Name: Ex vivo Chargement mécanique du tendon (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-05-28T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 36 s
Description: Découvrez un système de chargement mécanique ex vivo pour tendons permettant d'étudier simultanément quatre échantillons. Cette méthode bioingénierie aide à comprendre les mécanismes des troubles des tendons du poignet et du coude.

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<ol><li> Supplément médias CO 2-médiatiques indépendants avec sérum de veau fœtal, la L-glutamine, des antibiotiques et l&#39;acide ascorbique </li><li> Aliquoter 40 ml dans des tubes de 50 ml par centrifugation (1 pour chaque tendon) </li><li> Aliquote de 10 ml dans des tubes de 15 ml par centrifugation (1 pour chaque tendon) </li><li> Stériliser des instruments chirurgicaux, draps autoclave, une pince à épiler et une clé dynamométrique en autoclave </li><li> Stériliser colliers et des conseils micrométrique vigueur par trempage dans de l&#39;éthanol 70% pendant une nuit </li><li> Récolte des tendons de la patte arrière du lapin. Lapin aurait dû être euthanasiés pas plus de 2 heures. </li><li> Tendons lieu dans 15 ml remplie tube à centrifuger avec les médias </li><li> Disposez une feuille autoclave stérilisée pour établir un champ stérile </li><li> Mesure section transversale du tendon <ol style="margin-top: 0in"><li> Conseils micrométrique lieu le micromètre, aligner correctement </li><li> Tendon Grip par les extrémités </li><li> Fit section du tendon mince dans la rainure </li><li> Ont un poids de 50g lieu assistante </li><li> Attendez 30 secondes, lisez épaisseur (CSA = épaisseur x 1,3) </li></ol></li><li> Retour tendon lieu dans 15 ml tube à centrifuger </li><li> Répétez l&#39;opération avec chaque tendon d&#39;être chargé </li><li> Retirer actionneur de la base </li><li> Coupez deux bandes de 15mm par 40mm et un 3mm par pièce 5mm de gaze stérile pour chaque tendon </li><li> Rouler chaque bande hermétiquement et placer entre les rainures de la pince distale </li><li> Retirer tendon de tube de centrifugeuse et le lieu sur la pince, l&#39;extrémité distale du tendon sur la pince distale et la région fibrocartilage du tendon sur la pince proximale </li><li> Placez morceau de gaze 3x5 sur le dessus de l&#39;extrémité distale du tendon, et fixer la pince </li><li> Fixez clamp proximal, assurant tendon reste alignée entre les pinces et avec suffisamment de mou qu&#39;il n&#39;est pas sous tension lorsque les pinces sont serrées. Serrer les colliers à 1N-m </li><li> Tube à centrifuger 50ml place avec les médias dans la base </li><li> Placer le servomoteur dans la base </li><li> Répétez l&#39;opération avec chaque tendon d&#39;être chargé </li><li> Placer la base sur bain d&#39;eau </li><li> Chargement Protocole <ol style="margin-top: 0in"><li> Condition tendons </li><li> Appliquer 0,5 N de charge, la longueur du tendon mesure (c&#39;est la longueur de jauge) </li><li> Appliquer chargement cyclique </li></ol></li><li> Retirer actionneur de la base </li><li> Libération de tendon de pinces </li><li> Processus tendon </li></ol>

<ol><li>Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+system+for+applying+cyclic+loads+to+connective+tissues+under+displacement+or+force+control%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control.</a> Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).</li>
<li>Asundi, K. R., Rempel, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+loading+inhibits+expression+of+MMP-3+but+not+MMP-1+in+an+in+vitro+rabbit+flexor+tendon+model%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Biomech%22%5BJournal%5D)">Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model.</a> Clin Biomech. , In Press Forthcoming.</li>
<li>Asundi, K. R., Rempel, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MMP-1%2C+IL-1%CE%B2+and+COX-2+mRNA+Expression+is+Modulated+by+Static+Load+in+Rabbit+Flexor+Tendon%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon.</a> Ann Biomed Eng. , In Press Forthcoming.</li>
</ol>

La vidéo présente un nouveau système pour le chargement simultané de jusqu&#39;à quatre tendons vivons dans une culture tissulaire. Durées de chargement typiques sont de 2 à 48 heures. Après le chargement, les tendons sont enlevées et traitées pour l&#39;expression des gènes. Le système permet à l&#39;enquête de l&#39;effet de schéma de chargement sur les changements dans les gènes associés à des changements dégénératifs dans le tendon. Ces expériences peuvent fournir un aperçu des mécanismes de blessure associés au chargement répétitif. Il...

Personnalisé 4 Actuateur Linéaire système de chargement chaud l&#39;eau du bain tubes de 50 ml tendons (lapin) milieux stériles

ex vivo chargement mécanique du tendon

Ex vivo Mechanical Loading of Tendon

Blessures au tendon (par exemple, la tendinite du poignet, epicondyltis) en raison de la surutilisation sont communes dans les activités sportives et le lieu de travail. La plupart sont associés à répétition, des activités à forte main vigueur. Les mécanismes de dommages cellulaires et structurelles dues aux charges cycliques ne sont pas bien connus. Le but de cette vidéo est de présenter un nouveau système qui peut télécharger simultanément quatre tendons en culture de tissus. La vidéo décrit les méthodes de récolte des tissus stériles et comment les tendons sont chargés sur un système de serrage qui est ensuite immergé dans les médias et maintenue à 37 ° C. Une pince est fixe tandis que l&#39;autre est déplacé avec un actionneur linéaire. Force de traction des tendons est surveillé avec une cellule de charge en série avec la pince mobile. Les actionneurs sont contrôlés par un programme LabView. Les quatre tendons peuvent être chargés de façon répétitive avec des motifs différents de chargement, taux de redoublement, taux de chargement et la durée. Le chargement peut durer quelques minutes à 48 heures. A la fin du chargement, les tendons sont enlevées et le milieu des substances extraites des analyses biochimiques. Ce système permet de l&#39;enquête sur les effets du chargement des motifs sur l&#39;expression des gènes et des changements structurels dans le tendon. Finalement, les mécanismes de blessures dues à la surutilisation peuvent être des études avec les conclusions appliquées au traitement et la prévention.

Un nouveau système in vitro pour charger simultanément quatre tendons dans la culture est décrite.

Ex vivo Chargement mécanique du tendon

Les lésions tendineuses (par exemple, la tendinite du poignet, l'épicondylite) dues au surmenage sont fréquentes dans les activités sportives et en milieu professionnel. La plupart sont associées à ...

Je m'appelle David Rempel. Je suis enseignant-chercheur au sein du département de génie biomédical à l'Université de Californie à Berkeley. L'expérience que vous allez voir consiste à étirer des tendons, et son objectif principal est de mettre en évidence et de comprendre les mécanismes sous-jacents aux troubles tendineux au niveau du poignet et du coude.Ces troubles tendineux sont fréquents chez les sportifs et les travailleurs qui effectuent des tâches répétitives avec les mains. Krish Sundi, l'un des étudiants au doctorat dans notre laboratoire, démontrera plusieurs caractéristiques du système, notamment la mesure de la section transversale du tendon. Il chargera les tendons dans les actionneurs.Il démontrera le chargement cyclique du tendon par le système sur une période de 24 heures, puis retirera le tendon du dispositif. Bon, voici le système de chargement que nous avons conçu et construit. Comme vous pouvez le voir, il se compose de six actionneurs.Il s'agit d'actionneurs de haute précision, capables d'appliquer un déplacement d'un micromètre. En série avec l'actionneur, on trouve une cellule de charge permettant d'enregistrer les charges appliquées aux tendons. En série ave

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Biologie

Cet article décrit les procédures expérimentales utilisées pour préparer les tendons de queue de rat pour les études biomécaniques et mécanobiologique. Plusieurs caractéristiques des principales étapes de préparation sont démontrées, à commencer par l'extraction, la mesure de la superficie transversale, le rinçage et le chargement dans la chambre de bioréacteur.

Préparation des tendons de queue de rat pour les études biomécaniques et mécanobiologique

Une In vivo</emModèle de rongeur> de contraction induite par des blessures et de surveillance non invasive de récupération

Nous avons conçu un nouveau bioréacteur de chargement mécanique qui peut appliquer une contrainte mécanique uniaxiale ou biaxiale à une biocomposites du cartilage avant la transplantation dans un défaut de cartilage articulaire.

Conception d&#39;un bioréacteur de chargement mécanique biaxial pour l&#39;ingénierie tissulaire

Un nouveau protocole d’imagerie a été développé à l’aide d’un actionneur mécanique motorisé personnalisé pour permettre la mesure des réponses en temps réel à la déformation mécanique dans les cellules vivantes. Pertinent pour la mécanobiologie, le système peut appliquer des contraintes allant jusqu’à 20 % tout en permettant une imagerie en temps quasi réel avec la microscopie confocale ou à force atomique.

Imagerie sur cellule vivante pendant stretch mécanique

Nous décrivons un protocole in vivo pour mesurer la dorsiflexion du pied suite à la stimulation du nerf péronier et à la contraction du compartiment crural antérieur de la patte postérieure du rat. De telles mesures sont un outil translationnel indispensable pour évaluer la pathologie des muscles squelettiques et les approches d’ingénierie tissulaire de la réparation et de la régénération musculaires.

des applications de<em&gt; In Vivo</em&gt; Tests fonctionnels du Rat jambier antérieur pour l&#39;évaluation de l&#39;ingénierie tissulaire Skeletal Muscle Repair

Le protocole décrit des méthodes d'essai biomécaniques tendineuses et reproductibles efficaces et reproductibles pour les tendons murins grâce à l'utilisation d'appareils imprimés 3D sur mesure.

Tests biomécaniques des tendons murines

Un système biréacteur de stimulation mécanique uniaxial en trois dimensions est un bioréacteur idéal pour la différenciation ténogénique spécifique des cellules souches dérivées du tendon et de la formation de néo-tendons.

Application d’un système biréacticien uniaxial de stimulation mécanique tridimensionnelle pour induire la différenciation tenogène des cellules souches dérivées du tendon

Cet article décrit un algorithme de corrélation d’images numériques open source pour mesurer les souches tissulaires 2D locales dans les explants de tendons. La précision de la technique a été validée à l’aide de plusieurs techniques, et elle est disponible pour un usage public.

Mesure des souches tissulaires locales dans les tendons via une corrélation d’images numériques open source

Nous présentons une plate-forme expérimentale personnalisée et un protocole de culture tissulaire qui recrée le changement fibrocartilagineux induit par le conflit de l’insertion du tendon d’Achille dans les explants murins des membres postérieurs avec une viabilité cellulaire soutenue, fournissant un modèle adapté à l’exploration de la mécanobiologie du conflit tendonineux.

Modèle d’explant murin d’un membre postérieur pour l’étude de la mécanobiologie du conflit du tendon d’Achille

Ce protocole présente un système de test utilisé pour induire des lésions de fatigue quantifiables et contrôlées dans un tendon d’Achille de rat pour un modèle in vivo de tendinopathie induite par le surmenage. La procédure consiste à fixer la cheville du rat à un actionneur articulaire qui effectue une dorsiflexion passive de la cheville à l’aide d’un script MATLAB écrit sur mesure.

Un système de test passif de dorsiflexion de la cheville pour un modèle in vivo de tendinopathie induite par le surmenage

Ici, nous présentons un système modèle assembloïde pour imiter la diaphonie cellulaire tendineuse entre le tissu central du tendon porteur et un compartiment extrinsèque contenant des populations cellulaires activées par la maladie et la blessure. Comme cas d’utilisation important, nous démontrons comment le système peut être déployé pour sonder l’activation des cellules endothéliales extrinsèques pertinentes pour la maladie.

Ingénierie d’assembloïdes tendineux pour sonder la diaphonie cellulaire dans la maladie et la réparation

Découvrez un système de chargement mécanique ex vivo pour tendons permettant d'étudier simultanément quatre échantillons. Cette méthode bioingénierie aide à comprendre les mécanismes des troubles des tendons du poignet et du coude.

Ex vivo Chargement mécanique du tendon

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