Name: Développement de ovaire de hamster chinois-hôte dosages de protéines cellulaires utilisant la technologie acoustique microparticules membranaires (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-03T18:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: Découvrez le développement d'immunoessais personnalisés sur la plateforme ViBE pour des résultats sensibles et reproductibles avec un temps de manipulation limité. Cette méthode automatise les dosages de protéines cellulaires d'ovaire de hamster chinois.

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1. Préparation de microparticules <ol><li> Anticorps étiquette utilisant la biotine NHS Chimie </li><li> Détermination du degré de biotinylation </li><li> Conjugué avec des billes de streptavidine anticorps biotinylé <ol><li> Resuspendre les perles dans le flacon d'origine par vortex pendant 1-2 minutes </li><li> Aliquoter le volume souhaité de perles dans un tube à centrifuger </li><li> Laver les billes 3 fois avec PBST: <ol><li> Placer le tube contenant les billes sur l'aimant pendant 2 minutes </li><li> Retirer le surnageant par aspiration avec le tube sur l'aimant. Soyez prudent de ne pas perturber les perles </li><li> Retirer le tube de l'aimant et ajouter 1 ml de PBST </li><li> Vortex pendant 20 secondes pour remettre en suspension les perles </li><li> Centrifuger pendant 5 secondes pour enlever les perles de la PAC </li><li> Répéter deux fois plus 2.3.1-2.3.5 </li></ol></li><li> Après le troisième lavage lieu le tube sur l'aimant et aspirer le PBST </li><li> Ajouter anticorps biotinylé aux billes et resuspendre </li><li> Si nécessaire porter le volume de l'anticorps biotinylé jusqu'à 300 uL de PBS. Si le volume d'anticorps est déjà supérieure à 300 ul ne pas ajouter de PBS </li><li> Incuber la suspension de billes / anticorps pendant 30 minutes à température ambiante sur l'agitateur vortex ou le tube des rotateurs </li><li> Laver 3 fois avec PBST comme dans l'étape 3. </li><li> Bloc perles avec biotinylé BSA <ol><li> Après le troisième lavage ajouter 10 pg / mg de BSA biotinylé, ajuster le volume à 300 ul avec du PBS, si nécessaire, et incuber sous agitation pendant 30 minutes </li></ol></li><li> Laver 3 fois avec PBST comme dans l'étape 3 </li><li> Resuspendre les perles dans 100 uL de BSA PBS/0.05%. L'azide de sodium peut être ajouté pour le stockage à long terme </li></ol></li><li> Utilisation de la norme du NHS protocoles fluorescéine, fluoresceinate l'anticorps détecteur </li><li> Déterminer le degré de Fluorescination </li></ol> 2. HCP - Développement <ol><li> Préparer des solutions de travail: <ol><li> Anticorps marqué à la fluorescéine (FL-Ab): La plupart des cellules CHO-HCP dosages utilisent Fl-Ab à une concentration finale de 400 ng / mL. Le FL-Ab est ajouté en tant que ¼ du volume d'essai final, donc la concentration de la solution de travail est de 1,6 mg / ml. Préparer cette solution en diluant avec de stock Flab BioScale billes / Flab diluant. </li><li> Perles: La plupart des cellules CHO-HCP dosages utilisent des billes à une concentration finale de 2x10 5 billes / mL. Le réactif perles constitue ¼ du volume d'essai final, donc la concentration de la solution de travail est 8x10 5 billes / mL. Préparer cette solution en diluant stock de billes avec billes BioScale / Flab diluant. Vortex du stock de perles et de s'assurer que toutes les perles sont en suspension avant de retirer une partie aliquote. </li><li> Tampon: La composition du tampon de migration peut être optimisé pour les anticorps utilisés pour développer le test, mais plusieurs CHO-HCP tests ont été développés en utilisant 10 mM de tampon HEPES, 1% de Tween, pH 7,5. BioScale a développé un additif pour le tampon courant (fournie avec le kit de développement) qui est ajouté au tampon à une concentration de 1% avant de l'utiliser. </li></ol></li><li> Diluer étalons et d'échantillons avec le diluant échantillon BioScale. </li></ol> 3. ViBE Système Set Up <ol><li> Tournez le Workstation Vibe </li><li> Branchez l'alimentation du système et des déchets </li><li> Premier système </li><li> Insérez une cartouche ViBE </li><li> Route des tubes </li><li> Préparer modèle de test en remplissant la feuille intitulée «Exemple de configuration". BioScale offre la possibilité d'avoir un modèle de test pour chaque dosage Workstation ViBE. Cela permet à l'utilisateur de modifier et enregistrer des notes spécifiques dans les "Notes" feuille de modèle pour des dosages différents conserver un dossier complet de l'expérience. </li><li> Modèle de test initial mis en place: Commencez par remplir le tableau (en haut à gauche) de la gamme de concentration de ces normes dans le test dans le "Setup Sample" feuille. </li><li> Ensuite, entrer des informations supplémentaires dans le tableau à droite de l'normes (Configuration simple colonne Lire, Ajouter un réactif et réactif Deux configurations Ajouter) pour charger le Workstation ViBE combien de longs échantillons doivent incuber, quel volume de réactif doit être transféré , combien de temps l'accumulation de l'échantillon doit être, et si conditionné capteur et la décontamination des sondes et des cartouches sont nécessaires, etc </li><li> Remplissez le disposition de la plaque. </li><li> Charger l'échantillon / réactifs en plaques. La Vibe fournira les volumes nécessaires à la plaque de réactif. Le volume d'échantillon peut varier, mais dans la moitié d'un volume de dosage total de 120 uL est un bon point de départ. </li><li> Appliquer couvre la plaque. Charge plaques sur le pont poste de travail. </li><li> Exécutez le test de démarrage Assistant, passez par l'assistant et commencer dosage. </li></ol> 4. Les résultats représentatifs <img src="/files/ftp_upload/2493/2493fig1.jpg" alt="Figure 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 1"> Figure 1: immunoessai sandwich AMMP Sur un poste ViBE, un test mesure la concentration d'antigène AMMP. Le signal est mesuré lorsque l'anticorps-antigène-billes haptène se lie à la sonde à travers l'haptène / anti-haptène interaction. Régénération apporte le capteur revient à l'état commence par enlever les complexes immuns. <img src="/files/ftp_upload/2493/2493fig2.jpg" alt="Figure 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 2"> Figure 2: CHO-HCP courbe de calibration du dosage du PMMA Figure 2 ci-dessus est un exemple d'une courbe CHO HCP AMMP calibration du dosage. L'analyse peut être effectuée dans les échantillons de l'ensemble du flux d'épuration, y compris le réacteur avec une grande précision et la reproductibilité. <img src="/files/ftp_upload/2493/2493fig3.jpg" alt="Figure 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 3"> Figure 3: Protéines Une courbe de calibration Assay AMMP La figure 3 est une courbe de calibration pour une protéine résiduelle Une analyse du PMMA, réalisée avec une protéine résiduelle VIBE une trousse de dosage. Le même kit peut être utilisé pour un rapide essai avec une période d'incubation de 30 minutes, ou pour des résultats plus sensibles et plus large gamme dynamique, avec une période d'incubation plus longue, sans perte de précision ou de précision, qui tous deux sont généralement mieux que leurs équivalents en ELISA dans des usagers les mains <img src="/files/ftp_upload/2493/2493fig4.jpg" alt="Figure 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 4"> Figure 4: Produit Titer AMMP Assay La station de travail ViBE peut également être utilisé pour un dosage Titer produit, résultats présentés dans la figure 4. Réalisée différemment que d'autres dosages PMMA, ce test ne nécessite pas de traitement de l'échantillon autre que la dilution simple, ou de perles, et la quantification a été vérifié dans "sans essorage" échantillons contenant plus de 10 millions de cellules sur une large gamme de viabilités. <img src="/files/ftp_upload/2493/2493fig5.jpg" alt="Figure 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 5"> Figure 5: courbe standard de dosage AMMP pour le dosage de la TPS-GADD34 biomarqueur Montre la figure 5 est une courbe standard de signal obtenu par le BioAnalyzer ViBE (Groupe A) ou la technologie en utilisant AlphaScreen recombinant GST-GADD34. Résultats sur la plate-forme ViBE ont été d'environ un journal plus sensibles en utilisant les mêmes anticorps. AMMP s'appuie sur la mesure de moins de particules plus grandes mais encore les avantages de la capture en phase solution et la formation de complexes de détection. <img src="/files/ftp_upload/2493/2493fig6.jpg" alt="Figure 6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 6"> Figure 6: Courbe AMMP dosage standard pour la TPS-GADD34 dans l'échantillon de la tumeur Dans la figure 6, l'induction de GADD34 partir CWR22 xénogreffes a été testé dans la présence ou l'absence d'un inhibiteur du protéasome boronate que analysées soit par le BioAnalyzer ViBE (Groupe A) ou AlphaScreen (Groupe B). La plate-forme ViBE était capable de produire sensibles, des résultats reproductibles dans le in vivo xénogreffes tumorales tandis que le signal a été stoppée avec AlphaScreen mg de protéine accrue. Cet exemple montre la puissance de la technologie dans des échantillons de PMMA très complexe. Grâce à la puce de détection sensible et une grande efficacité de l'aimant à proximité de la chips, un faible nombre de microparticules magnétiques peuvent efficacement et de façon reproductible récupérer des cibles de faible abondance au milieu de la complexité de lysées cellulaire (y compris les réactifs de lyse) et les débris de sang.

Les auteurs de cet article sont employés par Bioscale, Inc qui produit certains des instruments et des réactifs utilisés dans cet article.

Les exemples qui précèdent montrent PMMA est très sensible des résultats quantitatifs dans des échantillons complexes. Cette performance, lorsqu&#39;ils sont livrés avec la facilité et le contrôle de la mise en forme des réactifs dans le système est propice à une variété d&#39;applications. Ces applications peuvent être spécifiques d&#39;une cible, comme dans GADD34 dans la tumeur, ou générique pour un large éventail de cibles, comme dans la détection des protéines de la cellule hôte et la quantification dans des échantillons qui traverse le ruisseau de purification. La plate-forme ViBE faible surcharge combinée avec PMMA extrêmement souple offre un outil puissant pour offrir des tests critiques.

<table><tbody><tr><td>NHS-biotine chromogène ou kit de marquage NHS-biotine chromogène</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Si le NHS-biotine chromogène est acheté comme réactif, les matériaux supplémentaires suivants seront nécessaires</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solvant organique miscible à l’eau tel que le diméthylsulfoxyde (DMSO) ou le diméthylformamide (DMF)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solution tampon phosphate (PBS) ou tout autre tampon sans amine (pH 7 &amp;#8211; 9)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Colonnes de désalinisation ou unités de dialyse pour l’échange de tampon</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre capable de mesurer à 354 et 280 nm &amp;#8211; pour mesurer les concentrations en protéine et en biotine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticorps biotinylé (2-5 biotines/anticorps)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microbilles magnétiques streptavidine</td><td><a href="http://www.bioscale.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> BioScale</a></td><td></td><td>(10 mg/mL) ~10&lt;sup&gt;8&lt;/sup&gt; billes/mg</td></tr><tr><td>AIMant pour tubes de microcentrifugeuse</td><td>New England Biolabs</td><td>cat # S1510S</td><td></td></tr><tr><td>BSA biotinylée pour le blocage</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solution tampon phosphate (PBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PBS 0,1 % Tween 20</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vortex</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Support de microcentrifugeuse pour vortex ou rotateur de tubes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticorps ou protéine à marquer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NHS-fluorescéine ou kit de marquage NHS-fluorescéine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Si la NHS-fluorescéine est achetée comme réactif, les matériaux supplémentaires suivants seront nécessaires</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solvant organique miscible à l’eau tel que le diméthylsulfoxyde (DMSO) ou le diméthylformamide (DMF)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>50 mM borate, pH 8,5 ou tout autre tampon sans amine (pH 7 &amp;#8211; 9)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Colonnes de désalinisation ou unités de dialyse pour l’échange de tampon</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>La mesure des concentrations en protéine et en fluorescéine nécessite un spectrophotomètre capable de mesurer à 493 et 280 nm.</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diluant</td><td><a href="http://www.bioscale.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> BioScale</a></td><td></td><td>pour diluer les billes et les anticorps marqués à la fluorescéine (FlAb)</td></tr><tr><td>Diluant d’échantillon</td><td><a href="http://www.bioscale.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> BioScale</a></td><td></td><td>pour diluer les échantillons et les étalons</td></tr><tr><td>Additif pour tampon de migration</td><td><a href="http://www.bioscale.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> BioScale</a></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

développement de ovaire de hamster chinois-hôte dosages de protéines cellulaires utilisant la technologie acoustique microparticules membranaires

Developing Custom Chinese Hamster Ovary-host Cell Protein Assays using Acoustic Membrane Microparticle Technology

Dosages personnalisés pour les protéines uniques sont souvent limitées à la détection manuelle du temps et des techniques de quantification telles que ELISA ou Western blot en raison de la complexité du développement sur les plates-formes de substitution. BioScale de membrane exclusive microparticules acoustique (PMMA) technologie permet immunodosages sandwich pour être facilement développé pour une utilisation sur la plate-forme ViBE, offrant une meilleure sensibilité, la reproductibilité et un fonctionnement automatisé. À titre d&#39;exemple, ce protocole définit la procédure d&#39;élaboration d&#39;une coutume chinoise protéine cellulaire d&#39;ovaire de hamster-Host (CHO-HCP) dosage. Les principes généraux énoncés ici peuvent être suivies pour le développement d&#39;une grande variété de dosages immunologiques. Une concentration de dosage d&#39;antigène AMMP mesures en mesurant les changements dans la fréquence d&#39;oscillation provoquée par la liaison de microparticules à la surface du capteur pour calculer. Il se compose de quatre éléments principaux: (1) une cartouche qui contient une puce de capteur fonctionnalisés huit (2) anticorps marqué microparticules magnétiques, (3) d&#39;anticorps haptène marqués qui se lie à la surface de la puce fonctionnalisés (4) échantillons contenant l&#39;antigène de intérêt. Biocapteur BioScale est un appareil de résonance qui contient huit membranes individuels avec des chemins séparés fluidiques. Les membranes changement de fréquence d&#39;oscillation en réponse à la masse qui s&#39;accumule sur la surface et ce changement de fréquence est utilisée pour quantifier la quantité de masse ajoutée. Pour faciliter l&#39;utilisation dans une grande variété de tests immunologiques de la sonde est fonctionnalisé avec un anticorps anti-haptène. Anticorps spécifiques de dosage ont été modifiés par la conjugaison covalente d&#39;un tag haptène à un anticorps et de la biotine à l&#39;autre. L&#39;étiquette biotine est utilisé pour lier l&#39;anticorps à la streptavidine couplée billes magnétiques qui, en combinaison avec l&#39;anticorps haptène marqué, sont utilisés pour capturer l&#39;analyte dans un sandwich. Le complexe se lie à la puce grâce à l&#39;interaction anti-hapten/hapten. A la fin de chaque essai exécuté les capteurs sont nettoyés avec un acide dilué permettant l&#39;analyse séquentielle des colonnes d&#39;une plaque de 96 puits. Ici, nous présentons la méthode pour développer une coutume CHO-HCP test AMMP pour le développement de bioprocédés. Développer des dosages PMMA ou en modifiant des dosages existants dans des dosages PMMA peut offrir de meilleures performances (reproductibilité, sensibilité) dans des échantillons complexes et le temps de l&#39;opérateur réduit. Le protocole décrit les étapes de développement et de la section de discussion critiques des résultats représentatifs. Pour une explication plus approfondie de l&#39;optimisation des essais et des paramètres de personnalisation de contact BioScale. Ce kit offre générique de tests de développement de bioprocédés comme les protéines résiduelles Un titre produit, et CHO-HCP.

Développement de tests personnalisés sur la plate-forme ViBE pour les plus sensibles, reproductibles, des résultats automatisé dans des matrices complexes est décrite. La cartouche universelle permet des dosages pour être facilement adapté pour une utilisation avec des dosages personnalisés. Cette polyvalence permet un développement rapide et la validation de nouveaux tests ou de versions automatisées de tests existants manuel, illustré dans cette vidéo.

Développement de ovaire de hamster chinois-hôte dosages de protéines cellulaires utilisant la technologie acoustique microparticules membranaires

Les dosages personnalisés pour des protéines uniques sont souvent limités à des techniques de détection et de quantification manuelles et chronophages, telles que l'ELISA ou le Western blot, en raison de...

L'objectif général de cette procédure est de concevoir un dosage immunoanalytique personnalisé et robuste permettant d'obtenir des résultats reproductibles avec un temps d'intervention minimal. Cela est réalisé en préparant tout d'abord les composants appropriés du dosage. La deuxième étape de la procédure consiste à optimiser le dosage en fonction de ses paramètres.La troisième étape de la procédure consiste à configurer le test sur la plateforme Vibe en chargeant simplement les plaques d'échantillons et de réactifs et en définissant le protocole du test. À l'aide du logiciel Vibe, la dernière étape de la procédure est de démarrer le Vibe à l'aide de l'assistant de démarrage. En définitive, des résultats peuvent être obtenus, montrant des résultats d'immunodosage sensibles et reproductibles avec des anticorps personnalisés et un temps de manipulation limité grâce à l'utilisation de la plateforme Vibe.Le principal avantage de cette technologie par rapport aux méthodes existantes telles que celle d'Eli réside dans le fait que la station Vibe permet des opérations sans intervention et des données plus reproductibles conformément aux protocoles standard. À l’aide de NHS Chromogène, de biotine Bio atine, liez l’anticorps de capture à l’anticorps biotinylé sur les billes magnétiques strepto-avidine en vortexant d’abord le flacon de billes strepto-avidine magnétiques pendant une à deux minutes afin de resuspendre les billes, puis pipetez le volume souhaité de billes dans un tube de centrifugation et retirez le surnageant à l’aide d’un séparateur magnétique. Lavez les billes trois fois avec du PBST en utilisant la séparation magnétique pour récupérer les billes conformément au protocole écrit.Après avoir retiré le PBST du dernier lavage, ajoutez la solution d'anticorps biotinylé aux billes et resuspendez les billes par pipetage. Assurez-vous que le volume d'anticorps est d'au moins 300 microlitres. S'il est inférieur, ajustez avec du PBS.Incuber la suspension pendant 30 minutes à température ambiante sous agitation. Laver ensuite les billes avec du PBST comme précédemment. Ajouter de l'albumine sérique bovine biotinylée selon la même procédure que celle réalisée précédemment.Lorsque l'anticorps biotinylé est utilisé, effectuez un lavage préalable et resuspendez les billes dans 100 microlitres de BSA à 0,05 % dans du PBS pour une conservation à long terme ; l'azoture de sodium peut alors être ajouté selon les protocoles standard. Marquez l'anticorps de détection à l'aide de fluorescéine NHS. Pour commencer le développement du test des protéines d'hôte cellulaires de l'ovaire de hamster chinois.Préparez d'abord les solutions de travail. L'anticorps marqué au dérivé réactif (HAPTEN) ou HAB est préparé sous forme de solution mère à quatre fois la concentration, soit 1,6 microgramme par millilitre, diluée avec le diluant HAB pour billes à échelle biologique ; faites tourner la solution pendant au moins cinq minutes. Ensuite, préparez la solution de billes.Vortexez bien le stock de billes dans la bile. Pour vous assurer que toutes les billes sont en suspension, prélève un aliquot afin de préparer un mélange de travail quatre fois concentré contenant huit fois 10 à la puissance cinq billes par millilitre, dilué avec le diluant HAB pour échelle biologique. Fais tourner la solution pendant au moins cinq minutes.Préparez ensuite le tampon de migration. Plusieurs dosages des protéines hôtes cellulaires (HCP) de CHO ont été mis au point en utilisant un tampon Hepes 10 millimolaire, 1 % de Tween, pH 7,5.Cependant, il se peut que le tampon doive être optimisé en fonction des anticorps utilisés pour développer votre test. Il est recommandé de préparer un modèle de test pour chaque test impliquant cinq postes de travail. Le modèle de test comporte sept feuilles, intitulées instructions, notes de configuration des échantillons, calculs des données brutes, graphique de calibration et résultats.Pour commencer la configuration du modèle, sélectionnez la feuille de configuration de l'échantillon et renseignez la plage de concentrations des étalons dans le tableau. Dans le coin supérieur gauche de la feuille, saisissez des informations supplémentaires dans le tableau situé à droite des étalons afin d'indiquer au poste de travail VIBE la durée d'incubation requise pour les échantillons, le volume de réactif à transférer, la durée d'accumulation des échantillons, ainsi que si un conditionnement du capteur et une décontamination des sondes et de la cartouche sont nécessaires. Ensuite, complétez la disposition de la plaque, diluez les calibrateurs et les échantillons avec le diluant d'échantillon Bio Scale et chargez les échantillons dans les plaques.Charger les réactifs dans la troisième plaque 96 puits. Sceller les plaques. Placer les plaques sur les agitateurs du plateau de la station de travail, puis configurer le système avec la solution de lavage et la solution de régénération.Mettez la station de travail vibe sous tension et connectez l'alimentation du système ainsi que le circuit de déchets. Commencez à amorcer le système. Insérez la cartouche vibe.Enfin, exécutez l'assistant de démarrage du test. Suivez les instructions à l'écran et commencez. Le signal du test est mesuré à l'aide de la technologie A MMP. Lorsque l'anticorps HAPTEN antigène sur microbille se lie au capteur par l'interaction hapten-anti-hapten, la régénération ramène le capteur à son état initial en éliminant les complexes immuns. Affiché.Voici un exemple de test H-C-P-A-M-M-P sur des cellules CHO. L'analyse de la courbe d'étalonnage peut être réalisée sur des échantillons de bioréacteur avec des résultats reproductibles. Cette courbe d'étalonnage concerne une protéine résiduelle.Le test A-A-M-M-P effectué avec une protéine résiduelle Vibe et un kit d'analyse. Le même kit peut être utilisé pour un test plus rapide avec une période d'incubation de 30 minutes ou pour des résultats plus sensibles et une gamme dynamique plus étendue avec une période d'incubation plus longue. La station de travail Vibe peut également être utilisée pour un dosage de titre de produit effectué différemment des autres tests A MMP.Cet essai ne nécessite ni traitement de l'échantillon ni billes, et la quantification a été vérifiée sur des échantillons sans centrifugation contenant plus de 10 millions de cellules. On observe ici une courbe standard du signal obtenu par le bioanalyseur Vibe ou la technologie Alpha Screen à l'aide de résultats de GST GAD 34 recombinant sur la plateforme Vibe. La sensibilité était un logarithme plus élevée ici.L'induction de GAD 34 à partir de xénogreffes CWR 22 a été testée en présence ou en l'absence d'un inhibiteur du protéasome bate, comme analysé par la plateforme Vibe, le bioanalyseur ou le test Alpha. La plateforme Vibe a permis d'obtenir des résultats sensibles et reproductibles dans les xénogreffes tumorales in vivo, tandis que le signal du test Alpha était atténué avec une augmentation des microgrammes de protéine après son développement. Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la découverte de médicaments en oncologie pour explorer l'inhibition pharmacologique dans des échantillons tumoraux, et a permis des opérations plus efficaces dans les applications de bioproduction.

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