Une technique simplifiée pour produire un modèle de plaie ischémique

L’objectif global de l’expérience suivante est de permettre de créer des plaies ischémiques, non seulement chez les lapins normaux, mais aussi chez les lapins à résistance réduite tels que ceux âgés ou diabétiques. Toutes les techniques actuellement utilisées pour la création de plaies ischémiques sont très invasives, et jusqu’à présent, aucune de ces techniques ne peut être utilisée chez les animaux diabétiques. Cette procédure utilise une chirurgie mini-invasive qui commence par la réalisation de trois petites incisions cutanées sur les trois faisceaux vasculaires.

L’étape suivante consiste à isoler et à protéger la veine centrale et le faisceau vasculaire du dorlotement afin que la circulation sanguine vers l’oreille soit réduite mais pas totalement éliminée. Enfin, les vaisseaux, les nerfs et les tissus sous-cutanés restants sont tous sectionnés ou ligaturés via les incisions cutanées. L’ischémie de l’oreille est confirmée par l’absence de pouls artériel, l’aspect de l’oreille, la différence de température et la saturation sous-cutanée en oxygène.

Cette chirurgie mini-invasive peut sembler difficile à réaliser, mais elle est en réalité très facile. Le principal avantage de cette technique est qu’elle présente très peu de perturbations cutanées. Depuis que nous avons publié cette technique pour la première fois en 2007, nous avons reçu de nombreuses questions.

Depuis, nous avons encore simplifié cette procédure. Pour le rendre encore plus facile à faire sans utiliser un microscope, commencez par peser le lapin sélectionné, anesthésiez le lapin à l’aide d’un mélange de kétamine et de xylazine. Surveillez les signes vitaux du lapin, trois faisceaux vasculaires qui alimentent l’oreille peuvent être identifiés sur la face dorsale.

Il s’agit du faisceau central, qui est le plus grand avec des garanties reliées à d’autres navires. Le faisceau de dorlotement dans lequel l’artère est généralement très petite ou absente, et le faisceau crânien. Sur la face ventrale, la peau distale ne reçoit pas d’apport sanguin des vaisseaux proximaux.

Au lieu de cela, les faisceaux de vaisseaux sur l’oreille dorsale ont de nombreuses branches pénétrantes à travers le cartilage pour fournir un apport sanguin à la peau ventrale distale. Chez certains lapins, un très petit vaisseau sous-cutané se trouve également sur la face ventrale, qui ne fournit pas de sang à plus d’un tiers de la peau ventrale. Dans une incision cutanée circonférentielle ouverte, il n’y a essentiellement pas de saignement d’une incision ventrale.

Avant de continuer, assurez-vous que le lapin ne réagit pas aux stimuli de la douleur à l’aide d’un pincement des orteils et d’un réflexe oculaire, protégez les yeux de l’animal en appliquant une larme artificielle. Pommade. Gardez le lapin au chaud pendant l’opération avec un coussin chauffant. Ensuite, à l’aide de bétadine et d’alcool, frottez les deux oreilles et les peaux environnantes drapez le lapin, de sorte que seules les deux oreilles sont exposées.

Une oreille sera rendue ischémique tandis que l’autre servira de contrôle. Les instruments utilisés pour la chirurgie sont un couteau chirurgical avec une lame numéro 15, deux paires de ramasseurs, l’un pour la peau et l’autre pour les autres tissus mous. Trois pinces à moustiques, une ou deux paires de micro-ciseaux incurvés, une paire de petits ciseaux pour couper les sutures et les tissus durs, un porte-aiguille et quelques poinçons en acier inoxydable.

Commencez la chirurgie en identifiant les trois pédicules vasculaires en fonction des artères et des veines. À l’aide d’une lame numéro 15. Faites soigneusement une incision cutanée verticale sur le pédicule vasculaire central.

Isolez la veine centrale des tissus environnants et protégez-la. Cette étape encercle. La veine centrale pour la rétraction.

Disséquez le nerf central librement. Il se trouve normalement du côté du dorlotet de la veine. Le nerf est coupé avec des ciseaux.

Disséquez l’artère centrale librement. Il se trouve normalement du côté crânien et plus profond que la veine, attache l’artère et la divise. Nettoyez les tissus autour de la veine centrale sur le cartilage de l’oreille.

Une deuxième incision cutanée est pratiquée sur le pédicule du dorlot. Pour préserver le paquet. Les vaisseaux sont disséqués librement et entourés pour les protéger.

Ceci est particulièrement utile lorsque la veine est large, comme chez ce lapin. Faites un tunnel entre celle-ci et la première incision. Coupez les tissus sous-cutanés sur le cartilage.

Une troisième incision cutanée est pratiquée sur le faisceau crânien. Tout ce faisceau est ligaturé et séparé. La peau du troisième paquet est ouverte.

Cette veine est très proche de la peau, il ne faut donc pas couper trop profondément. L’ensemble du faisceau de récipients est ensuite disséqué, attaché et séparé. À l’aide d’un couteau et de ciseaux, faites un tunnel sous-cutané.

Les trois incisions interrompent tous les tissus sous-cutanés, les muscles, les nerfs et les petites branches vasculaires. Utilisez des dissections pointues et émoussées supplémentaires pour nettoyer la base, laissant le cartilage nu d’environ cinq à 10 millimètres de large. Les saignements peuvent être contrôlés par la pression de la gaze.

L’électrocautérisation n’est pas nécessaire. La peau à l’intérieur de l’oreille n’est pas coupée car elle ne transporte pas beaucoup de sang. L’aspect important de cette procédure est d’assurer une dissection adéquate du tunnel sous-cutané tout en protégeant les vaisseaux.

Cette procédure ne devrait pas être si difficile. Après l’hémostase, les trois incisions cutanées sont fermées à l’aide de quatre ou cinq sutures oh ou cinq oh et vérifiées à nouveau pour s’assurer que les incisions cutanées sont correctement fermées et qu’aucun saignement n’est observé. Des plaies cutanées circulaires de pleine épaisseur peuvent être créées sur la face ventrale de chaque oreille à l’aide d’un poinçon en acier inoxydable de six millimètres.

La distance entre les plaies est d’au moins 20 à 30 millimètres. La peau et le périchondre à l’intérieur du poinçon sont enlevés, mais le cartilage n’est pas endommagé. Une fois que les plaies sont créées sur les deux oreilles, couvrez-les temporairement de gaze et transférez le lapin dans une salle de procédure pour l’application du médicament.

Une fois les plaies nettoyées de tout caillot sanguin, appliquez des médicaments de test et de contrôle. Les plaies sont recouvertes d’un pansement occlusif pour éviter la dessiccation. Lorsque vous comparez deux médicaments, appliquez chaque médicament à la fois sur une plaie proximale et distale.

Cela permet de contrôler les différences de taux de cicatrisation des plaies dans l’oreille distale et proximale en postopératoire. L’oreille ischémique devient généralement froide et cyanotique avec une sensation réduite distale à l’incision. Un œdème léger peut se présenter pendant quelques jours, mais disparaît de lui-même et aucun traitement n’est nécessaire.

Le pouls de l’artère centrale est absent. Le mouvement de l’oreille est réduit, mais pas totalement éliminé car certains muscles sont encore attachés à la base de l’oreille. Si le tunnel est fait correctement, une indentation claire peut être vue entre les incisions.

Un patch de fentanyl est fixé à la peau du dos pour soulager une éventuelle douleur postopératoire. La température de la peau est mesurée quotidiennement sur chaque oreille à l’aide d’un thermomètre. La circulation sanguine est mesurée dans l’oreille à l’aide d’un tensiomètre transcutané ou d’un débitmètre laser Doppler.

Après une semaine, les sutures des incisions cutanées peuvent être retirées à partir de 2007. La procédure a été utilisée chez plus de 70 lapins. Cela comprend 23 lapins diabétiques et quatre âgés.

Les différences de température entre l’oreille non ischémique et l’oreille ischémique variaient de un à 10 degrés Celsius, la plupart des lapins se situant dans la fourchette de deux à six degrés Celsius. La différence de température était plus élevée dans les premiers jours après l’opération, diminuant progressivement après le 15e jour, mais se maintenait toujours au bout d’un mois. Six échantillons de tissus ont été prélevés dans chaque épi et les teneurs en phosphate à haute énergie ont été mesurées par HPLC, à la fois un TP et une énergie totale.

Les concentrations étaient plus élevées dans les oreilles normales que dans les oreilles ischémiques. Les temps de cicatrisation des plaies étaient toujours plus longs pour l’oreille ischémique que pour l’oreille non ischémique chez les animaux non diabétiques et diabétiques chez 15 lapins non diabétiques. Le temps de cicatrisation moyen était de 17,8 jours sur l’oreille non ischémique contre 21,8 jours sur l’oreille ischémique.

Chez 10 animaux diabétiques de 12 mois, le temps moyen de guérison était de 18,3 jours sur l’oreille non ischémique contre 29,1 jours sur l’oreille ischémique. Chez tous les animaux, y compris les lapins diabétiques, les incisions cutanées guérissent normalement sans aucune complication chez les lapins. Avec une période de diabète de 24 mois, les plaies ventrales ont une tendance plus élevée à s’infecter.

Cette caractéristique le rapproche des plaies diabétiques humaines. Un échantillon histologique montre la cicatrisation du tunnel sous-cutané dans lequel le muscle est absent et est remplacé par des tissus fibreux. Cependant, la peau est intacte.

Lors de cette procédure, il est important de se rappeler de traiter les animaux de manière humaine. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en moins d’une heure. Nous avons utilisé cette technique chez plus de 70 lapins, dont 23 lapins diabétiques sans aucune complication telle qu’un saignement ou une infection.

C’est une procédure très sûre suite à cette procédure. D’autres méthodes telles que l’ischémie supplémentaire, les lésions nerveuses et l’inoculation bactérienne peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires telles que les ulcères vasculaires, les escarres et la neuropathie diabétique.