Name: Dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 27 s
Description: Apprenez deux techniques de prélèvement sanguin chez le rat : la veine saphène sans anesthésie et la ponction cardiaque terminale. Ces méthodes essentielles permettent des études pharmacocinétiques éthiques avec un minimum de stress pour l'animal.

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Dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque Remarque: Toutes les procédures doivent être approuvées par les soins des animaux de votre institut et au comité d&#39;utilisation. 1. Prélever du sang de la veine saphène <ol><li> Cette procédure est effectuée sans anesthésie et nécessite deux personnes, celui qui gère le rat, et celui qui effectue le tirage au sort. </li><li> Faire un cône sur une serviette ou de détenir le rat avec des gants de manipulation de rongeurs, en laissant une patte arrière exposés. </li><li> Rasage à l&#39;arrière de la jambe avec une tondeuse électrique jusqu&#39;à ce que la veine saphène est visible. Rasage une superficie assez grande, de sorte qu&#39;aucun poil entrera en contact avec le site de ponction. Utilisez une petite quantité de lotion pour les mains non parfumée pour garder les cheveux non rasés loin du site de ponction. </li><li> Faire un point de compression à la base de la jambe pour faire sortir l&#39;saphène renflement (similaire à l&#39;aide d&#39;un garrot lors de l&#39;élaboration du sang d&#39;un humain ou un animal de grande taille). Piquer la veine avec une aiguille de 20G et une pelle le sang comme elle vient à l&#39;aide d&#39;une microvette. Pompage avec la jambe aidera à attirer plus de sang. Lorsque vous avez collecté suffisamment de sang, tenir une compresse propre sur le site de ponction pour arrêter le saignement. </li></ol> 2. Prélever du sang par ponction cardiaque <ol><li> Cette procédure nécessite l&#39;anesthésie et est en phase terminale. Les animaux doivent être immédiatement euthanasié à l&#39;issue d&#39;une ponction cardiaque. </li><li> Préparer une seringue de 5 ml avec une aiguille 23G1. </li><li> Profondément anesthesize le rat et le chèque pour l&#39;anesthésie par le manque de mouvement spontané, le taux de respiration lente, et l&#39;absence de réponse à des stimuli (tels que le pincement d&#39;un orteil). Pour assurer une anesthésie prolongée, placez une seringue contenant une serviette trempée dans du papier anesthésiques volatils sur le nez du rat pendant la procédure. </li><li> Placez le rat sur son dos, face à vous. </li><li> Si vous êtes droitier, placez votre index gauche au niveau des plus bas des côtes, sans appliquer aucune pression. Le coeur sera situé ~ 1 cm au-dessus ce point, légèrement vers la droite. </li><li> Retenir votre seringue à un angle de 45 degrés, insérer l&#39;aiguille entre deux côtes et regarder pour une goutte de sang à venir dans l&#39;aiguille. Ceci est une indication que vous êtes dans le cœur. Sans bouger de votre seringue, tirez sur le piston pour remplir la seringue. Lorsque la seringue est pleine, soigneusement le déconnecter de l&#39;aiguille et le vider dans un tube. La seringue peut alors être ré-attaché à l&#39;aiguille pour le dessin plus de sang. Il devrait être possible de tirer des 5-10 ml de sang d&#39;un rat 120-180 g. </li><li> Immédiatement euthanasier le rat. </li></ol>

<ol><li>Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sampling+from+the+retro-orbital+plexus%2C+the+saphenous+vein+and+the+tail+vein+in+rats%3A+comparative+effects+on+selected+behavioural+and+blood+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables.</a> Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).</li>
<li>Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collecting+blood+from+rodents%3A+a+discussion+by+the+laboratory+animal+refinement+and+enrichment+forum%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Technology+and+Welfare%22%5BJournal%5D)">Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum.</a> Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).</li>
<li>Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+two+methods+of+bleeding+rats%3A+the+venous+plexus+of+the+eye+versus+the+vena+sublingualis%5BTitle%5D)+AND+%22Jounal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis.</a> Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K%2B+channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%2C+a+model+for+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad%22%5BJournal%5D)">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).</li>
<li>Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+effector+memory+T+cells+with+a+selective+peptide+inhibitor+of+Kv1.3+channels+for+therapy+of+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases.</a> Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kv1.3+channels+are+a+therapeutic+target+for+T+cell+mediated+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -M., Gola, M., Sabatier, J. -M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blocking+of+voltage-gated+K%2B+channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. , 936-944 (2001).</li>
<li>Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+basic+protein-reactive+T+cells+induce+conduction+failure+in+vivo+but+not+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro.</a> Neuroreport. , 317-320 (2003).</li>
<li>Beeton, C., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+monitoring+of+adoptive+delayed+type+hypersensitivity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).</li>
</ol>

Dessin de sang de la veine saphène est une façon pratique d&#39;obtenir de petites quantités de sang, sans anesthésie. Si l&#39;échantillonnage répété est nécessaire, consulter les règlements pour vous assurer de ne pas tirer trop de sang d&#39;un rat. Dessin de sang par ponction cardiaque est une façon pratique d&#39;obtenir de grandes quantités de sang, mais c&#39;est une procédure terminale. L&#39;animal doit être euthanasié à l&#39;issue du tirage au sort du sang. Ces techniques (comme toutes les techniques sur des anima...

<table><tbody><tr><td>Aiguille 20G 1/2</td><td>Outil</td><td>BD Biosciences</td><td>305176</td><td>Pour percer la veine saphène</td></tr><tr><td>Microvette 300</td><td>Outil</td><td>Sarstedt Ltd</td><td>20.1308.100</td><td>Pour recueillir le sang de la veine saphène</td></tr><tr><td>Tondeuse électrique</td><td>Outil</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>CLP-32130</td><td></td></tr><tr><td>Aiguille 23 G 1</td><td>Outil</td><td>BD Biosciences</td><td>305145</td><td>Pour la ponction cardiaque</td></tr><tr><td>Seringue en plastique de 5 ml, embout lisse</td><td>Outil</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-12</td><td>Pour la ponction cardiaque</td></tr></tbody></table>

dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque

Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture

Dessin de sang de rongeurs est nécessaire pour un grand nombre de fois in vitro et in vivo. Sites de prélèvements sanguins sont nombreux chez les rongeurs: le cœur du sinus rétro-orbitaires, la veine jugulaire, veine maxillaire, la veine saphène,. Chaque technique a ses avantages et ses inconvénients, et certains ne sont pas approuvés plus dans certains pays (par exemple, rétro-orbitaires dessine en Hollande). Une discussion sur les différentes techniques de dessin sont disponibles sanguins 1-3. Ici, nous présentons deux techniques pour prélever du sang à partir de rats, chacun avec ses applications spécifiques. Prélever du sang de la veine saphène, à condition qu&#39;il soit fait correctement, induit une détresse minimale chez les animaux et ne nécessite pas d&#39;anesthésie. Cette technique permet des tirages répétés de petites quantités de sang, comme nécessaires pour les études pharmacocinétiques 4,5, la détermination de la chimie du plasma, ou numération globulaire 6. Ponction cardiaque permet la collecte de grandes quantités de sang à partir d&#39;un seul animal (jusqu&#39;à 10 ml de sang peuvent être tirées d&#39;un rat de 150 g). Cette technique est donc très utile en tant que procédure de terminal lors de l&#39;élaboration de sang de la saphène ne serait pas de fournir un échantillon suffisamment grand. Nous utilisons ponction cardiaque quand nous avons besoin des quantités suffisantes de sérum provenant d&#39;une souche spécifique de rats à croître T lymphocytes in vitro lignes 4-9.

Prélèvements sanguins sont nécessaires dans un grand nombre d&#39;études, par exemple pour étudier le profil pharmacocinétique d&#39;un composé. Ici, nous montrons comment prélever du sang de rats en utilisant deux techniques: prélever du sang de la veine saphène ou par ponction cardiaque.

Dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque

Le prélèvement sanguin chez les rongeurs est nécessaire pour un grand nombre d'études, tant in vitro qu'in vivo. Les sites de prélèvement sanguin sont nombreux chez les rongeurs : ...

Bonjour, je suis Christine Beaton. Je suis chercheuse assistante dans le laboratoire de George Chen au Département de physiologie et de biomécanique de l'Université de Californie à Irvine. Et dans la vidéo que vous êtes sur le point de regarder avec l'aide d'Adriana Garcia, étudiante diplômée du laboratoire.Je vais vous montrer deux techniques pour prélever du sang chez le rat. La première technique que nous allons vous présenter consiste à prélever du sang de la veine saphène. Cette méthode est très utile si vous souhaitez obtenir de petites quantités de sang chez le rat sans anesthésie.Par exemple, si vous réalisez une étude de pharmacocinétique, qui nécessite de petites quantités de sang prélevées à intervalles réguliers. La deuxième technique que nous allons vous montrer consiste à prélever du sang par ponction cardiaque. Il s'agit d'une technique terminale, ce qui implique que le rat doit être sacrifié à la fin du prélèvement sanguin.Mais l'avantage de cette technique est qu'elle permet d'obtenir des quantités beaucoup plus importantes de sang, plusieurs millilitres. Une fois la zone préparée, nous appliquons une crème hydratante ordinaire, principalement pour éviter que des poils ne se détachent et n'entrent dans le tube, ce qui pourrait provoquer la coagulation du sang. Ensuite, à l'aide de mon pouce, j'applique une pression localisée afin que la veine ressorte légèrement, puis Adriana va piquer la veine ; parfois, celle-ci bouge et nous ne la touchons pas du premier coup, auquel cas nous effectuons une nouvelle tentative.À présent que nous avons perforé la veine, des gouttes de sang sortent à intervalles réguliers ; nous les recueillons donc à l’aide d’un microtube, et nous continuons ainsi jusqu’à obtenir suffisamment de sang pour notre analyse ou jusqu’à ce qu’aucune goutte ne s’écoule plus. Selon le rat et la qualité de la perforation, nous obtenons plus ou moins de sang provenant du cerveau. Pour favoriser l’écoulement de davantage de sang, nous effectuons un pompage avec la patte.Il s'agit de la quantité de sang que nous obtenons habituellement lors d'une prise de sang veineux. Maintenant, je vais vous montrer comment effectuer un kaun. Pour cette procédure, nous n'avons besoin que d'une seule seringue en plastique de cinq millilitres et d'une aiguille de calibre 23.Ainsi, le rat est profondément anesthésié avec de l'alane, et je place un masque, constitué d'une seringue avec un essuie-tout Kim imprégné d'alane, afin de m'assurer que le rat ne se réveille pas. Étant droitier, j'utilise mon index gauche au niveau du plexus solaire pour me positionner. Ensuite, pour localiser le cœur, je remonte d'environ un centimètre, légèrement vers la droite, en insérant ma seringue selon un angle d'environ 45 degrés.Et si je me trouve dans le cœur, je devrais observer un flux sanguin régulier. Si je ne suis pas dans le cœur, je peux aller plus en profondeur ou remonter vers la surface. Grâce à cette technique, je devrais être en mesure de prélever plusieurs millilitres de sang sur un rat donné.Bien sûr, lorsque le cœur s'arrête, le flux sanguin s'interrompt également. Vous devez donc anesthésier profondément le rat, mais sans qu'il meure trop rapidement. Lorsque la seringue est pleine, je l'ai déconnectée de l'aiguille, je l'ai placée dans un tube et je l'ai abaissée lentement pour éviter l'hémolyse, car je souhaite pouvoir utiliser mon sérum ultérieurement pour la culture tissulaire ou pour diluer mes médicaments destinés à des injections.Et puisque j'ai laissé l'aiguille en place, je peux essayer de voir si je peux prélever davantage de sang à partir de cette main. Encore une fois, si le débit est très faible, comme maintenant, je déplacerai l'aiguille vers le haut et vers le bas pour voir si je peux trouver un endroit où il y a plus de sang à prélever. Et bien sûr, une fois que vous avez trouvé l'endroit adéquat, vous ne devez pas bouger l'aiguille.Nous venons donc de vous montrer comment prélever du sang chez le rat, soit à partir de la veine ombilicale, soit par ponction cardiaque. Bonne chance dans vos expériences.

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Cathétérisme chronique des vaisseaux sanguins chez le rat est souvent nécessaire pour l'administration de substances, d'obtenir un échantillon de sang sur une période de temps ou pour directement conscients de la pression artérielle. Cathétérisme artériel fémoral du rat et les mesures correspondantes de la pression artérielle chez l'animal éveillé sera démontrée.

Fémorale cathétérisme artériel et veineux pour le prélèvement sanguin, Drug Administration et la pression artérielle Conscient et Mesures du rythme cardiaque

Les échantillons de sang sont utiles pour évaluer les biomarqueurs des états physiologiques ou de la maladie in vivo. Nous décrivons ici la méthodologie d’échantillonnage du sang de la veine latérale de la queue chez le rat. Cette méthode permet d’obtenir des échantillons rapides avec un minimum de douleur et d’invasivité.

L&#39;échantillonnage de sang de la veine caudale latérale de la Rat

Nous décrivons ici une méthode de prélèvement de sang simple queue veineuse chez les rats non anesthésiés à l’aide d’un système de tube d’aspiration. Cette méthode réduit le risque d’exposition directe au sang et simplifie les prélèvements d’échantillons multiples d’une seule ponction.

Répété de collecte de sang de la veine caudale des Rats Non anesthésiés avec un système de collecte de sang de vide

Nous présentons ici un protocole visant à recueillir des échantillons de sang de la veine sous-clavière de rat.

Ponction de la veine sous-clavière comme méthode Alternative de prélèvement d’échantillons de sang chez les Rats

Des techniques microchirurgicales détaillées sont démontrées pour établir un modèle de canulation de la veine jugulaire à plus long terme pour la collecte séquentielle de sang chez le même animal. Les paramètres physiologiques et hématologiques ont été surveillés pendant la phase de récupération du rat. Ce modèle a été appliqué pour étudier la pharmacocinétique du polyphénol administré par voie orale sans induire de stress animal.

Compétences microchirurgicales pour établir une canulation veineuse jugulaire permanente chez le rat pour le prélèvement sanguin en série d’un médicament administré par voie orale

Le présent protocole décrit une méthode simple et efficace pour la collecte dynamique et en temps réel du sang de cœur de rat à l’aide de la technique de microdialyse.

Extraction dynamique continue de sang du cœur de rat par une technique de microdialyse non invasive

Ici, nous présentons un protocole pour offrir des alternatives de prélèvement de sang rapides, faciles et fiables pour le modèle de rat. Nous décrivons trois méthodes différentes de prélèvement sanguin selon le contexte : ponction veineuse de la queue sous anesthésie ou sur un animal conscient, et ponction veineuse dorsale du pénis sous anesthésie.

Ponction modifiée de la veine de la queue et de la veine du pénis pour prélèvement sanguin dans le modèle du rat

Nous présentons ici une combinaison de méthodes efficaces de restriction chez le rat et de ponction veineuse sous-clavière qui permettent une collecte de sang rapide, sûre et répétée chez le rat sans anesthésie.

Prélèvement sanguin de la veine sous-clavière chez des rats conscients

La ponction cardiaque sous-clavière est une méthode simple et fiable pour prélever le sang terminal chez la souris. Il est facile à utiliser et garantit des échantillons de haute pureté.

Prélèvement sanguin cardiaque par ponction sous-clavière chez la souris

Les cellules tueuses naturelles sont une petite population de lymphocytes. Ici, nous montrons comment isoler ces cellules du sang humain par une sélection négative, en utilisant un kit de StemCell Technologies. Les cellules obtenues sont viables et épargnée par les anticorps, et donc prêt à être utilisé pour un certain nombre de procédures.

Enrichissement des cellules NK du sang humain avec le Kit de RosetteSep StemCell Technologies

Apprenez deux techniques de prélèvement sanguin chez le rat : la veine saphène sans anesthésie et la ponction cardiaque terminale. Ces méthodes essentielles permettent des études pharmacocinétiques éthiques avec un minimum de stress pour l'animal.

Dessin de sang de rats à travers la veine saphène et par ponction cardiaque

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