Travailler avec des centrifugeuses
1. protocole général pour l’utilisation sécuritaire de centrifugeuse
- laboratoire superviseur ou laboratoire d’agent de sécurité veillent à tous les utilisateurs reçoivent une formation adéquate dans la sélection du rotor, tube à essais et un fonctionnement correct de la centrifugeuse.
- N’importe quel nouvel utilisateur doit être étroitement surveillé par un utilisateur formé jusqu'à ce qu’il/elle est confiant sur la façon d’utiliser correctement l’instrument.
- Avant d’utiliser l’instrument, chaque utilisateur doit lire attentivement et comprendre les consignes de sécurité pour la centrifugeuse spécifique.
- Selon l’échantillon, les rotors compatibles doivent être utilisés.
- Le rotor, le tube et broche doivent être propre, sec et exempt de fissures ou déformations.
- Les joints toriques doivent être vérifiés pour porter ou fissures.
- Il est important de s’assurer que les tubes utilisés pour la centrifugation sont compatibles avec l’échantillon et la vitesse de rotation (basse, haute ou ultra).
- Les tubes à centrifuger ne doivent pas être remplis plus de trois quarts de leur niveau de remplissage maximal.
- Les tubes devraient être plafonnés hermétiquement.
- , Il est extrêmement important d’équilibrer les tubes en face de l’autre. Faute de quoi donc peut conduire à une séparation incomplète et, dans certains cas extrêmes, peut provoquer une dispersion du contenu tube dans le boîtier de la centrifugeuse.
- Avant d’allumer la centrifugeuse, le rotor doit être vérifié pour s’assurer il est correctement inséré dans le lecteur et le couvercle est correctement fermé.
- Le couvercle doit être fermé en tout temps lorsque la centrifugeuse est en marche et ne doit jamais être ouverte jusqu'à ce que le rotor s’arrête complètement.
- L’opérateur devrait rester dans le voisinage de la centrifugeuse jusqu'à ce qu’il a atteint en toute sécurité la vitesse d’exploitation cible. Dans le cas de vibrations ou de bruits inhabituels, l’instrument doit être immédiatement mis hors tension. La limite de vitesse de l’appareil ne doit jamais être dépassée. Après avoir éteint, laisser suffisamment de temps pour le rotor de ralentir à une position arrêtée. Centrifugeuses modernes dotés d’indicateurs qui signifient qu’il est sûr d’ouvrir la centrifugeuse.
- Une fois la centrifugation est terminée, les échantillons doivent être enlevés et l’instrument doit être vérifié pour toute fuite ou de déversement. Si nécessaire, le rotor doit être soigneusement nettoyé.
2. Autres précautions tandis que manipuler des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses
- lors de l’utilisation de produits chimiques dangereux ou des échantillons biologiques qui pourraient être contagieux, il est important d’étiqueter l’instrument en usage pour alerter les autres travailleurs à la danger.
- Devrait porter des gants appropriés 1 pour manipuler les échantillons dangereux.
- Sealed sécurité tubes doivent être utilisés. Il est préférable d’utiliser le confinement secondaire, le cas échéant, pour les tubes à centrifuger. Elles sont généralement sous la forme d’inserts en plastique ou en verre qui sont placés directement dans les seaux d’échantillon de la centrifugeuse.
- Une fois la centrifugation terminée, les tubes doit être enlevés du rotor et ouvert que dans le fumées hotte ou biologiques armoire de sécurité, le cas échéant.
- Nettoyage, si nécessaire, doit être fait avec un soin extrême, afin de ne pas exposer l’opérateur à des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses. En cas de déversement de ces échantillons, reportez-vous à l’étape 3, des Situations d’urgence, au-dessous de.
- Pour des types spécifiques d’échantillons dangereux, il peut être préférable de maintenir des procédures standards et les protocoles de nettoyage en laboratoire. Ceux-ci devraient être réexaminées et actualisées en conséquence, si nécessaire.
3. Situations d’urgence et de leurs mesures de sécurité
une situation d’urgence pouvant survenir si le rotor fonctionne mal ou s’il y a un déversement dans la centrifugeuse en raison de la rupture du tube ou une mauvaise manipulation. Dans de telles situations, les mesures suivantes devraient être prises.
- La centrifugeuse doit être éteint immédiatement et le couvercle doit être fermé jusqu'à ce que d’autres soient informés et évacuer l’emplacement. La puissance devrait être terminée à l’interrupteur sur l’instrument. Le bouton sera situé soit sur le devant, côté ou dos de l’instrument. L’utilisateur doit se familiariser avec son emplacement. Si le bouton d’alimentation est défectueux, l’utilisateur doit supprimer la fiche d’alimentation de la prise murale.
- Pour réduire le risque des aérosols, il est parfois préférable de laisser la centrifugeuse intacte pendant au moins 0,5 h Consult avec le document technique de centrifugation.
- Pour nettoyer les déversements, l’opérateur doit bien connaître l’échantillon utilisé et doit porter la tenue y compris blouse, gants, bouclier du visage et des lunettes de sécurité.
- Une fois nettoyés, les matières déversées devraient être éliminés et les vêtements de protection contaminés doivent être éliminés ou nettoyé correctement. Mains et toute peau exposée doivent être lavés soigneusement.
- Si ouvertement exposé à des matières très dangereuses, 911 doit être appelée ou une attention médicale immédiate doit être administrée à la personne affligée.
4. entretien de la centrifugeuse
Remarque : le corps de la centrifugeuse est habituellement fait de métal qui peut se corroder en présence de l’humidité, produits chimiques ou détergents forts. Pour une conservation optimale de la centrifugeuse, il est recommandé de suivre attentivement le fabricant ' s directives pour le nettoyage et l’entretien. Other than that, quelques mesures générales pour l’entretien garder à l’esprit sont les suivantes.
- La centrifugeuse doit toujours être bien propre et sec.
- Tout type de déversements doit être nettoyé immédiatement.
- Le rotor doit être décontaminé après utilisation avec le matériel biologique et radioactive. Il est recommandé d’utiliser 10 % eau de Javel pendant 30 min, suivie d’éthanol à 70 %, laissant l’air rotor sec.
- Fils de brosse abrasive ne doit jamais être utilisées pour nettoyer le rotor et les pièces associées.
- Le rotor doit être inspecté après chaque utilisation de l’opérateur et au moins annuellement par inspecteur fabricant. Carnet de route de
- A devrait être maintenu pour chaque centrifugeuse pour conserver une trace des utilisateurs, des échantillons et historique du service. En outre, les copies des documents relatifs à la garantie peuvent être inclus dans ce journal de bord.
source : Robert M. Rioux & Sylvia Jharimune, Pennsylvania State University, University Park, PA
la force de gravitation de la terre est capable de sép…
1. protocole général pour l’utilisation sécuritaire de centrifugeuse
- laboratoire superviseur ou laboratoire d’agent de sécurité veillent à tous les utilisateurs reçoivent une formation adéquate dans la sélection du rotor, tube à essais et un fonctionnement correct de la centrifugeuse.
- N’importe quel nouvel utilisateur doit être étroitement surveillé par un utilisateur formé jusqu'à ce qu’il/elle est confiant sur la façon d’utiliser correctement l’instrument.
- Avant d’utiliser l’instrument, chaque utilisateur doit lire attentivement et comprendre les consignes de sécurité pour la centrifugeuse spécifique.
- Selon l’échantillon, les rotors compatibles doivent être utilisés.
- Le rotor, le tube et broche doivent être propre, sec et exempt de fissures ou déformations.
- Les joints toriques doivent être vérifiés pour porter ou fissures.
- Il est important de s’assurer que les tubes utilisés pour la centrifugation sont compatibles avec l’échantillon et la vitesse de rotation (basse, haute ou ultra).
- Les tubes à centrifuger ne doivent pas être remplis plus de trois quarts de leur niveau de remplissage maximal.
- Les tubes devraient être plafonnés hermétiquement.
- , Il est extrêmement important d’équilibrer les tubes en face de l’autre. Faute de quoi donc peut conduire à une séparation incomplète et, dans certains cas extrêmes, peut provoquer une dispersion du contenu tube dans le boîtier de la centrifugeuse.
- Avant d’allumer la centrifugeuse, le rotor doit être vérifié pour s’assurer il est correctement inséré dans le lecteur et le couvercle est correctement fermé.
- Le couvercle doit être fermé en tout temps lorsque la centrifugeuse est en marche et ne doit jamais être ouverte jusqu'à ce que le rotor s’arrête complètement.
- L’opérateur devrait rester dans le voisinage de la centrifugeuse jusqu'à ce qu’il a atteint en toute sécurité la vitesse d’exploitation cible. Dans le cas de vibrations ou de bruits inhabituels, l’instrument doit être immédiatement mis hors tension. La limite de vitesse de l’appareil ne doit jamais être dépassée. Après avoir éteint, laisser suffisamment de temps pour le rotor de ralentir à une position arrêtée. Centrifugeuses modernes dotés d’indicateurs qui signifient qu’il est sûr d’ouvrir la centrifugeuse.
- Une fois la centrifugation est terminée, les échantillons doivent être enlevés et l’instrument doit être vérifié pour toute fuite ou de déversement. Si nécessaire, le rotor doit être soigneusement nettoyé.
2. Autres précautions tandis que manipuler des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses
- lors de l’utilisation de produits chimiques dangereux ou des échantillons biologiques qui pourraient être contagieux, il est important d’étiqueter l’instrument en usage pour alerter les autres travailleurs à la danger.
- Devrait porter des gants appropriés 1 pour manipuler les échantillons dangereux.
- Sealed sécurité tubes doivent être utilisés. Il est préférable d’utiliser le confinement secondaire, le cas échéant, pour les tubes à centrifuger. Elles sont généralement sous la forme d’inserts en plastique ou en verre qui sont placés directement dans les seaux d’échantillon de la centrifugeuse.
- Une fois la centrifugation terminée, les tubes doit être enlevés du rotor et ouvert que dans le fumées hotte ou biologiques armoire de sécurité, le cas échéant.
- Nettoyage, si nécessaire, doit être fait avec un soin extrême, afin de ne pas exposer l’opérateur à des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses. En cas de déversement de ces échantillons, reportez-vous à l’étape 3, des Situations d’urgence, au-dessous de.
- Pour des types spécifiques d’échantillons dangereux, il peut être préférable de maintenir des procédures standards et les protocoles de nettoyage en laboratoire. Ceux-ci devraient être réexaminées et actualisées en conséquence, si nécessaire.
3. Situations d’urgence et de leurs mesures de sécurité
une situation d’urgence pouvant survenir si le rotor fonctionne mal ou s’il y a un déversement dans la centrifugeuse en raison de la rupture du tube ou une mauvaise manipulation. Dans de telles situations, les mesures suivantes devraient être prises.
- La centrifugeuse doit être éteint immédiatement et le couvercle doit être fermé jusqu'à ce que d’autres soient informés et évacuer l’emplacement. La puissance devrait être terminée à l’interrupteur sur l’instrument. Le bouton sera situé soit sur le devant, côté ou dos de l’instrument. L’utilisateur doit se familiariser avec son emplacement. Si le bouton d’alimentation est défectueux, l’utilisateur doit supprimer la fiche d’alimentation de la prise murale.
- Pour réduire le risque des aérosols, il est parfois préférable de laisser la centrifugeuse intacte pendant au moins 0,5 h Consult avec le document technique de centrifugation.
- Pour nettoyer les déversements, l’opérateur doit bien connaître l’échantillon utilisé et doit porter la tenue y compris blouse, gants, bouclier du visage et des lunettes de sécurité.
- Une fois nettoyés, les matières déversées devraient être éliminés et les vêtements de protection contaminés doivent être éliminés ou nettoyé correctement. Mains et toute peau exposée doivent être lavés soigneusement.
- Si ouvertement exposé à des matières très dangereuses, 911 doit être appelée ou une attention médicale immédiate doit être administrée à la personne affligée.
4. entretien de la centrifugeuse
Remarque : le corps de la centrifugeuse est habituellement fait de métal qui peut se corroder en présence de l’humidité, produits chimiques ou détergents forts. Pour une conservation optimale de la centrifugeuse, il est recommandé de suivre attentivement le fabricant ' s directives pour le nettoyage et l’entretien. Other than that, quelques mesures générales pour l’entretien garder à l’esprit sont les suivantes.
- La centrifugeuse doit toujours être bien propre et sec.
- Tout type de déversements doit être nettoyé immédiatement.
- Le rotor doit être décontaminé après utilisation avec le matériel biologique et radioactive. Il est recommandé d’utiliser 10 % eau de Javel pendant 30 min, suivie d’éthanol à 70 %, laissant l’air rotor sec.
- Fils de brosse abrasive ne doit jamais être utilisées pour nettoyer le rotor et les pièces associées.
- Le rotor doit être inspecté après chaque utilisation de l’opérateur et au moins annuellement par inspecteur fabricant. Carnet de route de
- A devrait être maintenu pour chaque centrifugeuse pour conserver une trace des utilisateurs, des échantillons et historique du service. En outre, les copies des documents relatifs à la garantie peuvent être inclus dans ce journal de bord.
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La centrifugation est l’un des outils les plus puissants utilisés dans les laboratoires pour la séparation de mélanges hétérogènes, mais elle peut être dangereuse, et des précautions de sécurité doivent donc être appliquées.
Une centrifugeuse fait tourner rapidement les échantillons pour séparer les matériaux hétérogènes, ce qui induit des forces centrifuges extrêmes sur les échantillons et l’instrument. En raison de la vitesse élevée à laquelle une centrifugeuse fonctionne, elle peut causer de graves blessures à l’utilisateur si elle est mal manipulée. Par conséquent, des précautions particulières doivent être prises lors de l’utilisation d’une centrifugeuse pour éviter les déversements et les dommages à l’équipement.
Cette vidéo illustre le mécanisme d’une centrifugeuse et comment l’utiliser et l’entretenir en toute sécurité.
Avant d’entrer dans les détails des mesures de sécurité, passons rapidement en revue les bases de la centrifugation. Les centrifugeuses contiennent un rotor logé sur une broche. Des rotors de tailles différentes peuvent généralement être montés sur une seule broche pour s’adapter à différents flacons d’échantillons, tubes ou sacs. Un moteur fait tourner le rotor à un régime spécifié ou à des tours par minute. Ceci, à son tour, transmet la force centrifuge au mélange hétérogène dirigé à l’opposé de l’axe de rotation, ce qui sépare les particules de densités différentes.
Les centrifugeuses à basse vitesse fonctionnent à moins de 10 000 tr/min, les centrifugeuses à grande vitesse jusqu’à 21 000 et les ultracentrifugeuses à 30 000 et plus. Chaque type a des rotors différents qui sont compatibles avec lui. Après la course, un système de freinage ralentit généralement le rotor. Dans toute centrifugeuse, une vitesse élevée déforme le rotor.
En utilisation normale, il retrouvera sa taille précédente. Cependant, si la force due à la rotation dépasse la force maximale que le rotor peut supporter, il peut se déformer de façon permanente. Cela peut entraîner des fissures, qui peuvent, à leur tour, entraîner une défaillance grave. Les défaillances des centrifugeuses, en revanche, peuvent entraîner des fuites d’échantillons, ce qui peut être dangereux si des matières dangereuses sont impliquées et doivent être manipulées avec soin. Nous allons maintenant vous montrer comment préparer des échantillons et les utiliser en toute sécurité dans la centrifugeuse.
Tout d’abord, sélectionnez des tubes à centrifuger appropriés qui sont compatibles avec les vitesses de rotation que vous souhaitez utiliser. Consultez la documentation pour connaître les limites du tube. Les tubes doivent être intacts et exempts de toute fissure. Remplissez chacun jusqu’à ce qu’il ne soit pas rempli aux 3/4 pour éviter les déversements. Assurez-vous ensuite que les tubes sont équilibrés et fermez-les hermétiquement.
Lors de la centrifugation d’échantillons chimiques ou biologiques dangereux, prenez des précautions particulières. Portez l’équipement de protection approprié et préparez les échantillons dans un environnement de travail approprié, comme une hotte ou une armoire à flux laminaire. Pour plus d’informations sur ces caractéristiques de sécurité, consultez les vidéos de JoVE sur les hottes.
Si nécessaire, utilisez un confinement secondaire pour les matières dangereuses, comme un insert en verre ou en plastique. Des tubes de sécurité scellés offrant un environnement confiné peuvent également être utilisés. Tout le monde doit être formé avant d’utiliser une centrifugeuse ou un rotor.
Sélectionnez un rotor adapté à la centrifugeuse. Vérifiez que le rotor et son couvercle sont propres et secs et qu’ils ne présentent pas de fissures ou de déformations. Assurez-vous que les joints toriques du rotor ou du couvercle ne sont pas usés. Vérifiez également la broche de la centrifugeuse pour voir si elle est pliée ou présente d’autres déformations. Placez ensuite le rotor sur la broche en vous assurant qu’il est correctement installé. Insérez les échantillons dans le rotor, en vous assurant que les tubes s’insèrent parfaitement dans le rotor.
Placez toujours les tubes équilibrés en face l’un de l’autre. Couvrez le rotor en vous assurant que le joint est bien étanche. Fermez le couvercle de la centrifugeuse et démarrez votre programme. Encore une fois, voir la précédente vidéo de JoVE sur la centrifugeuse, pour plus d’informations sur l’exécution d’un programme de centrifugeuse.
Restez à la centrifugeuse jusqu’à ce qu’elle ait atteint sa vitesse maximale. Familiarisez-vous avec l’emplacement du bouton d’alimentation. Éteignez le bouton d’alimentation s’il y a des sons ou des vibrations inhabituels pour arrêter immédiatement la centrifugeuse. Évacuez ensuite la zone immédiate jusqu’à ce que le rotor se soit arrêté. Une fois qu’il s’est arrêté, inspectez les échantillons pour détecter tout déversement et le rotor pour détecter toute anomalie ou déséquilibre. S’il n’y a pas eu de problème, attendez que la centrifugeuse ait terminé son programme et s’est complètement arrêtée.
Attendez une demi-heure supplémentaire si des produits chimiques formant des aérosols sont présents. Sinon, vous pouvez ouvrir immédiatement la centrifugeuse
. Retirez les échantillons et rapportez-les dans un endroit spécialisé pour les ouvrir si nécessaire. En cas de déversement, nettoyez immédiatement la centrifugeuse. Utilisez un EPI approprié à tout danger présent et éliminez les matériaux contaminés conformément aux directives. N’utilisez pas de fils de brosse abrasifs pour nettoyer car ils pourraient endommager le rotor. Alertez le personnel d’urgence et n’essayez pas de nettoyer la centrifugeuse si des dangers mettant la vie en danger se sont déversés.
Décontaminez le rotor avec de l’eau de Javel à 10 % pour tous les échantillons biologiques utilisés dans la centrifugeuse, qu’il y ait un déversement ou non. Laissez reposer l’eau de Javel pendant 30 minutes, puis rincez à l’éthanol à 70 % et séchez à l’air. Enfin, retirez et inspectez le rotor pour tout dommage, et notez votre utilisation dans le journal de bord.
Vous venez de regarder l’introduction de JoVE à l’utilisation des centrifugeuses. Vous devriez maintenant comprendre comment préparer vos échantillons ainsi que comment utiliser et entretenir l’instrument.
Merci d’avoir regardé.
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Q1: What is the basic mechanism of how a centrifuge separates mixtures?
A centrifuge rapidly spins a rotor containing samples, generating centrifugal force directed away from the axis of rotation. This force causes particles with different densities to separate, with heavier particles moving toward the bottom of the tube. The separation speed depends on particle size and density, making centrifugation much faster than gravity-based sedimentation.
Q2: How should centrifuge tubes be prepared before use?
Select tubes compatible with your centrifuge's maximum RPM and verify limits in the documentation. Inspect tubes for cracks or damage and ensure they are intact. Fill each tube to no more than three-quarters full to prevent spills, then balance tubes and cap them tightly before placing them in the rotor.
Q3: What precautions are necessary when centrifuging hazardous materials?
Wear appropriate personal protective equipment and prepare samples in a fume hood or laminar flow cabinet. Use secondary containment such as glass or plastic inserts for hazardous chemicals or biological samples. Sealed safety tubes provide an additional contained environment. Always ensure proper use of personal protective equipment when handling potentially dangerous materials.
Q4: What rotor inspection steps should be completed before centrifugation?
Verify the rotor is appropriate for your centrifuge and check that it and its cover are clean, dry, and free of cracks or deformities. Inspect O-rings for wear and examine the centrifuge spindle for bending or damage. Ensure the rotor is correctly seated on the spindle and that sample tubes fit snugly without gaps.
Q5: What should you do if unusual sounds or vibrations occur during centrifugation?
Immediately turn off the power button to stop the centrifuge. Evacuate the immediate area and allow the rotor to stop completely before approaching. Inspect samples for spillage and the rotor for abnormalities or imbalances. Do not attempt to restart until the cause is identified and resolved.
Q6: How should a centrifuge be decontaminated after use with biological samples?
Decontaminate the rotor with 10% bleach regardless of whether a spill occurred. Allow the bleach to stand for 30 minutes, then rinse with 70% ethanol and air dry completely. After decontamination, remove and inspect the rotor for damage and document your use in the logbook.
Q7: What is the proper procedure for cleaning up a centrifuge spill?
Clean the centrifuge immediately using appropriate personal protective equipment for any hazards present. Dispose of contaminated materials according to guidelines. Do not use abrasive brush wires, as they damage the rotor. For life-threatening hazards, alert emergency personnel and do not attempt cleanup yourself.
Chapitres dans cette vidéo
0:04
Overview
0:59
Basics of Centrifugation
2:55
Preparing samples for the centrifuge
4:01
Using and maintaining the centrifuge
6:46
Summary