Name: Apprendre la route à faible stress en utilisant le labyrinthe Lashley III chez des souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-22T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Apprenez à évaluer l'apprentissage et la mémoire chez les souris à l'aide du labyrinthe Lashley III sans stress aversif. Cette méthode permet d'étudier les fonctions cognitives et le vieillissement chez Mus musculus.

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Le labyrinthe de Lashley III utilisé pour ces expériences a été construit par Tim Bowmaster, Paul Corman, Barry Dutrow, Ryan Jabco, et Tim Treaster partir de la boutique la Pennsylvania State University Physics Department machine. Les auteurs tiennent à remercier Mme Shoba Belegundu, Mme Tara Chrzanowski, et Mme Alexandra Lewis pour l&#39;assistance dans l&#39;exécution des expériences présentées dans les figures 2-4. M. Walter Jackson a fourni une rétroaction précieuse dans la préparation de ce protocole. Ce travail a été soutenu financièrement par le National Institute of Mental Health (MH064756 et MH077978 à AMA). Le contenu est uniquement la responsabilité de leurs auteurs et ne représentent pas nécessairement les vues officielles de l&#39;Institut national de santé mentale ou de la National Institutes of Health.

1. Préparation: <ol><li> Le labyrinthe est construit Lashley III de plexiglas et est représenté dans la figure 1. La zone de départ, les bras labyrinthe, et la boîte de but sont modulaires pour permettre le nettoyage et la modifiabilité du labyrinthe. Les murs de la case départ, les bras labyrinthe, et la boîte de but sont construites de plexiglas noir pour éliminer les signaux visuels de l'extérieur et l'intérieur du labyrinthe. Maze bras sont de 45 cm de long, 7 cm de haut et 5 cm de large. Les portes menant aux armes consécutifs du labyrinthe sont de 4 cm x 4 cm et sont situés à 11 cm de murs extérieurs du labyrinthe. La boîte de but est de 19,5 cm de long x 7 cm de haut x 5 cm de large. La zone de départ est de 8 cm x 9,5 cm x 7 cm. Séparée claires morceaux de plexiglas sont placés sur le dessus de la zone de départ, labyrinthe, et la boîte de l'objectif de permettre la visualisation de chaque souris à mesure qu'elle progresse dans le dédale, tout en empêchant les souris de s'échapper. Le labyrinthe repose sur une base construite de plexiglas rouge qui est assez grand pour contenir les trois pièces du labyrinthe, plus une cage de pseudo-maison qui est la même taille que la cage de l'animal domestique standard. </li><li> Pour préparer pseudo-home cages avant le procès labyrinthe première litière fraîche de la même nature que celui utilisé dans des cages des animaux à domicile »est ajouté au fonds de cage individuelle ayant des portes (2 cm x 2 cm) coupés sur les côtés. Placez fils sommets sur ces fonds en cage individuellement et de les numéroter, un pour chaque animal dans une cohorte d'essai. Ces cages individuelles servira de pseudo-home cages pour chaque animal pour la durée de la période d'essai. Parce que nous étudions le rôle du stress et / ou de l'anxiété des comportements liés à l'apprentissage et la mémoire, nous utilisons des pseudo-cages à domicile pour éviter les souris individuellement logement dans leurs cages à domicile. Toutefois, si ces facteurs ne sont pas la principale préoccupation, les animaux peuvent être hébergés individuellement dans des cages à domicile modifiés avec des portes et ces cages peuvent servir les cages à domicile pour la navigation labyrinthe succès. </li></ol> 2. Test: <ol><li> Chaque jour, les animaux sont déplacés vers la salle d'examen le comportement d'un minimum d'une heure avant le test afin de leur permettre de s'acclimater à l'environnement de test. </li><li> Trente minutes avant l'heure de début des tests, de la nourriture et l'eau est retirée de toutes les cages à domicile. Gardez la nourriture et l'eau dans la salle de test de comportement, mais hors de portée de la souris. Nourriture et l'eau est généralement enlevé 30 min après le changement de la phase de la lumière à la phase d'obscurité, après le repas de pointe s'est produite. Cela garantit que les animaux sont pour la plupart des aliments et d'eau rassasiés avant le test, cependant, les tests pendant cette période donne une petite force supplémentaire de motivation pour naviguer dans le labyrinthe, même si il n'ya pas de nourriture ou de récompense manifeste de l'eau à l'achèvement des tâches. </li><li> Après la période de 30 min avant le test s'est écoulé, nettoyer le labyrinthe avec 70% d'éthanol. Laissez la porte menant de la zone de départ dans le labyrinthe bras fermés. Les portes aux deux extrémités de la boîte de but sont laissés ouverts. </li><li> Placez la cage pseudo-home correspondant au premier animal à l'extrémité de la boîte de but. </li><li> Effectuer la première souris au labyrinthe, il ventouses dans votre main. Placez la souris dans la zone de départ et remettre le couvercle. </li><li> Lorsqu'il est en position d'observer le dédale sans obstruction, ouvrez la porte de la boîte de départ et commencer immédiatement à trois chronomètres. </li><li> Lorsque les quatre pattes de la souris ont quitté la zone de départ, fermer la porte de la boîte démarrer et arrêter le premier temporisateur. </li><li> Enregistrement à la main le chemin de la souris se déplace comme il navigue dans le labyrinthe. Une souris entre dans une nouvelle zone ou le bras du labyrinthe où les quatre pattes ont franchi dans cette zone (voir fig. 1). </li><li> Lorsque les quatre pattes entrer dans la boîte but, fermer la porte menant entre le labyrinthe et la boîte de but et d'arrêter le deuxième chrono. </li><li> Lorsque la souris est complètement entrée dans la cage de pseudo-maison, fermer la porte entre la boîte de but et la cage. Arrêtez le troisième chrono. </li><li> Enregistrement des temps des trois chronomètres. Comptez le nombre d'erreurs de la souris a fait. Une erreur est défini comme une entrée dans une impasse en cul-de-sac de zone (par exemple, allant de L bras pour la zone K;. Fig 1) ou en voyage en arrière à travers un bras déjà parcouru le labyrinthe (par exemple, allant de F bras à bras C, fig 1).. Alors que nous marquons les performances de la souris comme elle se produit, il est possible de filmer ou autrement essais labyrinthe d'enregistrement pour permettre notation subséquente soit par l'œil ou par un logiciel automatisé. Discrétion de l'expérimentateur doit être utilisé pour choisir une méthode appropriée. </li><li> Laissez l'animal dans la cage de pseudo-home pendant 1 min avant de le retourner dans sa cage à la maison. </li><li> Répétez les étapes 2.3 à 2.12 pour toutes les souris dans la cohorte des tests. </li><li> Quand la souris dernière dans la cohorte a été retourné à sa cage, de lancer le chronomètre de 30 minutes. A la fin de cette période de 30 min, retournez la nourriture et l'eau pour toutes les souris dans la cohorte et revenir ensuite les animaux dans leur chambre colonie. </li><li> Répétez cette procédure sur nuits consécutives, avec un essai par jour et par animal tests, jusqu'à ce que toutes les souris de la cohorte ont atteint un des critères d'apprentissage définis ou jusqu'à ce qu'un n prédéterminésOmbre d'essais de test a eu lieu. Une souris est classé comme ayant appris le labyrinthe où il peut accomplir la tâche avec 0 ou 1 erreur (s) sur deux essais consécutifs. Les souris sont testées dans le même ordre sur les essais successifs. </li></ol> 3. Les résultats représentatifs: Jours d'apprendre (portée critère) peuvent être analysés et comparés entre les différents groupes dans une étude particulière (fig. 2A et 3A). Par ailleurs, un indice de l'apprentissage (apprentissage ratio), qui caractérise l'acquisition labyrinthe, peut être évalué au cours des quatre premiers jours de la période d'essai (figures 2B et 3B). L'indice de l'apprentissage est le rapport entre le nombre de segments de chemin parcouru correcte au nombre total de segments de chemin parcouru pour chaque essai. L'indice de l'apprentissage devrait être en moyenne d'environ 0,5 pour l'essai 1, lorsque les souris sont d'abord exposés à du labyrinthe et de naviguer au hasard. Les augmentations de l'indice d'apprentissage et d'approches entre les essais 1 2 et 4 indiquant que l'apprentissage est en cours. Dans la figure 2, le jeune (2 mois) et au vieillissement (24 mo) les souris mâles C57Bl/6NCr ont été formés sur le labyrinthe de Lashley pour 15 essais. Les jeunes ont appris des souris dans le labyrinthe de 7,2 (± 1,5) d. En revanche, les animaux du vieillissement a pris 11,7 (± 2,1) pour atteindre d critère. Il y avait une forte tendance pour les souris C57Bl/6NCr le vieillissement de prendre plus de temps à apprendre le labyrinthe ([t (23) = 1,59, p = 0,056]; un test t bilatéral, une hypothèse a priori que les jours d'apprendre est plus dans le vieillissement souris). Lorsque l'indice est calculé d'apprentissage, deux groupes d'âge montrent une augmentation régulière de l'indice de l'apprentissage à partir des essais 2 à 4 (effet principal significatif de temps P &lt;0,001). Cependant, il n'y avait aucune différence statistiquement significative de l'indice d'apprentissage entre jeunes et vieux C57 souris souris C57 (principal effet de l'âge P = 0,58). La figure 3 est représentatif des études examinant les effets de la souche de base sur l'apprentissage des comportements. Les données de l'C57Bl/6NCr jeune mâle Fig. 2 sont maintenant comparés aux données de jeunes Crl: CD-1 (ICR) BR souris [CD-1, 4-5 Mo]. Souris CD-1 a appris le labyrinthe Lashley III 4.5 (± 1.4) d; cependant, il n'y avait aucune différence significative entre les souches dans les jours à apprendre (figure 3A; [t (18) = 1,328, P = 0,20], deux -tailed test t). En revanche, l'examen de la montre l'indice d'apprentissage qui, alors que tous les animaux ont été de naviguer dans le labyrinthe sur le premier essai par hasard, souris CD-1 a appris la tâche plus rapidement (effet principal de la souche P &lt;0,001). Ceci est illustré par l'augmentation statistiquement significative de l'indice de l'apprentissage dans les essais 2 à 4 de la souris CD-1 par rapport à des souris C57Bl/6NCr. Fait intéressant, si souris CD-1 continuent d'être formés dans le labyrinthe au delà du point d'atteindre critère, ils présentent un comportement indicative de surentraînement (fig. 4), qui est examinée plus en détail ci-dessous. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig1.jpg" alt="Figure 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 1"> Figure 1:. Le labyrinthe de Lashley III l'impasse en cul-de-sac zones du labyrinthe sont de couleur rouge dans ce diagramme à des fins d'illustration seulement. La base et le bras du labyrinthe sont réelles couleurs solides (en médaillon). Le labyrinthe est dessiné à l'échelle (les dimensions dans le texte). <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig2.jpg" alt="Figure 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 2"> Figure 2: Performance Lashley labyrinthe III en 2 et 24 mois souris mâles C57Bl/6NCr Le labyrinthe Lashley III a été utilisé pour évaluer l'apprentissage des routes dans les jeunes (2 Mo) et au vieillissement (24 mo) les souris mâles C57Bl/6NCr.. Les paramètres mesurés étaient: (a) jours pour critère, le nombre de jours requis pour une souris à courir dans le labyrinthe pour deux nuits consécutives avec 0 ou 1 erreur d'erreur, et (b) l'indice d'apprentissage, le nombre d'entrées correctes bras quatre pattes faite par rapport au nombre total d'entrées-bras en les jours 1-4 de tests Lashley labyrinthe III. Le nombre d'animaux par groupe ont été n = 10 pour 2 mois et n = 15 pour 24 mois chez la souris. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig3.jpg" alt="Figure 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 3"> Figure 3: performances Lashley labyrinthe III en C57Bl/6NCr jeune homme et souris CD-1 Le labyrinthe Lashley III a été utilisé pour évaluer l'apprentissage des routes en 2 mois et 4-5 mois C57Bl/6NCr âgé souris CD-1.. Les paramètres mesurés étaient: (a) jours pour critère, le nombre de jours requis pour une souris à courir dans le labyrinthe pour deux nuits consécutives avec 0 ou 1 erreur d'erreur, et (b) l'indice d'apprentissage, le nombre d'entrées correctes bras quatre pattes faite par rapport au nombre total d'entrées-bras en les jours 1-4 de tests Lashley labyrinthe III. Le nombre d'animaux par groupe ont été n = 10 pour C57Bl/6NCr et n = 10 pour souris CD-1. Significations statistiques: * p &lt;0,05, ** P &lt;0,01 versus souris C57Bl/6NCr. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig4.jpg" alt="Figure 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 4"> Figure 4: performances Lashley labyrinthe III en 4-5 mois mâles âgés de souris CD-1 Le labyrinthe Lashley III.a été utilisée pour évaluer l'apprentissage des routes dans dix 4-5 mois mâles âgés de souris CD-1 sur 15 jours consécutifs. Les paramètres mesurés sont (a) le nombre d'erreurs commises par jour, avec une erreur définie comme une entrée de quatre patte dans une zone morte-end en cul-de-sac ou voyagez un bras déjà parcouru le labyrinthe, et (b) temps passé dans le labyrinthe par jour. Le critère de la journée où a été atteint est indiqué par une flèche rouge.

<ol><li>Blizard, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Return+to+home+cage%27+as+a+reward+for+maze+learning+in+young+and+old+genetically+heterogeneous+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Med%22%5BJournal%5D)">Return to home cage' as a reward for maze learning in young and old genetically heterogeneous mice.</a> Comparative Med. 56, 196-201 (2006).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+JN+%22What%27s+wrong+with+my+mouse%3F%3A+Behavioral+phenotyping+of+transgenic+and+knockout+mice%22">What's wrong with my mouse?: Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice</a>. , 2nd ed, John Wiley & Sons, Inc. Hoboken. (2007).</li>
<li>Blizard, D. A., Klein, L. C., Cohen, R., McClearn, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse-friendly+cognitive+task+suitable+for+use+in+aging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">A novel mouse-friendly cognitive task suitable for use in aging studies.</a> Behav. Genet. 33, 181-189 (2003).</li>
<li>Warren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetitive+learning+by+old+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Aging+Res%22%5BJournal%5D)">Appetitive learning by old mice.</a> Exp. Aging Res. 12, 99-105 (1986).</li>
<li>Lashley, K. Brain mechanisms and intelligence: A quantitative study of injuries to the brain. , University of Chicago Press. Chicago. (1929).</li>
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<li>Matzel, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+the+expression+of+a+general+learning+ability+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Individual differences in the expression of a general learning ability in mice.</a> J. Neurosci. 23, 6423-6433 (2003).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris water maze in the study of memory and learning.</a> Int. J. Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Hepler, D. J., Wenk, G. L., Cribbs, B. L., Olton, D. S., Coyle, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+impairments+following+basal+forebrain+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Memory impairments following basal forebrain lesions.</a> Brain Res. 346, 8-14 (1985).</li>
<li>Sci, B. ehavB. rain 2, 313-313 (1979).</li>
</ol>

Tous les protocoles de comportement ont été approuvées par les soins de la Pennsylvania State University et le Comité institutionnel d&#39;animaux utilisation. Il n&#39;y a pas divulgation de renseignements financiers à signaler.

Les tests chez les rongeurs les plus couramment utilisés pour évaluer l&#39;apprentissage de comportement et la mémoire sont la piscine de Morris et des variantes de conditionnement de la peur 2. Ces tests reposent sur ​​des indices visuels ou auditifs pour l&#39;apprentissage et des stimuli aversifs (par exemple, l&#39;eau, choc électrique) pour motiver les animaux pour compléter les 3 tâches. Chez les rongeurs vieillissement, comme chez les humains du vieillissement, des modalités sensorielles di...

<table><tbody><tr><td>labyrinthe Lashley III</td><td>Atelier mécanique de physique de l'Université d'État de Pennsylvanie</td><td>N/A</td><td> Le labyrinthe doit être fabriqué sur mesure, il n'est pas disponible commercialement</td></tr></tbody></table>

apprendre la route à faible stress en utilisant le labyrinthe lashley iii chez des souris

Low-stress Route Learning Using the Lashley III Maze in Mice

Beaucoup de tests de comportement visant à évaluer l&#39;apprentissage et la mémoire chez les rongeurs, en particulier les souris, s&#39;appuient sur des repères visuels, la privation de nourriture et / ou de l&#39;eau, ou d&#39;autres stimuli aversifs pour motiver l&#39;acquisition tâche. Comme l&#39;âge des animaux, des modalités sensorielles se détériorer. Par exemple, de nombreuses souches de souris développent l&#39;audition des déficits ou des cataractes. Les changements dans les systèmes sensoriels nécessaires pour guider les souris lors de l&#39;acquisition tâche actuelle confond potentiel dans l&#39;interprétation des variations d&#39;apprentissage chez les animaux vieillissants. Par ailleurs, l&#39;utilisation de stimuli aversifs pour motiver les animaux à apprendre des tâches est potentiellement confondants en comparant des souris avec différentes sensibilités au stress. Pour minimiser ces types d&#39;effets confondants, nous avons implémenté une version modifiée du labyrinthe Lashley III. Ce dédale d&#39;apprentissage repose sur la route, où les souris apprennent à naviguer dans un labyrinthe à travers une exposition répétée dans des conditions de stress faible, par exemple la phase sombre, pas de privation de nourriture / eau, jusqu&#39;à ce qu&#39;ils naviguer sur un chemin de l&#39;emplacement de début à une cage de pseudo-maison avec 0 ou 1 erreur (s) sur deux essais consécutifs. Nous classons cela comme un test de comportement à faible stress, car il ne repose pas sur des stimuli aversifs d&#39;encourager l&#39;exploration du labyrinthe et de l&#39;apprentissage de la tâche. L&#39;appareil se compose d&#39;une boîte de démarrage modulaire, un organe labyrinthe 4-bras, et une boîte de but. A la fin de la boîte de but est une cage de pseudo-maison qui contient la literie semblable à celle trouvée dans la cage de la maison de l&#39;animal et est spécifique à chaque animal pour la durée du test labyrinthe. Il a été démontré précédemment que cette cage pseudo-home offre une récompense suffisante pour motiver les souris pour apprendre à naviguer dans le labyrinthe<sup&gt; 1</sup&gt;. Ici, nous présentons la visualisation de la procédure de Lashley labyrinthe III dans le contexte de l&#39;évaluation liée à l&#39;âge des différences dans l&#39;apprentissage et la mémoire chez des souris avec une comparaison du comportement d&#39;apprentissage chez deux souches différentes de souris de fond. Nous espérons que d&#39;autres chercheurs intéressés à évaluer les effets du vieillissement ou de la vulnérabilité du stress chez les souris examinera ce dédale une alternative intéressante aux tests comportementaux qui comportent des tâches d&#39;apprentissage plus stressant et / ou des indices visuels.

Le labyrinthe de Lashley III est une tâche itinéraire d&#39;apprentissage qui ne repose pas sur des stimuli aversifs ou des indices visuels. C&#39;est donc une option très intéressante pour évaluer l&#39;apprentissage et la mémoire, en particulier dans les souris vieillissantes ou autrement, où le stress est une considération.

Apprendre la route à faible stress en utilisant le labyrinthe Lashley III chez des souris

De nombreux tests comportementaux conçus pour évaluer l'apprentissage et la mémoire chez les rongeurs, en particulier les souris, reposent sur des indices visuels, la privation de nourriture et/ou d'eau, ou d'autres...

Dans le labyrinthe en trois branches de Lash, les souris ont appris à se déplacer à travers une série de branches pour atteindre un environnement simulant une cage d'habitation. Lors de plusieurs essais, au début de chaque essai, les souris sont placées dans le Starbucks, qui est séparé du labyrinthe par une porte. Une fois la porte ouverte, les souris entrent dans les branches du labyrinthe et peuvent explorer librement le trajet qu'elles empruntent.Le labyrinthe est enregistré, y compris les entrées dans les zones d'erreur en impasse. À l'entrée dans la boîte dorée, une autre porte se ferme pour empêcher la réentrée dans le labyrinthe et diriger la souris vers la cage pseudo-domestique. À la fin de l'essai dans le labyrinthe, les performances sont comparées entre groupes d'âge ou souches afin d'évaluer leur rôle dans l'apprentissage et la mémoire.Bonjour, je suis Amanda Bressler. Je travaille au laboratoire d'Anne Andrews ici à l'Université d'État de Pennsylvanie. Je vais vous montrer aujourd'hui comment utiliser le labyrinthe de Lashley trois.Nous utilisons principalement ce labyrinthe dans notre laboratoire pour étudier le vieillissement chez des souris génétiquement modifiées. Voici donc le labyrinthe de Lashley trois. Tout d'abord, voyons à quoi ressemble le labyrinthe de Lashley trois.Le labyrinthe de départ, les bras et la boîte dorée sont modulaires afin de permettre le nettoyage et la modification du labyrinthe. Les parois de la boîte de départ, du labyrinthe, des bras et de la boîte dorée sont toutes fabriquées en plexiglas noir afin d'éliminer les indices visuels provenant de l'extérieur et de l'intérieur du labyrinthe. Les bras du labyrinthe mesurent 45 centimètres de long, sept centimètres de haut et cinq centimètres de large.Les portes menant à des bras consécutifs de la masse mesurent quatre centimètres sur quatre centimètres et sont situées à 11 centimètres des murs extérieurs de la masse. La boîte dorée mesure 19,5 centimètres de longueur, sept centimètres de hauteur et cinq centimètres de largeur. La boîte de départ mesure huit centimètres sur 9,5 centimètres sur sept centimètres. Des pièces transparentes en plexiglas sont placées au-dessus du labyrinthe en forme de masse et de la boîte dorée afin de permettre la visualisation de chaque souris au fur et à mesure de son parcours dans le labyrinthe.Bien que l'empêchement des souris de s'échapper du labyrinthe repose sur une base construite en plexiglas rouge suffisamment grande pour contenir les trois pièces du labyrinthe, ainsi qu'une cage-maison factice de la même taille que la cage-maison standard de l'animal. Pour préparer les cages-maisons factices avant le premier essai MACE, ajoutez un matériau de litière frais dans le fond de chaque cage, avec des ouvertures découpées sur les côtés, placez les couvercles en treillis métallique sur les fonds de cage et numérotez-les individuellement, un par animal dans une cohorte d'essai. Ces cages serviront de cages-maisons factices individuelles à chaque animal pendant toute la durée de la période de test.Avec le labyrinthe préparé, voyons comment réaliser un test comportemental d'au moins une heure. Avant le test, déplacez les animaux dans la salle de tests comportementaux afin qu'ils s'acclimatent à l'environnement de test. 30 minutes avant le test, retirez la nourriture et l'eau de toutes les cages d'origine.Gardez la nourriture et l'eau dans la salle de tests comportementaux, mais hors de portée des souris. L'expérience est généralement planifiée de sorte que la nourriture et l'eau soient retirées 30 minutes après le passage de la phase claire à la phase sombre, moment où l'alimentation est maximale. Cela garantit que les animaux sont majoritairement rassasiés en nourriture et en eau avant le test, aux fins de démonstration.Dans cette vidéo, nous montrons cette procédure sous une lumière vive. Le test est généralement réalisé pendant la phase sombre du cycle clair-obscur. Une fois la période de prétest de 30 minutes écoulée, nettoyez le labyrinthe avec de l'éthanol à 70 %.Laissez la porte menant du Starbucks vers le labyrinthe. Bras fermés. Les portes aux deux extrémités de la boîte dorée doivent rester ouvertes.Placez maintenant la fausse cage d'accueil correspondant au premier animal. À la fin de la boîte dorée, transportez la première souris vers le labyrinthe en la tenant en coupe dans votre main.Placer la souris dans le Starbucks et remettre le couvercle. Une fois en position pour observer le labyrinthe sans obstruction, ouvrir la porte de la boîte de départ et démarrer immédiatement trois chronomètres. Lorsque les quatre pattes de la souris ont quitté la boîte de départ, fermer la porte de la boîte de départ et arrêter manuellement le premier chronomètre.Enregistrez le parcours. La souris se déplace en naviguant dans le labyrinthe. Sur une feuille de notation, une souris est considérée comme entrant dans une nouvelle zone ou branche du labyrinthe lorsque ses quatre pattes ont franchi cette zone.Lorsque les quatre pattes entrent dans la boîte-objectif, fermez la porte entre le labyrinthe et la boîte dorée et arrêtez le deuxième chronomètre. Lorsque la souris est complètement entrée dans la fausse cage d’habitat, fermez la porte entre la boîte dorée et la cage. Arrêtez le troisième chronomètre.Enregistrez les temps provenant des trois chronomètres et comptez le nombre d'erreurs commises par la souris. Une erreur est définie comme une entrée dans une zone sans issue en impasse ou le fait de revenir par un bras du labyrinthe déjà emprunté. Laissez l'animal dans la fausse cage d'accueil pendant une minute avant de le ramener à sa cage d'origine.Après avoir testé toutes les souris du groupe, attendez 30 minutes, puis remettez la nourriture et l'eau à toutes les souris. Enfin, ramenez les animaux dans leur salle d'élevage. Répétez cette procédure pendant plusieurs nuits consécutives, avec un essai par jour de test et par animal, jusqu'à ce que toutes les souris du groupe atteignent un critère d'apprentissage défini ou jusqu'à ce qu'un nombre prédéterminé d'essais de test ait été effectué.On considère qu'une souris a appris le labyrinthe lorsqu'elle est capable d'effectuer la tâche sans erreur ou avec une seule erreur lors de deux essais consécutifs. Les souris sont testées dans le même ordre au cours des essais successifs. Nous allons maintenant présenter quelques résultats comportementaux représentatifs.Ici, nous observons des données provenant de souris mâles jeunes de deux mois et âgées de 24 mois, de type C57 noir six et CR, qui ont été entraînées au labyrinthe de Lashley pendant un maximum de 15 essais. Sur la figure 2 A, les souris jeunes ont appris le labyrinthe en moyenne en 7,6 jours. En revanche, les animaux âgés ont mis 11,7 jours pour atteindre le critère.Il y avait une forte tendance chez les souris C57, black six NCR R âgées à mettre plus de temps pour apprendre le labyrinthe. L'indice d'apprentissage correspond au rapport entre le nombre d'entrées correctes dans les bras et le nombre total de segments de trajet parcourus lors d'un essai unique, lorsque l'indice d'apprentissage est calculé dans la figure deux B. Les deux groupes d'âge présentent un ratio d'environ 0,50 pour le premier essai. Les souris jeunes et âgées montrent toutes deux une augmentation régulière de l'indice d'apprentissage entre les essais deux et quatre, mais aucune différence significative n'a été observée entre les deux groupes présentés.Voici des données provenant d'études examinant l'effet de la souche génétique sur le comportement d'apprentissage. Des souris mâles jeunes, C 57, black six NCR et des souris témoins CD one âgées de quatre à cinq mois ont été comparées. Les souris C 57 black six sont les mêmes souris que le groupe jeune du graphique deux.À la figure trois, des souris CD1 apprennent le labyrinthe de Lashley trois en 4,5 jours. Aucune différence significative n'a été observée entre les souches quant au nombre de jours nécessaires pour atteindre les critères. En revanche, l'analyse de l'indice d'apprentissage à la figure trois B montre que, bien que tous les animaux parcourent le labyrinthe au hasard lors du premier essai, les souris CD1 apprennent la tâche plus rapidement.Cela est illustré par l'augmentation statistiquement significative de l'indice d'apprentissage lors des essais deux à quatre chez les souris CD one par rapport aux souris C57BL/6 et CR. Fait intéressant, si l'on continue à entraîner les souris CD one dans le labyrinthe au-delà du moment où elles atteignent le critère, elles présentent un comportement indiquant un surentraînement. À la figure 4 A, on observe une augmentation du nombre d'erreurs commises après le jour 5. Le jour 5 correspondait au jour où les souris CD one ont atteint le critère.Les souris CD un passaient également plus de temps à l'intérieur du MACE après avoir acquis la tâche, ce qui peut être observé à la figure quatre B. Nous venons donc de vous montrer comment utiliser le labyrinthe Lashley trois pour mesurer l'apprentissage et la mémoire chez les souris. Lors de la mise en œuvre de cette expérience dans votre propre laboratoire, il peut être nécessaire de réaliser quelques travaux pilotes, car différentes souches de souris acquièrent les MAs à des rythmes différents et peuvent être sujettes à un surentraînement. Merci d'avoir regardé et bonne chance dans vos futures expériences.

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Cette vidéo montre comment utiliser le Barnes Maze avec une souris. La procédure de test du labyrinthe de Barnes est utilisée par les chercheurs pour évaluer l’apprentissage spatial et la mémoire chez des animaux de laboratoire après des essais répétés.

Labyrinthe de Barnes : une méthode d’évaluation de l’apprentissage spatial et de la mémoire chez les animaux de laboratoire

La terre sèche Barnes labyrinthe est largement utilisé pour mesurer la capacité de la navigation spatiale en réponse à des stimuli aversifs légèrement. Sur des jours consécutifs, la performance (par exemple, la latence pour localiser évasion cage) des sujets de contrôle améliore, indicatif de l'apprentissage et de la mémoire normale. Les différences entre les rats et les souris nécessitent appareils et méthodologie changements qui sont détaillées ici.

Barnes Maze Stratégies de test avec les petites et grandes des modèles de rongeurs

L’objectif de ce protocole est d’étudier la cognition spatiale chez les rongeurs. Le labyrinthe aquatique double-H est un test novateur, qui est particulièrement utile pour élucider les différentes composantes de l’apprentissage, de la consolidation et de la mémoire, ainsi que l’interaction des systèmes de mémoire.

Le Double-H Maze: un test comportemental robuste pour l&#39;apprentissage et la mémoire chez les rongeurs

L'Open-champ Tour Maze (OFTM) est un labyrinthe créé pour étudier les mécanismes comportementaux et neuronaux de l'apprentissage spatial (par exemple, ou la réponse place--learning) chez les rats. Ce labyrinthe est particulièrement utile pour les expérimentateurs qui veulent utiliser un paradigme de labyrinthe non stressant pour enquêter sur l'apprentissage spatial dans leurs recherches.

Placez et l&#39;apprentissage de réponse à l&#39;Open-champ Tour Maze

Ce protocole décrit une analyse comportementale, basée sur le test du labyrinthe Barnes, pour étudier comment instinctive défensive actions sont modifiées par la connaissance de l’environnement spatial.

Une analyse comportementale pour enquêter sur le rôle de la mémoire spatiale pendant la défense Instinctive chez les souris

Ce protocole mesure spatiale d’apprentissage et de mémoire à l’aide du labyrinthe de Barnes. Un nouveau paradigme de demoiselle en détresse sert à évaluer l’activité locomotrice et comportement prosocial chez la souris.

Analysant l’apprentissage Spatial et comportement Prosocial chez la souris à l’aide de la Maze de Barnes et paradigmes de la demoiselle en détresse

La tâche de barrière Y-maze est un test de comportement qui examine la motivation à dépenser des efforts pour la récompense. Ici, nous discutons de tester plusieurs facteurs de stress chroniques bien validés, y compris la corticostérone chronique et le stress de défaite sociale avec ce comportement, ainsi que le nouveau stress chronique non discriminatoire défaite sociale (CNSDS), qui est efficace chez les femmes.

Le stress chronique change le comportement de choix lié à l’effort dans une tâche de barrière de Y-Maze chez les souris

Le présent protocole décrit un labyrinthe reconfigurable, un système unique pour tester la navigation spatiale et les phénotypes comportementaux chez les rongeurs. L’adaptabilité de ce système de labyrinthe permet l’exécution de diverses expériences dans un seul environnement physique. La facilité du réarrangement structurel génère des résultats expérimentaux fiables et reproductibles.

Utilisation d’un système de labyrinthe reconfigurable pour améliorer la reproductibilité des tests de navigation spatiale chez les rongeurs

Cet article présente un protocole qui permet une évaluation non invasive et automatisée des performances de motricité fine, ainsi qu’un apprentissage moteur adaptatif et associatif lors de défis, à l’aide d’un dispositif appelé Erasmus Ladder. La difficulté de la tâche peut être titrée pour détecter une déficience motrice allant de degrés majeurs à subtils.

Suivi de l’apprentissage de la motricité fine et associative chez la souris à l’aide de l’échelle Erasmus

La plupart des expériences de comportement pour les rongeurs ont été conçues à l’origine pour les rats. En raison des différences de comportement entre les rats et les souris, des modifications sont parfois nécessaires pour les souris. Nous présentons une méthode pour tester la mémoire de travail spatiale chez la souris, en minimisant le stress pendant la tâche de mémoire de travail.

Une tâche de mémoire de travail spatiale appétitive pour des souris dans un labyrinthe radial semi-automatisé à 8 bras, réduisant l’association de mémoire effrayante dans le labyrinthe

Apprenez à évaluer l'apprentissage et la mémoire chez les souris à l'aide du labyrinthe Lashley III sans stress aversif. Cette méthode permet d'étudier les fonctions cognitives et le vieillissement chez Mus musculus.

Apprendre la route à faible stress en utilisant le labyrinthe Lashley III chez des souris

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