October 1st, 2007
Je m’appelle Hang Moon. Je travaille avec le professeur de préservatifs. Lui et moi travaillons avec la platine XYJ pour créer une structure 3D de cellule.
Bonjour, je m’appelle PE et Lynn et je travaille sur le projet d’impression cellulaire avec l’encapsulation cellulaire, les supports et les gels. Il s’agit d’un solénoïde pour l’éjection d’une cellule et d’un mélange de cellules d’aros sur un milieu cellulaire. La soupape Soo est activée par deux lignes de signal.
La ligne de signal provient d’une planche sèche ici. Le signal est venu d’ici. Cette droite passant par cette droite, celle-là est la fonction premier générateur.
Donc, le premier est généré par notre méthode programmée. Donc, si vous voulez, vous voulez changer le porte-monnaie, vous pouvez changer le programme avec la ligne qui commute ou vous pouvez contrôler ce générateur de processus sur l’ordinateur. La valve cellulaire est ouverte et fermée par le signal électrique, mais la cellule est alimentée par cette ligne.
La cellule et le milieu ou l’agrogel sont alimentés par les seringues. Les seringues à l’intérieur de l’eau, à l’intérieur de la seringue est la lumière de presse par l’air. L’air sous pression est fourni à partir d’un réservoir comme ici la ligne.
Ainsi, la petite ligne et l’air isé volent à travers le filtre à air. Le filtre à air discrimine la poussière et d’autres types de saleté. C’est le générateur de pression que nous l’appelons, génère le signal utilisé pour ouvrir la cloche d’air solaire ou fermer l’ordinateur de la vanne d’air solaire est connecté via le connecteur P-I-B-U-S-V.
On peut donc utiliser le port USB par directement notre ordinateur, l’ordinateur portable. Donc, on est connecté à ce côté ici. Ensuite, nous pouvons contrôler via l’ordinateur portable de contrôle ici.
Donc, si nous voulons synchroniser le mouvement de la scène et l’ouverture de la cloche, elle peut être contrôlée par le même contrôleur qu’un ordinateur portable. Ainsi, nous pouvons contrôler le moment où il s’ouvre, quand il se ferme, et quand il bouge et quand il s’arrête. Et nous pouvons synchroniser le mouvement et la cloche d’ouverture.
Cette scène est la scène motorisée. Il est automatiquement déplacé automatiquement par la ligne de signal de mort et le moteur. La motorisation est donc de 0,1 micromètre.
Ainsi, il peut idéalement tracer la ligne jusqu’à 100 millimètres. L’axe du jet se déplace, monte et descend de cette façon. Ainsi, il contrôle le capuchon entre le substrat et la ceinture solaire.
Ainsi, il peut contrôler la hauteur d’éjection. Ce substrat est le connecté aux étages XY ici, X ici et Y là. Il s’agit donc de se déplacer autour d’un plan XY.
Il dessine donc une démo de fonctionnalité à droite des étages est de trois X, X, Y et G.So l’axe jet con jet ou l’axe XY est contrôlé par le signal ici. La ligne de signal est donc connectée au contrôleur de mouvement ici. Ce contrôleur de mouvement n’a pas d’interrupteur manuel du tout car il ne peut pas être contrôlé manuellement.
Il est contrôlé par l’ordinateur portable. L’ordinateur portable est donc connecté. A l’arrière du contrôleur, on a trois x pour une cellule d’impression à jet XY.
Il produit donc trois types de signaux différents indépendamment. Et puis le contrôleur de mouvement est communiqué via les connecteurs rf 2, 3, 2 est directement connecté à l’USV. Et puis l’USV est connecté à l’ordinateur portable.
Donc, l’emprunteur contrôlé par ordinateur portable. Nous utilisons le programme AutoCAD, nous faisons un chemin de génération A comme ça bam. Et puis ça passe au langage machine comme ça.
Donc, le langage machine est transféré à ce genre de caractère simple et de nombres comme ça. Il y a chaque position liée aux étapes X, Y, Z ici je choisis le fichier, je contiens ce type de programme, puis j’ouvre le programme de téléchargement de cette façon. Et puis je choisis dans un fichier comme c’est exactement la même chose, le fichier texte.
Seul le fichier texte est téléchargé, choisissez le fichier texte et téléchargez automatiquement de l’ordinateur portable à l’exécutif du contrôleur de mouvement, puis il passe au caractère BAM comme je l’ai mentionné précédemment, BAM. Dans ce flacon se trouvent N IH 3G trois cellules de fibroblastes de souris. Et je vais d’abord aspirer les vieux médias.
Ce processus consiste à faire passer les cellules et les cellules sont collées au fond du ballon. Donc, après avoir aspiré le milieu, je vais mettre six RYS dans lesquels se trouve une enzyme. D’accord? Ainsi, une fois que la trypsine a été introduite dans le ballon, nous devons attendre trois à cinq minutes pour que les cellules se détachent du fond du ballon.
Nous sommes maintenant prêts à mettre le milieu et à faire passer les cellules dans un tube de centrifugation. Il s’agit d’une dilution un à un. Je mets donc six mil de ce média ici et je vais laver un peu les scies pour m’assurer qu’elles sont toutes passées.
Et maintenant, les cellules sont prêtes à être centrifugées dans ce tube. Maintenant, nous allons centrifuger ces cellules à mille tr/min en trois à cinq minutes. Maintenant que les cellules ont été transformées en une pastille, je vais aspirer le surnageant.
Maintenant, je vais laver les cellules avec du PBS. Et c’est pour, c’est pour colorer les cellules. Les colorants que nous utilisons sont des substrats estérases.
D’accord, maintenant nous allons centrifuger à nouveau et faire tourner les cellules en un palais. Et je vais aspirer le PBS et je vais résiner les cellules. Je suis dans les médias pour être compté.
Je mélange les cellules de sorte que lorsque nous prélevons un échantillon, la concentration soit uniforme dans tout le tube. Maintenant, je vais prendre une centaine de microlitres de cellules pour mesurer la densité cellulaire. Maintenant, je mets une centaine de microlitres de type et bleu, ce qui est une tache.
Nous allons attendre trois à cinq minutes pour que la coloration pénètre dans les membranes des cellules mortes. Quand nous comptons les cellules, les bleues, nous ne les comptons pas. Les cellules sont prêtes à être comptées avec l’hémocytomètre, je vais transférer 50 microlitres du mélange cellulaire de chaque côté de l’hémocytomètre.
D’accord, je vais le recouvrir avec un côté diapositive en verre. Il y a deux côtés à l’hémocytomètre. Je vais compter le premier côté et après avoir compté les deux côtés, je vais prendre la moyenne, puis multiplier par deux car nous avons eu une dilution un à un avec le type en bleu.
Donc, en gros, notre densité cellulaire sera de 135 fois 10 puissance quatre cellules par mil. Pour notre expérience, nous utiliserons une solution cellulaire avec une concentration d’un demi-million de cellules par mil. Et donc, puisque nous avons 13,5 millions de cellules, je vais réanimer les cellules en suspension dans 27 millions de milieux.
Nous utilisons deux types de teintures différentes. Il s’agit d’un test vivant mort à partir de sondes moléculaires. Notre première coloration s’appelle le calcium.
Notre deuxième coloration est appelée homodimère AUM. Il colore les cellules mortes. Nous utilisons l’excitation bleue pour obtenir une fluorescence verte et l’excitation verte pour obtenir une fluorescence rouge Pour ces deux colorants, lorsque nous imaginons notre solution de dés sera préparée dans PBS.
Donc, d’abord, je vais transférer cinq mil de PBS dans un tube de solution saline tamponnée au phosphate. C’est une solution saline. Maintenant, je vais ajouter un demi-litre de calcium par mil.
Maintenant, j’ajoute 2,5 microlitres de calcium am dans le tube et deux microlitres d’un homodimère par mil de PBS. Voici la machine btex. Il permet de bien répartir la cellule et le support dans l’ensemble du volume.
Maintenant, nous chargeons la cellule de 200 microlitres sur les sept ici. Et puis nous mettons le bouchon, c’est un étanche et hermétiquement scellé comme ça, ici j’ouvre la soupape et ensuite c’est la pression, l’air léger entre et ensuite j’ajuste la courroie comme ça. Et puis cela change la pression.
Alors je m’adapte. La pression est de cinq PSI. La pression à l’intérieur du tube est de cinq PSI.
D’ici à ici, il s’est connecté à travers l’intérieur du trou. Il suffit donc d’ouvrir la cloche ici, puis d’injecter la cellule avec la pression de cinq PSI, puis de commencer à s’ouvrir. Et puis la soupape Sona commence à fonctionner.
Et puis nous roulons le substrat. Son substrat n’est qu’un simple verre à lames. Et puis nous chargeons la bonne portion et je mets du ruban adhésif pour fixer le substrat comme ça, n’est-ce pas ?
Et tout simplement, je le répare. Nous réglons donc l’ensemble de la cellule et de la vanne et du substrat pendant le déplacement de l’ary, commençons à travailler. Nous sommes donc tout configurés, puis nous ouvrons le démarrage de la soupape.
Et puis nous déplaçons la scène comme ça, n’est-ce pas ? Ensuite, nous créons un motif sur le substrat, un motif sur le substrat et un caractère bam. Je vais immerger ces gouttelettes que nous avons imprimées dans cette solution de colorant que nous avons fabriquée plus tôt.
Et maintenant, les gouttelettes seront incubées pendant 10 minutes, puis imagées. Tout d’abord, je vais ajuster l’image à travers l’oculaire. Notre première image n’est qu’une image en champ clair.
Je vais éteindre la lumière et changer le filtre pour que nous ayons une excitation bleue, qui montrera une fluorescence verte. Et la troisième image que nous prendrons est celle des cellules mortes, qui est la coloration de l’homodimère Thm. Et avec la lumière verte, nous obtiendrons une fluorescence rouge.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Cet article traite du développement d'une structure cellulaire 3D à l'aide d'un projet d'impression cellulaire. La recherche implique l'encapsulation cellulaire et l'utilisation de médias et de gels pour améliorer le processus d'impression.
This work presents a programmable microfluidic platform for precise cell encapsulation and deposition, enabling reproducible 3D cellular architectures. The system supports early-stage target validation by providing controlled microenvironments for phenotypic screening and mechanistic de-risking of cellular responses. Integration with automated staging and valve control enhances throughput and reproducibility in discovery workflows.
The method positions itself within the discovery continuum from Early Discovery to Lead Identification by enabling hypothesis-driven cellular patterning and quantitative response measurement.