Appareil et méthode pour Novel Drug Renforcement

Ce vidéo montre une nouvelle approche pour l'étude de l'abus de drogues en combinant les procédures classiques de préférence conditionnée pour un lieu et d'auto-administration. Premièrement, les préférences de base pour deux environnements opérants distincts sont déterminées. Ensuite, des séances d'auto-administration commencent, durant lesquelles les rats s'auto-administrent de la cocaïne dans un seul des deux environnements opérants distincts.

Après l'acquisition conditionnée, on mesure la durée pendant laquelle les animaux choisissent de rester dans chacun des environnements opérants ; les modifications de l'endroit préféré, des préférences et des taux d'auto-administration de drogue peuvent ensuite être mesurées et corrélées. Bonjour, je suis Allison Fiducia du laboratoire de la Dre Christine Elle, au Collège de pharmacie, division de pharmacologie et de toxicologie à l'Université du Texas à Austin. Et moi, je suis Christine Elle.

Aujourd'hui, nous aimerions vous présenter un nouvel appareil qui peut être utilisé de plusieurs façons différentes pour étudier le renforcement médicamenteux et la dépendance chez le rat. Nous utilisons cette procédure dans notre laboratoire pour étudier les effets conditionnants de l'automédication à la cocaïne. Commençons donc.

Pour commencer les préparatifs d'expériences sur le renforcement pharmacologique, entraînez d'abord des rats mâles à appuyer sur un levier pour obtenir une récompense alimentaire. Ensuite, construisez des cathéters intraveineux, qui seront utilisés pour l'auto-administration du médicament. Les cathéters sont fabriqués à partir d'une canule en acier inoxydable et d'un tube en Celeste, et doivent être rincés avec du méthanol et de l'eau.

Ensuite, les faire sécher à l'air pendant leur préparation le jour de la chirurgie, puis les baigner dans de l'éthanol à 70 %. Une fois les cathéters terminés, les rats subissent une intervention chirurgicale de cathétérisation jugulaire afin de permettre l'auto-administration de drogues. Pendant les expériences, anesthésier un rat avec de 2,5 à 4 % d'isoflurane.

Ensuite, rasez la tête et la poitrine, désinfectez les zones avec une solution de Bétadine. Puis placez-le sur un coussin stérile après la chirurgie. Surveillez le rat pendant plusieurs heures avant de le retourner dans la colonie animale.

Assurez la perméabilité du cathéter par un rinçage quotidien avec 0,1 millilitre d'une solution saline à 0,9 %, d'héparine et de menton afin de préparer la cocaïne utilisée dans les expériences ; dissolvez-la dans une solution saline isotonique aux concentrations posologiques appropriées selon le poids des animaux, les animaux et l'administration du médicament étant préparés. Examinons l'appareillage utilisé durant les expériences. L'appareillage utilisé durant les expériences est constitué de deux chambres à levier unique, équipées de lumières ambiantes et de lumières stimuli, ainsi que de trois jeux de faisceaux photoélectriques, utilisés pour mesurer l'activité locomotrice.

Les compartiments sont reliés entre eux par une allée en plexiglas conçue. L'allée est constituée de deux murs noirs avec des bandes blanches et de deux murs métalliques, d'un dessus en plexiglas transparent et d'un sol en plexiglas blanc. Les deux compartiments opérants sont équipés de planchers en barreaux de grille d'acier installés sur des fonds de cage métalliques amovibles.

Des indices visuels et olfactifs sont placés dans la chambre opérante afin de créer des environnements uniques et distinguables. Dans l'un des environnements, le sujet menacé aura accès à des injections de cocaïne. Dans l'environnement alternatif, le sujet menacé n'aura accès qu'à des injections de sérum salin.

Les indices visuels consistent en un matériau en feutre blanc ou noir fixé aux parois avant et arrière ainsi qu'au-dessus du couvercle de la cage. Les indices olfactifs sont constitués d'huiles essentielles de rangées ou de cannelle imprégnant une boule de coton placée sous le plancher de la chambre pour rongeur. Pendant les expériences, les réponses de Libra et les données d'activité locomotrice sont enregistrées à l'aide d'un ordinateur Med Pentium doté d'un processeur de 100 mégahertz et du logiciel med PC.

Maintenant que nous avons vu le dispositif expérimental, examinons comment recueillir les données. La procédure expérimentale s'étend sur plusieurs jours, en commençant par des tests de préférence de base d'une durée de deux jours, suivis de séances d'auto-administration de drogue durant huit ou 16 jours, et se terminant par un test de préférence conditionnée pour un lieu. Pour commencer à recueillir les mesures de préférence de base, placez le rat dans la travée centrale avec accès aux deux chambres opérantes pendant 20 minutes.

Immédiatement après avoir placé le rat dans la chambre, activez simultanément le logiciel de caméra vidéo sur le PC et le chronomètre. Après 20 minutes, retirez le rat de la chambre et replacez-le dans sa cage d'origine. Le jour suivant le dernier test de base, commencez les séances d'auto-administration de drogue.

Placez d'abord les indices sensoriels, puis positionnez un panneau pour bloquer l'accès depuis la tranchée centrale en plexiglas vers la chambre. Reliez maintenant l'entrée du cathéter de l'animal à la seringue de médicament fixée pour démarrer la séance. Placez d'abord l'animal dans la chambre.

Après avoir fermé la porte de la chambre opératoire, lancez le programme Med PC et le minuteur afin que la cocaïne soit disponible pendant une heure. La cocaïne est administrée selon un protocole de renforcement à ratio progressif. Ce protocole exige un nombre croissant d'appuis sur le levier pour recevoir chaque injection successive de cocaïne.

Chaque injection consiste en une dose de 0,75 milligramme par kilogramme administrée tous les deux jours. Dans l'environnement alternatif, le protocole du ratio progressif est également utilisé pour les injections de sérum physiologique. À la fin de chaque séance d'auto-administration, déconnectez l'enroulement du tube à drogue, retirez-le de la chambre et replacez-le dans la cage d'origine.

Le jour suivant la dernière séance d'auto-administration, réalisez le test de préférence conditionnée pour un lieu. La procédure de ce test est identique à celle des mesures de base. Voyons maintenant comment évaluer et analyser les données.

Lors de l'évaluation des données et de l'attribution aveugle des groupes par l'expérimentateur, on détermine la durée pendant laquelle l'animal a passé dans chaque compartiment. L'expérimentateur examine la vidéo pour comptabiliser les entrées et sorties entre les compartiments pendant une période de 15 minutes, commençant cinq minutes après le placement dans l'appareil. Les mêmes procédures sont utilisées pour déterminer la préférence de base et les scores du test de CPP.

Les différences entre les mesures de base et les scores de CPP post-conditionnement sont utilisées pour déterminer les effets du conditionnement médicamenteux. Les scores de différence post-conditionnement sont calculés en soustrayant la durée passée dans le compartiment apparié au stimulus saillant de celle passée dans le compartiment apparié au médicament lors du test de CPP. Les scores de différence de base sont calculés de manière similaire et soustraits des scores de différence de CPP.

Une analyse statistique des différentes variations de scores entre la ligne de base et les séances de test peut être effectuée afin de déterminer les effets du conditionnement médicamenteux. On observe ici un graphique représentatif des scores de base et des scores de test de PCC. Les scores de test de PCC étaient significativement supérieurs aux scores de base, indiquant une préférence pour l'environnement associé à la cocaïne.

Après l'analyse de corrélation conditionnelle pour les réponses totales de sortie liées au médicament et les scores de différence au test de CPP sont illustrés ici. Le groupe à effet prolongé de cocaïne a été le seul groupe à présenter une corrélation positive significative entre les réponses de sortie liées au médicament et les scores au test de CPP. Nous venons de vous montrer comment combiner des méthodes traditionnelles de conditionnement, de préférence pour un lieu et d'auto-administration afin d'adopter une approche novatrice pour l'étude du renforcement médicamenteux chez le rat.

Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de tenir une bonne comptabilité. Voilà donc tout. Merci d'avoir regardé et bonne chance avec vos expériences.