Préparation et utilisation des lésions Phantom à la pratique cytoponctions

Pour préparer une lésion fantôme, découpez un morceau de carton de six pouces sur six qui servira de plaque de base. Recouvrez la plaque de base d'une couche de mastic d'un demi-pouce d'épaisseur. Ensuite, découpez un morceau de banane d'une longueur de deux pouces et demi et enfoncez-le délicatement dans le mastic.

La banane sert de noyau de lésion fantôme. Enrober complètement le noyau de mastic sans emprisonner de bulles d'air. Recouvrir le noyau d'un morceau de film plastique et le façonner en un monticule lisse. Laisser durcir le support en mastic à un endroit chaud après que le mastic soit devenu ferme et durci.

Détachez l'emballage en plastique pour vous exercer à la FNA afin de prélever un échantillon à partir du cœur de la banane et vous entraîner à la préparation de frottis. Je suis le Dr Vino, du service de cytopathologie du Département d'anatomie pathologique du Medical College of Wisconsin. Et je suis le Dr George Varszegi, fellow en cytopathologie dans le même service.

Aujourd'hui, nous allons démontrer une procédure permettant de préparer une lésion factice afin de s'exercer à la maîtrise de la réalisation de la FNAV en utilisant des outils et des matériaux simples et facilement accessibles. Nous utilisons généralement cette technique pour initier les fellows en cytopathologie et les résidents en anatomie et cytologie pathologiques à la procédure finale de biopsie par aspiration. Ultérieurement, au cours de leur formation, les fellows et les résidents perfectionneront leurs compétences en réalisant des aspirations fines sur des lésions cliniquement palpables sous la supervision d'enseignants-chercheurs.

Commençons donc. Préparez la lésion simulée un ou deux jours avant la séance prévue de pratique de la FNA. Avant de commencer, tenez prêts sur le plan de travail un morceau de carton, un pistolet à calfeutrer, une banane non épluchée et du film plastique.

La première étape de la préparation d'une lésion fantôme consiste à découper un morceau de carton de six pouces sur six qui servira de plaque de base. Ensuite, découpez un segment de banane d'environ deux pouces de long, qui constituera le noyau de la lésion fantôme. Une fois le noyau de la lésion fantôme prêt, prenez un pistolet à calfeutrer et appliquez une couche d'environ un demi-pouce d'épaisseur de mastic sur la plaque de base.

Appuyez légèrement le noyau de la lésion simulée dans le mastic humide. Ajoutez ensuite davantage de mastic par-dessus le noyau de la lésion simulée afin de l'incorporer complètement. Veillez à ne pas emprisonner de bulles d'air dans le mastic en portant des gants.

Étendre le mastic à la main sur le noyau de la lésion fantôme afin de s'assurer qu'il est complètement recouvert. Recouvrir ensuite le monticule d'un morceau de film plastique de 15 x 15 cm environ et façonner le monticule en une forme convexe lisse. Placer le monticule de mastic dans un endroit chaud pour le laisser durcir de six à huit heures supplémentaires par rapport au temps de durcissement recommandé pour la marque spécifique de mastic utilisée.

Le mastic durcit lorsqu'il est exposé à l'air. Vous pouvez laisser le monticule à température ambiante supérieure à 60 degrés Fahrenheit ou l'incuber à 37 degrés Celsius pour accélérer le durcissement. Après durcissement, le mastic est ferme et vous pouvez facilement retirer le film plastique.

La lésion factice pour l’EAF est désormais prête à être utilisée pour s’exercer à la procédure d’EAF. Maintenant que vous avez préparé votre lésion factice et qu’elle est solidifiée, vous pouvez vous en servir pour vous entraîner à la procédure de BAAF. Ici, nous utilisons le récolteur de tissu muni d’un clapet fonctionnel, mais vous pouvez utiliser brièvement n’importe quel système d’EAF.

Le THFB se compose d'une aiguille pour percer l'échantillon, d'un manchon d'aiguille pour recueillir le matériel aspiré, d'une seringue pour réguler la pression à l'intérieur de l'appareil et d'une valve permettant de relier et de déconnecter le manchon d'aiguille de la seringue. Commencez par préparer l'ensemble de la PAAF en gardant la valve reliant le manchon d'aiguille à la seringue fermée. Tirez ensuite le piston de la seringue afin de créer un vide dans le corps de la seringue.

Insérez ensuite la pointe de l'aiguille dans la lésion. Ouvrez le robinet pour relier le connecteur de l'aiguille au vide dans le corps de la seringue. Le vide aspire le matériel de la lésion dans l'aiguille et dans le connecteur de l'aiguille.

Déplacez l’aiguille de manière répétée à l’intérieur de la lésion afin d’aspirer un échantillon représentatif des composants cellulaires. En maintenant la pression sous vide, prélèvez différentes zones de la lésion en insérant l’aiguille dans des directions variées. Une fois l’échantillonnage terminé, tournez le robinet pour déconnecter le vide dans le corps de la seringue et équilibrer la pression avec les conditions extérieures en ouvrant le robinet.

Ensuite, tournez le robinet pour vous déconnecter de l'extérieur et du corps de la seringue. Retirez l'aiguille de la lésion tout en gardant le robinet fermé. Garder le robinet fermé maintient une légère pression négative à l'extrémité du mandrin et empêche l'échantillon de s'écouler à nouveau dans la lésion par capillarité.

De façon comparable au phénomène de pipetage, votre échantillon de tissu est désormais en sécurité dans le manchon de l'aiguille. Une fois que vous avez retiré l'aiguille du dispositif de désengagement, aspirez le contenu sur une lame de verre afin de préparer une frottis direct. Une fois que vous avez déposé une goutte d'aspirat sur votre lame, vous pouvez l'étaler selon différentes méthodes, en fonction de la nature de l'aspirat ; nous étalons généralement l'échantillon entre deux lames en utilisant la méthode illustrée ici.

Si un échantillon réel est dilué avec du sang, éliminez l'excès de sang en inclinant la lame avant de placer une deuxième lame en verre par-dessus. Si l'aspirat est principalement une suspension sans micro-fragments, comme dans le cas de lésions lymphoprolifératives, il peut être étalé selon la méthode dite « à côtes », où le bord d'une lame sert à créer une série de frottis en relief sur une autre lame, ou selon la méthode d'étalage, où une lame permet de former un film sur une deuxième lame. Une fois les frottis préparés, vous pouvez les traiter et les fixer de diverses manières.

Pour différentes méthodes de coloration, la meilleure approche consiste à faire sécher à l'air tous les frottis rapidement, en une à deux minutes. Le séchage des frottis plus épais et plus humides peut être accéléré en déplaçant latéralement les lames dans l'air ou, de préférence, à l'aide d'un sèche-cheveux ou d'un petit ventilateur portatif fonctionnant sur batterie. Lorsqu'on utilise un ventilateur, il convient de faire attention à prévenir l'aérosolisation, en particulier pour les lésions que l'on soupçonne infectées ; une fois les frottis secs, les colorer de manière appropriée selon vos expériences.

Ici, nous démontrons la coloration d'un frottis séché à l'air avec la coloration D quick, qui fait partie des colorations de type Romanowski en fonction du temps. Suivez les instructions du fabricant. Nous constatons que le séchage à l'air améliore grandement la netteté de la coloration, comme illustré dans cet exemple de frottis colorés par la méthode de Papanicolaou.

L'analyse de ces colorations initiales déterminera les tests supplémentaires que vous souhaiterez peut-être effectuer, tels que la microscopie électronique sélective sur coupe cellulaire, les cultures de microbiologie ou d'autres examens. La réalisation réussie du prélèvement sur lésion simulée permettra une aspiration adéquate du matériel lésionnel, dans ce cas précis, un matériau végétal pâteux provenant de banane. Ce matériau peut être étalé sur des lames en verre afin de s'exercer à l'étalement et à la coloration.

Nous venons donc de vous montrer comment préparer une lésion fantôme afin de s'exercer à la maîtrise de la FNA. Lors de la réalisation de cette expérience, il est important de se rappeler que la lésion fantôme doit être préparée au moins 36 heures avant la séance d'évaluation de compétence, car le gel de calfeutrage nécessite un certain temps pour durcir. Un autre point important est l'application et la libération du vide selon une séquence appropriée afin d'obtenir un matériel d'aspiration optimal lors de la réalisation de la procédure de FNAV.

Voilà, c'est tout. Merci d'avoir regardé et bonne chance dans votre pratique. Et merci beaucoup.