Utilisation appropriée des autoclaves

L’autoclave est l’une des méthodes les plus couramment utilisées en laboratoire à des fins de décontamination.

De nombreux scientifiques, en particulier ceux qui travaillent avec des échantillons biologiques, ont besoin d’équipements et de milieux stérilisés, et les autoclaves offrent un moyen rapide et économique de décontaminer les matériaux. Ils utilisent de la vapeur à haute température et pression pour tuer les micro-organismes. En raison de ces conditions extrêmes, cependant, ils doivent être utilisés avec précaution.

Cette vidéo illustrera le fonctionnement des autoclaves et comment les utiliser correctement.

Dans un autoclave, les matériaux sont chauffés à la vapeur à des températures de 121 degrés Celsius à des pressions d’au moins 15 p.s.i. Après au moins 30 minutes, ces conditions déshydrateront et tueront les cellules.

Les autoclaves peuvent stériliser à la fois les matériaux liquides et solides, mais différents paramètres de fonctionnement doivent être pris en compte. Les liquides nécessitent plus de temps que les solides pour évacuer la vapeur, afin d’éviter l’ébullition instantanée. De plus, les grands volumes de matériaux liquides mettent plus de temps à chauffer à la bonne température.

Tous les matériaux ne peuvent pas résister aux températures à l’intérieur d’un autoclave. Par conséquent, n’autoclavez jamais tout ce qui fond, brûle, est explosif ou des liquides qui s’évaporeront. De plus, n’autoclavez pas de produits chimiques toxiques ou radioactifs.

Nous allons maintenant vous montrer comment préparer des échantillons pour l’autoclave et comment en faire fonctionner un.

Tout d’abord, sélectionnez les matériaux que vous allez autoclaver et n’utilisez que des récipients et des instruments compatibles. Le pyrex, le verre borosilicaté, l’acier inoxydable, le polypropylène et le polycarbonate peuvent être utilisés pour l’autoclavage.

D’autres matériaux de laboratoire courants, tels que les pointes de pipette et les boîtes, sont également compatibles. Le papier peut être autoclavé dans des sacs compatibles avec l’autoclave.

Les déchets solides peuvent également être autoclavés dans un sac approprié. Laissez de l’espace dans ce sac pour permettre à la vapeur de circuler et d’attacher les extrémités. Enfin, avant l’autoclavage, assurez-vous de créer une petite ouverture dans le sac pour permettre à la vapeur d’entrer.

Pour les milieux aqueux et autres échantillons liquides compatibles, utilisez un récipient intact sans aucune fissure. Remplissez le récipient à moitié et jamais aux deux tiers maximum.

Pour ventiler les gaz d’un récipient de liquide, desserrez le bouchon. S’il n’y a pas de bouchon, couvrez sans serrer avec du papier d’aluminium pour éviter de contaminer le matériau autoclave.

Mettez tous les matériaux dans un récipient secondaire en polypropylène ou en acier inoxydable. Séparer les matériaux solides et liquides à autoclaver. Laissez de l’espace entre les matériaux et ne remplissez pas trop le contenant.

Enfin, fixez un morceau de ruban adhésif autoclave à tous les matériaux. Ce ruban est doté d’indicateurs sensibles à la température qui deviennent noirs si une température suffisante a été atteinte.

Lors de l’utilisation d’un autoclave, portez un équipement de protection individuelle approprié pour vous protéger contre les risques de température et de pression élevées. Cela comprend des lunettes de sécurité EPI standard, des blouses de laboratoire, des chaussures fermées et des gants résistants à la chaleur. Utilisez un tablier et un écran facial lorsque vous manipulez des échantillons de liquide.

À l’autoclave, ouvrez d’abord la porte et vérifiez s’il y a des dangers à l’intérieur. Chargez les matériaux liquides et secs séparément, car ils nécessitent différents cycles d’autoclave.

Pour éviter de fondre, assurez-vous que les matériaux ne touchent pas les parois. Assurez une bonne circulation de la chaleur en gardant un espacement suffisant entre les matériaux. Enfin, fermez et scellez la porte.

Différents autoclaves ont des modes d’emploi différents. Les cycles peuvent être réglés en réglant manuellement la température et le temps, ou en sélectionnant dans une liste prédéfinie. En général, utilisez les cycles recommandés pour le type de matériau que vous décontaminez.

Il existe une variété de cycles pour les solides et les liquides, ainsi que pour différentes quantités de matériaux et de déchets à autoclaver. Lorsque vous exécutez un cycle, assurez-vous que la température a atteint au moins 121 degrés Celsius et la pression au moins 15 p.s.i.

Une fois le cycle terminé, assurez-vous que la pression est revenue à zéro et que l’autoclave a refroidi. Ouvrez soigneusement la porte pour laisser échapper le reste de vapeur. Ensuite, laissez les matériaux reposer pendant 10 minutes pour libérer les gaz chauds. Le ruban adhésif de l’autoclave devrait maintenant avoir des bandes noires ou, disons, autoclavé dessus, bien que cela ne garantisse pas que la stérilisation a eu lieu.

En portant un EPI approprié, retirez les matériaux en veillant à ne pas secouer les échantillons liquides. Notez votre consommation dans le registre, y compris le type de substances et toute circonstance particulière si vous la rencontrez. Enfin, transportez les matériaux vers un endroit sécurisé ou une hotte à flux laminaire pour refroidir.

Vous venez de regarder l’introduction de JoVE aux autoclaves. Vous devez maintenant comprendre quels matériaux peuvent être autoclavés, comment les préparer et comment utiliser l’instrument en toute sécurité. Merci d’avoir regardé !