Induction du glioblastome à l’aide de la transposition médiée par SB : une technique de génération d’un nouveau modèle de souris à l’aide de l’intégration médiée par transposon du plasmide SB dans le cerveau d’une souris néonatale

Commencez par prendre un tube contenant un mélange de plasmides. Le plasmide de la belle au bois dormant ou transposon SB est conçu pour porter un élément transposable comprenant un oncogène induisant le glioblastome d’origine humaine pris en sandwich entre deux séquences répétées inversées. De plus, ce mélange contient un plasmide de transposase SB qui possède un élément exprimant l’enzyme transposase.

Maintenant, ajoutez un réactif de transfection approprié dans le tube. Aspirez le mélange d’injection dans une seringue munie d’une micro-aiguille. Ensuite, fixez un bébé souris anesthésié en position couchée sur un cadre stéréotaxique. Visualisez la région de la tête du chiot pour localiser les sutures crâniennes. Positionnez la micro-aiguille au-dessus des sutures crâniennes.

Injectez le mélange dans le ventricule latéral - une cavité à l’intérieur du parenchyme cérébral. Par la suite, la solution est dispersée dans le parenchyme cérébral, où les molécules réactives de transfection facilitent l’entrée des plasmides dans les cellules. Une fois à l’intérieur de la cellule, le plasmide transposase exprime les molécules de l’enzyme transposase, qui reconnaissent les séquences répétées