11 janvier 2011
Dans cet article, nous avons décrit la procédure de chirurgie et de la manutention des conseils pour l'implantation de l'ultra-mince matrice de microélectrodes à base de polyimide (PBM-array) sur le crâne de la souris pour l'acquisition de haute densité encéphalographie (EEG) dans un modèle murin.
Bonjour, je m’appelle Mina Lee et je travaille au Gen Choice Laboratory du Centre de neurosciences de l’Institut coréen des sciences et de la technologie. Aujourd’hui, nous allons démontrer l’état de l’EG à haute densité dans le modèle de masse avec un réseau de micro-électrodes à base de poly. La procédure implique la mise en place des instruments, la préparation des animaux pour la chirurgie et la chirurgie stéréotoxique.
Après l’opération, nous effectuerons un enregistrement EEG, puis analyserons les données. Commençons. Avant de commencer l’opération, installez les instruments stéréotoxiques et tout le matériel nécessaire.
L’environnement doit être propre. Préparez la souris pour la chirurgie. Je vais faire une démonstration de l’opération d’aujourd’hui à l’aide d’une souris hybride de base de 17 semaines, de six noirs, de six J, 1 29, de quatre S-V-J-A-E.
Nous pouvons également utiliser des souris de plus de 25 grammes. Anisez la souris avec une injection IP de cocktail contenant 120 milligrammes par kilogramme, de la kétamine et six milligrammes par kilogramme de sortie. Pincez doucement la queue de la souris ou pour vous assurer que la souris est anesthésiée suffisamment profondément pour procéder à la chirurgie.
Pour commencer l’opération, montez l’animal sur le stéréo toxique séparé. Placez les barres d’air dans la conelle de la souris une par une et serrez-la. Mettez un peu de méthanol sur sa tête, puis façonnez l’arrière de sa tête.
Injecter, faire une incision antérieure postérieure entre les yeux jusqu’entre les oreilles et le crâne. Pincez la peau de la souris à l’aide de micro-pinces afin de maintenir l’incision large vers le haut. Retirez tout tissu ou membrane restant du crâne avec les permutations stérilisées.
Placez le marqueur au-dessus de sa tête. Marquez les points lambda BMA. Retirez ensuite le marqueur et marquez les points à l’aide d’un vieux stylo.
Juste dans le mille. Le point. Amenez l’électrode de film au-dessus de la tête et mettez une goutte d’eau T sur le crâne.
Placez le BMA au milieu de la cinquième couche de l’Ontario du meilleur micro réseau électro. Sous-marinez soigneusement le film de la médiane à plus tard avec l’eau douce des échanges de coton. Donnez quelques minutes jusqu’à ce qu’il sèche complètement.
Cela contribue à une meilleure observance. Faites trois marques de stylo avec un stylo à base d’huile sur l’espace résiduel. C’est là que vous allez percer.
Faites très attention à ne pas toucher l’intérieur lorsque vous percez les trous. Placez les vis de direction à trois lignes steril sur le crâne et placez-les jusqu’à ce qu’elles soient bien en cordon. Mélangez un lot épais de ciment dentaire liquide, liquide, précis et couvrez les vis de l’électrode du film et le reste du crâne.
Faites un autre lot et utilisez-le pour couvrir complètement l’électrode. Dévoilez à nouveau les vis pour le fixer. N’oubliez pas que cet homme ne doit pas être sous l’électrode du film.
Mettez un double signe qui a du ruban adhésif à l’arrière du plan de connexion. Placez un bâton rigide comme sangle au milieu du crâne à l’aide d’une colle forte. Dans l’expérience d’aujourd’hui, j’utilise la pointe d’un écouvillon pour cette étape, je manipule la position du connecteur pour qu’elle soit à l’envers jusqu’à ce qu’il entre en contact avec la pointe du point de coupe.
La distance entre le crâne et le connecteur doit être supérieure à cinq millimètres. Collez le plan du connecteur sur la pointe de l’échange de coton en ajoutant de la colle forte. Couvrir le reste de la zone ouverte avec de l’acrylique ul ciment.
Après le durcissement du ciment, retirez les pinces et remuez la peau. Retirez la souris du parus et couvrez l’espace supplémentaire. Avec du ciment dentaire acrylique, appliquez de l’antibiotique sodique autour du ciment et de la zone de suture.
Placez la souris dans sa propre cage et donnez-lui une liste de cinq jours pour la récupération. Connectez la souris à l’EEG et tirez le feu et donnez plus d’une heure pour l’habitation. Après une heure d’enregistrement EEG, nous avons réalisé l’acquisition d’un EEG haute densité dans un modèle murin avec un réseau de micro-électrodes à base de poly.
Lors de cette procédure, il est important de ne pas oublier de manipuler le film electro Tri en douceur car il n’a que sept micromètres d’épaisseur. R, une goutte d’eau du robinet est nécessaire lorsque vous réorganisez l’électrode. Si vous sautez cette étape, l’électrode peut être tournée facilement et assurez-vous que les dents en acrylique à haute viscosité ne pénètrent pas sous le film.
Après l’enregistrement, nous effectuons une analyse hors ligne à l’aide d’un laboratoire de méthamphétamine pour dessiner plusieurs graphiques cérébraux afin de visualiser clairement les activités cérébrales chez la souris. Il s’agit des signaux EEG multicanaux représentatifs après injection de GBL. Sur le panneau de gauche, vous pouvez voir les signaux e multicanaux représentatifs après l’injection de GBL sur le panneau de droite.
Des cartes topographiques cérébrales telles que le délai de puissance moyen, l’intensité maximale moyenne et la carte de probabilité moyenne d’apparition des crises sont présentées. Donc c’est tout. Merci d’avoir regardé.
Cet article démontre la procédure chirurgicale pour implanter un réseau d'électrodes microscopiques en polyimide (réseau PBM) sur le crâne de la souris, permettant l'acquisition d'un EEG haute densité dans un modèle murin.
L'EEG à haute densité chez les souris librement mobiles permet une dépréciation mécanistique des hypothèses sur les circuits neuronaux en reliant des signatures électrophysiologiques au comportement dans des modèles génétiquement accessibles. Cette approche soutient la validation de cibles en découverte de médicaments neuropsychiatriques en fournissant des lectures quantitatives et reproductibles de l'activité du réseau liée aux mécanismes de la maladie. Le réseau microélectrode à base de polyimide améliore la fidélité du signal et la capacité d'enregistrement chronique, renforçant ainsi la confiance prédictive dans les évaluations de l'efficacité préclinique.
La méthode s'intègre au continuum de découverte, de la génération d'hypothèses à l'optimisation des candidats, en fournissant des données neuronales dynamiques, à l'échelle du système, qui orientent le choix des cibles et la priorisation des composés.