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La pression du fluide interstitiel ou IFP est la force exercée par le liquide dans les espaces entre les cellules d’un tissu. Tout d’abord, anesthésie une souris porteuse d’une tumeur avec 2 % d’isofluorane mélangé à de l’oxygène et immobilisez-la sur la plateforme robotique de tomodensitométrie ou CT-IFP. Maintenant, injectez dans la veine latérale de la queue d’une souris avec des liposomes encapsulés avec un agent de contraste pour visualiser la tumeur. Remettez l’animal dans sa cage et laissez-le récupérer.
Entre 48 et 72 heures après l’injection, fixez la souris anesthésiée sur la plateforme CT-IFP et sélectionnez quelques positions régulièrement espacées sur la tumeur pour mesurer l’IFP. Ensuite, rincez l’aiguille du système IFP avec une solution saline d’héparine avant l’insertion. Amenez l’aiguille dans la position sélectionnée et insérez-la dans le tissu tumoral.
Acquérez maintenant des images à toutes les positions et mesurez l’écran plat IFP à l’aide du logiciel. L’IFP dans la tumeur est généralement élevé en raison de sa nature dense, de ses vaisseaux sanguins anormaux et de son système lymphatique défectueux. Cela peut conduire à l’accumulation de liposomes à la périphérie de la tumeur. Dans le protocole suivant, nous démontrerons la technique de mesure de l’IFP dans une tumeur solide.
Pour mesurer l’IFP, scotchez l’animal sur la plate-forme robotique CT-IFP, de sorte que la tumeur soit immobilisée et accessible au système robotique CT-IFP. Obtenez un micro-tomodensitométrie anatomique comme nous venons de le démontrer, puis chargez les données de préinsertion de l’aiguille dans le logiciel d’alignement du robot CT-IFP et ajustez la fenêtre et le niveau pour visualiser la tumeur. Cliquez sur le bord de la tumeur dans n’importe quelle image, suivi de la sélection d’un deuxième emplacement du bord sur le côté adjacent de la tumeur.
Le logiciel calculera une série de positions le long d’une ligne linéaire entre les deux points. Sélectionnez ensuite les coordonnées x, y et z pour une série de cinq à huit positions régulièrement espacées dans la liste. Ensuite, rincez l’aiguille du système IFP avec une solution saline d’héparine et entrez les premières positions prédéterminées de l’aiguille dans les fenêtres de coordonnées XYZ du logiciel de commande de robot CT-IFP.
Appuyez sur le bouton Go pour déplacer le robot à l’emplacement souhaité. Ensuite, pour chaque position de l’aiguille à tour de rôle, cliquez sur le bouton Insérer l’aiguille pour insérer l’aiguille dans le tissu. Pincez et relâchez la tubulure PE-20 pour confirmer une bonne communication fluide entre l’aiguille IFP et le tissu et observez que la mesure IFP augmente et revient à la valeur de pré-pincement sur le logiciel d’acquisition IFP. Enfin, obtenez une tomodensitométrie anatomique avec l’aiguille insérée, en cliquant sur le bouton Rétracter l’aiguille à la fin de l’examen pour retirer l’aiguille du tissu.
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