Name: Titre encapsulation cellulaire par des gouttelettes (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T13:09:54.000+00:00
Duration: 13 min 10 s
Description: Découvrez l'encapsulation cellulaire pour l'impression 3D en biologie cellulaire utilisant des fibroblastes de souris. Cette méthode avance l'ingénierie tissulaire et la médecine régénérative.

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NIH3T3 la préparation des cellules: A. Cellules pour l&#39;éjection <ol><li> Trypsiniser cellules, puis diluer 1:1 avec les médias de cellules, et le transfert à partir d&#39;un flacon T75 à un tube Falcon de 15 ml </li><li> Isoler les cellules en un culot par centrifugation, aspirer le surnageant et laver les cellules avec du DPBS </li><li> Isoler les cellules en un culot à nouveau, et aspirer le surnageant </li><li> Resuspendre les cellules dans les médias </li><li> Déterminer la densité des cellules avec des hémocytomètre (~ 200 x 10 4 cellules / mL par flacon T75) </li><li> Solution cellulaire Centrifuger, aspirer le surnageant et remettre en suspension dans le montant approprié des médias pour différentes concentrations cellulaires </li></ol> Cellule d&#39;éjection B. <ol><li> Cellules Vortex avant de l&#39;utiliser pour l&#39;éjection </li><li> Transférer 200 ul de solution de la cellule dans la seringue </li><li> Réglez le mode approprié sur un générateur d&#39;impulsions <ol><li> Pour éjecter des gouttelettes d&#39;unique et de multiples gouttelettes (rafales), mis en générateur d&#39;impulsions à «E. BUR&quot; mode </li><li> Pour l&#39;éjection de gouttelettes en continu, mis en générateur d&#39;impulsions à &quot;NORM&quot; mode </li></ol></li><li> Modifier les paramètres du signal <ol><li> Réglez le niveau de haute et basse tension de sortie niveau: HIL à 5 V et de LOL à 0 V et assurez-vous de la «LIM» est allumée </li><li> Régler le signal comme un signal carré </li><li> Changer la quantité de temps l&#39;électrovanne est ouverte pour l&#39;éjection de gouttelettes en changeant la valeur de &quot;IFD&quot; ou le changement cyclique («devoir») </li><li> Modifier la fréquence d&#39;éjection en changeant la valeur de &quot;PER&quot; </li><li> Modifier le nombre de gouttelettes éjectées dans un élan en changeant la valeur de &quot;BUR&quot; </li></ol></li><li> Solution cellulaire éjection sur le substrat préparé pour l&#39;imagerie au microscope </li></ol> Coloration C. <ol><li> Maquillage solution de colorant avec 0,5 uL calcéine-AM et 2 uL d&#39;éthidium homodimère par ml de DPBS </li><li> Plongez substrat préparé dans une solution de teinture </li><li> Laisser l&#39;échantillon à incuber pendant 10 minutes à 37 ° C avant d&#39;imagerie </li></ol> Validation Experiment <ol><li> Sur un Nikon Eclipse TE-2000 U microscope à fluorescence <ol><li> Logiciels avancés spot (Diagnostics, Inc) </li><li> Live / Dead Assay </li></ol></li></ol>

Les auteurs n'ont rien à divulguer.

<table><tbody><tr><td>Microscope fluorescent</td><td></td><td>Nikon Instruments</td><td>Eclipse TE-2000 U</td><td></td></tr><tr><td>Éjecteur de cellules à valve solénoïde</td><td></td><td></td><td></td><td>Fréquence de fonctionnement : 1 kHz, 30 psi, 50 nl~0,5 µl. Pilote de valve 12 V : courant de commande 2,5 A</td></tr><tr><td>Réservoir d'air portable de 5 gallons</td><td></td><td>Coleman</td><td>Powermate CT5</td><td>Pression d'air : 30 psi</td></tr><tr><td>Régulateurs de pression</td><td></td><td>Marsh Bellofram</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Générateur d'impulsions</td><td></td><td></td><td>HP8112A</td><td>Génération de fréquence d'activation : 50 MHz</td></tr><tr><td>Plateau XYZ</td><td></td><td>Newmark Systems</td><td></td><td>Avec moteur pas à pas : plateau XY course 6 pouces (NLS4-6-25), plateau Z course 2,5 pouces (NLS4-2,5-25), contrôleur 3 axes (NSC-G3), résolution 0,1 µm</td></tr><tr><td>NIH 3T3</td><td>Ligne cellulaire</td><td></td><td></td><td>fibroblastes</td></tr><tr><td>Trypsine</td><td></td><td></td><td></td><td>Solution à 0,05 %</td></tr><tr><td>Milieu pour cellules NIH 3T3</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td> tampon</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>T75</td><td></td><td></td><td></td><td>Flacons de culture tissulaire</td></tr><tr><td>Tubes coniques en plastique</td><td></td><td></td><td></td><td>15 ml, pour culture tissulaire</td></tr></tbody></table>

titre encapsulation cellulaire par des gouttelettes

Title Cell Encapsulation by Droplets

Titre encapsulation cellulaire par des gouttelettes

Je m'appelle Hang Moon. Je travaille avec le professeur des préservatifs. Lui et moi travaillons avec l'étape XYJ pour créer une structure tridimensionnelle de cellule.Bonjour, je suis PE et Lynn, et je travaille sur le projet d'impression cellulaire avec encapsulation cellulaire et milieux et gels. C'est un solénoïde destiné à l'éjection d'une cellule et d'une mixture cellulaire d'aros au-dessus du milieu cellulaire. Le robinet solénoïde est activé par deux lignes de signal.La ligne de signal provient d'une carte sèche ici. Le signal provient d'ici. Cette ligne traverse cette autre ligne, celle-ci étant le premier générateur de fonction.Tout d'abord, le flux est généré par notre méthode programmée. Ainsi, si vous le souhaitez, vous pouvez modifier le débit en changeant le programme à l'aide de la ligne de commutation, ou bien en contrôlant ce générateur de processus depuis l'ordinateur. La vanne cellulaire s'ouvre et se ferme grâce à un signal électrique, mais la cellule est alimentée par cette ligne.La cellule et le milieu ou le gel d'agar sont fournis par l'intermédiaire de seringues. Les seringues situées dans l'eau, la pression à l'intérieur de la seringue est exercée par l'ai

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Encapsulation Cellulaire dans les hydrogels 3D pour l&#39;ingénierie tissulaire

La combinaison de génération goutte monodispersée avec commande d'inertie de cellules et des particules, on décrit un procédé pour encapsuler un nombre désiré de cellules ou de particules dans une seule goutte à des taux kHz. Nous démontrons l'efficacité deux fois supérieures à celles d'encapsulation non ordonnée pour les gouttes simple et double-particules.

High Throughput unicellulaire et multiples cellules de micro-encapsulation

Cette vidéo montre une technique d’immunocoloration de cellules encapsulées dans un hydrogel 3D. La culture d’hydrogel contenant des cellules progénitrices neurales est fixée, perméabilisée et traitée avec une solution bloquante pour éviter l’immunocoloration non spécifique. Un cocktail d’anticorps primaires est ajouté pour lier des protéines spécifiques, suivi d’anticorps secondaires marqués par fluorescence et d’une coloration nucléaire. L’échantillon est ensuite monté sur une lame et observé...

Immunomarquage de cellules encapsulées dans un système d’hydrogel 3D

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Encapsulation de cellules de mammifères dans des perles d&#39;alginate à l&#39;aide d&#39;un récipient agité simple

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Méthode fondée sur un embout de la Pipette pour semis de cellules aux plateformes microfluidiques Droplet

Présenté ici est un protocole pour l’utilisation de l’alginate comme un polymère dans la microencapsulation des cellules immortalisées pour la livraison à long terme des produits biologiques aux yeux de rongeur.

Technologie cellulaire encapsulée pour la livraison de produits biologiques à l’œil de souris

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Étude de la thérapie améliorée par cavitation

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