la place sur un support approprié. Pour éviter une contamination croisée possible entre les groupes, le préposé aux animaux doit changer de gants après chaque conteneur d’expédition.

Pour le changement de cage des animaux immunodéprimés, la préparation de la cagoule et des cages et des EPI sont les mêmes que pour le déballage de ces animaux. Et la technique de transfert est la même que celle des animaux immunocompétents, mais dans des conditions stériles.

Discutons maintenant des conditions de logement appropriées pour les animaux, ce qui est un autre aspect important de la fourniture de soins essentiels. Les souris et les rats sont principalement logés dans des cages de type boîte à chaussures avec un fond solide contenant du matériel de litière. La cage de souris typique offre 75 pouces carrés d’espace au sol, ce qui est suffisant pour un maximum de 5 souris adultes. D’autre part, une cage à rats a une superficie de 142 pouces carrés et est suffisante pour 2 rats adultes. Les cages statiques sont généralement recouvertes d’un couvercle à barre métallique et un matériau filtrant est ajouté sur le dessus de la cage sous forme de chapeau. Les cages ventilées individuellement, ou IVC, sont également dotées d’un couvercle et d’un capot en fil métallique, mais elles sont placées sur un support qui fournit un flux d’air dans la cage. Cela élimine le besoin de changer la cage aussi souvent que les cages statiques, ce qui peut être bénéfique pour les animaux immunodéprimés.

Tous les systèmes de cages sont pourvus d’un approvisionnement en nourriture et en eau. Il y a soit des mangeoires placées à l’intérieur de la cage de l’animal, soit une section du couvercle de la barre métallique est utilisée pour le stockage de la nourriture. La nourriture doit être placée de manière à ne pas être souillée par les animaux. L’eau est généralement fournie par une bouteille d’eau placée sur le dessus de la cage, ou par une vanne d’abreuvement automatique qui est un composant intégré de la cage de l’animal. Pour l’option de vanne d’abreuvement, lorsque la cage est engagée sur un support, l’eau est transportée dans le tube pour un système d’abreuvement automatique conçu pour répondre aux besoins de l’animal dans toute l’animalerie.

Le Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire stipule que tous les instruments de cage doivent être désinfectés au moins toutes les 2 semaines. Certaines cages et certains accessoires peuvent avoir besoin d’être changés plus souvent, en fonction du niveau d’odeur et d’ammoniac dans l’enclos.

Parlons maintenant de l’approvisionnement en nourriture et en eau adéquat pour les animaux immunocompétents et immunodéprimés. Il existe de nombreux aliments disponibles dans le commerce avec des compositions variables en protéines, en glucides et en graisses. Idéalement, les aliments devraient contenir 15 à 19 % de protéines, 44 % de glucides et 4 à 9 % de matières grasses. Pour les animaux immunodéprimés, assurez-vous que l’aliment a été stérilisé.

L’eau du robinet, ou osmose inverse, c’est-à-dire l’eau osmosée, peut être utilisée pour les animaux immunocompétents, mais pour les animaux immunodéficients, l’eau peut être une source de contamination et doit donc être stérilisée. La stérilité de l’eau est maintenue en ajoutant 2 gouttes d’acide chlorhydrique 12 molaires à 8 litres d’eau osmosée, ce qui acidifiera l’eau à un pH de 2,5-3 et limitera la croissance bactérienne. Versez ensuite l’eau dans des bouteilles individuelles et couvrez-les de papier d’aluminium. Placez les couvercles de bouteilles avec les tubes à bec séparément dans un sac d’autoclave et mettez le tout dans un autoclave pour la stérilisation à la vapeur.

Voyons maintenant les conditions environnementales standard essentielles pour les soins aux animaux.

Au niveau des cages, le logement social est obligatoire sauf si cela est scientifiquement justifié ou si un animal est incompatible avec tous les autres. L’enrichissement de l’environnement avec des huttes en papier et des matériaux de nidification permet aux animaux de présenter des comportements spécifiques à l’espèce, comme la construction de nids et l’enfouissement, ce qui diminue le niveau de stress et augmente le bien-être général des animaux. Les matériaux de nidification fournissent également un espace de sommeil saturé de phéromones calmantes qui aident à loger plusieurs souris mâles dans la même cage. Comme mentionné précédemment, déplacer la zone de nidification vers la cage propre lors du changement de cage aide à prévenir l’agression, en particulier chez les mâles, car les animaux sont introduits dans un nouvel environnement. Pour les animaux nus athymiques, il faut envisager de fournir de la litière supplémentaire et des matériaux de nidification en papier déchiqueté dans leurs cages pour aider à la thermorégulation.

Au niveau de la pièce, la température pour les souris et les rats doit être comprise entre 68 et 79 ? F. Le taux d’humidité de la pièce doit être de 30 à 70 %, car des niveaux plus bas peuvent entraîner une condition connue sous le nom de ringtail. Le troisième paramètre de la pièce est l’éclairage. Cela inclut l’intensité lumineuse et les cycles. Normalement, la salle animalière est réglée sur un cycle de 12 heures de lumière/12 heures d’obscurité. L’intensité de l’éclairage doit varier en fonction de l’activité dans la pièce. Lorsque les techniciens travaillent, des niveaux d’éclairage plus élevés peuvent être utilisés. Cependant, il devrait être abaissé à environ 325 lux une fois que toute l’activité sera terminée. Enfin, le flux d’air dans la pièce doit également être soigneusement contrôlé. Un minimum de 10 à 15 changements d’air 100 % d’air frais doit se produire toutes les heures. Cela diminue les microbes et les odeurs dans la salle des animaux.

Enfin, voyons comment les chercheurs utilisent ces connaissances sur le logement, le régime alimentaire et les préférences environnementales des animaux de laboratoire dans leurs expériences.

Comme nous l’avons vu précédemment, les animaux de laboratoire présentent généralement un comportement de construction de nid, ce qui réduit le stress, et les chercheurs l’ont utilisé comme indicateur du bien-être animal. Dans cette expérience particulière, les scientifiques ont développé un système impartial pour noter le nid construit, puis l’ont utilisé pour étudier l’effet de la température ambiante sur le comportement de construction du nid. Comme vous pouvez le constater, une augmentation de la température a provoqué une baisse significative du score, mettant en évidence le rôle de la température ambiante dans le bien-être animal.

Étant donné que les souris et les rats adorent les glucides, les chercheurs ont utilisé des aliments de différentes formes pour tester la fonction motrice des animaux. Cela comprend l’analyse de la dextérité lors de différents types de tâches de manipulation des aliments et l’examen du comportement d’atteinte à la suite d’interventions chirurgicales ou pharmacologiques.

Enfin, on sait que les souris et les rats sont nocturnes et qu’ils ne préfèrent pas les zones éclairées. Les scientifiques utilisent ces connaissances pour créer un environnement afin d’étudier l’anxiété chez ces espèces. Par exemple, ici, les recherches ont introduit des animaux dans un champ ouvert simple et ont étudié le temps passé par les souris de type sauvage et knock-out dans les zones intérieures et extérieures, pour analyser l’effet de l’inactivation du gène sur le comportement anxiogène.

Vous venez de regarder l’introduction de JoVE aux procédures de soins essentiels pour les souris et les rats. Vous devriez maintenant avoir une meilleure compréhension des mesures à prendre pour s’assurer que l’environnement et la manipulation de ces animaux ne causent aucun dommage à la santé des animaux et vous devriez également savoir comment les chercheurs peuvent modifier ces paramètres pour atteindre différents objectifs scientifiques. Comme toujours, merci d’avoir regardé !