Name: Modèle murin dendométriose chirurgicalement induite par Auto-transplantation de tissu utérin (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Apprenez à induire chirurgicalement l'endométriose chez la souris par auto-transplantation de tissu utérin sur le mésentère intestinal. Ce modèle murin reproduit fidèlement les lésions endométrioïdes humaines pour étudier la pathophysiologie et évaluer de nouvelles thérapeutiques.

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Un merci spécial à Chris et Audrey Kassotis Bailey pour un examen critique de ce manuscrit et au Dr Scott Korte, Joseph Beeman, Alison Curfman, Paul Kimball, Bridget Neibreggue, Jacob Redel, Amy Schroder, Maija Steinberg, et Stacey Winkeler pour leur aide dans l&#39;optimisation de ce modèle dans notre laboratoire. Le financement a été fourni par la clinique Grant Biodetectives Formation (NIH T90) (KEP), Université du Missouri Life Sciences Research Programme de premier cycle des chances, MU Conseil de recherches, MU subventions pour la recherche et de conseil NIH R21HD056441 (SCN).

<ol><li>Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%3A+cost+estimates+and+methodological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Endometriosis: cost estimates and methodological perspective.</a> Hum. Reprod. Update. 13, 395-404 (2007).</li>
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<li>Vernon, M. W., Wilson, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+surgical+induction+of+endometriosis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Studies on the surgical induction of endometriosis in the rat.</a> Fertil. Steril. 44, 684-694 (1985).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+endometriosis+in+mice%3A+a+new+model+sensitive+to+estrogen%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Induction of endometriosis in mice: a new model sensitive to estrogen.</a> Reprod. Toxicol. 9, 233-238 (1995).</li>
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<li>Flores, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+of+experimental+endometriosis+identified+gene+expression+patterns+in+common+with+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling of experimental endometriosis identified gene expression patterns in common with human disease.</a> Fertil. Steril. 87, 1180-1199 (2007).</li>
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<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+or+enzymatic+disruption+of+aromatase+inhibits+the+growth+of+ectopic+uterine+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Genetic or enzymatic disruption of aromatase inhibits the growth of ectopic uterine tissue.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 87, 3460-3466 (2002).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L., Birnbaum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promotion+of+endometriosis+by+2%2C3%2C7%2C8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin+in+rats+and+mice%3A+time-dose+dependence+and+species+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Promotion of endometriosis by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin in rats and mice: time-dose dependence and species comparison.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 138, 131-139 (1996).</li>
<li>Foster, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+characteristics+of+endometriosis+in+the+mouse+model%3A+application+to+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Physiol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Morphologic characteristics of endometriosis in the mouse model: application to toxicology.</a> Can. J. Physiol. Pharmacol. 75, 1188-1196 (1997).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+surgically+induced+endometriosis+on+pregnancy+and+effect+of+pregnancy+and+lactation+on+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Soc.+Exp.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of surgically induced endometriosis on pregnancy and effect of pregnancy and lactation on endometriosis in mice.</a> Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 212, 332-337 (1996).</li>
<li>Lu, Y., Nie, J., Liu, X., Zheng, Y., Guo, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trichostatin+A%2C+a+histone+deacetylase+inhibitor%2C+reduces+lesion+growth+and+hyperalgesia+in+experimentally+induced+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Trichostatin A, a histone deacetylase inhibitor, reduces lesion growth and hyperalgesia in experimentally induced endometriosis in mice.</a> Hum. Reprod. 25, 1014-1025 (2010).</li>
<li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li>
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<li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rodent+estrous+cycle%3A+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Birth.+Defects.+Res.+B.+Dev.+Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth. Defects. Res. B. Dev. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586-e2586 (2011).</li>
<li>Moen, M. H., Halvorsen, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histologic+confirmation+of+endometriosis+in+different+peritoneal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Obstet.+Gynecol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Histologic confirmation of endometriosis in different peritoneal lesions.</a> Acta. Obstet. Gynecol. Scand. 71, 337-342 (1992).</li>
<li>Cummings, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methoxychlor+as+a+model+for+environmental+estrogens%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methoxychlor as a model for environmental estrogens.</a> Crit. Rev. Toxicol. 27, 367-379 (1997).</li>
<li>Fowler, R. E., Edwards, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+superovulation+and+pregnancy+in+mature+mice+by+gonadotrophins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Induction of superovulation and pregnancy in mature mice by gonadotrophins.</a> J. Endocrinol. 15, 374-384 (1957).</li>
<li>Wilson, E. D., Zarrow, M. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+superovulation+in+the+immature+mouse+and+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reprod.+Fertil%22%5BJournal%5D)">Comparison of superovulation in the immature mouse and rat.</a> J. Reprod. Fertil. 3, 148-158 (1962).</li>
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<li>Hirata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+experimental+model+of+endometriosis+using+mice+that+ubiquitously+express+green+fluorescent+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Development of an experimental model of endometriosis using mice that ubiquitously express green fluorescent protein.</a> Hum. Reprod. 20, 2092-2096 (2005).</li>
<li>Story, L., Kennedy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+studies+in+endometriosis%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ilar.+J%22%5BJournal%5D)">Animal studies in endometriosis: a review.</a> Ilar. J. 45, 132-138 (2004).</li>
<li>Cummings, A. M., Hedge, J. M., Birnbaum, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+prenatal+exposure+to+TCDD+on+the+promotion+of+endometriotic+lesion+growth+by+TCDD+in+adult+female+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of prenatal exposure to TCDD on the promotion of endometriotic lesion growth by TCDD in adult female rats and mice.</a> Toxicol. Sci. 52, 45-49 (1999).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+estrogen%2C+progesterone%2C+and+methoxychlor+on+surgically+induced+endometriosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effects of estrogen, progesterone, and methoxychlor on surgically induced endometriosis in rats.</a> Fundam. Appl. Toxicol. 27, 287-290 (1995).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriotic+lesions+synthesize+and+secrete+a+haptoglobin-like+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometriotic lesions synthesize and secrete a haptoglobin-like protein.</a> Biol. Reprod. 58, 988-994 (1998).</li>
<li>Yavuz, E., Oktem, M., Esinler, I., Toru, S. A., Zeyneloglu, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genistein+causes+regression+of+endometriotic+implants+in+the+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Genistein causes regression of endometriotic implants in the rat model.</a> Fertil. Steril. 88, 1129-1134 (2007).</li>
<li>Dmitrieva, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+involvement+in+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid involvement in endometriosis.</a> Pain. 151, 703-710 (2010).</li>
<li>Efstathiou, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsteroidal+antiinflammatory+drugs+differentially+suppress+endometriosis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model.</a> Fertil. Steril. 83, 171-181 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endostatin+inhibits+the+growth+of+endometriotic+lesions+but+does+not+affect+fertility%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Endostatin inhibits the growth of endometriotic lesions but does not affect fertility.</a> Fertil. Steril. 84, Suppl 2. 1144-1155 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+synthetic+endostatin+peptides+inhibit+endothelial+migration+in+vitro+and+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Short synthetic endostatin peptides inhibit endothelial migration in vitro and endometriosis in a mouse model.</a> Fertil. Steril. 85, 71-77 (2006).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+rats+as+a+research+model+for+the+study+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Using rats as a research model for the study of endometriosis.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 955, 318-327 (2002).</li>
<li>Stilley, J. A., Woods-Marshall, R., Sutovsky, M., Sutovsky, P., Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+Fecundity+in+Female+Rats+with+Surgically+Induced+Endometriosis+and+in+Their+Daughters%3A+A+Potential+Role+for+Tissue+Inhibitors+of+Metalloproteinase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Reduced Fecundity in Female Rats with Surgically Induced Endometriosis and in Their Daughters: A Potential Role for Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1.</a> Biol. Reprod. 80, (2009).</li>
</ol>

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

Il ya plusieurs paramètres critiques qui doivent être notés dans l&#39;exercice de l&#39;induction chirurgicale de l&#39;endométriose chez la souris. Premièrement, l&#39;endométriose est une maladie oestrogènes dépendantes et en tant que telle cette chirurgie doit être réalisée chez les animaux intacts ou bien chez les animaux ayant subi une ovariectomie complétées avec des oestrogènes 20. Deuxièmement, la suture des biopsies endométriales à la cascade artérielle doit être effectuée avec un soin extrême. Nous...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif / équipements </td><td> Société </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td> Crayon de cire </td><td> Fisher </td><td> NC9954135 </td></tr><tr><td> Lame de verre </td><td> Fisher </td><td> 12-550-433 </td></tr><tr><td> Pipette </td><td> Fisher </td><td> S79383 </td></tr><tr><td> Microscope optique standard pour l&#39;évaluation des frottis vaginaux </td><td></td><td></td></tr><tr><td> La buprénorphine HCL C3 (CARJET) 10X1ml </td><td> Alimentation Butler Santé Animale </td><td> 022891 </td></tr><tr><td> Phosphate stérile saline tamponnée (PBS) </td><td> Gibco </td><td> 14040-117 </td></tr><tr><td> 10000 U / ml de pénicilline, 10.000 pg / ml de streptomycine dans le NaCl à 0,85% </td><td> Hyclone </td><td> SV30010 </td></tr><tr><td> L&#39;isoflurane </td><td> AbbottSanté Animale </td><td> 05260-05 </td></tr><tr><td> L&#39;isoflurane non réinhalation système d&#39;anesthésie </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Recirculation pad chauffage à eau chaude </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 ml gaine de seringues </td><td> Fisher </td><td> 14 à 823-16G </td></tr><tr><td> Poudre libre gants stériles </td><td> Fisherbrand </td><td> 19020558 </td></tr><tr><td> Pommade ophtalmique </td><td> Pharmaceuticals Major </td><td> 10033691 </td></tr><tr><td> Petite tondeuse électrique </td><td> Wahl </td><td> 9861-600 </td></tr><tr><td> Gommage chlorhexidine </td><td> Fisher </td><td> NC9863042 </td></tr><tr><td> Ethanol à 70% </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Polylined champ stérile </td><td> Jetables Hôpital Busse </td><td> 696 </td></tr><tr><td> Taille 3 bistouri </td><td> Fisher </td><td> 22-079-657 </td></tr><tr><td> Numéro 10 lames de scalpel </td><td> Fisher </td><td> 22-079-681 </td></tr><tr><td> Petits ciseaux chirurgicaux </td><td> Roboz </td><td> RS-5850 </td></tr><tr><td> Petits dentelés semi-courbée pince </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td></tr><tr><td> 5-0 soie noire tressée </td><td> Ethicon </td><td> K870H </td></tr><tr><td> Stérilisés en verre pyrex boîtes de Pétri </td><td> Corning </td><td> 70160-101 </td></tr><tr><td> 2 mm biopsie </td><td> Miltex </td><td> 33-31 </td></tr><tr><td> Gaze stérile </td><td> Kendall </td><td> 1806 </td></tr><tr><td> 6-0 suture noire en nylon monofilament Ethilon </td><td> Ethicon </td><td> 697G </td></tr><tr><td> Les conducteurs de seringues (en option) </td><td> Instruments de précision du monde </td><td> 500023 </td></tr><tr><td> 5-0 écru tresse couché vicryl de suture </td><td> Ethicon </td><td> J490G </td></tr><tr><td> 9mm Autoclip plaies clips </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> Autoclip applicateur &amp; Remover </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427630 </td></tr><tr><td> Aiguille 23G </td><td> Becton Dickinson </td><td> 305193 </td></tr><tr><td> Seringue 1cc </td><td> Becton Dickson </td><td> 301025 </td></tr><tr><td> 5X se loupe (facultatif) </td><td> Fisher </td><td> 14-648-23 </td></tr><tr><td> 10% du formol tamponné </td><td> Fisher </td><td> SF100-4 </td></tr><tr><td> Étriers </td><td> Roboz </td><td> RS-6466 </td></tr><tr><td> Traitement / embedding cassettes </td><td> Fisher </td><td> 15 à 197-700A </td></tr><tr><td> Coussinets en mousse biopsie </td><td> Fisher </td><td> 22-038-222 </td></tr><tr><td> RNAqueous kit d&#39;isolement d&#39;ARN </td><td>Ambion </td><td> AM1912 </td></tr><tr><td> L&#39;azote liquide </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Microcentrifugeuse bouchon rabattre à plat tube supérieur </td><td> Fisher </td><td> 02-681-240 </td></tr><tr><td> La kétamine (facultatif) </td><td> Simga </td><td> K4138 </td></tr><tr><td> Domitor (chlorhydrate de médétomidine) (facultatif) </td><td> Tocris </td><td> 2023 </td></tr><tr><td> Antisedan (atipamézole) (facultatif) </td><td> Sigma </td><td> A9611 </td></tr></tbody></table>

modèle murin d&#39;endométriose chirurgicalement induite par auto-transplantation de tissu utérin

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

L&#39;endométriose est une maladie chronique, douloureuse dont l&#39;étiologie reste inconnue. Par ailleurs, le traitement de l&#39;endométriose peuvent exiger l&#39;enlèvement laparoscopique des lésions, et / ou chronique gestion pharmaceutique de la douleur et des symptômes d&#39;infertilité. Le coût associé à l&#39;endométriose a été estimé à 22 milliards de dollars par an dans le 1 États-Unis. Pour approfondir notre compréhension des mécanismes sous-jacents de cette maladie énigmatique, des modèles animaux ont été employées. Les primates se développent spontanément l&#39;endométriose et des modèles de primates conséquent ressemblent le plus à la maladie chez les femmes. Des modèles de rongeurs, cependant, sont plus rentables et facilement disponibles 2. Le modèle que nous décrivons ici implique un transfert autologue de tissu utérin au mésentère intestinal (Figure 1) et a été d&#39;abord développé chez le rat 3 et transféré plus tard à la souris 4. Le but du modèle de rongeur autologue de l&#39;endométriose chirurgicalement induite est d&#39;imiterla maladie chez les femmes. Nous et d&#39;autres ont déjà montré que le modèle gène modifié expression observée dans les lésions d&#39;endométriose chez les souris ou les rats qui miroirs observés chez les femmes avec la maladie 5,6. Un avantage de réaliser l&#39;intervention chez la souris est que l&#39;abondance des souches de souris transgéniques disponibles peuvent aider les chercheurs à déterminer le rôle des composants spécifiques important dans la création et la croissance de l&#39;endométriose. Un modèle alternatif dans lequel des fragments humains excisés endomètre sont introduits dans le péritoine de souris immunodéprimées est aussi largement utilisée, mais est limitée par l&#39;absence d&#39;un système immunitaire normal qui est pensé pour être important dans l&#39;endométriose 2,7. Surtout, le modèle de souris de l&#39;endométriose chirurgicalement induite est un modèle polyvalent qui a été utilisée pour étudier comment le système immunitaire 8, 9,10 hormones et des facteurs environnementaux affectent 11,12 endométriose ainsi que les effets de l&#39;endométriose sur Fertilité 13 et de la douleur 14.

Une description de l&#39;induction chirurgicale de l&#39;endométriose chez les souris et les rats par auto-transplantation de tissu utérin à la cascade de l&#39;artère mésentère intestinal.

Modèle murin d&#39;endométriose chirurgicalement induite par Auto-transplantation de tissu utérin

L'endométriose est une maladie chronique et douloureuse dont l'étiologie demeure inconnue. De plus, le traitement de l'endométriose peut nécessiter l'ablation par laparoscopie de...

L'objectif général de cette procédure est d'induire chirurgicalement l'endométriose chez la souris par transfert autologue de tissu utérin vers la cascade artérielle du mésentère intestinal. Cela est réalisé en ligaturant, retirant et exposant d'abord l'endomètre de l'utérus. La deuxième étape de la procédure consiste à créer trois implants endométrioides à partir de l'endomètre exposé à l'aide d'un punch biopsique de deux millimètres.La troisième étape de la procédure consiste à suturer les trois implants endométrioïdes aux artères de la cascade artérielle du mésentère intestinal. La dernière étape de la procédure consiste à fermer la paroi abdominale et la peau, puis à permettre à l'animal de récupérer les lésions endométrioïdes. Excisés chez la souris, ils ressemblent à ceux des femmes atteintes d'endométriose, comme le montre l'analyse histologique ainsi que les profils d'expression génique et protéique.En général, les personnes novices dans cette méthode éprouveront des difficultés pour trois raisons principales. Premièrement, les tissus murins sont tout simplement très petits. Deuxièmement, le mésentère intestinal est facilement endommagé, et troisièmement, les points de suture, s'ils sont trop serrés, entraîneront une nécrose intestinale.Commencez par rassembler tout l'équipement chirurgical nécessaire pour une chirurgie aseptique réussie, y compris les solutions destinées à l'analgésie et à l'anesthésie. Après avoir anesthésié l'animal à l'aide d'isoflurane inhalé, confirmez l'anesthésie complète par l'absence de réponse à une stimulation par pincement de l'orteil ; pour prévenir la sécheresse oculaire pendant l'intervention, appliquez un onguent ophtalmique sur les yeux, puis rasez la zone chirurgicale à l’aide d’un petit rasoir. Désinfectez le site chirurgical à l’aide de trois passages alternés de solution de chlorhexidine et d’éthanol à 70 %, puis recouvrez l’animal d’un champ stérile.Réalisez une petite incision médiane à l’aide de petites ciseaux ou d’un scalpel, en terminant à 0,5 à 1,0 centimètre en avant de l’orifice vaginal. Détachez délicatement par dissection émoussée la paroi corporelle de la paroi abdominale afin de faciliter la fermeture du site chirurgical. Après la dissection émoussée, pratiquez une petite incision médiane dans la paroi abdominale.Ensuite, à l’aide de petites pinces, localisez délicatement le cornet utérin gauche. L’utérus est situé en position dorsale par rapport à l’intestin, qui est généralement visible dès l’ouverture du site d’incision. Tirez doucement vers le haut sur le cornet utérin et glissez une pince ouverte sous celui-ci afin de l’utiliser comme rétracteur. Il est également utile d’observer à ce moment l’apparence des ovaires et de l’utérus.Pour faciliter le repérage du cycle œstral. Faire glisser deux morceaux de suture en soie noire tressée de calibre 5, mesurant six à huit centimètres, sous la corne utérine étirée. Liger fermement la corne au niveau de la jonction utéro-tubaire.Placez simplement un point de suture au niveau de la trompe de Fallope et à la jonction utéro-cervicale. À chaque emplacement, utilisez un nœud carré et laissez les extrémités du fil non coupées. Retirez la section du cornet utérin située entre les deux ligatures, puis placez le tissu dans une boîte de Pétri en verre contenant environ 100 microlitres de PBS additionné de pénicilline et de streptomycine.Coupez les extrémités du fil de soie en dernier. Si le fil se desserre ou s’il y a un saignement, localisez le moignon et faites un autre nœud ou non à l’aide de petites ciseaux. Retirez la graisse de la corne utérine.Ouvrir la corne utérine en insérant une lame d'une petite paire de ciseaux dans la lumière. Faire glisser doucement les ciseaux le long de la corne utérine tout en maintenant celle-ci avec une pince. Dans la boîte de Pétri en verre, utiliser un punch à biopsie de deux millimètres pour découper trois implants de taille égale, en veillant à ce qu'ils ne s'assèchent pas.Placer un pansement stérile immédiatement au-dessus du site d'incision et l'imbiber complètement de PBS stérile contenant de la pénicilline et de la streptomycine. Il est important de maintenir l'hydratation tout au long des étapes suivantes à l’aide de petites pinces lisses. Localiser doucement le caecum et déplacer délicatement le long de l'intestin grêle.Extraire une petite section de quatre à cinq centimètres d'intestin et l'arranger en forme d'éventail sur un tampon imbibé afin que la cascade artérielle du mésentère intestinal soit clairement visible. Veiller à maintenir l'intestin humide en tout temps avec du sérum physiologique stérile. Placer un implant sur une aiguille, puis utiliser une suture noire aut six alon pour fixer délicatement l'implant à une artère située à environ 0,5 centimètre de l'intestin.Utilisez-en seulement un. Jetez-le par-dessus la pince et ne serrez pas trop fort le point de suture. En effet, cela pourrait entraîner une perte du flux sanguin et une nécrose ultérieure de l’intestin.Effectuez deux nœuds avec un seul, jetez chacun et taillez le fil de suture à deux millimètres de l’implant, puis hydratez l’intestin. Ensuite, en vous déplaçant dans le sens rostral. Extrayez les trois à quatre centimètres suivants de l’intestin et remplacez délicatement la section qui contient déjà un implant.Passer une ou deux artères à partir du site d'implantation précédent et suturer l'implant suivant ; répéter l'opération pour le troisième implant. Enfin, suturer la paroi abdominale et fermer la peau à l'aide de clips chirurgicaux. Après la fermeture du site opératoire et l'administration d'analgésiques, placer l'animal en position ventrale dans la cage, partiellement posé sur un tapis chauffant à eau recirculante, jusqu'à ce que l'animal soit complètement récupéré.Pour récupérer les lésions endométrioïdes, repérez les fils noirs dans le mésentère intestinal. Mesurez la longueur et la largeur de chaque lésion endométrioïde à l’aide d’un pied à coulisse. Disséquez les lésions endométrioïdes en prenant soin de ne pas les percer.Retirer tout tissu non endométriote de la lésion. Agiter doucement les trois lésions endométriotes remplies de liquide avant de retirer le point de suture. Retirer délicatement le point de suture et inciser deux des lésions endométriotes.Les peser à nouveau avant de passer au traitement des tissus. Ensuite, exciser et peser la corne utérine restante. L'analyse histologique de l'endométriose chez les femmes ainsi que dans le modèle murin présenté ici indique que la lésion endométrioïde contient des glandes et un stroma endométrial. Les lésions endométriosiques chez la souris contiennent également des macrophages chargés d'hémosidérine, qui constituent un signe courant de l'endométriose chez la femme. Les lésions endométrioïdes prélevées chez les souris trois jours après l'induction apparaissent inflammatoires et hémorragiques, comme montré à gauche, après deux à quatre semaines de croissance.Les lésions endométriosiques chez la souris sont de type kystique, remplies de liquide et entourées d'adhérences péritonéales, comparées au poids des lésions au moment de l'induction. Les lésions remplies de liquide étaient respectivement 306 % et 862 % plus grandes, et les lésions kystiques étaient respectivement 51 % et 172 % plus grandes à un et deux mois après l'induction. Lésion endométrioïde kystique et remplie de liquide.Les poids restent constants un mois après l'induction, sur cinq expériences différentes suivant cette procédure. Ce modèle peut être utilisé pour répondre à des questions concernant la physiopathologie de l'endométriose et pour explorer de nouveaux traitements thérapeutiques destinés à soulager la douleur et l'infertilité associées à cette maladie.

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