Name: Transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 23 min 43 s
Description: Découvrez la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris pour étudier les mécanismes de rejet et les réponses immunitaires. Cette technique modifiée permet d'évaluer de nouveaux médicaments immunosuppresseurs.

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Préparation des donateurs et la récolte du coeur: <ol><li style="text-align: left"> La souris est anesthésiée par une injection intrapéritonéale de pentobarbital et placé en position couchée sur le champ opératoire. </li><li style="text-align: left"> Une longue incision médiane abdominale est faite. Contenu abdominal sont rentrés avec de la gaze à gauche afin d&#39;exposer l&#39;aorte abdominale et la veine cave inférieure. </li><li style="text-align: left"> 1 ml d&#39;héparine (10u/ml) est injecté dans la veine cave inférieure pour héparinisation. </li><li style="text-align: left"> La thoracotomie est faite: les côtes sont divisés sur les deux côtés de la colonne vertébrale et la paroi thoracique antérieure est endettée pour exposer le cœur. </li><li style="text-align: left"> La veine cave inférieure, la veine cave supérieure et la veine azygos sont ligués avec soie 6-0 et divisé supérieure aux ligatures. </li><li style="text-align: left"> L&#39;aorte ascendante et l&#39;artère pulmonaire sont séparés et répartis autant que possible distal. </li><li style="text-align: left"> Les veines pulmonaires sont ligaturés et divisés en aval de la cravate. </li><li style="text-align: left"> Le coeur est perfusé avec 4 o C une solution saline. </li><li style="text-align: left"> Le cœur est stocké dans une solution saline glacée. </li></ol> Récipiendaire de préparation et de la transplantation <ol><li style="text-align: left"> La souris est anesthésiée par une injection intrapéritonéale de pentobarbital et placé en position couchée sur le champ opératoire. </li><li style="text-align: left"> Une longue incision médiane abdominale est faite. Contenu abdominal sont rentrés en dehors de l&#39;abdomen avec une gaze afin d&#39;exposer l&#39;aorte abdominale et la veine cave inférieure. </li><li style="text-align: left"> Les branches de l&#39;aorte abdominale et la veine cave inférieure sont exposés et ligaturé avec 10-0 points de suture. </li><li style="text-align: left"> Les ligatures proximales et distales sont placés autour de l&#39;aorte et la veine cave inférieure, respectivement. </li><li style="text-align: left"> Le venotomy est faite dans la veine cave inférieure du receveur avec une aiguille de calibre 30. L&#39;ouverture est ensuite étendu à une longueur de l&#39;aorte pulmonaire égal à du donneur avec des micro-ciseaux. </li><li style="text-align: left"> Le aortotomie est faite dans l&#39;aorte abdominale du destinataire avec une aiguille de calibre 30. </li><li style="text-align: left"> L&#39;aorte abdominale et a ouvert la veine cave inférieure sont irriguées avec une solution saline. </li><li style="text-align: left"> Le cœur du donneur est placée sur le côté gauche de l&#39;abdomen du destinataire et est couvert avec de la gaze. </li><li style="text-align: left"> Les sutures sont placées rester aux sommets proximales et distales de l&#39;aorte abdominale avec destinataires aorte ascendante du donateur. </li><li style="text-align: left"> L&#39;anastomose du côté droit de l&#39;aorte abdominale du destinataire et l&#39;aorte ascendante du donateur sont complétées par des sutures de continuer. </li><li style="text-align: left"> Deux sutures sont réalisées en premier séjour à l&#39;apex et le sommet proximale distale inférieure du destinataire veine cave avec l&#39;artère pulmonaire du donateur pour l&#39;anastomose de l&#39;artère pulmonaire du donneur et du receveur inférieure veine cave. </li><li style="text-align: left"> La paroi gauche de la veine cave inférieure et l&#39;artère pulmonaire donneur est fermée avec des sutures continue à l&#39;intérieur de la veine cave inférieure. </li><li style="text-align: left"> Après un noeud avec la suture proximale séjour sommet, le mur de droite de la veine cave inférieure et l&#39;artère pulmonaire du donneur sont fermées avec des sutures continue en dehors de la grotte de veine. </li><li style="text-align: left"> Le cœur du donneur est retourné sur le côté droit de l&#39;abdomen du destinataire. Le mur de droite de l&#39;aorte abdominale du receveur et le donneur d&#39;anastomose aorte ascendante sont fermées par des sutures de continuer. </li><li style="text-align: left"> Après anastomose est faite, la ligature distale est retiré pour vérifier que le saignement de l&#39;anastomose. </li><li style="text-align: left"> S&#39;il ya peu ou pas de saignement de l&#39;anastomose, la ligature proximale est retirée. Le cœur du donateur se remplit de sang immédiatement la couleur du cœur devient rouge et il commence à battre de nouveau. </li><li style="text-align: left"> Les intestins sont retournés à l&#39;abdomen, qui est fermée avec 6-0 points de suture continue. </li><li style="text-align: left"> La souris receveuse est placé sur une surface chaude. Après une heure le destinataire récupère. </li></ol>

<ol><li>Corry, R. obert J., Winn, H. enry J., Russell, P. aul S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
</ol>

Résultats Nous avons réalisé avec succès plus de 1000 cas de transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris et atteint plus de 90% de réussite dans les différentes souches de souris, y compris de type sauvage, transgéniques et des souris knockout du gène. Discussion Depuis les Drs. Corry et Russell introduit transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris, en 1973, ce modèle s&#39;est avéré être une particulièrement précieuse pour étudier la réponse de rejet immunitair...

transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris

Heterotopic Heart Transplantation in Mice

La transplantation cardiaque hétérotopique la souris a été largement utilisée car elle a été introduite par les Drs. Corry et Russell en 1973. Il est particulièrement précieux pour étudier le rejet et la réponse immunitaire aujourd&#39;hui que les nouveaux transgéniques et des souris knockout du gène sont disponibles, et un grand nombre de réactifs immunologiques ont été développés. Le modèle de transplantation cardiaque est moins stricte que les modèles de greffe de peau, bien que techniquement plus difficile. Nous avons développé une technique modifiée et avoir complété plus de 1000 cas de succès de la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris. Lors de l&#39;anastomose de l&#39;aorte ascendante et l&#39;aorte abdominale, deux points de suture sont placés rester aux sommets proximales et distales de l&#39;aorte abdominale avec destinataires aorte ascendante du donateur s, puis en utilisant 11-0 de suture pour une anastomose des deux côtés de l&#39;aorte avec des sutures de continuer. Les sutures séjour font l&#39;anastomose facile et 11-0 est une taille idéale de suture pour éviter les saignements et des thromboses. Lors de l&#39;anastomose de l&#39;artère pulmonaire et la veine cave inférieure, deux sutures sont faites rester à la pointe proximale et distale de l&#39;apex inférieure au destinataire s veine cave avec l&#39;artère pulmonaire du donateur s. La paroi gauche de la veine cave inférieure et l&#39;artère pulmonaire donateurs est fermé avec des sutures continue dans l&#39;intérieur de la veine cave inférieure après, un noeud avec le séjour de suture proximale sommet du mur à droite de la veine cave inférieure et l&#39;artère pulmonaire du donateur s sont fermées par des sutures continue en dehors de la grotte de veine avec des sutures 10-0. Cette méthode est plus facile à réaliser, car l&#39;anastomose est faite seulement sur un côté de la veine cave inférieure et 10-0 sutures est la bonne taille pour éviter les saignements et des thromboses. Dans cet article, nous fournir des détails sur la technique pour compléter la vidéo.

Le modèle de souris transplantation cardiaque hétérotopique a été prouvée par de nombreux chercheurs d&#39;être une méthode importante pour étudier les mécanismes de rejet et de la réponse immunitaire. Cependant, les techniques impliquées sont toujours difficiles. En modifiant les techniques standard, nous avons eu du succès avec plus de 1000 greffes.

Transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris

La transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris est largement utilisée depuis qu'elle a été introduite par les docteurs Corry et Russell en 1973. Elle s'avère particulièrement précieuse...

Je m'appelle Hun Li. Je travaille au laboratoire du Dr Kas, au Département de chirurgie de l'Université de Californie à San Francisco. Aujourd'hui, je vais vous montrer les procédures de la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris. Ce modèle constitue un outil très important dans le domaine de la greffe d'organes depuis sa première description par les docteurs Carrie et Russell en 1973.Ce modèle est extrêmement précieux pour l'étude de nouveaux médicaments immunosuppresseurs et des mécanismes de rejet. Les difficultés techniques élevées ont été limitées. En utilisant ce modèle comme base, j'ai modifié certaines étapes.Facilitez-vous cette procédure. Je suis certain que cela suscitera un grand intérêt de leur part lorsque vous réaliserez ce modèle. D'accord ? Je viens de vous montrer la procédure de transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris.Le point le plus important de cette procédure est la densité appropriée des points de suture. Elle ne doit être ni trop faible ni trop serrée, et l'osmose doit être terminée en 30 minutes. Ce modèle de transplantation est extrêmement utile pour l'étude des réponses immunologiques après la transplantation d'organe et pou

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Biologie

Le modèle de transplantation cardiaque col de l'utérus de souris est bien adapté pour immunologique ainsi que des études de lésions d'ischémie reperfusion. Nous avons modifié la procédure en utilisant une technique de manchette non-suture et effectué plus de 1.000 transplantations réussies avec cette approche.  Ici, nous fournissons des détails supplémentaires de cette technique pour compléter la vidéo.

Murin col de l&#39;utérus Cœur, la transplantation en utilisant une technique de modification de manchette

Une technique est démontrée pour la procédure microchirurgicale pour la transplantation hétérotopique de cœurs chez la souris, y compris des méthodes simplifiées pour le prélèvement du donneur et l’anastomose des vaisseaux receveurs.

Une méthode modifiée de Heterotopic souris coeur la transplantation

Le manuscrit décrit les étapes nécessaires pour effectuer la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris.

Murin de transplantation cardiaque hétérotopique Technique

Afin de comprendre les mécanismes cellulaires et moléculaires qui sous-tendent néo-tissu formation et le développement de la sténose dans les valves cardiaques de l'ingénierie tissulaire, un modèle murin de coeur hétérotopique vanne transplantation a été développé. Une valvule cardiaque pulmonaire a été transplanté au destinataire en utilisant la technique de transplantation cardiaque hétérotopique.

Transplantation de valve pulmonaire en utilisant un modèle de souris de transplantation cardiaque hétérotopique

La technique du brassard raccourcit et facilite le modèle de transplantation cardiaque cervicale hétérotopique chez la souris en évitant les anastomoses de suture techniquement difficiles des petits vaisseaux. Les détails techniques présentés dans cet article vidéo devraient permettre aux chercheurs d’établir ce modèle dans leurs laboratoires.

Heterotopic col de l&#39;utérus chez la souris Transplantation cardiaque

Ici, nous décrivons un modèle préclinique de grand animal (porcin) de transplantation orthotopic de coeur qui a été fermement établi et utilisé pour étudier de nouvelles stratégies cardioprotective.

Un modèle porcin préclinique de transplantation orthotopic de coeur

Une technique originale pour la reconstruction de circuit de sang dans un modèle abdominal heterotopic de transplantation de coeur de souris est démontrée.

Reconstruction de circuit sanguin dans un modèle de transplantation de cœur de souris abdominale

Dans le présent protocole, un modèle de transplantation cardiaque de souris est utilisé pour étudier le mécanisme du rejet de l’allogreffe cardiaque. Dans ce modèle de transplantation cardiaque hétérotopique, l’efficacité de l’opération est améliorée et la survie des greffons cardiaques est assurée par une anastomose cervicale de bout en bout de l’implantation cardiaque à l’aide d’une technique de brassard modifiée.

Une technique de brassard modifiée pour un modèle de transplantation cardiaque hétérotopique cervicale de souris

Les modèles de transplantation cardiaque de souris représentent des outils de recherche précieux pour étudier l’immunologie de la transplantation. Le présent protocole détaille la transplantation cardiaque cervicale hétérotopique chez la souris qui implique la mise en place de brassards sur l’artère carotide commune du receveur et le tronc de l’artère pulmonaire du donneur pour permettre le flux sanguin laminaire.

Transplantation cardiaque cervicale hétérotopique de souris utilisant des brassards vasculaires

Ce protocole présente une technique simplifiée d’anastomose de suture de bout en côté pour la transplantation de cœur cervical murin, fournissant un modèle robuste et reproductible pour l’étude de l’immunologie de la transplantation.

Transplantation cardiaque hétérotope cervicale de souris utilisant la technique d’anastomose de bout en côté pour étudier l’immunologie de la transplantation

Découvrez la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris pour étudier les mécanismes de rejet et les réponses immunitaires. Cette technique modifiée permet d'évaluer de nouveaux médicaments immunosuppresseurs.

Transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris

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