Détection d’anticorps antiglycanes circulants à l’aide d’une matrice de glycanes imprimée

Commencez avec une glycopuce fonctionnalisée avec des sous-réseaux de glycanes imprimés organisés en blocs de réseaux.

Chaque tache du sous-réseau représente un glycane distinct - un polymère à base de glucides avec des variations dans la composition monosaccharide, la longueur de la chaîne et le motif de ramification.

Traitez la glycopuce avec un tampon de blocage pour bloquer les sites d’interaction non spécifiques.

Transférez la glycopuce et introduisez du sérum de souris dilué dans un tampon supplémenté en surfactant pour minimiser l’agrégation d’anticorps. Incuber sous agitation.

L’agitation favorise une distribution uniforme du sérum, facilitant la liaison sélective des anticorps anti-glycanes à des glycanes spécifiques en fonction de caractéristiques moléculaires distinctes.

Laver avec des concentrations décroissantes d’un tampon contenant un tensioactif pour perturber la liaison non spécifique et rincer.

Superposez la glycopuce avec des anticorps secondaires conjugués à la biotine anti-souris, interagissez avec des anticorps anti-glycanes pré-liés et lavez.

Introduire de la

streptavidine marquée au fluorophore, se liant à des anticorps secondaires biotinylés. Lavez et enlev