Name: Test Morris Water Maze pour les déficits dapprentissage et de mémoire chez la souris modèle de la maladie dAlzheimer (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Découvrez le test Morris Water Maze pour évaluer l'apprentissage spatial et la mémoire dépendante de l'hippocampe chez les souris modèles de la maladie d'Alzheimer. Cette méthode permet d'analyser les effets de traitements sur les capacités cognitives.

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Ce travail a été soutenu par les Instituts canadiens de recherche en santé du Canada (IRSC), la famille Townsend, et Jack Brown et la famille d&#39;Alzheimer Research Foundation (WAS). WS est le titulaire de la Chaire de recherche du Canada sur la maladie d&#39;Alzheimer. PL a été soutenue par une CRSNG Alexander Graham Bell Canada bourse d&#39;études supérieures de recherche au doctorat et d&#39;une Fondation Michael Smith pour la recherche en santé diplômés bourse d&#39;études supérieurs.

1. Préparation <ol><li> Préparation de l'équipement <ol><li> Obtenir un bassin circulaire avec un diamètre de 150cm et une profondeur de 50cm (Fig. 1). Si vous utilisez la souris noire, une piscine blanc doit être utilisé; si vous utilisez la souris blanche, une piscine noire doit être utilisé. </li><li> Disposer la salle de telle sorte que l'animal testé ne pouvez pas voir l'expérimentateur lors des essais. Ceci peut être accompli avec des rideaux ou des cloisons. </li><li> Placez des repères spatiaux à haut contraste sur la salle, et / ou à l'intérieur de la piscine à un endroit qui serait au-dessus de la surface de l'eau. </li><li> Placez une plateforme 10 cm de diamètre dans la piscine - blanc pour une piscine de blanc, en plexiglas transparent pour une piscine de noir. Remplissez la piscine à l'eau jusqu'à la plateforme est 1cm au-dessus de la surface de l'eau. Laissez l'eau s'équilibrer à température ambiante (22 ° C). Selon la température de l'eau ce qui peut prendre un à trois jours, ou encore l'eau chaude peut être ajouté pour accélérer l'équilibrage. </li></ol></li><li> Logiciels de préparation <ol><li> Calibrer la piscine dans le logiciel informatique afin que la caméra peut créer des informations de distance physique à base de pixels d'information. Divisez la piscine en 4 quadrants. Spécifiez la zone comme une zone plate-forme de variable qui peut changer à chaque procès. Créer cinq sous-zones plateforme - un dans chaque quadrant, et un dans le centre de la piscine. Enregistrer l'étalonnage et l'utiliser pour les jours d'essai restant. (Voir Fig exemple. 2). </li><li> Réglez le temps d'essai maximale de 60 sec. Si la souris trouve la plate-forme avant ce temps, programmer le logiciel pour arrêter le procès lorsque la plate-forme est trouvée. </li><li> Spécifiez le programme pour commencer à suivre automatiquement, lorsque l'expérimentateur quitte la zone de test. Utiliser toute «réflexion minimisation" des options de votre logiciel fournit. </li><li> Suivre la longueur du trajet, la latence s'échapper, et le temps passé dans chaque quadrant. </li></ol></li></ol> 2. Jour 1: Plate-forme visible <ol><li> Programme informatique <ol><li> Chargez le calibrage piscine dans le logiciel de suivi. </li><li> Créer cinq essais, avec un intervalle entre les essais appropriés pour votre expérience. Programme de l'emplacement et la direction plateforme de départ diffèrent à chaque procès. Voir tableau 1 pour un protocole par exemple. </li></ol></li><li> Procédure d'essai <ol><li> Transférer la souris de leur logement à la salle de comportement. Gardez la souris dans une zone où ils ne peuvent pas voir la piscine ou des indices spatiaux. Laissez-les s'adapter à leur nouvel environnement pendant au moins 30 minutes avant le test. </li><li> Placez un drapeau sur la plate-forme pour accroître sa visibilité. </li><li> Pour commencer le test, ascenseur souris à partir de la cage par la base de la queue. Soutien de la souris comme vous l'apporter à la zone d'essai. Lifting de la souris par la base de la queue, placez doucement la souris dans l'eau, face au bord de la piscine. Quitter rapidement la zone de test. </li><li> Si la souris trouve la plate-forme avant le sec 60 de coupure, permettant la souris pour rester sur la plate-forme pour 5 secondes, puis le retourner dans sa cage à la maison. Si la souris ne trouve pas la plate-forme, placez la souris sur la plate-forme et lui permettre d'y rester pendant 20 sec avant de le retourner dans sa cage à la maison. </li><li> Répétez l'opération pour toutes les souris dans le sentier. Commencez chaque procès subséquent avec un emplacement autre plate-forme et le sens de départ, comme vous avez programmé dans votre logiciel. </li><li> Lorsque le test est terminé, retournez la souris de leur logement en question. Les souris sont taries et les normothermie est assuré avant de revenir à l'animalerie. </li><li> En préparation pour le jour suivant, retirer le drapeau de la plate-forme et ajouter de l'eau à la piscine de submerger la plate-forme de 1 cm en dessous de la surface. </li></ol></li></ol> 3. Jours 2-5: plate-forme cachée <ol><li> Programme informatique <ol><li> Chargez le calibrage piscine dans le logiciel de suivi. </li><li> Créer cinq essais, avec un intervalle entre les essais appropriés pour votre expérience. Programme de l'emplacement plateforme de rester dans la même position tout au long des essais et des jours, mais ils ont le sens de départ différents à chaque essai, chaque jour. </li></ol></li><li> Procédure d'essai <ol><li> Pour les souris noire, ajouter non-toxique, blanc, peinture en poudre température de la piscine et bien mélanger. Utilisez suffisamment de peinture tels que la plate-forme immergée n'est pas visible de la surface de l'eau. Pour les souris blanches, une piscine noire avec de l'eau claire et d'une plateforme en plexiglas transparent doit être utilisé. </li><li> Suivez les étapes 2.2.3 à 2.2.6. </li></ol></li></ol> 4. Jour 6: Essai de la sonde <ol><li> Programme informatique <ol><li> Chargez le calibrage piscine dans le logiciel de suivi. </li><li> Créer une zone de non essai avec plate-forme et une direction de départ. La direction de départ la plus éloignée du quadrant plate-forme utilisée, les 2-5 jours est préférable. Réglez la longueur du tracé à 60 sec. </li></ol></li><li> Procédure d'essai <ol><li> Retirez la plate-forme de la piscine. </li><li> Suivez les étapes 2.2.3 à 2.2.6. </li></ol></li></ol> 5. L'analyse des données <ol><li> Pour chaque jour et chaque souris, la moyenne des 5 essais pour donner une longueur de voie unique et la latence d'échappement pour chaque sujet d'essai. Calculer l'erreur combinée de manière appropriée. Pour le jour 6, il suffit de recueillir la longueur du chemin, la latence s'échapper, et le temps passé dans le quadrant plate-forme pour chaque souris. </li><li> Si des différences existent entre les groupes sur une journée, il est probablement un problème avec la vision plutôt que de l'apprentissage et la mémoire. Seuls procéder à l'analyse si aucune différence n'est vu le jour 1. </li><li> Comparer les courbes d'apprentissage pour les Jours 2-5 à l'aide de statistiques appropriées pour votre ensemble de données. Une plus forte courbe représente une acquisition plus rapide des tâches; une plus faible courbe représente un déficit dans l'acquisition de la tâche. Les données du jour 2 au jour 5 sont analysées à l'aide Anowa. </li><li> Pour 6 jours, comparez les pour cent du temps passé dans le quadrant plateforme déjà appris, à l'aide de statistiques appropriées pour votre ensemble de données. Un pourcentage plus élevé de temps passé dans le quadrant plateforme est interprété comme un niveau plus élevé de rétention de la mémoire. </li></ol> 6. Les résultats représentatifs Nous avons utilisé le test Morris Water Maze pour examiner l'effet d'hypoxie sur la pathogenèse AD (7) et l'acide valproïque (VPA) de l 'potentiel pharmaceutique pour le traitement AD (6) dans le modèle de souris transgéniques MA. La figure 3 est le résultat représentatif nous avons signalé dans notre étude sur l'effet de l'APV sur les déficits de la mémoire dans le modèle AD APP23 souris (6). Le jour 1 (essais plateforme visibles), il n'ya aucune différence entre l'APV et de traiter des groupes de contrôle de la latence (figure 3A) et la longueur du trajet (figure 3A), indiquant que les deux groupes ont à moteur similaire et des capacités visuelles. De cela, nous supposons que les souris sont capables de voir la plate-forme et le pavillon-repères dans le milieu environnant, et peut nager de façon acceptable. Pendant des jours 2-5 (jour 1 à 4 du procès plateforme cachée) de l'exemple montre une différence dans la latence d'échappement (figure 3C) et la longueur du trajet (figure 3D) entre les groupes, ce qui suggère que les souris traitées APV nettement mieux que les contrôles au fil du temps. Les résultats sentiers sonde sur la dernière journée (Jour 6) montrent que le nombre de fois où la souris a voyagé dans le troisième quadrant, où la plate-forme cachée était auparavant placé, était significativement supérieure avec le traitement APV par rapport au témoin (Fig. 3E). Ces données indiquent que le traitement améliore significativement l'APV déficits de mémoire vu dans APP23 souris. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig1.jpg" alt="Figure 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 1"> Figure 1. Configuration de l'équipement pour l'eau de Morris test du labyrinthe plateforme visible de jour. La piscine est à l'abri de l'expérimentateur en utilisant des cloisons. Indices spatiaux sont situés sur les murs, et peut-être placée à l'intérieur de la piscine, au-dessus de la surface de l'eau, si désiré. La piscine est remplie d'eau claire, avec la plate-forme située 1cm au-dessus de la surface. Un indicateur a été mis sur la plate-forme pour améliorer la visibilité. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig2.jpg" alt="Figure 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 2"> Figure 2. Capture d'écran de la Toute-Maze Tracking System ™ Vidéo montrant l'étalonnage de la piscine. La piscine est vu de dessus par une caméra de suivi analogiques en noir et blanc avec un numériseur RTV24. Plusieurs zones sont définies dans le logiciel et le pool total est divisé en quatre quadrants. Un cinquième, une zone plate-forme est entré qui peut varier selon les essais, avec cinq emplacements possibles: NO, NE, SO, SE, ou le Centre. Une droite d'étalonnage (ligne cochée dans le centre) est ajouté pour permettre au logiciel pour convertir des distances pixel dans les distances physiques. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig3.jpg" alt="Figure 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figure 3"> Figure 3. Les résultats représentatifs pour la piscine de Morris. Le APP23 de 7 mois souris transgéniques portant humaine suédoises gène mutant APP ont été testés après un mois de la vie quotidienne APV (n = 30 souris) ou de solution véhicule (n = 30 souris) injections. (A) pendant la première journée de tests plate-forme visible, l'APV traités et témoins APP23 souris présentaient un temps de latence de fuite similaires sur la plateforme visible. P&gt; 0,05 par étudiant t-test (B). L'APV-traités et le contrôle APP23 souris avaient similaires distances de natation avant de s'échapper vers la plate-forme visible dans le test de la plate-forme visible. P&gt; 0,05 par étudiant t-test. (C) Dans les tests plate-forme cachée, l'APV traité APP23 souris a montré une latence plus courte pour échapper sur la plate-forme cachée sur le 3 ème et 4 ème jour, P &lt;0,001 par ANOVA. (D) L' APV-traitée APP23 souris avaient une longueur plus courte de natation avant de s'échapper vers la plate-forme cachée sur le 3 ème et 4 ème jour, P &lt;0,01 par ANOVA. (E) Dans l'essai de sonde sur le 6ème jour, l'APV APP23 souris traitées voyagé dans le troisième quadrant, où la plate-forme cachée était auparavant placé, parfois beaucoup plus que les témoins. * P &lt;; 0,005 par étudiant t-test. (Adapté et réimprimé dans le Journal of Experimental Medicine 205, 2781-2789, 2008, Rockefeller University Press, publié initialement dans J. Exp Med doi:... 10.1084/jem.20081588) (6). <table border="1"><tbody><tr><td> </td><td colspan="2"> Jour 1 </td><td> Jour 2 </td><td> Jour 3 </td><td> Jour 4 </td><td> Jour 5 </td><td> Jour 6 </td></tr><tr><td></td><td> Lieu Platform </td><td> Direction de départ </td><td colspan="4"> Lieu Plate-forme: SO partir Localisation comme suit: </td><td> Aucune plate-forme. </td></tr><tr><td> Essai 1 </td><td> SO </td><td> S </td><td> W </td><td> N </td><td> N </td><td> E </td><td> N </td></tr><tr><td> Essai 2 </td><td> NO </td><td> N </td><td> S </td><td> W </td><td> E </td><td> S </td><td></td></tr><tr><td> Essai 3 </td><td> NE </td><td> S </td><td> N </td><td> E </td><td> W </td><td> W </td><td></td></tr><tr><td> Essai 4 </td><td> Centre </td><td> E </td><td> E </td><td> W </td><td> S </td><td> E </td><td></td></tr><tr><td> Essai 5 </td><td> SE </td><td> W </td><td> S </td><td> S </td><td> N </td><td> N </td><td></td></tr></tbody></table> Tableau 1. L'échantillon d'eau du protocole labyrinthe * * Notez comment la fois la position de départ plate-forme et changer de direction le 1er jour, alors que sur la position jours 2-5 plateforme reste constant tandis que les changements de direction de départ. Au jour 6, il n'ya pas de plate-forme et un seul essai. La direction de départ pour le jour 6 est le plus éloigné de l'emplacement de la plate-forme précédente (SW) de sorte que la souris doit parcourir une certaine distance avant d'entrer dans le quadrant plateforme appris précédemment.

<ol><li>Morris, R. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+localization+does+not+require+the+presence+of+local+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Motivation%22%5BJournal%5D)">Spatial localization does not require the presence of local cues.</a> Learning and Motivation. 12, 239-260 (1981).</li>
<li>O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+hippocampal+place+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">A review of the hippocampal place cells.</a> Prog Neurobiol. 13, 419-439 (1979).</li>
<li>Scoville, W. B., Milner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+recent+memory+after+bilateral+hippocampal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Loss of recent memory after bilateral hippocampal lesions.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 20, 11-21 (1957).</li>
<li>Eichenbaum, H., Stewart, C., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+representation+in+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal representation in place learning.</a> J Neurosci. 10, 3531-3542 (1990).</li>
<li>Block, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+ischemia+and+behavioural+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Global ischemia and behavioural deficits.</a> Progress in Neurobiology. 58, 279-295 (1999).</li>
<li>Qing, H., He, G., Ly, P. T., Fox, C. J., Staufenbiel, M., Cai, F., Zhang, Z., Wei, S., Sun, X., Chen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valproic+acid+inhibits+Abeta+production%2C+neuritic+plaque+formation%2C+and+behavioral+deficits+in+Alzheimer%27s+disease+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Valproic acid inhibits Abeta production, neuritic plaque formation, and behavioral deficits in Alzheimer's disease mouse models.</a> J Exp Med. 205, 2781-2789 (2008).</li>
<li>Sun, X., He, G., Qing, H., Zhou, W., Dobie, F., Cai, F., Staufenbiel, M., Huang, L. E., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+facilitates+Alzheimer%27s+disease+pathogenesis+by+up-regulating+BACE1+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Hypoxia facilitates Alzheimer's disease pathogenesis by up-regulating BACE1 gene expression.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , 18727-18732 (2006).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of memory and learning.</a> Int J Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Lipp, H. P., Wolfer, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+modified+mice+and+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Genetically modified mice and cognition.</a> Curr Opin Neurobiol. 8, 272-280 (1998).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural Plast. 6, 41-52 (1998).</li>
</ol>

Toutes les expériences ont été menées en conformité avec l&#39;Université de la Colombie Soins des animaux-Britannique et le comité de l&#39;utilisation et les lignes directrices des IRSC.

Age, sexe, espèce, souche et les différences influent sur les performances MWM (8). Des études indiquent que des souris âgées ont mauvaise performance dans le MWM, tandis que les rongeurs mâles performants que les filles; de plus, flottant est plus prononcée chez les souris que les rats (9, 10). Par conséquent, ces éléments devraient être assimilée à travers toutes les épreuves. Les preuves suggèrent également que les animaux stressés effectuer plus mal dans le MWM (11), donc des facteurs environnementaux qui peuvent causer du stress, comme la température, la lumière et le bruit, doivent être surveillées et maintenues constantes au cours de la tâche.

<table border="1"><tbody><tr><th> Nom du réactif </th><th> Société </th><th> Commentaires (optionnel) </th></tr><tr><td> Système de suivi AnyMaze Vidéo </td><td> Société Stoelting </td><td></td></tr><tr><td> Peinture Tempera </td><td> Groupes Reeves &amp; Poole </td><td> Blanc, en poudre </td></tr></tbody></table>

test morris water maze pour les déficits d&#39;apprentissage et de mémoire chez la souris modèle de la maladie d&#39;alzheimer

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

La piscine de Morris (MWM) a été créé par Richard Morris neuroscientifique G. en 1981 afin de tester l&#39;hippocampe apprentissage dépendant, y compris l&#39;acquisition de données spatiales memoryand à long terme la mémoire spatiale 1. Le MWM est une procédure relativement simple consistant généralement de six essais par jour, le principal avantage étant la différenciation entre le spatial (cachés-plateforme) et non-spatiales (visible plate-forme) les conditions de 2-4. En outre, l&#39;environnement de test MWM réduit les interférences sentiers odeurs 5. Cela a conduit la tâche à être largement utilisé dans l&#39;étude de la neurobiologie et neuropharmacologie de l&#39;apprentissage spatial et la mémoire. Le MWM joue un rôle important dans la validation des modèles de rongeurs pour les troubles neurocognitifs comme la maladie d&#39;Alzheimer 6, 7. Dans ce protocole, nous avons discuté de la procédure typique de MWM pour l&#39;apprentissage et la mémoire des tests et des analyses de données couramment utilisés dans la maladie d&#39;Alzheimer souris modèle transgénique.

La piscine de Morris est une tâche comportementale afin de tester l&#39;hippocampe dépend apprentissage et la mémoire. Il a été largement utilisée dans l&#39;étude de la neurobiologie, la neuropharmacologie et les troubles neurocognitifs dans des modèles rongeurs.

Test Morris Water Maze pour les déficits d&#39;apprentissage et de mémoire chez la souris modèle de la maladie d&#39;Alzheimer

Le labyrinthe aquatique de Morris (MWM) a été mis au point pour la première fois par le neuroscientifique Richard G. Morris en 1981 afin de tester l'apprentissage dépendant de l'hippocampe, notamment...

L'objectif général de l'expérience suivante est de tester l'apprentissage et la mémoire dépendant de l'hippocampe. Le premier jour, la souris est entraînée à trouver une plateforme surélevée marquée par un drapeau, placée aléatoirement dans un bassin d'eau claire, afin que la souris apprenne que la tâche comporte un point de sortie possible. Dans un second temps, la souris est entraînée lors des jours suivants en étant placée dans un bassin d'eau opaque depuis différentes positions, avec la plateforme immergée et fixée à un emplacement précis.Cela permet à la souris d'apprendre l'emplacement de la plateforme en utilisant les indices environnants. Ensuite, la plateforme est retirée le dernier jour et le trajet de nage de la souris est enregistré pendant une minute afin d'évaluer l'acquisition de la tâche. Ainsi, les résultats relatifs à l'apprentissage et à la mémoire sont obtenus.Ce test révèle des altérations de l'apprentissage spatial et de la mémoire, fondées sur les latences d'échappement et la longueur du trajet observées dans trois conditions expérimentales différentes. Le principal avantage de cette méthode par rapport aux méthodes existantes réside dans sa relative simplicité à distinguer les conditions de plateforme cachée spécifique des conditions de plateforme visible non spécifique. En général, les personnes novices dans cette méthode peuvent éprouver des difficultés, car celle-ci est sensible à la manipulation expérimentale.Vous devez vous assurer que les souris ne sont pas stressées pendant les procédures, car cela pourrait affecter les résultats. Cette procédure sera démontrée par Mme Kelly Bromley et les étudiants diplômés de Suède de mes laboratoires. Fixez d'abord un bassin circulaire. Si les souris expérimentales sont noires, utilisez un bassin blanc ; si les souris sont blanches, utilisez un bassin noir.Aménager la pièce à l’aide de séparateurs de manière à ce que les animaux testés ne puissent pas voir l’expérimentateur pendant la phase de test. Placer des repères spatiaux contrastés dans la pièce et sur l’intérieur du bassin à un endroit qui sera situé au-dessus de la surface de l’eau. Remplir le bassin d’eau et laisser l’eau s’équilibrer à la température ambiante.Ensuite, placez une plateforme de 10 centimètres de diamètre dans le bassin, à un centimètre au-dessus de la surface de l'eau, de couleur blanche pour un bassin blanc, ou en plexiglas transparent pour un bassin noir. Étalonnez le bassin dans le logiciel informatique afin que la caméra puisse générer des informations sur les distances physiques à partir des données en pixels.Divisez le bassin en quatre quadrants. Définissez la zone de la plateforme comme une zone variable, pouvant changer à chaque essai. Créez ensuite cinq sous-zones de plateforme, une dans chaque quadrant et une au centre du bassin.Enregistrez l'étalonnage et utilisez-le pour les jours de test restants. Ensuite, définissez la durée maximale d'essai à 60 secondes. Si la souris trouve la plateforme avant ce délai, programmez le logiciel pour arrêter l'essai dès que la plateforme est trouvée.Spécifiez également le programme pour commencer automatiquement le suivi lorsque l'expérimentateur quitte la zone de test. Utilisez toutes les options de minimisation des réflexions fournies par le logiciel. Enfin, suivez le trajet, la longueur, l'échappement, la latence et le temps passé dans chaque quadrant.Le jour du test, transférez les souris de leur lieu d'hébergement vers la salle de comportement, dans une zone où elles ne peuvent pas voir le bassin ni les repères spatiaux. Laissez-les s'habituer au nouvel environnement pendant au moins 30 minutes. Avant le test, chargez l'étalonnage du bassin dans le logiciel de suivi.Créez cinq essais avec un intervalle inter-essai approprié, en faisant varier à chaque essai la position de la plateforme et la direction de départ. Placez un drapeau sur la plateforme afin d'en augmenter la visibilité. Pour commencer le test, prenez la souris par la base de la queue depuis sa cage d'origine, en la soutenant durant son transfert vers la zone de test.Ensuite, placez délicatement la souris dans l'eau, face au bord du bassin. Quittez rapidement la zone de test. Si la souris trouve la plateforme avant le temps limite de 62 secondes, laissez-la rester sur la plateforme pendant cinq secondes, puis remettez-la dans sa cage d'origine.Si la souris ne trouve pas la plateforme, placez-la sur la plateforme et laissez-la y rester pendant 20 secondes avant de la ramener à sa cage d’origine. Répétez cette procédure pour toutes les souris de l’essai. Commencez chaque essai ultérieur avec une position de plateforme et une direction de départ différentes, conformément au logiciel du programme.Lorsque les tests sont terminés, ramenez les souris à leur lieu d'hébergement en prévision du jour suivant. Retirez le repère de la plateforme et ajoutez de l'eau supplémentaire dans le bassin afin de plonger la plateforme à un centimètre sous la surface. Chargez l'étalonnage du bassin dans le logiciel de suivi et créez cinq essais avec un intervalle inter-essai approprié.Ensuite, programmez la position de la plateforme pour qu'elle reste identique durant tous les essais et toutes les journées, mais faites varier la direction de départ à chaque essai de chaque journée. Pour les souris noires, ajoutez de la peinture blanche tempéra non toxique en poudre dans le bassin et mélangez soigneusement. Utilisez suffisamment de peinture pour que la plateforme immergée ne soit pas visible depuis la surface de l'eau.Procéder au test individuel des souris dans l'eau comme décrit précédemment pour l'essai de sonde final. Charger l'étalonnage du bassin dans le logiciel de suivi. Créer un essai sans zone de plate-forme et avec une seule direction de départ.De préférence, la direction de départ la plus éloignée du quadrant contenant la plateforme utilisé lors des jours deux à cinq. Réglez également la durée du parcours à 60 secondes. Retirez maintenant la plateforme du bassin et testez individuellement les souris dans l'eau comme décrit précédemment ; pour chaque jour et chaque souris, faites la moyenne des cinq essais afin d'obtenir une longueur de trajet unique et une latence d'échappement pour chaque sujet testé.En outre, analyser et interpréter les données selon les modalités décrites dans l'article accompagnant l'étude, en utilisant le labyrinthe aquatique de Morris. Des souris transgéniques PP 23 âgées de sept mois et porteuses du gène humain A PP portant la mutation suédoise ont été testées après un mois d'injections quotidiennes d'acide valproïque ou d'une solution véhicule, lors du premier jour des tests avec plateforme visible. Les souris PP 23 traitées à l'acide valproïque et les souris témoins ont présenté une latence similaire pour s'échapper vers la plateforme visible.Les souris APP23 traitées au VPA et les souris APP23 contrôles ont parcouru des distances de nage similaires avant de s'échapper sur la plateforme visible. Lors du test de la plateforme visible et des tests de plateforme cachée réalisés le troisième et le quatrième jour, les souris APP23 traitées au VPA ont présenté une latence plus courte pour s'échapper sur la plateforme cachée. Le troisième et le quatrième jour, les souris APP23 traitées au VPA ont parcouru une distance de nage plus courte avant de s'échapper sur la plateforme cachée.Lors de l'essai de sonde au sixième jour, par rapport aux souris témoins, les souris traitées au VPA et au PP 23 ont traversé significativement plus de fois le troisième quadrant où la plateforme cachée avait été placée précédemment. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de garder à l'esprit la nécessité de surveiller les facteurs environnementaux pouvant induire un stress, tels que le bruit, la température et la lumière. Après cette procédure, d'autres méthodes telles que le conditionnement à la peur ciblé et contextuel peuvent être réalisées afin de répondre à des questions supplémentaires, comme savoir si les déficits d'apprentissage sont spécifiques à l'hippocampe ou s'ils font partie d'un problème neurocognitif plus large, qui pourrait inclure l'amygdale.

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Dans cette vidéo, nous décrivons le test du labyrinthe aquatique de Morris avec déplacement de plate-forme, une tâche de navigation utilisée pour étudier la mémoire de travail chez les rongeurs.

Le labyrinthe d’eau avec déplacement de plate-forme : une méthode pour évaluer la mémoire de travail

Ce manuscrit décrit un protocole de labyrinthe aquatique de Morris (MWM) conçu pour être utilisé avec un modèle murin couramment utilisé de la maladie d’Alzheimer. Le MWM est largement utilisé dans les modèles de souris transgéniques. La mise en œuvre d’une procédure sensible à la déformation de fond du modèle murin est essentielle pour détecter les différences entre les groupes.

Labyrinthe aquatique de Morris Test: Optimisation pour les souris de souche et environnement de test

Pour étudier la maladie de co-morbide de la maladie d'Alzheimer (AD) et l'état de la course dans un modèle roman, trois tâches de comportement sont décrites qui permettent d'évaluer à la fois le contrôle moteur et comportements cognitifs. Ces tâches comprennent la tâche de faisceau à pied, tâche de cylindre et labyrinthe aquatique de Morris.

Moteur et hippocampique apprentissage spatial et dépendante Référence évaluation de la mémoire dans un modèle de rat transgénique de la maladie d&#39;Alzheimer avec des maladies

Nous présentons ici un protocole pour un test de cognition spécifique à la souris qui ne nécessite pas de nage. Ce test peut être utilisé pour distinguer avec succès les souris traumatiques traumatiques provoquées par l'impact cortical contrôlé par des témoins simulés.

Évaluation de la déficience de la mémoire spatiale dans un modèle de souris de lésions cérébrales traumatiques à l&#39;aide d&#39;un labyrinthe radial de la marche d&#39;eau

Ici, un protocole pour mener les essais de labyrinthe d'eau de Morris pour évaluer la capacité d'apprendre et la mémoire des souris modèles de la maladie d'Alzheimer et pour évaluer l'effet de l'acupuncture manuelle pour les traiter est décrit.

Analyse de la capacité d'apprentissage et de mémoire dans un modèle de souris de la maladie d'Alzheimer à l'aide du labyrinthe d'eau Morris

Nous présentons une méthode à faible coût pour concevoir et construire un headstage la lumière pré-amplificateur du système avec enregistrement simultané de neurones et de la capacité de stimulation. Ce dispositif peut être imperméabilisé pour une utilisation chez les animaux de natation.

Conception et construction d&#39;un Headstage rentable pour la stimulation neuronale et enregistrement simultanés dans le labyrinthe de l&#39;eau

Découvrez le test Morris Water Maze pour évaluer l'apprentissage spatial et la mémoire dépendante de l'hippocampe chez les souris modèles de la maladie d'Alzheimer. Cette méthode permet d'analyser les effets de traitements sur les capacités cognitives.

Test Morris Water Maze pour les déficits d'apprentissage et de mémoire chez la souris modèle de la maladie d'Alzheimer

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