Isolement de cellules cérébrales à partir de larves de poisson-zèbre : une technique pour obtenir des neurones, des macrophages et des microglies intacts à partir de tissu cérébral de poisson-zèbre

Le cerveau du poisson-zèbre est constitué de neurones - des cellules nerveuses qui jouent un rôle important dans le traitement de l’information. De plus, il comprend une population de cellules immunitaires de soutien, y compris des macrophages et des microglies, qui habitent l’espace interneuronal.

Pour isoler tous ces types de cellules cérébrales d’un poisson-zèbre, il faut d’abord prendre des larves de poisson-zèbre anesthésiées dans une boîte de Pétri contenant un milieu approprié.

Visualisez le poisson-zèbre au microscope stéréoscopique et transectez les têtes larvaires au-dessus du sac vitellin pour garder le cerveau intact.

Transférez les têtes excisées dans un homogénéisateur rempli de milieux pré-refroidis, placé sur de la glace. Les basses températures aident à prévenir la dégradation des cellules cérébrales.

À l’aide d’un pilon, homogénéisez le tissu cérébral du poisson-zèbre. L’homogénéisation désintègre la matrice extracellulaire et initie la dissociation des neurones, des macrophages et de la microglie du tissu cérébral.

Cette étape sépare également la myéline - une couche isolante riche en lipides - des neurones.

Passez l’homogénat dans une passoire pour piéger les gr