2 juillet 2011
Fopius arisanus est un parasitoïde des œufs de larves de mouches des fruits Tephritidae qui est utilisé avec succès dans la lutte biologique contre ces ravageurs importants tropicales. Nous décrivons ici un protocole optimisé pour l'élevage de F. arisanus sur une petite échelle en utilisant des matériaux facilement disponibles.
FOIA Aus est un agent important de lutte biologique à Hawaï, car il s'attaque aux mouches des fruits, des ravageurs économiques sérieux dans les régions tropicales et particulièrement ici à Hawaï. Ce qui fait l'intérêt de FOIA Aus, c'est qu'il attaque le stade œuf de l'insecte ravageur, permettant ainsi de le contrôler dès un stade précoce. Dans les séquences suivantes, vous pourrez observer des gros plans montrant comment nous élevons FOIA Aus en laboratoire.
Et à la fin de ce programme, vous verrez des discussions sur la manière dont ce parasitoïde particulier a été utilisé dans un programme de relâchement réussi en Polynésie française. Nous allons commencer notre protocole avec des parasites adultes prêts à pénétrer dans les œufs d'une drosophile hôte. La première étape consiste à préparer les œufs de drosophile afin de les présenter au parasite.
Ensuite, les larves de drosophiles sont laissées éclore, se développer et se nymphoser. Une fois que les drosophiles atteignent le stade de nymphe, elles sont triées selon leur taille afin d'enrichir en parasites. Enfin, les parasites émergent et sont maintenus jusqu'à leur maturation.
Ils se rencontrent ensuite et sont de nouveau prêts à pénétrer dans un nouveau lot de fruits. Œufs de drosophiles. Ceci achève le cycle.
Préparez un substrat A pour les fruits. Faites des blocs de taraudage d'environ 10 centimètres de côté. Le taraudage est préparé à une concentration de neuf grammes de poudre de taraudage par litre d'eau.
Sur une surface plane, remplir les boîtes jusqu'au bord avec le milieu d'augage, puis laisser durcir pendant au moins 45 minutes. Une fois les blocs d'augage solidifiés, poser une couche unique de papier absorbant recouvrant la surface de chaque bloc. Le papier doit adhérer facilement à l'augage grâce à l'humidité superficielle.
Un deuxième passage de roulage. Appliquer les œufs de drosophile sur la surface des blocs vis sans fin recouverte de tissu. Un volume de 0,5 millilitre d'œufs de drosophile en suspension donne environ 6 000 œufs par bloc.
Un pinceau de 2,5 centimètres de large, trempé dans l’eau, est utilisé pour répartir uniformément les œufs de drosophile à la surface du tissu. Les œufs de drosophile sont ensuite placés sous le tamis inférieur des cages à parasites afin de permettre aux parasites d’y pondre par-dessus ; en tapotant le dessous du tamis, on élimine les parasites morts, qui pourraient entraver les œufs de drosophile. Les œufs de drosophile permettent aux parasites de pondre par-dessus toute la nuit.
Environ 21 heures sont suffisantes pour qu'un pourcentage élevé des œufs de drosophile soit parasité. Une exposition plus longue risque le superparasitisme. Les principaux composants nécessaires pour l'élevage des œufs après l'exposition aux parasites sont le milieu de culture pour les larves de drosophile, les récipients pour le milieu larvaire et les récipients de nymphose.
Placer trois à trois et demi blocs préparés de tarières contenant des œufs parasités sur un litre et quart de fruit. Régime alimentaire pour larves de mouches. Placer le récipient contenant le régime et les œufs sur un support surélevé et un récipient de nymphose au-dessus d'une couche d'environ un centimètre et demi de vériculite fine ou de sable lavé.
Scotchez les bords du contenant de nymphose avec du ruban adhésif. Veillez à ce qu'il y ait suffisamment d'espace entre le haut du contenant de milieu et le couvercle du contenant de nymphose pour permettre aux larves de sortir et de pénétrer dans la vérmiculite située en dessous. Placez les contenants de nymphose dans une pièce à 27 degrés Celsius et à 80 % d'humidité relative pendant une semaine.
Couvrez les récipients avec un tissu épais pendant les quatre premiers jours après une semaine. Ouvrez les récipients de nymphose et retirez le milieu larvaire. Nous utilisons Bre Dorsals comme drosophile hôte pour élever foia Airis.
D'autres espèces appartenant aux genres Asfa et sitis sont également des hôtes potentiels. S'il y a des larves présentes dans la vermiculite, laissez-les se nymphoser toute la nuit à l'aide d'un tamis. Récupérez les pupes à partir de la vermiculite en commençant par un tamis grossier et un récipient de grande taille.
Ensuite, utilisez un tamis manuel pour éliminer les grumeaux restants de vermiculite Eria contenant des opia. Les Ais peuvent être partiellement séparés des mouches drosophiles non parasitées par. Ainsi, en se basant sur des recherches antérieures, nous collectons uniquement les aria comprises entre 1,65 et 2,26 millimètres de diamètre, qui sont plus petites et contiennent principalement des parasitoïdes de taille insuffisante.
Les mouches sont majoritairement présentes dans les échantillons plus grands. Diverses méthodes peuvent être utilisées pour trier les pupes selon leur taille. Nous décrirons une méthode mécanique utilisant un trieuse sur mesure pour les mouches parasitées collectées.
Le pourcentage de femelles augmente avec la taille. Placez le cône en haut du trieuse mécanique par taille. Un alimentateur vibrant les déplace vers le haut d'une paire de barres roulantes légèrement divergentes à un angle de 30 degrés. Les individus tombent individuellement dans une série de fentes qui se vident par des entonnoirs dans 10 récipients distincts.
Placez les pupes dans la gamme de taille comprise entre 1,65 millimètres et 2,26 millimètres dans une cage d’émergence pendant encore sept jours, jusqu’à ce que la majorité des mouches soient sorties des pupes parasitées. Ensuite, utilisez un ventilateur pour séparer les mouches vides de celles qui contiennent encore des parasitoïdes vivants. Pour maintenir la colonie d’Opia Aus, utilisez une cage de maintien des parasites dotée d’un avant en verre amovible, d’environ 25 centimètres de côté.
La cage est munie d'un tamis de un millimètre carré sur le dessus et sur deux des côtés. L'arrière de la cage est recouvert d'une feuille de caoutchouc comportant un trou de neuf centimètres pour l'accès. Le fond de la cage possède une découpe recouverte à l'intérieur d'un tamis de un à deux millimètres carrés.
Assez grand pour permettre la disposition de deux blocs à vis avec des fruits et des œufs de drosophile afin que le parasite se positionne au-dessus. Les cages de maintien doivent également présenter une partie teintée sur le quart inférieur de la face en verre afin de minimiser l'agglutinement des parasites le long de la face avant de la cage. Placer environ 11 grammes de l'aria sélectionnée dans des récipients en plastique d'environ neuf centimètres de diamètre.
Cela devrait produire environ 600 à 700 parasites par cage. La sélection par taille devrait donner environ 60 % de femelles. Fixer les couvercles grillagés sur les récipients. Les couvercles doivent être recouverts d'une maille de deux millimètres carrés, ce qui permettra aux mouches d'émerger des récipients, tout en retenant les mouches à fruits restantes.
Conserver les parasites à 24 degrés Celsius et à environ 45 % d'humidité relative, avec un photopériode de 12 heures de lumière et 12 heures d'obscurité, ainsi que des courants d'air adéquats. Appliquer du miel filé en fines stries le long du haut des cages au moins trois fois par semaine, ou chaque fois que le miel disponible est sec. Appliquer le miel filé en stries étroites à l'aide du bout du doigt. Remarquer que si les stries sont trop épaisses, le miel risque de couler dans la cage ; si elles sont trop fines, le miel s'assèche rapidement et nécessite des applications fréquentes. Placer des blocs d'humidité (blocs en forme de vis), mesurant 10 centimètres de côté et quatre centimètres de profondeur, sur le dessus des cages afin de fournir de l'humidité aux parasites.
Ces blocs doivent être changés deux fois par semaine. En 2001, nous avons reçu une petite subvention initiale afin de déterminer si nous pouvions introduire des moyens de lutte biologique en Polynésie française pour aider à atténuer la situation, car la mouche des fruits orientale causait à l’époque des infestations incroyables sur tous les fruits tropicaux. Le laboratoire situé ici à Hawaï a effectué 10 expéditions.
Ainsi, chacun de ces envois représentait habituellement environ cent mille Opia air sayings, bien qu’il y en ait eu en réalité un peu plus ; nous expédiions le PPE de la mouche des fruits orientale avec le parasitoïde à l’intérieur, puis nous les faisions émerger. Nous avons donc aménagé un petit laboratoire à Tahiti où nous recevions ces envois, puis nous faisions émerger les FOIA Air Sanus. Ainsi, sur une période d’environ un an, nous avons relâché près d’un million de FOIA Aans.
Dans l'ensemble, c'est l'exemple le plus réussi en dehors d'Hawaï. Lorsque FOIA Aus a été initialement libéré à Hawaï, il est devenu le meilleur exemple de lutte biologique contre les mouches des fruits à travers le Pacifique. Au cours des 10 dernières années, on a assisté à une propagation considérable du complexe Bactrocera Dorsalis à travers le monde.
Ainsi, Bactrocera carbo s'est étendu en Amérique du Sud, au Suriname, et est désormais présent dans le nord du Brésil. Ensuite, une autre espèce appelée Bacter inance, répandue en Afrique, provoque toutes sortes de dégâts. En outre, on observe également la propagation de la bactérie du papayer.
Ce succès ouvre désormais des opportunités pour diffuser ces FOIA Aus en Amérique du Sud, en Afrique et dans d'autres régions d'Asie.
Fopius arisanus est un hyménoptère parasitoïde qui cible les stades œuf-larve des mouches des fruits téphritidés, des ravageurs agricoles importants dans les régions tropicales. Cet article décrit un protocole optimisé d'élevage de F. arisanus à petite échelle, utilisant des matériaux facilement accessibles.
La mise en place de colonies de laboratoire fiables de guêpes parasitoïdes comme Fopius arisanus est essentielle pour faire progresser les programmes de lutte biologique contre les mouches des fruits téphritidés, qui causent des dégâts économiques importants. Des protocoles d'élevage optimisés renforcent la confiance prédictive dans la validation des cibles en permettant une production constante d'agents biologiques, réduisant ainsi les risques mécanistiques liés aux stratégies de gestion des ravageurs. Cela assure une continuité translationnelle, depuis la découverte jusqu'à l'évaluation préclinique, dans les filières de biotechnologie agricole.
La méthode d'élevage s'intègre dans la continuité de la découverte en soutenant la vérification des hypothèses lors de la phase précoce de découverte, en permettant le développement de tests grâce à une production standardisée de parasitoïdes et en alimentant la recherche translationnelle par la validation de l'amplitude d'hôte.