Name: Protocole dhyperthermie Durée du corps entier long chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Découvrez un protocole d'hyperthermie corporelle totale chez la souris pour induire des états fébriles durant 12 à 24 heures. Cette méthode standardisée permet d'étudier les réponses immunitaires et physiologiques.

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1. Éthique animale Avant de procéder à l&#39;hyperthermie longue durée sur des souris de s&#39;assurer que la procédure a été approuvée par les soins des animaux et du Comité institutionnel utilisation. Toutes les procédures décrites dans le présent document et dans la vidéo qui l&#39;accompagne ont été approuvées par le Comité d&#39;éthique animale institutionnel de l&#39;Institut national d&#39;immunologie. 2. L&#39;hyperthermie compréhension L&#39;hyperthermie du corps entier (WBH) est livré en plaçant les animaux dans des cages préchauffé qui sont placés dans un incubateur maintenu à 39,5 ° C. Au cours de la standardisation des protocoles, un capteur de température a été implanté chirurgicalement dans la souris et leur température a été contrôlée dans des conditions expérimentales différentes. Il a été observé que lors de placer les animaux dans un environnement chaud, la température augmente progressivement de 37 ° C à un maximum de 42 ° C au cours de la durée de 100 min (figure 1). The résultat &quot;pic&quot; de température est intrigante que la température interne du corps tourné encore plus élevée que la température de l&#39;environnement externe. Lorsque la température du corps supérieure à 40 ° C, l&#39;animal montre des signes de stress et de déshydratation tels que des agents mouillants autour du museau. Augmenter la température du corps au-delà de 40 ° C, conduira à mouillage et le stress irréversibles, voire la mort des animaux à cause du stress de la chaleur. Il est donc important d&#39;éviter les pics de température au cours de l&#39;hyperthermie. Ce phénomène de pics de température élevée est associée à l&#39;hyperactivité physique de l&#39;animal au cours de l&#39;exposition hyperthermie. Pointes de température similaires ont été observés par d&#39;autres groupes aussi, et ont été associés à l&#39;hyperactivité physique de l&#39;animal après avoir été introduit à l&#39;environnement ayant des températures plus élevées 10. Dans notre protocole, les souris sont immobilisés pendant l&#39;exposition hyperthermie. Commereprésenté sur la figure 2, l&#39;immobilisation de l&#39;animal empêche les pointes de température. Nous avons utilisé 8-12 semaines BALB / Cj souris pour démontrer ce protocole. Le protocole n&#39;est pas limitée à un type particulier / souche de souris. 3. Préparation de l&#39;Expérience 3,1 Incubateur Cette expérience peut être réalisée dans un incubateur à CO 2 normale car ils ont une bonne régulation de la température. Débranchez l&#39;alimentation de gaz CO 2 et enlevez le bac de rétention d&#39;eau de l&#39;incubateur CO 2. Dans certains modèles de couveuses il est possible de désactiver le contrôleur de CO 2. Disposer les étagères de l&#39;incubateur afin que la cage des souris pourraient être placés commodément à l&#39;intérieur. Réglez la température de l&#39;incubateur à 39,5 ° C. 3.2 Cages En règle générale, l&#39;expérience hyperthermie est effectuée sur 4 souris à la fois. Deux cages sont nécessaires; sure est placée à l&#39;intérieur de l&#39;incubateur et l&#39;autre est placé à l&#39;extérieur à la température ambiante. Literie de cages est évitée, car les correctifs de literie mouillés avec le temps ce qui entraîne non uniforme la température à l&#39;intérieur de la cage. La cage extérieure ne doit avoir boulettes de nourriture et une bouteille d&#39;eau. Tubes d&#39;immobilisation 3,3 Souris Au cours de 4 premiers cycles de souris hyperthermie sont immobilisés dans des tubes perforés. Ces tubes d&#39;immobilisation peut être fabriqué à partir de 50 &#39;à centrifuger&#39; ml tubes en perçant des trous de 3 mm sur tout le corps et quatre de ces tubes seront nécessaires. Le tube de 50ml pouvez facilement immobiliser BALB / Cj souris qui sont plus de 8 semaines. Tubes de tailles appropriées peuvent être nécessaires pour certaines souche exceptionnellement différente des souris ou des souris qui sont très jeunes ou plus vieux que 50 semaines. Placez les tubes d&#39;immobilisation et d&#39;une cage à l&#39;intérieur de l&#39;incubateur maintenu à 39,5 ° C. Attendez au moins 2 heures afin que la cage et itubes mmobilization atteindre la température de l&#39;incubateur. 4. Premier cycle de l&#39;hyperthermie Les souris peuvent éprouver la déshydratation pendant l&#39;exposition hyperthermie. Par conséquent, avant de commencer l&#39;expérience, administrer 0,5 ml par voie intrapéritonéale une solution saline normale à chaque souris. Utilisez une aiguille 26 G avec seringue de 1 ml. Prendre rapidement la cage placée dans l&#39;incubateur, placez un animal dans chacun des tubes d&#39;immobilisation et remettez la cage dans l&#39;incubateur. Noter le temps. Il est essentiel de garder la cage à la même place dans l&#39;incubateur à chaque fois. Après 90 min, sortir la cage de l&#39;incubateur. Relâchez les animaux des tubes d&#39;immobilisation et les placer dans la cage à température normale avec un accès facile à la nourriture et à l&#39;eau. Placer les tubes d&#39;immobilisation vides dans l&#39;incubateur. Après 15 min, le deuxième cycle de l&#39;hyperthermie est démarré en livrant 0.5 ml par voie intrapéritonéale une solution saline à chaque souris. Ils sont ensuite immobilisés dans des tubes de 50 ml d&#39;immobilisation perforés et placés dans l&#39;incubateur. 5. Cycles hyperthermie ultérieures Pour les 4 premiers cycles, il est indispensable d&#39;immobiliser des souris pendant l&#39;exposition de l&#39;hyperthermie et pour les deux premiers cycles, injection de solution saline est donnée avant le début de la période de l&#39;hyperthermie. Après ces cycles de l&#39;hyperthermie suivie par le repos sont terminés, les souris se s&#39;acclimater et ne pas devenir hyperactif pendant l&#39;exposition hyperthermie. L&#39;injection intrapéritonéale de sérum physiologique peut ne pas être nécessaire si les souris facilement prendre de la nourriture et de l&#39;eau pendant le temps de repos. 6. Après tous les cycles terminée, l&#39;étape finale consiste à examiner les animaux Il ne devrait pas y avoir de mort pendant les cycles de l&#39;hyperthermie. Chaque animal doit être regardé avec beaucoup d&#39;attention dans le premierquelques cycles. Rapidement rechercher n&#39;importe quel mouillage autour du museau. Ce symptôme est une signature de la déshydratation. Les souris présentant de tels symptômes doit immédiatement être donné 0,5 ml ip solution saline normale et reste à la température ambiante. La plupart des souris immobilisés ne nécessitent aucun soin supplémentaire et avec succès supporter le stress de la hyperthermie. Après avoir terminé les cycles nécessaires, les animaux peuvent paraître faibles et déshydratés, mais ils vont rapidement se rétablissent en quelques heures. <img src="/files/ftp_upload/3801/3801fig1.jpg" alt="Figure 1" /> Figure 1. Variation de la température centrale du corps de la souris lorsque la cage a été placé dans un incubateur à 39,5 ° C. Après 90 min de la cage a été retiré de l&#39;incubateur et placés à 25 ° C. Les cercles rouges indiquent des pics à haute température. <img src="/files/ftp_upload/3801/3801fig2.jpg" alt="Figure 2" /> Figure 2. Variation de la temperature corporellere d&#39;une souris immobilisés pendant les cycles de l&#39;hyperthermie. Après l&#39;immobilisation de l&#39;animal, fortes pointes de températures ne sont pas observer lorsque la cage est placée à 39,5 ° C.

<ol><li>Braude, A. I., Beck, J., Zalesky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Febrile+response+to+bacterial+pyrogens+in+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Febrile response to bacterial pyrogens in leukemia.</a> Blood. 16, 1279(1960).</li>
<li>Dovern, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperthermic+intraperitoneal+chemotherapy+added+to+the+treatment+of+ovarian+cancer.+A+review+of+achieved+results+and+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Gynaecol.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Hyperthermic intraperitoneal chemotherapy added to the treatment of ovarian cancer. A review of achieved results and complications.</a> Eur. J. Gynaecol. Oncol. 31, 256(2010).</li>
<li>Gaworek, J., Mayer, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+whole+body+hyperthermia+in+oncology%3A+fatal+heat+for+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pflege.+Z%22%5BJournal%5D)">Systemic whole body hyperthermia in oncology: fatal heat for tumor cells.</a> Pflege. Z. 56, 15(2003).</li>
<li>Hegewisch-Becker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+whole+body+hyperthermia+%2841.8+degrees+C%29+on+the+frequency+of+tumor+cells+in+the+peripheral+blood+of+patients+with+advanced+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of whole body hyperthermia (41.8 degrees C) on the frequency of tumor cells in the peripheral blood of patients with advanced malignancies.</a> Clin. Cancer Res. 9, 2079( ).</li>
<li>Jia, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+B16+murine+melanoma+metastasis+and+enhancement+of+immunity+by+fever-range+whole+body+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Inhibition of B16 murine melanoma metastasis and enhancement of immunity by fever-range whole body hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 27, 275(2011).</li>
<li>Maluta, S., Dall'oglio, S., Nadalini, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+for+intermediate+and+high-risk+prostate+cancer%3A+controversial+issues+and+the+role+of+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Treatment for intermediate and high-risk prostate cancer: controversial issues and the role of hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 26, 765(2010).</li>
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<li>Muthana, M., Multhoff, G., Pockley, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+infiltrating+host+cells+and+their+significance+for+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Tumour infiltrating host cells and their significance for hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 26, 247(2010).</li>
<li>Ostberg, J. R., Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effects+of+two+different+whole+body+hyperthermia+protocols+on+the+distribution+of+murine+leukocyte+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effects of two different whole body hyperthermia protocols on the distribution of murine leukocyte populations.</a> Int. J. Hyperthermia. 16, 29(2000).</li>
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</ol>

Nous n&#39;avons rien à déclarer.

<html> Aussi loin que 5000 ans avant JC, les médecins égyptiens tumeurs traitées avec la chaleur. Les Grecs ont reconnu la valeur de la chaleur dans certains traitements médicaux. Les plus anciens textes de la loi de Moïse mention sources d&#39;eau chaude (Genèse 36:24) pour élever la température du corps thérapeutique. Les techniques antérieures employés soit l&#39;utilisation d&#39;extraits microbiens pyrogènes pour l&#39;induction de la fièvre ou des bains d&#39;eau chaude pour l&#39;induc...

<table border="1"><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Thermistance </td><td> RS composants </td><td> 528-8558 </td><td></td></tr><tr><td> CO 2 incubateur </td><td> Heraeus </td><td> B5060 EK-CO2 </td><td></td></tr><tr><td> Souris cages </td><td> Citizen industries ltd. </td><td></td><td> Type B 365X207X190 cm </td></tr><tr><td> Aliments pour animaux </td><td> Provimi Inde </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Une bouteille d&#39;eau pour cage </td><td> Fournisseur local </td><td></td><td> Bouteille en verre </td></tr><tr><td> Fer à souder </td><td> Solderon, Inde </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 50 tubes à centrifuger ml </td><td> BD Biosciences </td><td> 352070 </td><td></td></tr><tr><td> Minuteur </td><td> Fournisseur local </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Seringue de 1 ml avec aiguille 26G </td><td> BD Biosciences </td><td> 309602 </td><td></td></tr><tr><td> Saline </td><td> Fournisseur local </td><td></td><td></td></tr></table>

protocole d&#39;hyperthermie durée du corps entier long chez la souris

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

L&#39;hyperthermie est un terme général utilisé pour définir l&#39;augmentation de la température corporelle au-dessus de la normale. Il est souvent utilisé pour décrire la température centrale du corps accrue que l&#39;on observe pendant la fièvre. L&#39;utilisation de l&#39;hyperthermie comme adjuvant a émergé comme une procédure prometteuse pour la régression tumorale dans le domaine de la biologie du cancer. A cet effet, l&#39;exigence la plus importante est d&#39;avoir des protocoles de chauffage fiables et uniformes. Nous avons élaboré un protocole pour l&#39;hyperthermie (corps entier) chez la souris. Dans ce protocole, les animaux sont exposés à des cycles de l&#39;hyperthermie pendant 90 minutes suivie d&#39;une période de repos de 15 min. Pendant cette période, les souris ont un accès facile à la nourriture et à l&#39;eau. Fortes pointes de température corporelle chez les souris pendant quelques premiers cycles d&#39;exposition hyperthermie sont empêchés par l&#39;immobilisation de l&#39;animal. En outre, une solution saline normale est administré en premier quelques cycles pour réduire les effets de la déshydratation. Ce protocole permet de simuler la fièvre comme conditions chez la souris jusqu&#39;à 12-24 h. Nous avonsutilisé 8-12 semaines BALB / Cj souris femelles de démontrer le protocole.

Ce document décrit un protocole pour l&#39;hyperthermie globale chez les souris qui peuvent stimuler la fièvre comme conditions à 12-24 h.

Protocole d&#39;hyperthermie Durée du corps entier long chez la souris

L'hyperthermie est un terme général utilisé pour définir l'augmentation de la température corporelle centrale au-delà de la normale. Il est souvent utilisé pour décrire l'augmentation de la température corporelle centrale...

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Dans cette vidéo, nous décrivons un protocole étape par étape pour étudier le coup de chaleur à l’effort (EHS) dans un modèle murin.

Modèle murin de coup de chaleur à l’effort : un protocole pour étudier les mécanismes sous-jacents au coup de chaleur à l’effort

Cette vidéo montre la procédure permettant d’induire des crises induites par la chaleur chez une souris transgénique présentant des mutations génétiques liées à l’épilepsie en augmentant progressivement la température corporelle dans une chambre contrôlée. Ce protocole est utilisé pour étudier les mécanismes convulsifs et les thérapies potentielles de l’épilepsie.

Déclenchement et surveillance des crises induites par la chaleur dans un modèle de souris transgénique

Présenté ici est un protocole pour la fabrication de microbulles à coquille de nanoparticules d’oxyde de fer (NSM) par auto-assemblage, synergie magnétique, acoustique et réactivité optique dans une plate-forme nanothérapeutique pour l’hyperthermie magnétique et la thérapie du cancer combinée photothermique.

Microbulles magnétiques, acoustiques et optiques triple-réactives pour l’hyperthermie magnétique et la thérapie du cancer combinée pothototherme

Cet article décrit deux méthodes d’induction de l’hypothermie de courte durée du corps entier chez le rat. La première méthode d’induction rapide utilise un refroidissement actif à l’aide de ventilateurs et de pulvérisation d’éthanol pour une diminution rapide de la température. La deuxième méthode est une méthode de refroidissement progressif. Ceci est réalisé en utilisant la combinaison de l’anesthésie à l’isoflurane et de la réduction des réglages de température sur le tapis chauffant...

Induction d’hypothermie de courte durée chez le rat à l’aide de modèles pour des études examinant la pertinence clinique et les mécanismes

Le protocole décrit le développement d’un modèle préclinique standardisé, reproductible et de coup de chaleur à l’effort (EHS) chez la souris exempt de stimuli externes indésirables tels que le choc électrique. Le modèle fournit une plate-forme pour les études mécanistes, préventives et thérapeutiques.

Un modèle préclinique de coup de chaleur à l’effort chez la souris

Le but de la méthode est de dépister l’hyperthermie ou les crises induites par la chaleur dans des modèles murins. Le protocole décrit l’utilisation d’une chambre construite sur mesure avec une surveillance continue de la température corporelle pour déterminer si une température corporelle élevée entraîne des convulsions.

Un dépistage comportemental des crises induites par la chaleur dans des modèles murins d’épilepsie

Les souris et les rats sont implantés chirurgicalement avec des transpondeurs de température à distance, puis habitués à l’environnement et à la procédure de test. Les changements de température musculaire sont mesurés en réponse à des stimuli pharmacologiques ou contextuels dans la cage familiale ou pendant l’activité physique prescrite (c.-à-d. la marche sur tapis roulant à une vitesse constante).

Mesure de la thermogenèse des muscles squelettiques chez la souris et le rat

Un protocole d’utilisation de l’hyperthermie contrôlée, générée par des ultrasons focalisés de haute intensité guidés par résonance magnétique, pour déclencher la libération de médicaments à partir de liposomes sensibles à la température dans un modèle murin de rhabdomyosarcome.

Hyperthermie générée par ultrasons focalisés de haute intensité guidés par résonance magnétique: une méthode de traitement réalisable dans un modèle de rhabdomyosarcome murin

Ce protocole présente les techniques et la méthodologie nécessaires à la thérapie hyperthermique ciblée dans des modèles de tumeurs solides. L’approche exploite la conversion photothermique de la lumière proche infrarouge par des nanotiges d’or injectées intratumorale pour induire un réchauffement localisé dans le microenvironnement tumoral.

Induction d’une légère hyperthermie ciblée dans des modèles de tumeurs murines par conversion photothermique de la lumière proche infrarouge par des nanotiges d’or intratumorales

Parabiotic jonction de deux organismes entraîne le développement d'un système de circulation commun. Dans ce protocole, nous décrivons les étapes chirurgicales pour former une connexion entre parabiotic une souris de type sauvage et une souris exprimant la GFP constitutive.

Parabiose chez la souris: un protocole détaillé

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