Transplantation de l'intestin chez les souris
20 août 2007
La souris petit modèle de transplantation intestinale a été reconnue comme un outil important pour étudier mechanismes de rejet immunitaire et de l'écran de nouveaux médicaments immunosuppresseurs. Toutefois, ce modèle est limité à utiliser, car les techniques impliqués est un défi extrêmement technique. Maintenant nous présentons la technique modifiée.
Je m'appelle, je travaille au laboratoire du Dr K du Département de chirurgie de l'Université de Californie à San Francisco. Aujourd'hui, je vais vous montrer les techniques de transplantation chez la souris. Comme vous le savez peut-être, le nombre de transplantations réussies de moelle osseuse est limité par rapport aux transplantations d'organes solides.
Cela est probablement dû à des caractéristiques intestinales distinctes, telles qu'une forte immunogénicité et une perméabilité élevée aux bactéries, entraînant un taux élevé de complications postopératoires. Ce modèle chirurgical constitue un excellent outil pour l'étude de ces complications. Je viens de vous montrer la procédure de transplantation de l'intestin grêle chez la souris.
Les étapes les plus importantes de cette procédure consistent à maintenir la lumière de l'intestin grêle du donneur dégagée et à réduire au minimum le temps opératoire. Ce modèle de transplantation est extrêmement utile pour l'étude des agents immunosuppresseurs et des mécanismes de rejet dans la transplantation de l'intestin grêle. J'espère que vous serez désormais en mesure de réaliser cette procédure dans vos propres laboratoires.
Merci.
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Aperçu
Le modèle de transplantation de l'intestin grêle de souris est un outil essentiel pour l'étude des mécanismes de rejet immunitaire et l'évaluation de nouveaux médicaments immunosuppresseurs. Cette présentation décrit une technique modifiée permettant d'améliorer la faisabilité de ce modèle.
Composantes clés de l'étude
Domaine scientifique
- Biologie de la transplantation
- Immunologie
- Techniques chirurgicales
Contexte
- La greffe d'intestin grêle est moins réussie que la greffe d'organe solide.
- Les caractéristiques propres à l'intestin contribuent à une forte immunogénicité.
- Les complications postopératoires sont fréquentes en raison de la présence bactérienne.
- Ce modèle est précieux pour l'étude de ces complications.
Objectif de l'étude
- Démontrer une technique modifiée de transplantation de l'intestin grêle chez la souris.
- Améliorer le taux de succès des transplantations de l'intestin grêle.
- Faciliter la recherche sur le rejet immunitaire et les stratégies immunosuppressives.
Méthodes utilisées
- Démonstration des techniques chirurgicales pour la transplantation de l'intestin grêle.
- Utilisation d'un modèle murin pour étudier les résultats de la transplantation.
- Évaluation des complications postopératoires.
- Analyse des réponses immunogènes.
Résultats principaux
- Démonstration réussie de la technique de transplantation modifiée.
- Identification des facteurs clés influant sur le succès de la greffe.
- Apercus sur l'immunogénicité de l'intestin grêle.
- Potentiel pour un meilleur criblage des médicaments immunosuppresseurs.
Conclusions
- La technique modifiée améliore la faisabilité de la transplantation de l'intestin grêle chez la souris.
- Ce modèle peut contribuer de manière significative à la compréhension du rejet immunitaire.
- De futures recherches pourront s'appuyer sur ce modèle afin de développer de meilleures stratégies immunosuppressives.
Questions fréquemment posées
Pertinence professionnelle dans l'industrie
Le modèle de transplantation de l'intestin grêle chez la souris comble un manque critique dans la recherche préclinique en immunologie en permettant l'étude mécanistique du rejet de greffe et de l'efficacité des médicaments immunosuppresseurs. Ce modèle permet la validation de cibles thérapeutiques et la réduction des risques mécanistiques pour les traitements gastro-intestinaux, domaines dans lesquels les modèles d'organes solides ne parviennent pas à reproduire les réponses immunitaires propres à l'intestin. Une faisabilité chirurgicale améliorée augmente le débit pour l'identification des candidats-médicaments et renforce la fiabilité prédictive en phase précoce de découverte.
Applications stratégiques en recherche et développement en biopharmaceutique
Découverte précoce et validation de cibles
- Valeur scientifique : Permet l'exploration des voies immunogènes spécifiques de l'intestin et des mécanismes de rejet.
- Valeur opérationnelle : Fournit un système reproductible pour valider des cibles thérapeutiques en immunité muqueuse.
- Valeur prédictive : Facilite la réduction des risques précliniques en modélisant des complications postopératoires et des réponses immunitaires proches de celles observées chez l'humain.
Développement de tests et criblage
- Valeur scientifique : Permet une évaluation standardisée des agents immunosuppresseurs dans un contexte de greffon contre hôte cliniquement pertinent.
- Valeur opérationnelle : La technique de suture modifiée réduit les échecs procéduraux, améliorant la reproductibilité et la scalabilité du test.
- Valeur prédictive : Génère des lectures quantitatives de l'attecement et du rejet pour le criblage de composés et l'optimisation des candidats.
Recherche translationnelle et préclinique
- Valeur scientifique : Modélise l'immunologie de la transplantation intestinale humaine, permettant la découverte de biomarqueurs translationnels.
- Valeur opérationnelle : Permet la surveillance longitudinale de la fonction du greffon et de l'infiltrat immunitaire.
- Valeur prédictive : Guide les décisions d'avancement ajustées au risque en prédisant les trajectoires de rejet clinique.
Intégration des pipelines et des flux de travail
Le modèle s'inscrit dans le continuum de la découverte, allant de la validation de la cible à l'identification de composés d'intérêt, jusqu'aux tests d'efficacité préclinique, en particulier pour les thérapies immunomodulatrices ciblant l'inflammation gastro-intestinale ou le rejet de greffe.
- Biologie de la découverte : Soutient la vérification d'hypothèses sur les voies de contrôle immunitaire et la signalisation des cytokines dans le rejet de greffe.
- Écrantage : Permet des lectures standardisées et quantitatives de la survie de la greffe et des scores histologiques de rejet.
- Analytique : Fournit des critères d'évaluation mesurables tels que le temps de reperfusion, l'incidence de la thrombose et l'infiltration des cellules immunitaires pour des analyses comparatives.
- Recherche translationnelle : Relie les découvertes mécanistiques à la validation préclinique de régimes immunosuppresseurs.
- Réutilisation en entreprise : Met en place une plateforme chirurgicale réutilisable pour des tests itératifs de médicaments et des études sur le mécanisme d'action.
Impact opérationnel et organisationnel
- Valeur scientifique : Réduit l'ambiguïté mécanistique dans les réponses immunitaires intestinales et améliore la confiance dans les cibles.
- Valeur opérationnelle : Améliore la reproductibilité grâce à une anastomose vasculaire simplifiée et une technique de suture standardisée.
- Valeur stratégique : Accroît l'efficacité du capital en augmentant les taux de réussite des modèles et en réduisant les pertes expérimentales.
- Impact sur le portefeuille : Permet des décisions fondées sur les données (aller ou ne pas aller) dans les filières d'immunomodulation grâce à une meilleure stratification des risques.
Considérations relatives à la mise en œuvre
- Nécessite une expertise en techniques de microchirurgie et en anatomie des rongeurs.
- Dépend d'outils de suture fins (10-0) et de systèmes de grossissement pour l'anastomose vasculaire.
- Exige des protocoles standardisés de soins postopératoires afin de surveiller les infections et la fonction de la greffe.
- Les considérations d'adaptation incluent les variations d'appariement de taille entre donneur et receveur ainsi que la durée d'ischémie.
- Les limites pratiques comprennent la complexité du modèle et la nécessité d'une technique rigoureusement aseptique pour prévenir la sepsie.
F.A.Q. sur la bio-industrie pharmaceutique
Chapters in this video
8:09
10. locating inferior vena cava
35:32
Conclusion
11:57
20. harvesting donor small bowel
33:14
Sewing up Abdominal Cavity
8:15
11. injecting heparin into the inferior vena cava
17:15
6. suturing donor mesenteric artery to recipient aorta
27:50
3. cutting ileal end of donor small bowel
11:19
18. cutting away mesenteric tissue
12:09
Preparing Recipient Mouse for Small Bowel Transplantation
23:01
9. flipping donor small bowel in order to finish suture of mesenter
32:02
8. suturing jejunal end of donor small bowel to stoma
16:31
4. repeat procedure for aorta
1:18
Harvesting Small Bowel from Donor Mouse
8:36
12. cutting mesenteric artery
4:21
3. cleaning out small bowel contents before ligating ileum
25:56
12. releasing ligatures to open circulation to donor small bowel
2:46
2. clearing away tissue to allow ligation of small bowel
16:17
3. performing veinotomy on inferior vena cava
24:53
11. final suture for anastamosis of donor mesenteric artery to reci
1:20
1. performing Tail Pinch to Ensure Mouse is Anesthetized
4:50
4. ligating ileum
0:16
Introduction
5:20
5. exposing and ligating mesenteric vessels
13:29
2. clearing away tissue in order to apply ligatures
0:03
Title
27:20
1. clamping ileal end of donor small bowel
14:35
3. applying ligatures to inferior vena cava and inferior aorta
11:34
19. cutting portal vein
19:59
7. suturing donor portal vein to recipient inferior vena cava
26:47
Connecting Donor Small Bowel to Recipient Small Bowel
10:56
17. cutting ileal end of ligated small bowel
23:35
10. suturing donor mesenteric artery to other side of aorta
9:37
15. cutting away small bowel mesenteric tissue
7:28
8. ligating branch of portal vein
29:10
5. flipping small bowel clamps in order to suture other side of ana
30:20
6. removing clamps
6:18
6. exposing mesenteric artery which will be cut when small bowel is
15:15
1. placing donor small bowel in recipient mouse
10:27
16. cutting away mesenteric tissue until the portal vein is reached
31:14
7. creating stoma for jejunal end of donor small bowel
13:20
1. exposing inferior vena cava and aorta
15:03
Connecting Donor Small Bowel Circulation to Recipient Circulation
22:39
8. final suture for anastamosis of donor portal vein to recipient i
27:39
2. cutting recipient jejunum
9:23
14. cutting jejunal end of ligated small bowel
17:00
5. washing away blood from vessels with saline
6:42
7. exposing portal vein
7:58
9. exposing other side of mesenteric artery
15:56
puncturing inferior vena cava for veinotomy
8:54
13.clearing away tissue from mesentaric artery
28:04
4. suturing one side of donor ileum to recipient jejunum
32:40
9. cutting ligature to jejunal end of donor small bowel
