Name: Neurogenèse corticale: Passage de progrès dans le laboratoire pour des thérapies cellulaires (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 38 s
Description: Découvrez l'électroporation in utero pour étudier la neurogenèse corticale et la migration neuronale chez les cellules souches neurales. Cette méthode permet d'analyser la fonction des gènes dans le développement cérébral.

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neurogenèse corticale: passage de progrès dans le laboratoire pour des thérapies cellulaires

Cortical Neurogenesis: Transitioning from Advances in the Laboratory to Cell-Based Therapies

Neurogenèse corticale: Passage de progrès dans le laboratoire pour des thérapies cellulaires

Je m'appelle Arnold Krickstein. Je suis le directeur de l'Institut de médecine régénérative de l'UCSF, et mon domaine d'intérêt est la neurobiologie du développement. Plus précisément, nous nous intéressons beaucoup aux premiers stades du développement cortical, et nous étudions les cellules souches et progénitrices neuronales ainsi que la manière dont elles génèrent des neurones, la migration de ces neurones et le début de la formation de circuits dans le cerveau en développement, en particulier dans le cortex.Eh bien, l'avènement de l'électroporation in utero, je pense, a été l'une de ces technologies transformatrices introduites par SDO et ses collègues en ce qui concerne l'étude des premiers stades du développement cérébral, car cela permet de réaliser des expériences de type gain ou perte de fonction pour une grande variété de gènes. Et de le faire relativement simplement en introduisant directement ces gènes dans les cellules souches neuronales et progénitrices qui produisent des neurones durant le développement cortical précoce. La technique consiste essentiellement à injecter de l'ADN sous forme de plasmide dans les ventricules cérébraux d'un animal à un stade embryonnaire,

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Biology

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Les cellules souches neurales récoltés dans le cerveau adulte sont de plus en plus utilisés dans des applications allant de la recherche fondamentale du développement du système nerveux à l'exploration des applications cliniques potentielles en médecine régénérative. Cela rend le contrôle rigoureux des conditions d'isolement et de culture utilisés pour cultiver ces cellules essentielles au son des résultats expérimentaux.

Grandir cellules souches neurales de régions classiques et non conventionnelles du cerveau adulte rongeurs

Les astrocytes phénotypiquement sauvages et les cellules souches neurales récoltées sur des souris modifiées avec des allèles oncogéniques conditionnels floxés et transformés par recombinaison virale médiée par Cre peuvent être utilisés pour modéliser la pathogenèse de l’astrocytome in vitro et in vivo par injection orthotopique de cellules transformées dans le cerveau de compagnons de portée syngéniques et immunocompétents.

Modélisation astrocytome pathogenèse In Vitro Et In Vivo Utilisation corticale astrocytes ou cellules souches neurales à partir de, souris génétiquement modifiées conditionnelle

Cette étude décrit une plateforme expérimentale permettant de caractériser rapidement les cellules souches modifiées et leurs comportements avant leur application dans des études de transplantation in vivo à long terme pour le sauvetage et la réparation du système nerveux.

High Throughput Caractérisation des cellules souches adultes d&#39;ingénierie pour la livraison des facteurs thérapeutiques pour les stratégies neuroprotectrices

L’imagerie Live est un outil puissant pour étudier les comportements cellulaires en temps réel. Nous décrivons ici un protocole pour le Time-lapse vidéo-microscopie des cellules du cortex cérébral primaire qui permet un examen détaillé des phases adoptées au cours de la progression de la lignée du primaire des cellules souches neurales au différenciée des neurones et cellules gliales.

Imagerie des cellules du Cortex cérébral primaire à l’aide d’un système de Culture 2D en direct

Reprogrammation neuronale directe génère des neurones qui maintiennent l’âge de la cellule somatique départ. Nous décrivons ici une méthode basée sur un vecteur unique pour générer des neurones induites de fibroblastes dermiques provenant de donneurs humains adultes.

Génération simple d’une Culture de haut rendement de neurones induits des fibroblastes de la peau humaine adulte

Le but de ce protocole est de décrire une approche pour analyser le comportement des cellules neurales adultes de tige/progéniteur en réponse à la manipulation chimiogénétique d'un circuit neural local spécifique.

Régulation spécifique du circuit d'analyse des cellules neuronales neuronales hippocampales adultes

Ici nous présentons un protocole, conçu pour employer des outils chimiogénétiques pour manipuler l'activité des progéniteurs interneurons corticaux transplantés dans le cortex des souris postnatales tôt.

Transplantation de progéniteurs interneuron corticales génétiquement modifiés dans les cerveaux de souris postnatales précoces

Nous décrivons un protocole pour reprogrammer les fibroblastes peau-dérivés humains en cellules neuronales induites d’ancêtre (iNPCs), et leur différentiation suivante dans les astrocytes induits (iAs). Cette méthode conduit à une génération rapide et reproductible d’iNPCs et d’iAs en grande quantité.

Modélisation in vitro pour les maladies neurologiques à l’aide de la conversion directe de fibroblastes en cellules progénitrices neuronales et différenciation en astrocytes

Dans cette étude, nous fournissons une technique détaillée pour un système de culture organoïde corticale simple mais robuste utilisant des cultures hPSC standard sans mangeoire. Il s’agit d’un protocole rapide, efficace et reproductible pour générer des organoïdes qui modélisent les aspects de la sénescence cérébrale in vitro.

Génération robuste et hautement reproductible d’organoïdes cérébraux corticaux pour la modélisation de la sénescence neuronale cérébrale in vitro

Ce protocole décrit des cultures organotypiques à long terme du cortex humain adulte combinées à la transplantation intracorticale ex vivo de progéniteurs corticaux induits dérivés de cellules souches pluripotentes, qui présentent une nouvelle méthodologie pour tester davantage les thérapies à base de cellules souches pour les troubles neurodégénératifs humains.

Cultures organotypiques du cortex humain adulte comme modèle ex vivo pour la transplantation et la validation de cellules souches humaines

Nous décrivons ici un protocole pour la transplantation et le suivi de cellules neurales marquées dans des organoïdes cérébraux humains.

Un modèle organoïde cérébral humain de transplantation de cellules neurales

Découvrez l'électroporation in utero pour étudier la neurogenèse corticale et la migration neuronale chez les cellules souches neurales. Cette méthode permet d'analyser la fonction des gènes dans le développement cérébral.

Neurogenèse corticale: Passage de progrès dans le laboratoire pour des thérapies cellulaires

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