Mesurer la pression sanguine chez des souris en utilisant enregistrement de la pression du volume, une méthode Queue-coiffe

Le mot « coda » signifie queue en italien. Le système non invasif de mesure de la pression artérielle Coda permet de mesurer la pression artérielle chez les rongeurs grâce à un capteur spécialisé d'enregistrement de pression par volume, qui mesure les variations du volume sanguin dans la queue lorsque le capteur est placé sur la queue d'un animal. Cette vidéo montre comment installer le système, préparer les animaux et effectuer simultanément des mesures de pression artérielle sur huit animaux.

Bonjour, je suis Anju Bala Krishnan, chercheuse au sein du laboratoire d'Alan Dougherty au Centre de recherche cardiovasculaire de l'Université du Kentucky à Lexington. Aujourd'hui, nous allons vous montrer une procédure permettant de mesurer la pression artérielle chez la souris à l'aide d'une méthode de manchon à queue avec enregistrement du volume et de la pression. Nous utilisons cette procédure dans notre laboratoire pour étudier le système cardiovasculaire.

Commençons. Pour configurer le système CODA, choisissez un endroit dans le laboratoire où la température ambiante est stable à 20 degrés Celsius ou plus. Évitez les emplacements près des bouches de climatisation, car l'exposition des animaux à des bruits forts ou à des odeurs peut les irriter ou les stresser.

Les odeurs animales peuvent inclure tout parfum fort que vous pourriez porter. Allumez le contrôleur Coda, puis les plateformes de réchauffage réglées au niveau trois. Si la température ambiante est supérieure à 25 degrés Celsius, commencez aux niveaux un ou deux.

Effectuez d'abord le test de diagnostic du contrôleur, puis ouvrez le logiciel Coda. Sélectionnez l'appareil Coda en cliquant dessus. Cliquez sur tester l'appareil sélectionné.

Sélectionnez les manchons et les canaux à tester, puis cliquez sur « tester ». Une fois le test de diagnostic du contrôleur terminé, fermez la fenêtre de test de l'appareil. Sélectionnez le code du contrôleur à utiliser, puis cliquez.

Utilisez ces dispositifs pour configurer le logiciel. Sélectionnez les outils permettant de gérer le personnel. Ensuite, cliquez sur le chercheur numéro un.

Pour modifier le nom, cliquez sur les lignes suivantes pour ajouter d'autres chercheurs. Ensuite, cliquez sur enregistrer les données. Cliquez sur l'onglet des techniciens pour modifier ou ajouter des techniciens.

Ensuite, cliquez sur l'onglet spécimens pour nommer les animaux afin de faciliter leur identification et pour sélectionner le type d'animal. Puis cliquez sur enregistrer les données. Enfin, cliquez sur l'onglet animaux.

Pour modifier le type d'animal et la sensibilité, cliquez sur enregistrer les données, puis sur fermer. Pour commencer une nouvelle expérience, sélectionnez Fichier Nouvelle expérience. Saisissez le nom de l'expérience, sélectionnez le chercheur principal et choisissez une date de début.

Cliquez sur suivant. L'étape suivante consiste à saisir les informations de base de la session. Commencez par entrer le nom de la session, réglez les cycles d'acclimatation à cinq ; si vous préférez ne pas inclure de cycles d'acclimatation, réglez la valeur à zéro.

Configurez le nombre de séries à une fois, avec un intervalle de 30 secondes entre les séries pour plusieurs séries. Réglez le nombre de cycles par série à 20 cycles et l'intervalle entre les cycles à cinq secondes. Ensuite, cliquez sur suivant.

Pour commencer la sélection de l'échantillon, sélectionnez l'échantillon dans le réservoir d'échantillons et attribuez-le au premier canal disponible. Cliquez ensuite sur suivant pour définir les paramètres de la session. Réglez la pression d'occlusion maximale à 250 millimètres.

Temps de déflation du mercure à 20 secondes. Pour les souris, réduire le volume minimal à 15 microlitres et afficher un style avec un canal par graphique. Vous pouvez également ajouter d'autres chercheurs et techniciens.

Ensuite, cliquez sur suivant. Vérifiez le script de la séance et cliquez sur suivant. Ne sélectionnez pas terminer avant d'avoir complété la section de préparation de l'animal, qui est décrite ci-après.

Et maintenant, vous pouvez récupérer les animaux et les placer à côté du système de mesure de la pression artérielle codé. Avant de placer les animaux dans les supports, notez la taille de chaque animal par rapport à la taille du support sélectionné. L'animal doit pouvoir entrer librement dans le support.

Placer chaque animal dans un support en le prenant par la queue et en le glissant délicatement à l’arrière du support, orienté vers l’extrémité ouverte du cône nasal. Fixer soigneusement le panneau arrière au support en tournant la vis située sur ce panneau. Veiller à ne pas pincer la queue ni aucune autre partie du corps lors de la fermeture du panneau arrière.

Diapositive suivante. Le cône nasal vers la trappe arrière. Limiter les mouvements de l'animal.

Le cône nasal doit être positionné de manière à empêcher l'animal de faire demi-tour. Une fois l'animal à l'intérieur du support, placez le support sur la plateforme chauffante. Dans la position prévue, laissez l'animal s'acclimater au support pendant au moins cinq minutes.

Ne touchez ni ne manipulez pas l'animal. Lorsqu'il est à l'intérieur du support, un contact accru pourrait irriter l'animal, et ne laissez jamais l'animal dans le support sans surveillance. Pour positionner correctement le manchon de contention occlusif, passez la queue dans le manchon et placez-le aussi près que possible de la base de la queue, sans forcer.

Ensuite, passez la queue dans le manchon du capteur VPR en la positionnant à moins de deux millimètres du manchon d'occlusion. Fixez le tube dans l'encoche située à l'arrière supérieur du support. Le manchon d'occlusion de la queue est gonflé pour entraver la circulation sanguine dans la queue.

Le garrot d'occlusion est dégonflé lentement et le manchon capteur VPR, intégrant un capteur spécialement conçu, mesure les caractéristiques physiologiques du flux sanguin revenant tandis que le sang regagne la queue. Le manchon capteur VPR mesure le gonflement de la queue résultant des pulsations artérielles dues au flux sanguin. La pression artérielle systolique est mesurée automatiquement lors de la première apparition du gonflement de la queue.

La pression artérielle diastolique est automatiquement calculée lorsque le taux d'augmentation du gonflement cesse au niveau de la queue. Une fois tous les animaux placés dans les supports et leurs queues sanglées, laissez-les au moins cinq minutes pour qu'ils régulent leur température. Enregistrez la température des animaux.

Fréquemment, avec un thermomètre infrarouge, la température de l'animal doit se situer entre 32 et 35 degrés Celsius. Maintenant que les animaux sont prêts, nous pouvons commencer l'expérience. Cliquez sur Terminer pour démarrer l'expérience.

La ligne rouge représente la déflation du brassard d'occlusion et du brassard du capteur VPR. La ligne bleue représente les variations du volume sanguin dans la queue. Le premier point d'inflexion de la ligne bleue, correspondant à la vitesse minimale de changement, indique la pression artérielle systolique.

Le deuxième point d'inflexion de la ligne bleue, correspondant au taux de variation maximal, indique la pression artérielle diastolique lorsque l'expérience est terminée. Retirer immédiatement les animaux des brassards et du support. Un rapport sommaire de la séance s'affiche.

Les données recueillies lors de l'expérience sont enregistrées sous forme de fichier Excel. Il existe plusieurs façons de traiter les données dans le fichier Excel. Une pratique courante consiste à calculer la moyenne et l'écart type, puis à supprimer les mesures.

Si l'écart type est supérieur à 30. En outre, les cycles rejetés peuvent être consultés et l'ensemble de la base de données peut facilement être exporté vers Excel. Consulter le protocole écrit et le manuel de l'utilisateur.

Pour plus d'informations, je viens de vous montrer comment mesurer la pression artérielle chez la souris de manière non invasive à l'aide de l'enregistrement du volume et de la pression. Il est essentiel de réduire le stress animal en suivant cette procédure afin d'obtenir des mesures précises et reproductibles. Voilà, c'est tout.

Merci d'avoir regardé et bonne chance avec les expériences.