Administration d'agents expérimentaux II

De nombreuses expériences exigent qu’un composé soit administré à un animal par voie orale ou topique, de sorte que la méthode imite mieux l’apport naturel de la substance expérimentale.

Pour le dosage oral, le composé peut être dissous dans l’eau de boisson ou incorporé dans la nourriture que les animaux consomment. Une autre méthode plus précise de dosage oral est le gavage oral dans lequel une grosse aiguille est utilisée pour placer le composé directement dans l’estomac. D’autre part, un agent topique peut être placé directement sur la surface de la peau et est généralement destiné à n’affecter que la zone sur laquelle il est appliqué. Chacune de ces stratégies présente des avantages et des limites, que nous aborderons dans cette vidéo. Ensuite, nous montrerons comment effectuer ces techniques d’administration de composés chez des animaux de laboratoire, et certaines de leurs applications.

Avant de nous plonger dans les protocoles, passons en revue les considérations, les avantages et les inconvénients de ces techniques. Le dosage oral avec des comprimés, des gélules ou des liquides est la méthode d’administration de médicaments la plus couramment utilisée chez l’homme. Cependant, les comprimés et les gélules ne sont pas pratiques pour les rongeurs, de sorte que le dosage oral courant est réalisé en dissolvant le composé dans l’eau potable ou les aliments.

Lors du dosage par l’eau potable, le saccharose est souvent ajouté à l’eau pour améliorer l’appétence. Cependant, il doit être finement équilibré pour encourager une consommation d’eau normale et non une consommation excessive en raison du goût sucré. Une bonne règle est de commencer avec une solution de saccharose à 10 %, puis d’ajuster en fonction de l’apport. Une autre façon de doser l’animal par voie orale est d’utiliser des aliments spécialisés. Il existe des aliments disponibles dans le commerce qui contiennent des composés couramment dosés, tels que le fenbendazole. Les entreprises d’aliments pour rongeurs peuvent également créer des régimes d’essai spécialisés pour répondre à une exigence expérimentale.

Les avantages de cette forme de dosage oral sont qu’elle est non invasive, administre le composé en continu et imite l’administration de médicaments oraux humains. Cependant, il manque de précision car l’apport en composé dépend de l’acceptation de la nourriture ou de l’eau, de la stabilité du composé et du nombre d’animaux présents dans la cage. Si le dosage exact n’est pas essentiel à l’expérience, cette méthode non invasive est la meilleure pour le bien-être des animaux.

Pour une administration orale plus précise, on peut utiliser le gavage oral, qui dépose le composé directement dans l’estomac à un moment précis et à un volume spécifié. Cependant, une formation appropriée est nécessaire pour effectuer cette technique, car de graves dommages peuvent survenir à l’animal s’il n’est pas correctement attaché.

En ce qui concerne les agents topiques, il s’agit notamment des crèmes, des lotions, des pommades, des sprays et des gels. En règle générale, les agents topiques sont destinés à affecter uniquement la zone sur laquelle ils sont appliqués. Cependant, ils peuvent également être absorbés dans la circulation sanguine, ce qui peut être intentionnel ou non. Cette absorption dépend de : l’état de la peau, la surface utilisée, la concentration de la substance, la durée du contact et la solubilité lipidique de l’agent.

Maintenant que nous avons discuté du contexte des méthodes d’administration orale et topique, apprenons les protocoles en commençant par l’administration orale par alimentation ou par eau.

Pour calculer le dosage, vous devez d’abord connaître la dose prévue à administrer. Deuxièmement, vous devez déterminer le poids corporel. Plutôt que de peser des animaux individuels, vous pouvez utiliser le poids moyen de la souche de souris ou de rat pour vos calculs, sauf indication contraire. Troisièmement, vous devez être conscient du nombre d’animaux par cage, et quatrièmement, vous devez connaître la consommation quotidienne moyenne d’eau ou de nourriture par cage.

N’oubliez pas que l’aliment formulé ou l’eau potable contenant le composé dissous peut devoir être remplacé plus fréquemment que l’aliment ou l’eau standard en raison de l’instabilité du composé. Certains composés peuvent être sensibles à la lumière ou précipiter avec le temps.

Apprenons maintenant à administrer par voie orale des doses précises en effectuant un gavage oral chez la souris et le rat.

La première étape consiste à sélectionner une aiguille appropriée pour la procédure. Ceux-ci sont soit réutilisables en acier inoxydable, soit jetables avec une tige en plastique flexible et un embout en silicone. Pour les souris, des aiguilles de dosage droites ou incurvées de calibre 20-25 de 1,5 pouce de longueur sont appropriées. Pour les rats, choisissez des aiguilles de dosage droites ou courbes de calibre 18-20 de 2 à 3 pouces de long. Le bon calibre d’aiguille et le choix de la seringue dépendent également du volume et de la viscosité. Visionnez la vidéo sur l’administration de composés I pour comprendre l’impact de ces facteurs. Pour le dosage de liquides épais, une seringue Luer lock est préférée.

Après avoir fait la sélection, fixez la seringue à l’aiguille de manière à ce que les graduations sur le corps puissent être lues sans tourner l’aiguille. Ceci est important car une fois que l’aiguille a été placée dans l’œsophage, toute rotation peut rompre la paroi de l’œsophage, entraînant la mort de l’animal. Ensuite, remplissez la seringue avec le volume correct de la solution à administrer.

Cette méthode doit toujours être appliquée sur des animaux conscients ayant des réflexes de déglutition intacts afin d’éviter un placement accidentel dans la trachée. L’utilisation d’une technique de contention appropriée est essentielle pour cette procédure. Pour la souris, saisissez la peau à la base de la tête et tenez fermement la pelle. Cela garantit que la tête a un minimum de possibilités de mouvement latéral. Assurez-vous également que le corps est suspendu en ligne droite de la tête à la queue ; Toute torsion empêchera le placement de l’aiguille de gavage dans l’œsophage. L’arrière-train doit également être stabilisé pour éviter la rotation du corps.

Pour retenir un rat, saisissez-le par-dessus les épaules à l’aide de l’index et du majeur de chaque côté du cou. Cela évitera au rat de tourner la tête d’un côté à l’autre. Le pouce, le troisième et le quatrième doigt entourent la poitrine pour empêcher l’animal de se déplacer vers l’avant ou vers l’arrière.

Une fois que vous avez correctement retenu l’animal, positionnez l’aiguille avec la courbe vers le bas et alignée avec la courbe naturelle du cou. Ensuite, introduisez l’aiguille dans la bouche par le côté droit ou gauche, à travers les diastèmes et entre les incisives et les molaires à un angle vers l’arrière du pharynx. Maintenant que l’aiguille est placée dans la cavité buccale, utilisez-la pour incliner la tête vers l’arrière jusqu’à ce que le nez soit pointé vers le haut. À ce stade, l’aiguille devrait glisser facilement dans l’œsophage. Une fois l’aiguille positionnée dans l’estomac, déposez doucement le composé. Ensuite, retirez l’aiguille de l’animal en veillant à ne pas la faire pivoter. Il est important de NE PAS forcer l’aiguille vers le bas. Si vous ressentez une résistance, retirez-la et réessayez. Pendant l’exécution de la procédure, si l’animal présente des signes de cyanose ou de détresse respiratoire ou s’il y a une solution qui s’écoule de sa bouche, l’aiguille doseuse doit être immédiatement retirée et l’animal doit être relâché dans sa cage.

Enfin, passons en revue les procédures d’administration topique chez les animaux de laboratoire. Commencez par anesthésier l’animal. Cela se fait généralement à l’aide d’un inhalant à action rapide, ce qui permet une récupération rapide de l’animal. Pour plus de détails sur l’administration de l’anesthésie, veuillez consulter une autre vidéo de cette collection.

Ensuite, à l’aide d’une tondeuse à cheveux, retirez toute la fourrure de la zone d’application. Pour éviter toute coupure, placez la surface plane de la tondeuse contre la peau et rasez-vous dans le sens opposé à celui de la pousse des poils. Ensuite, nettoyez la peau à l’eau et séchez-la avec un tampon de gaze. Maintenant, à l’aide d’un applicateur à bout de coton, appliquez la substance directement sur la peau. Pour de meilleurs résultats, appliquez plusieurs couches minces de pommade ou de crème, par opposition à une application unique d’une couche épaisse. Pour éviter l’ingestion accidentelle d’un composé appliqué localement lors du toilettage, placez un petit collier ou un bouclier pour empêcher l’animal d’atteindre la partie du corps affectée. De plus, pour éviter le toilettage des compagnons de cage, les animaux doivent être logés individuellement.

Maintenant que vous avez une compréhension de ces voies d’administration alternatives, voyons comment elles sont utilisées dans la recherche biomédicale aujourd’hui.

L’une des applications importantes du gavage oral est l’administration précise de substances pour étudier leur effet direct sur le tractus gastro-intestinal. Ici, les chercheurs ont utilisé cette méthode pour délivrer une levure probiotique transformée directement dans l’estomac de l’animal. Ensuite, ils ont disséqué les plaques de Peyer, qui sont des nodules lymphatiques organisés de l’intestin grêle, pour étudier l’adhérence du micro-organisme délivré.

La voie orale non invasive peut être utilisée pour imiter le mode naturel d’infection d’origine alimentaire. Dans cette expérience, le scientifique a développé un modèle de transmission orale de Listeria monocytogenes chez la souris par l’ingestion d’aliments contaminés. Après l’infection, les chercheurs ont prélevé divers organes comme l’intestin grêle, le côlon, la rate, le foie et la vésicule biliaire, afin d’analyser la propagation de l’infection à ces tissus.

Enfin, certains chercheurs s’intéressent à l’étude du mécanisme par lequel le rayonnement UV peut entraîner des coups de soleil. Ici, les scientifiques ont utilisé la voie topique pour appliquer une substance pharmacologique qui induit la production de mélanine épidermique, un agent protecteur UV. Par la suite, ils ont utilisé un protocole similaire aux études humaines pour examiner l’effet protecteur de l’agent appliqué localement contre l’érythème induit par le rayonnement UV.

Vous venez de regarder le deuxième épisode de JoVE sur les méthodes d’administration de composés traitant du dosage oral et topique. Vous devriez maintenant comprendre comment on peut administrer oralement l’animal avec de la nourriture ou de l’eau, et comment on peut effectuer l’administration orale plus précise par gavage. Enfin, vous devez connaître les considérations et la méthode d’administration topique, ainsi que les applications de ces différentes techniques. Comme toujours, merci d’avoir regardé !